枯草芽胞杆菌紫外线诱变实验方案的优化

【目的】优化枯草芽胞杆菌紫外线诱变实验教学方案,以便学生在实验中获得预期结果。【方法】从菌体培养、活菌浓度估测和辐射参数三方面探讨影响实验结果的因素。【结果】采用液体培养法活化菌体有利于制备均匀的菌悬液,采用比浊法估测初始菌悬液浓度可以指导学生将其稀释至102-103 CFU/m L的浓度;涂布接种后平板表面干燥、培养皿盖内无明显水珠附着,是获得单菌落的关键;在紫外辐射过程中采用固定的菌悬液体积和搅拌速度,可以获得规律性的辐射剂量——致死效应曲线。【结论】优化后的方案实验结果易得、重复性好,可供教学和研究实验参考。     

细菌芽胞染色方法改进研究

改进微生物学实验教材上介绍的Schaeffer-Fulton氏芽胞染色法。将涂片的初染用水浴蒸汽加热和烘箱加热,通过显微镜观察不同温度下不同染色时间的染色效果。以5%孔雀绿为染色剂,100℃蒸汽加热4m in或80℃蒸汽加热6 m in能达到好的染色效果。改进方法操作简单易行,加热过程不需添加染料,更符合环保要求;将改进的染色方法运用于微生物学实验教学,收到了良好的教学效果。     

生姜离体芽的快速繁殖

姜(Zingiber offcinale Rose.)是芭蕉目、姜(襄荷)科的单子叶植物,其肉质根状茎富含姜醇、姜烯、枸橼醛和桉油精等芳香成分以及辛辣成分姜素。姜皮、姜片均可入药,具解表散寒,温胃止呕,祛痰止咳和解毒等功能。与泻下剂同用,可减轻肠绞     

高压热杀菌技术灭活细菌芽胞机理研究进展

高压热杀菌技术(High-pressure Thermal Sterilization,HPTS)是一种重要的新型食品杀菌技术,可杀灭细菌芽胞。目前对HPTS杀灭芽胞的效果和动力学的研究较多,但关于HPTS杀灭芽胞机理研究却较少并缺少总结分析。深入完整地综述了有关HPTS灭活细菌芽胞机理的文献报道,着重从HPTS对2,6-吡啶二羧酸(2,6-Pyridinedicarboxylic acid,DPA)释放、小分子酸溶性蛋白(Small acid-soluble protein, SASP)的降解、皮层裂解酶活力、芽胞内膜的损伤和皮层的水解等方面的作用阐述其杀灭细菌芽胞的机理。     

唐菖蒲球茎芽的离体培养及快速繁殖

将带１－２个芽眼的唐菖蒲球茎切块接种到附加１．０ｍｇ／Ｌ ＢＡ的ＭＳ基本培养基上可诱导休眠芽萌动。无菌芽转移至附加３．０ｍｇ／Ｌ ＢＡ的培养基上可分化产生丛生芽。丛生芽的幼代增殖宜采用附加１．５ｍｇ／Ｌ ＢＡ的培养基生根培养,以ＭＳ＋ＮＡＡ０．１－０．５ｍｇ／Ｌ或ＭＳ＋ＩＢＡ１．ｍｇ／Ｌ效果最佳。     

芽胞杆菌浸种对水稻内生细菌群落结构的影响

水稻内生细菌群落是反映植株内环境是否健康稳定的重要生物学指标,芽胞杆菌是防治水稻病害的重要生防微生物。为揭示芽胞杆菌浸种处理对水稻内生细菌群落结构的影响,采用Illumina MiSeq测序的方法对水稻内生细菌的16S rRNA基因进行测序,剖析了芽胞杆菌浸种处理对不同水稻组织内生细菌的微生态调控作用。结果表明,3种芽胞杆菌浸种处理可以提高水稻根和茎部内生细菌群落的丰富度和均匀度,降低叶部内生细菌群落的丰富度和均匀度,显著增加根部内生细菌群落多样性。变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes)是水稻根部和茎部共有优势菌门,厚壁菌门和芽胞杆菌属(Bacillus)是叶部共有优势菌门和属。芽胞杆菌浸种处理显著提高了叶部内生厚壁菌门和芽胞杆菌属的相对丰度,增加了根系和茎部组织内生细菌的分类单元OTU(Operational Taxonomic Units)数量,对叶部组织影响不明显;降低了茎部和叶部中参与各种代谢通路的内生细菌丰度,显著增加了根部参与代谢通路的内生细菌丰度。因此,3种芽胞杆菌浸种处理可以显著改变水稻根部、茎部和叶部内生细菌群落结构,改善水稻生长的微生态环境。     

苏云金芽胞杆菌G03 spoIVF操纵子敲除对芽胞和晶体形成的影响

spoIVF是一个普遍存在于芽胞杆菌中的操纵子。在枯草芽胞杆菌中,它编码的两个蛋白是芽胞形成所必需的。采用基因重组技术敲除了苏云金芽胞杆菌G03菌株中的spoIVF操纵子,构建了spoIVF缺失株G03(spoIVF-)。研究表明:该突变株丧失了形成芽胞和晶体的能力。lacZ基因与cry1Aa基因的启动子融合表达分析发现:突变株中的cry1Aa基因的活性严重降低。利用载体pSTK携带spoIVF操纵子在突变株中的表达,使突变株部分恢复了产胞和形成杀虫晶体蛋白的能力。这说明spoIVF操纵子是所必需的,同时该操纵子还影响σE因子控制的cry1Aa基因表达。     

细菌芽胞—— 一种新型的疫苗载体

杆菌属的芽胞作为益生菌已经应用于人和动物的食品生产和细菌疗法.目前,芽胞作为一种新型的疫苗载体,开始用于破伤风、炭疽等疫苗的研究.与目前的第二代疫苗相比,细菌芽胞热稳定性好,遗传操作方便,是一种理想的疫苗载体.本文就其作为疫苗载体的相关研究进行综述.     

1株产细菌纤维素芽胞杆菌的分离及鉴定

从残次水果中分离出1株菌株ZF-7,其产物经纤维素特异性染色反应、红外光谱分析及纤维素酶水解实验后,被确定为细菌纤维素。在对ZF-7菌株常规形态学及生理生化特性鉴定的基础上,对部分长度的16S rDNA同源性进行了分析,发现ZF-7菌株与解淀粉芽胞杆菌相似度可达99.5%,现命名为Bacillus amyloliquefaciens ZF-7。对ZF-7菌株在振荡培养和静置培养条件下的发酵性能进行了初步考察,得到细菌纤维素产率分别为6.6和6.2 g/L。     

唐菖蒲球茎芽的离体培养及快速繁殖

将带1-2个芽眼的唐菖蒲球茎切块接种到附加1.0mg/LBA的MS基本培养基上可诱导休眠芽萌动、无菌芽转移至附加3.0mg/LBA的培养基上可分化产生丛生芽。丛生芽的继代增殖宜采用附加1.5mg/LBA的培养基生根培养,以MS+NAA 0.1-0.5mg/L或MS+IBA 1.5mg/L效果最佳。试管苗移栽存活率可达50%左右。     

3种细菌芽胞遗传同源性及抗力对比研究

比较细菌芽胞的遗传同源性、结构和抗力差异,为炭疽芽胞的替代试验菌的可靠评价提供依据。采用资料检索、生物信息分析、显微镜观察和微生物学技术分析不同芽胞的遗传同源性、超微结构和抗力差异。炭疽芽胞与腊样芽胞的结构和大小相似,生物遗传同源性最近,对热力、UVC和有效氯的抗力相近。腊样芽胞对炭疽芽胞的代表性最好,可以倾向性选用其替代炭疽芽胞进行试验研究。     

途径优化强化枯草芽胞杆菌合成肝素前体

肝素前体是化学酶法合成肝素的起点,肝素前体的微生物高效合成具有重要意义。在已构建的产肝素前体的枯草芽胞杆菌((1.71±0.08)g/L)中,分析了UDP-葡萄糖醛酸(UDP-GlcUA)途径中关键酶基因(pgcA、gtaB、tuaD)以及UDP-乙酰氨基葡糖(UDP-GlcNAc)途径中关键酶基因(glmS、glmM、glmU)的过量表达对肝素前体产量及其分子量的影响。在此基础上,通过共表达tuaD、gtaB、glmU、glmM和glmS基因,摇瓶中肝素前体产量提高至(2.89±0.11)g/L,分子量为(75.90±1.18)kDa。通过在3 L发酵罐中进行补料分批发酵,肝素前体的产量最终积累到(7.25±0.36)g/L,分子量为(46.66±2.71)kDa,为工业化生产肝素奠定了基础。     

苏云金芽胞杆菌G03 spoIVF操纵子敲除对芽胞和晶体形成的影响

spoIVF是一个普遍存在于芽胞杆菌中的操纵子。在枯草芽胞杆菌中,它编码的两个蛋白是芽胞形成所必需的。采用基因重组技术敲除了苏云金芽胞杆菌G03菌株中的spoIVF操纵子,构建了spoIVF缺失株G03(spoIVF-)。研究表明:该突变株丧失了形成芽胞和晶体的能力。lacZ基因与cry1Aa基因的启动子融合表达分析发现:突变株中的cry1Aa基因的活性严重降低。利用载体pSTK携带spoIVF操纵子在突变株中的表达,使突变株部分恢复了产胞和形成杀虫晶体蛋白的能力。这说明spoIVF操纵子是所必需的,同时该操纵子还影响σ^E因子控制的cry1Aa基因表达。     

细菌spore的中文名称统一使用“芽胞”

2010年末《微生物学报》重新修正了"投稿须知",并于2010-12-28在网站上重申,严格规范本刊使用的微生物学名词。要求作者和审稿专家按照全国科学技术名词审定委员会审定、公布的名词进行使用。参考书目:全国自然科学名词审定     

细菌spore的中文名称统一使用“芽胞”

2010年末《微生物学报》重新修正了"投稿须知",并于2010-12-28在网站上重申,严格规范本刊使用的微生物学名词。要求作者和审稿专家按照全国科学技术名词审定委员会审定、公布的名词进行使用。参考书目:全国自然科学名词审定委员会.微生物学名词.第一版.北京:科学出版社,1988.(注:此书的第二版正在编写中,出版后将以第二版为准。)     

细菌spore的中文名称统一使用“芽胞”

2010年末《微生物学报》重新修正了"投稿须知",并于2010-12-28在网站上重申,严格规范本刊使用的微生物学名词。要求作者和审稿专家按照全国科学技术名词审定委员会审定、公布的名词进行使用。参考书目:全国自然科学名词审定委员会.微生物学名词.第一版.北京:科学出版社,1988.(注:此书的第二版正在编写中,出版后将以第二版为准。)     

地衣芽胞杆菌（CMCC63519）及代谢产物对部分细菌的抑菌作用

本文通过两个试验,证实了地衣芽杆菌的代谢产物对某些细菌有类似抗生素样作用。抑菌作用与代谢产物有关。     

SigmaK和GerE对芽胞外壁基质结构基因exsB的转录调控

[目的]明确SigmaK和GerE对苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)芽胞外壁(exosporium)基质结构基因exsB的转录调控.[方法]序列比较蜡样芽胞杆菌群exsB及启动区序列,利用启动子融合lacZ技术检测exsB启动子的转录活性;通过凝胶阻滞方法检测GerE与exsB启动子的结合.[结果]在蜡样芽胞杆菌群中,exsB及其启动区具有较高的相似性,exsB启动子在芽胞形成期的晚期大量转录;sigK和gerE的突变影响了exsB启动子的转录活性,凝胶阻滞结果显示GerE蛋白与exsB启动子可以结合.[结论]本研究证明exsB在芽胞形成晚期受到SigmaK转录调控,并直接受到GerE的正调控.     

4种细菌芽胞中α/β-SASP分子结构对比分析

认识和描述不同细菌芽胞α/β-SASP的分子结构特征,为深入开展以α/β-SASP为靶向修饰的应用技术提供科学依据.运用生物信息学方法和技术,比对分析4种菌株,炭疽芽胞杆菌Ames 株、苏云金芽胞杆菌serovar konkukian 97-27 株、腊样芽胞杆菌ATCC 10987株、枯草芽胞杆菌168 株的α/β-SASP基因及蛋白质一、二、三级结构的异同.基因-ClustalW2;一级结构-ClustalW2和ProtParam tool;二级结构-SOPMA;三级结构-SWISS-MODEL和Swiss-Pdbviewer4.0.1.4种菌株的α/β-SASP基因及蛋白质一、二、三级结构有明显的同源性,炭疽芽胞、苏云金芽胞和腊样芽胞的生物学特征非常相似.在开展细菌芽胞的α/β-SASP基因及生物效应研究时,可以首选苏云金杆菌芽胞或腊样杆菌芽胞作为炭疽杆菌芽胞的试验菌,其次可以选择枯草杆菌芽胞.     

胶质芽胞杆菌对磷矿石风化作用时细菌蛋白质的双向电泳分析

本文研究对磷矿石有风化作用的胶质芽胞杆菌(Bacillus muscilaginosus)在风化磷矿石过程中菌体蛋白质组的变化及差异, 以此了解该风化作用的分子生物学机制。将该菌接入液体培养基中, 加磷矿粉为处理组, 不加磷矿粉为对照组, 静置培养。培养10 d 后, 取上清液离心后的固体物和部分上清液中的外分泌蛋白用作菌体蛋白质组学分析。菌体蛋白质组二维电泳图谱进行比较和软件分析后, 处理组可见蛋白点数为(1134±98)个, 对照组可见蛋白点数为(729±53)个, 两者比较具有统计学差异(P<0.0