成体干细胞可塑性研究的理论思考

成体干细胞是存在于发育成熟机体组织中的具有高度自我更新和增殖潜能的未分化细胞。依据细胞的发育潜能,可将干细胞分为全能干细胞(具有分化为全部机体组织细胞类型的能力)、多能干细胞(具有分化为多种不同组织细胞类型的能力)和专能干细胞(只能分化为某一特定类型的组织细胞)。成体专能干细胞的研究已经开展多年,其中造血干细胞和角膜干细胞已经成功应用于临床,表皮干细胞和神经干细胞也取得了良好进展。进入20世纪90年代末,成体干细胞的研究又取得了重要突破。在发育成熟的高等动物甚至人类的多种组织器官中(如骨髓和皮肤等)发现存在有成体多能干细胞。这些成体多能干细胞同样具有很强的分化潜能,甚至可以跨越传统的胚层概念的界限,分化为其他胚层来源的细胞。成体干细胞的发育来源是一重要的理论问题,对干细胞的研究实践具有指导意义。从发育生物学的角度提出了成体干细胞发育来源的一个设想模式,同时对成体干细胞与胚胎干细胞的比较和成体干细胞与肿瘤细胞的联系进行分析,以期有助于对成体干细胞的理解和认识。     

肝干细胞研究进展

198 1年英国的Evans和Kaufman用延缓着床的胚泡首次成功地分离了小鼠胚胎干细胞 ,从而在全球掀起了有关干细胞的研究热潮。 1998年 11月 ,美国Thomson和Gearhart分别用不同的方法获得人胚胎干细胞及胚胎生殖细胞 ,此后 ,干细胞的研究便进入了一个新的时代。所谓干细胞 (stemcell) ,是指那些处于分化过程之中 ,具有分裂增殖能力 ,可自我更新 ,有多向分化潜能即能分化产生一种以上“专业”细胞的原始细胞。干细胞依其分化潜能的大小可分为 :①胚胎干细胞 (embryonicstemcell,ES细胞 ) ,即具有分化为机体任何一种组织器官潜能的细胞 ,如囊胚…     

成体干细胞可塑性研究的理论思考

成体干细胞是存在于发育成熟机体组织中的具有高度自我更新和增殖潜能的未分化细胞。依据细胞的发育潜能，可将干细胞分为全能干细胞(具有分化为全部机体组织细胞类型的能力)、多能干细胞(具有分化为多种不同组织细胞类型的能力)和专能干细胞(只能分化为某一特定类型的组织细胞)。成体专能干细胞的研究已经开展多年，其中造血干细胞和角膜干细胞已经成功应用于i临床，表皮干细胞和神经干细胞也取得了良好进展。进入20世纪90年代末，成体干细胞的研究又取得了重要突破。在发育成熟的高等动物甚至人类的多种组织器官中(如骨髓和皮肤等)发现存在有成体多能干细胞。这些成体多能干细胞同样具有很强的分化潜能，甚至可以跨越传统的胚层概念的界限，分化为其他胚层来源的细胞。成体干细胞的发育来源是一重要的理论问题，对干细胞的研究实践具有指导意义。从发育生物学的角度提出了成体干细胞发育来源的一个设想模武，同时对成体干细胞与胚胎干细胞的比较和成体干细胞与肿瘤细胞的联系进行分析，以期有助于对成体干细胞的理解和认识。     

成体干细胞的转分化现象

成体干细胞是一种存在于已分化组织中的未分化细胞，它们具有自我更新能力和分化产生相应细胞后代的能力。现代细胞生物学和发育生物学的研究表明，组织中的成体干细胞除能分化形成构成该组织的特化细胞外，在某些情况下，还能分化形成其它组织的细胞类型。细胞的转变分化方向的能力称为转分化，对转分化机制的研究将有助于我们更好地了解细胞分化和个体发育的机制，同时也有助于探索细胞治疗的基础。然而，干细胞的转分化能力也受到来自多方面的质疑。本文综述了近年来成体干细胞转分化的研究现状。     

绿色荧光蛋白转基因胚胎大鼠神经干细胞生物学特性研究

目的:体外分离、培养、鉴定绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)转基因胚胎大鼠神经干细胞,研究其体外活性与生物学性状,为在体分化示踪研究奠定基础。方法:采用机械分离,无血清传代培养法从GFP胚胎大鼠海马获得神经干细胞,免疫荧光和免疫细胞化学法染色进行体外神经干细胞性质和分化活性鉴定,并利用流式细胞计数法行纯度检测。结果:成功从GFP胎鼠海马获得神经干细胞,体外生长情况与活性良好,能分化成神经元和胶质细胞;体外连续传代3次后绝大部分细胞Nestin表达阳性,且分化后细胞的GFP表达不受影响。结论:GFP胚胎大鼠来源神经干细胞具有普通胎鼠神经干细胞相同的自我更新和多向分化潜能,且能稳定表达GFP,因此它可以成为示踪神经干细胞研究的有效工具细胞。     

干细胞与创面修复

创面修复是一门古老的科学 ,而干细胞作为一门新兴科学现在正掀起一股研究热潮 ,并对创面修复产生深远影响。本文就干细胞及利用它进行创面修复作一综述。1　干细胞与表皮干细胞干细胞的定义一直存在争议 ,一般认为干细胞是一类能无限地自我更新并且能产生至少一种高分化子代细胞的细胞[1] 。干细胞具有以下特点 :本身不是处于分化途径的终端 ;能无限地分裂 ,具有终身无限的自我更新能力 ;具有分化潜能 ,能分化为终末分化细胞 ;分裂产生的子细胞只能在两种途径中选择其一 ,或保持亲代特征 ,仍作为干细胞 ,或不可逆向终末分化。干细胞自我更…     

胚胎大鼠神经干细胞的分离培养及其基本属性的观察

目的分别以单纯机械吹打法和胰蛋白酶消化法分离培养神经干细胞(NSCs),并观察NSCs的生长、增殖和分化特点。方法采用无血清培养技术从胎鼠的大脑皮层和海马通过单纯机械吹打和胰蛋白酶消化分离培养原代细胞,并加血清诱导其分化,借助免疫细胞化学技术检测培养的神经干细胞及其分化后神经元和星形胶质细胞标志蛋白的表达;并应用相差显微镜观察神经干细胞的生长特点及分化后的细胞形态学变化。结果①从胎鼠大脑皮层及海马能分离培养出具有很强增殖力的细胞,它们能稳定表达巢蛋白,经诱导分化后可表达神经元和星形胶质细胞的特异性抗原。②与用单纯机械吹打分离细胞法相比,用胰蛋白酶消化后,在神经干细胞培养基中有很少或几乎没有未分离的组织团块,原代细胞背景更清晰。结论①应用胰蛋白酶消化,能分离培养出纯度较高的神经干细胞。②从大鼠大脑皮层及海马能成功地分离、培养出神经干细胞,它是进一步研究神经干细胞的良好材料。     

神经干细胞的增殖分化及在癫痫治疗中的应用

神经干细胞是中枢神经系统中一类具有自我更新能力、高增殖潜能以及分化潜能的细胞 ,它来源于室管膜细胞 ,存在于胚胎和成年哺乳动物中枢神经系统脑室系统周围的广泛区域。神经干细胞的增殖和分化受到多种因素的调控 ,目前研究较多的是碱性成纤维细胞生长因子 (basicfi broblastgrowthfactor,bFGF)和表皮生长因子(epidermalgrowthfactor ,EGF)。在成功地培养了神经干细胞之后 ,它被用来进行移植治疗 ,同时借助外界某种刺激可使中枢神经系统内的神经干细胞激活 ,促进神经元和胶质细胞的生成。向γ 氨基丁酸能神经元分化的神经干细胞的移植…     

正常成人脑脊液诱导人胚来源的神经干细胞分化的实验研究

目的　观察人胚来源的神经干细胞在正常成人脑脊液中的分化情况并探讨其机制。方法　将原代培养的人胚来源的神经干细胞置入含有正常成人脑脊液培养基 (DMEM/F12 +B2 7+ 3 0 %脑脊液 )使其分化 ,在分化的不同时间对分化的细胞进行免疫细胞化学染色 ,计数产生的各类神经细胞的比例。结果　正常成人脑脊液能诱导人胚来源的神经干细胞分化成神经元、星型胶质细胞、少突胶质细胞 ,与其在胎牛血清中的分化相比星型胶质细胞比例增多 (P <0 0 5 ) ,而其他类型细胞比例无显著性差异。结论　正常成人脑脊液能诱导人胚来源的神经干细胞分化成神经元、星型胶质细胞、少突胶质细胞 ,神经干细胞在脑脊液中可以存活和分化 ,为神经干细胞的移植治疗提供有力的依据     

人胚胎干细胞HuES17向造血干细胞的分化

背景:人类胚胎干细胞是来源于着床前囊胚的内细胞团,能在长期培养中无限增殖并保持未分化状态,且具有分化成人体组织各种细胞类型能力的细胞。目的:进一步验证人胚胎干细胞HuES17细胞株向造血干细胞分化的能力。方法:人胚胎干细胞HuES17采用与人包皮成纤维细胞二维共培养的方式培养,采用人胚胎干细胞与小鼠骨髓基质细胞(OP9)二维共培养的方法诱导胚胎干细胞向造血干细胞分化。结果与结论:人胚胎干细胞与小鼠骨髓基质细胞(OP9)二维共培养诱导造血分化的第四五天即开始出现OP9细胞逐渐老化,很快死亡;可以观察到人胚胎干细胞分化,然而,随着OP9细胞死亡,分化的人胚胎干细胞亦死亡,不能诱导人胚胎干细胞向造血干细胞分化。提示人胚胎干细胞HuES17细胞株可能不能向造血干细胞分化,或向造血干细胞分化的能力较低。     

骨髓间充质干细胞及其向神经元细胞分化的研究进展

早期的干细胞研究主要集中在骨髓造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)上。现在发现骨髓中除了造血干细胞以外,还存在一类骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)。BMSCs是与HSC截然不同的一类干细胞,具有自我更新和多向分化的潜能,能分化为成骨细胞、脂肪细胞、成肌纤维细胞、软骨细胞、内皮细胞、心肌细胞,神经元样细胞[1-2]。在新近的研究中,人们还发现它可以向内胚层及外胚层的细胞分化[3-4],具有     

成体干细胞向血管内皮细胞定向分化的研究现状

成体干细胞存在于已分化的组织器官中,具有明显的可塑性,能跨系统、跨胚层分化,在组织工程和损伤修复领域具有重要的应用价值.在血管组织工程研究领域中,成体干细胞作为种子细胞得到越来越广泛而深入的研究.目前研究表明,具有向血管内皮细胞分化的成体干细胞主要有骨髓间充质干细胞、造血干细胞、脂肪来源的干细胞以及羊膜来源的干细胞等基于此,就成体干细胞作为种子细胞在血管组织工程领域研究现状进行综述.     

人胎脑皮质神经干细胞的分离培养及鉴定

目的探讨人脑皮质中分离培养神经干细胞并鉴定其增殖及分化潜能。方法采用包含碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮细胞生长因子(EGF)的无血清培养和单细胞克隆技术，从30周自愿水囊引产人胎脑皮质中分离出神经干细胞，并进行培养、传代、分化观察，应用免疫组织化学染色对培养的细胞及其分化的细胞进行鉴定。结果从30周人胎脑皮质中成功分离出具有自我更新和多分化潜能的神经干细胞，在无血清培养时细胞呈悬浮状态生长，形成神经球，该细胞具有连续克隆能力，可传代培养，表达神经巢蛋白抗原(Nestin)；在含血清培养时诱导神经干细胞分化，分化后的细胞表达神经元细胞和胶质细胞的特异性抗原。结论神经干细胞的存活和分裂有赖于EGF和bFGF的共同作用；30周人胎脑皮质仍能培养出具有自我复制和分化潜能的神经干细胞。     

GFP转基因胚胎大鼠神经干细胞生物学特性研究

目的 体外分离、培养、鉴定绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）转基因胚胎大鼠神经干细胞，研究其体外活性与生物学性状，为在体分化示踪研究奠定基础。方法 采用机械分离，无血清传代培养法从GFP胚胎大鼠海马获得神经干细胞，免疫荧光和免疫细胞化学法染色进行体外神经干细胞性质和分化活性鉴定，并利用流式细胞计数法行纯度检测。结果 成功从GFP胎鼠海马获得神经干细胞，体外生长情况与活性良好，能分化成神经元和胶质细胞；体外连续传代3次后绝大部分细胞Nestin表达阳性，且分化后细胞的GFP表达不受影响。结论 GFP胚胎大鼠来源神经干细胞具有普通胎鼠NSCs相同的自我更新和多向分化潜能，且能稳定表达GFP，因此它可以成为示踪神经干细胞研究的有效工具细胞。     

脐血单个核细胞在间充质干细胞微环境中向单核细胞分化

现已知在骨髓中存在2种类型的千细胞：造血干细胞(HSC)和问充质干细胞(MSC)。HSC在造血微环境的调控下能够分化为不同系列的成熟血细胞，而MSC则能分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌肉细胞和基质细胞等问充质组织细胞。最近还发现MSC能分泌许多造血生长因子，在体外做为饲养层细胞能增加细胞集落形成的数量，MSC和HSC联合输注能加快造血重建的速度。为进一步研究MSC对造血细胞的作用，我们采用MSC作为饲养层细胞，观察接种的脐血单个核细胞(MNC)在MSC微环境中的增殖分化情况。     

免疫与造血

正常造血与免疫造血干细胞中存在着不同的分化阶段。全能干细胞可分化为髓系和淋巴系多能干细胞.但全能干细胞与多能干细胞等很幼稚细胞的分化与增殖的调节机理尚有许多不明之处。现正在研究由骨髓支持细胞(基质细胞)等形成的造血微环境,以及近年来特别引人注目的白细胞介素3(IL-3)的调节机理。对于分化方     

干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞的研究与进展

学术背景:干细胞是一群较原始的细胞,它们具有自我更新和多向分化潜能,可以被诱导分化为胰岛素分泌细胞,理论上可提供丰富的胰岛细胞来源.目的:本文就近年来干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞的研究进展做一综述.检索策略:应用计算机检索Pubmed和CNKI数据库1990-2007年期间相关文献,检索词为"干细胞,诱导分化,胰岛素分泌细胞,stem cell,differentiation,islet-producing cell".对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文.纳入标准:干细胞向胰岛素分泌细胞诱导分化的研究进展.排除标准:重复研究.文献评价:共收集到相关文献162篇,选择其中49篇文献进行重点阅读和分析.49篇文献中,1篇涉及糖尿病及其并发症的治疗,1篇涉及胰岛细胞移植,1篇涉及干细胞在糖尿病治疗中的应用,13篇涉及胚胎干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞的研究,4篇涉及脐血来源的干细胞体内分化为胰岛素分泌细胞的研究,10篇涉及骨髓来源的干细胞分化为胰岛素分泌细胞的研究,13篇涉及胰腺干细胞分化为胰岛素分泌细胞的研究,6篇涉及其它器官来源的干细胞分化为胰岛素分泌细胞的研究.资料综合:胰岛细胞移植可以用来治疗1型和部分2型糖尿病,但由于供体细胞来源匮乏,因而寻找新的细胞来源成了当务之急.近年来,干细胞研究为新型胰岛细胞的来源带来了希望.目前用于胰岛细胞来源研究的干细胞主要有胍胎干细胞和成体干细胞,后者根据细胞来源不同分为脐血来源干细胞、骨髓来源干细胞、胰腺干细胞及其他器官来源的干细胞.目前的研究显示,骨髓来源的干细胞可以在体内促进胰腺的再生,并且可以在体外被诱导分化为胰岛样细胞.结论:深入了解干细胞向胰岛β细胞诱导分化的分了调控机制,将会加快糖尿病细胞治疗的研究进展.     

成体干细胞及其分化机理

成体干细胞是存在于胎儿和成人组织器官中具有自我更新，高度增殖和多向分化潜能的细胞，在适当的诱导条件下。可变成不同类型的细胞。成体干细胞的分化是指成体干细胞具有可在体内、体外分化成不同类型细胞的能力，将其分化物植入体内后在各种情况下都能稳定地存活。目前认为分化的可能机制是：多种成体干细胞可能在不同的器官中存在，包括出生后体内仍存在的多能性干细胞。美国Minnesota大学干细胞研究所一系列的研究证明成体骨髓中确实存在具有多分化潜能的成体干细胞，命名为MAPC，能在体外由单细胞分化为具有中胚层系、外胚层系或内胚层系特征的细胞；将其注入胚泡，能分化成各种组织细胞。多能的成体干细胞在今后能用于多个不同器官的变性或遗传性疾病的治疗。     

间充质干细胞定向分化及其在肝脏疾病应用中的启不

间充质干细胞向肝细胞诱导分化成功后，分化后的肝细胞样细胞应用于肝病成为了研究热点。不仅未分化的间充质干细胞能治疗肝病，其来源的分化后的肝细胞样细胞亦能有效治疗肝病。因此，有必要对间充质干细胞分化前后的细胞治疗效果进行比较评价。本文从诱导分化培养方案、鉴定指标及相关细胞生物学功能进行述评。     

兔骨髓基质细胞体外培养、诱导及分化成神经干细胞的实验研究

目的研究新西兰大白兔骨髓基质细胞体外培养及诱导分化情况. 方法梯度密度离心法分离新西兰大白兔骨髓基质细胞( BMSCs),于体外用神经干细胞培养基和多种细胞因子进行培养、诱导、分化,细胞免疫化学方法进行鉴定. 结果新西兰大白兔骨髓基质细胞能在体外培养中增殖、分化,具有克隆能力的骨髓基质细胞能表达干细胞特异性抗原神经巢蛋白 (Nestin),这些细胞最终能分化出类神经元样细胞,免疫细胞化学检测可见有神经核蛋白抗体( NeuN)的表达. 结论新西兰大白兔骨髓基质细胞是具多向分化潜能的细胞,具有较强的增殖、自我更新能力.在适宜的条件下,可以分化成能表达神经系细胞特异性抗原的细胞.骨髓基质细胞来源方便、取材较容易,体外培养和扩增的技术条件简便,具有向神经系细胞分化的潜能,可以考虑作为细胞移植治疗的种子细胞.