细胞程序化死亡的线粒体调控

线粒体对细胞程序化死亡有调控作用。程序化死亡细胞可观察线粒体转膜电位的下降，线粒体通透性改变很可能是细胞程序化死亡链条中的关键，由此导致程序经死亡诱导因子的释放。Ｂｃｌ－２基因也与线粒体的调控密切相关。     

线粒体相关凋亡蛋白的研究进展

 细胞凋亡是细胞的主动死亡过程,该过程与肿瘤、神经退行性等疾病的发生发展密切相关。目前研究证实,线粒体是细胞凋亡发生的核心,线粒体通路是细胞凋亡的重要通路之一。与线粒体相关的一些重要蛋白如：Bcl-2家族蛋白、凋亡诱导因子、细胞色素C等在细胞凋亡过程中各司其职,共同调控着凋亡的发生发展,对细胞凋亡产生重要的作用。本文就线粒体相关的主要凋亡蛋白及其最新研究进展进行综述。     

线粒体DNA含量变化在肿瘤诊断中的意义

 各类常见的人类恶性肿瘤中的线粒体DNA含量变化,及其与肿瘤发生的潜在机制。探讨了线粒体DNA含量作为新的生物标志物在诊断肿瘤易感风险和早期监测方面的意义。     

RNA干扰沉默Bax基因对线粒体途径软骨细胞凋亡的影响

 【摘要】 目的 利用体外培养的鼠软骨细胞,研究RNA干扰沉默Bax基因表达对经线粒体途径细胞凋亡的影响。方法 体外分离培养SD大鼠软骨细胞;Bax siRNA干扰沉默Bax基因表达。RT-PCR和Western blot检测mRNA及蛋白表达水平;MTT法检测细胞活力;Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡率;Western blot检测Bcl-2、Cytochrome C蛋白的表达。结果 Bax siRNA干扰24h后,Bax的mRNA和蛋白的表达水平均明显降低。细胞凋亡受到明显抑制,细胞存活率增高。并且,在Bax基因沉默的细胞中,Cytochrome C蛋白表达水平降低,同时Bcl-2蛋白表达水平升高。结论 RNA干扰沉默Bax基因可抑制鼠软骨细胞凋亡并且促进其存活,其机制可能与线粒体途径相关。     

TRAIL诱导Hela细胞凋亡的线粒体信号通路

 目的 探讨 TRAIL 诱导人宫颈癌 Hela 细胞凋亡的线粒体通路。 方法 琼脂糖凝胶电泳判断细胞凋亡;激光共聚焦、Western blot、荧光免疫和 caspase-3 活性检测测定细胞线粒体膜电位 (∆Ψm) 、Bcl-2 蛋白、细胞色素 c (Cyt c) 和凋亡诱导因子 (AIF) 蛋白在细胞中的定位以及 caspase-3 活性。结果 TRAIL 能诱导 Hela 细胞凋亡,有凋亡细胞特有的 DNA 梯状条带。同时,TRAIL具有时间依赖性致 ∆Ψm 和 Bcl-2 蛋白含量明显下降,线粒体 Cyt c 蛋白释放,AIF 蛋白向细胞质、细胞核转移,caspase-3 活性增强。结论 TRAIL 诱导 Hela 细胞凋亡途径之一是通过线粒体信号通路进行的。     

siRNA沉默AFP基因对肝癌细胞系 EGHC-9901 增殖的影响

 目的 建立稳定表达AFP-siRNA质粒的肝癌细胞系并探讨对其增殖的影响。方法 构建AFP-siRNA,用脂质体法转染肝癌细胞系,G418筛选4～5周,Western blot 及RT-PCR检测靶基因表达,分组：实验组,转染AFP-siRNA组;阳性对照组,转染空载体组;空白对照组,未处理组。MTT绘制生长曲线,平板克隆实验观察集落形成,流式细胞仪分析细胞周期。结果 成功建立稳定表达AFP-siRNA的肝癌细胞系,实验组表达AFP近乎完全抑制;实验组增殖能力显著低于空载体组;实验组＞75μm集落形成数19±2,低于空载体组62±6;实验组G1期细胞数较空载体组提高20％左右。 结论 成功建立稳定表达AFP-siRNA的肝癌细胞系,抑制AFP表达可使肝癌细胞发生G1期阻滞,明显抑制其增殖及集落形成能力。     

奥帕曲拉对内皮素-1诱导的大鼠心肌细胞肥大的影响

 摘要： 目的 探讨奥帕曲拉（OMA）对内皮素-1（ET-1）诱导的大鼠心肌细胞肥大的作用及其机制。方法 经差速贴壁法获得乳鼠心肌细胞,随机分为对照组、ET-1组、OMA 组、ET-1＋OMA组、ET-1＋OMA＋L-NAME组和ET-1＋OMA＋HS-142-1（GC受体阻断剂）组。用分光光度法测定NOS活性, 放射免疫法测定细胞内cGMP水平;液体闪烁计数仪测定3H-亮氨酸（[3H]-leu）掺入率及蛋白激酶C (PKC)活性;用HJ2000图像分析系统测定细胞表面积。结果10-6mol/L ET-1能显著增加心肌细胞表面积、PKC活性及[3H]-leu 掺入率, 降低NOS活性及 cGMP含量 (均P < 0.01); 10-7 mol/L OMA能显著抑制ET-1的上述作用（均P < 0.01）,L-NAME、HS-142-1可部分阻断OMA的作用。结论OMA能抑制ET-1诱导的心肌细胞肥大效应,该作用部分通过NO/cGMP、PKC调控。     

醛固酮对新生大鼠心肌成纤维细胞PTEN表达的影响

目的研究醛固酮(Ald)诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖中PTENmRNA、蛋白表达及螺内酯(Spi)对其表达的影响,从而探讨Ald对心肌成纤维细胞PTEN表达的影响。方法用体外培养新生SD大鼠的CFs,以Ald诱导其增殖和胶原合成,并加入Spi干预,用RT-PCR和Western Blot分别测定PTENmRNA和蛋白表达。结果与对照组相比,Ald组的CFs增殖和羟脯氨酸含量明显增加(P<0.05),并呈浓度依赖性降低PTENmRNA和蛋白表达(P<0.05);与Ald组相比,Ald+Spi组的CFs增殖和羟脯氨酸含量明显减少(P<0.05),同时其PTENmRNA、蛋白表达均明显升高(P<0.05)。结论醛固酮可通过盐皮质激素受体(MR)介导的基因组通路降低PTEN表达发挥其致心肌纤维化作用。     

左卡尼汀减轻大鼠小肠缺血再灌注损伤

小肠缺血再灌注(I/R)损伤,如肠系膜血管栓塞、肠扭转及小肠移植及休克等,是导致患者不能顺利康复的关键.既往研究表明L-carnitine对肾脏[1]I/R损伤有保护作用,但对小肠的I/R损伤研究尚未见报道.本研究探讨L-carnitine对大鼠小肠I/R损伤的影响.     

电离辐射对食管癌细胞系(ECA109和TE13)r-H2AX表达的影响

维持一个完整的基因组对于细胞的稳定性是至关重要的,由电离辐射和类辐射药物产生的DNA双链损伤是最主要的细胞毒损伤,如果不能修复这种损伤就会导致基因组不稳定和肿瘤的形成或其他年龄相关疾病[1].体内外的研究都证明H2AX的修饰在调节各种细胞应答DNA双链断裂中起着中心作用[2-4].Giunta等的实验为rH2AX作为DNA双链断裂的标志提供了证据[5].而食管癌ECA109为高分化鳞状细胞癌,TE13细胞为低分化鳞状细胞癌,他们的生物学特征不同,研究r-H2AX在不同食管癌株系的动力学特点将有助于了解DNA双链断裂——这一细胞内最致命的损伤的特点与食管癌放疗敏感性之间的关系.     

Senescence impairs successful reprogramming to pluripotent stem cells

Somatic cells can be reprogrammed into induced pluripotent stem (iPS) cells by overexpressing combinations of factors such as Oct4, Sox2, Klf4, and c-Myc. Reprogramming is slow and stochastic, suggesting the existence of barriers limiting its efficiency. Here we identify senescence as one such barrier. Expression of the four reprogramming factors triggers senescence by up-regulating p53, p16^INK4a, and p21^CIP1. Induction of DNA damage response and chromatin remodeling of the INK4a/ARF locus are two of the mechanisms behind senescence induction. Crucially, ablation of different senescence effectors improves the efficiency of reprogramming, suggesting novel strategies for maximizing the generation of iPS cells.     

线粒体与细胞凋亡

线粒体是所有真核细胞内重要的细胞器 ,是ＡＴＰ生成的主要部位 ,对维持细胞能量代谢和正常功能活动起重要作用。新近研究发现 ,线粒体内包含一些与细胞凋亡有密切关系的物质 :如ｐｒｏ ｃａｓｐａｓｅ ,细胞色素Ｃ (ＣｙｔＣ) ,Ｓｍａｃ Ｄｉａｂｌｏ ,ＡＩＦ等。在一定因素的刺激下 ,线粒体膜的通透性增加 ,这些物质可由线粒体释出 ,诱导细胞凋亡。因此线粒体在细胞凋亡的发生中起重要作用 ,被形象地称为细胞凋亡的“燃烧室”。大多数细胞发生凋亡时均伴有 :(1)胞浆酸化 ;(2 )线粒体结构与功能障碍 ;(3)Ｃａｓｐａｓｅ活化。细胞发生凋亡…     

Effect of alcohol on hepatocyte mitochondria

Ultrastructural changes in the hepatocytes under the influence of alcohol were studied. The greatest changes were found in the mitochondria. Physical exertion and a low protein diet have a marked effect on the degree of alcohol poisoning. The first factor reduces whereas the second aggravates the harmful action of alcohol.Institute of Gastroenterology and Nutrition, Medical Academy, Sofia, Bulgaria. (Presented by Academician of the Academy of Medical Sciences of the USSR A. M. Chernukh.) Translated from Byulleten' Éksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 84, No. 12, pp. 737–739, December, 1977.     

Inversion of stress response reprogramming phenomenon in lipopolysaccharide-stimulated alveolar macrophages

The stress response and NO production in reprogrammed proinflammatory or antiinflammatory alveolar macrophages were studied after lipopolysaccharide treatment. Experiments with macrophages not containing HSP70 showed that lipopolysaccharide in a dose of 500 ng/ml induced stress response in cells with the proinflammatory phenotype (as distinct from an antiinflammatory phenotype). The stress response was not observed in HSP70-containing lipopolysaccharide-stimulated proinflammatory macrophages, but occurred in cells with antiinflammatory phenotype. Hence, the presence of HSP70 in alveolar macrophages results in the inversion of the phenomenon of reprogramming of the stress response. Independently on the phenotype, stimulation with lipopolysaccharide was accompanied by a 60–70% increase in NO production by macrophages not containing HSP70. However, NO production by HSP70-containing macrophages did not increase in response to lipopolysaccharide treatment. Our results indicate that reprogramming of the cell response in macrophages does not concern the system for NO synthesis. HSP70 prevents the lipopolysaccharide-induced activation of NO synthesis in alveolar macrophages. __________ Translated from Byulleten’ Eksperimental’noi Biologii i Meditsiny, Vol. 144, No. 10, pp. 387–390, October, 2007