犬隐孢子虫和隐孢子虫病的研究进展

隐孢子虫病（Cryptosporidiosis）是由隐孢子虫（Cryptosporidium）起的一种重要的人畜共患病。近年来，隐孢子虫病的检出率逐年增高，已被列为世界最常见的6种腹泻病之一。犬隐孢子虫病世界各地均有报道，严重威胁着人类和动物的健康。本文对犬隐孢子虫病的病原分类、虫体形态和寄生部位、流行病学特点、诊断、防治等方面研究状况进行了综述，为犬隐孢子虫病的有效防制提供参考。     

隐孢子虫和隐孢子虫病研究进展

190 7年著名寄生虫学家Ｔｙｚｚｅｒ在作小鼠粘膜组织切片时发现大量虫体 ,并定名为小鼠隐孢子虫 (Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍｍｕｒｉｓ) ,1 91 2年Ｔｙｚｚｅｒ在小鼠小肠中查到相似虫体 ,但认为是另一种虫种 (Ｃ .ｐａｒｖｕｍ) ,因为该虫种比Ｃ .ｍｕｒｉｓ小而且内生发育阶段局限于小肠上皮。1 95 5年Ｓｌａｖｉｎ报道Ｃ .ｍｅｌｅａｇｒｉｄｉｓ感染火鸡小肠出现急性临床症状 ,其特征是严重腹泻 ,但死亡率低 ,首次证明隐孢子虫的强致病性。在腹泻犊牛小肠中检测到隐孢子虫后更进一步引起兽医的兴趣 (Ｐａｎｃｉｅｒａｅｔａｌ.,1…     

广东和云南部分地区艾滋病患者中隐孢子虫感染的调查分析

目的 了解艾滋病患者中隐孢子虫的感染状况.方法 收集广东和云南省部分地区艾滋病患者的粪便,采用改良的抗酸染色法和免疫荧光染色法检测隐孢子虫卵囊;并同时检测患者的CD4细胞计数.结果 212例艾滋病患者粪便标本中9例标本为阳性,感染率为4.25%.广东和云南的艾滋病患者隐孢子虫感染率分别为4.00%(5/126)和4.65%(4/86),两地之间差异无统计学意义(P＞0.05);稀便与软便中的隐孢子虫卵囊检出率分别为12.00%(3/25)和3.21%(6/187),其差异无统计学意义(校正χ2=2.31,P＞0.05);男性与女性艾滋病患者隐孢子虫感染率分别为5.07%(7/138)和2.70%(2/74),其差异无统计学意义(校正χ2=0.21,P＞0.05);50～59岁组隐孢子虫感染率高于30～39岁组的感染率(校正χ2=7.15,P＜0.01);接受抗病毒治疗组与未接受治疗组艾滋病患者隐孢子虫感染率分别为1.12%(2/179)和21.21%(7/33),两者差异有统计学意义(校正χ2=18.54,P=0.0000);艾滋病晚期,尤其是CD4细胞计数少于100个/μl的患者其发病率明显提高.结论 我国南方艾滋病患者中存在着隐孢子虫感染,但发病率明显低于国外报道;艾滋病患者的便形、性别及所处地区不能预示隐孢子虫感染率;抗病毒治疗能降低隐孢子虫病感染率,艾滋病患者的隐孢子虫感染多发生在疾病的终末期.     

广州市哨点医院腹泻儿童隐孢子虫感染的分子

目的了解广州某哨点医院门诊腹泻儿童隐孢子虫感染现状和分子流行病学特征。方法收集2012年6月至2013年5月广州市某哨点医院门诊腹泻儿童的人口资料学和粪便标本。采用巢氏聚合酶链反应（NestedPCR）方法检测粪便标本中的隐孢子虫卵囊。结果348份粪便标本中隐孢子虫的检出率为3．45％（12／348）,发病年龄以3岁以内为主（n=10）,检出率在患者的性别、年龄、月份间差异均无统计学意义,时间分布有2个高峰,分别为3—4月和11—12月。检出的12株隐孢子虫经测序分型,8株为C．hominis,4株为C．parvum,其中Ia亚型6株,Ib亚型2株,lIa亚型3株,IId亚型1株。结论广州某哨点医院腹泻儿童存在隐孢子虫感染,高发于春季和冬季,以3岁以内婴幼儿为主,主要流行C．hominis。     

微小隐孢子虫子孢子表面蛋白质粒DNA接种诱导Balb/c小鼠的免疫应答

目的　探讨微小隐孢子虫子孢子表面蛋白CP2 3重组质粒pCR3.1～ 2 3DNA疫苗诱导机体产生体液和细胞免疫应答的效果。方法　用重组的DNA疫苗于Balb/c小鼠后腿胫骨前肌注射免疫 ,于 0、3、6周共免疫 3次 ,10 0 μg/次。免疫后不同时间检测体液和细胞免疫应答指标。并用 1× 10 6卵囊进行攻虫试验。结果　pCR3.1～ 2 3可诱导机体产生相应的特异性抗体 ,对C .parvum卵囊攻击具有保护作用。结论　微小隐孢子虫子孢子表面蛋白CP2 3重组质粒pCR3.1～ 2 3有可能作为侯选的隐孢子虫DNA疫苗 ,值得进一步深入研究。     

抗微小隐孢子虫Apple结构域单克隆抗体的制备

采用PCR技术从已构建的微小隐孢子虫cDNA文库中扩增含Apple结构域基因,构建pGEX-4T-1-Apple重组质粒,并进行原核表达及纯化,得到分子质量大小约为34kDa的GST—Apple重组蛋白,以其为免疫原,免疫Balb／c小鼠,利用杂交瘤技术制备单克隆抗体,测定其免疫球蛋白亚类及效价,并用蛋白质印迹法（Western—blot）鉴定其特异性。结果共筛选出能稳定分泌抗重组Apple单克隆抗体的2株杂交瘤细胞株,抗体亚类均为IgGl,Western—blot分析显示2株单抗均能与重组蛋白GST—Apple发生特异性结合。为研究Apple结构域在隐孢子虫侵入过程中的功能提供有效工具。     

贝氏隐孢子虫在珍珠鸡体内发育的透射电镜观察

采用透射电镜观察了贝氏隐孢子虫在珍珠鸡气管和法氏囊的发育。贝氏隐孢子虫各期虫体均在上皮细胞微绒毛所形成的带虫空泡内发育，虫体基部有一营养器。滋养体呈圆形，有一个细胞核。胞质中有发达的粗面内质网。裂殖体经２或３次核分裂，以出芽方式形成４或８个裂殖子。成熟的裂殖子呈香蕉形，大小为２．８５×０．７０μｍ，被双层膜。小配子体由滋养体发育而来，内含多个缺少核仁的细胞核，细胞核移向胞质浅层，并进入胞质突起成为小配子的细胞核。大配子内可观察到二种成囊体和大量多糖颗粒，并在其胞质的空泡内发现小配子类似物。孢子生殖也在带虫空泡内进行，最终形成一个大残体和４个子孢子。子孢子有一个细胞核，富含微线和多糖颗粒。     

应用巢式PCR方法诊断微小隐孢子虫感染的实验研究

目的应用巢式PCR扩增方法诊断微小隐孢子虫感染。方法用昆明种小鼠通过免疫抑制方法建立动物模型，通过不连续蔗糖密度梯度离心法分离、纯化隐孢子虫卵囊。抽提DNA后，用巢式PCR扩增隐孢子虫的18S核糖体DNA，电泳、割胶回收后测序。结果成功建立隐孢子虫的小鼠免疫抑制动物模型，纯化后的隐孢子虫卵囊形状均一，呈圆形或椭圆形，大小在3-6um左右。经巢式PCR扩增，在840bp左右有一条特异性条带。通过测序和生物信息学分析，证实该基因序列与微小隐孢子虫18S具有高度同源性。结论巢式PCR方法扩增18S基因是诊断微小隐孢子虫感染的敏感方法。     

南京市儿童医院门诊儿童隐孢子虫病的流行病学调查

目的调查南京市儿童医院门诊儿童隐孢子虫病的流行情况,进而了解2008年夏秋季节南京及周边地区儿童人群中隐孢子虫病的流行情况。方法收集2008年7-8月份和9～10月份两个时间段南京市儿童医院门诊儿童粪样,用改良抗酸染色和金胺酚．改良抗酸复合染色法,检查粪样中的隐孢子虫卵囊。同时,随机收集部分门诊儿童的血样,通过分子生物学技术纯化特异性隐孢子虫重组蛋白SA35,用微粒子免疫检测法检测血清中抗SA35 IgG抗体水平。结果共收集儿童医院门诊儿童的粪样2268份,血样207份。粪样隐孢子虫检出率为0．97％。血检结果阳性率为29．95％,经卡方检验,粪检和血检的阳性率在性别之间差异无统计学意义（P〉0．05）：但血检阳性率1岁以上的儿童比1岁以内的儿童明显增高（P〈0．05）。结论南京及周边地区门诊儿童在夏秋季仍然存在隐孢子虫感染,需要进一步加强血检以监控隐孢子虫病的传播。     

贾第鞭毛虫和隐孢子虫的流行病学研究进展

蓝氏贾第鞭毛虫和隐孢子虫在我国的流行状况还不是很清楚,本文简单介绍了贾第鞭毛虫和隐孢子虫的特性及分类,综述了国外贾第鞭毛虫和隐孢子虫的流行状况及其分子流行病学方面的内容。     

本草九代对慢性迁延性肝炎患者血清可溶性白细胞介素2受体水平的调节作用

用ELISA方法检测了29名慢性迁延性肝炎患者和18名健康献血员血清可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)水平,同时进行了血清IL-2与sIL-2R的相关分析。结果发现,正常人sIL-R为147±72.1u/ml,而慢性迁延性肝炎病人sIL-2R显著升高(210.5±84).GWe治疗3个月后sIL-2水平显著下降(185.8±79);同时发现IL-2水平与sIL-2R 有一定相关性。上述结果提示GWe具有调节机体IL-2功能的独特作用。     

肾综合征出血热患者血清超氧化物歧化酶、丙二醛含量和T淋巴细胞亚群的关系

目的:探讨肾综合征出血热(HFRS)发病机理中,自由基(OFR)对T淋巴细胞亚群的影响。方法:对54例HFRS患者进行血清SOD、MDA、T细胞亚群进行动态观察。结果:显示SOD含量在发热期明显低于正常对照组,MDA含量在发热期明显高于正常对照组,CD4 细胞在发热期明显降低,CD8 细胞在发热期明显升高,其变化在少尿期最重,并且发现MDA和T细胞亚群变化有一定的相关性,即MDA与CD8 细胞百分比是正相关,与CD4 /CD8 负相关。结论:HFRS患者免疫功能紊乱现象与OFR反应有关。     

Progress in interleukin‐2 therapy for rheumatic immune diseases by regulating the immune balance of T cells

Breaking the balance between effector T cells, including Th17 (T helper cell 17) cells, and regulatory T cells (Tregs) is a key link in the pathogenesis of rheumatic immune diseases, which lead to a new concept of regulating immune balance in the treatment of rheumatic immune diseases. Interleukin (IL)‐2 can effectively regulate the differentiation, development and functional activity of regulatory T cells, thus restoring the immune balance between regulatory T cells and effector T cells. Therefore, low‐dose IL‐2 has been used in the treatment of rheumatic immune diseases, and it has become a promising new choice to achieve therapeutic purpose by regulating the immune balance of T cell. Here, we discuss the role of T cells immune imbalance in the pathogenesis of rheumatic immune diseases and the mechanism of IL‐2 in the treatment of rheumatic immune diseases by regulating T cells immune balance and summarize the relevant clinical trials.     

大肠癌患者围手术期免疫状态变化的临床意义

目的 研究大肠癌患者围手术期的免疫状态。方法 应用ＡＰＡＡＰ夹心法ＥＬＩＳＡ和比色法分别测定大肠癌患者手术前后Ｔ细胞亚群变化,血浆可溶性白介２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）及一氧化氮（ＮＯ）和癌组织的ＳＩＬ－２Ｒ,ＮＯ含量。结果 大谫ＣＤ３,ＣＤ４细胞、ＣＤ４／ＣＤ８比值和血浆ＮＯ水平明显低于正常,血浆ＳＩＬ－２Ｒ、ＣＤ８细胞较正常显著增高,肿瘤切除后３周左右ＣＤ３、ＣＤ４细胞、ＣＤ４／ＣＤ８和血浆术前有明     

人参四物汤对成瘾动物胸腺T细胞亚群增殖及IL—2R的作用研究

目的：观察吗啡对胸腺细胞ＣＤ４,ＣＤ８细胞周期增殖、ＩＬ－２的影响及人参四物汤对其调节作用。方法：小剂量递增给药建立吗啡成瘾动物模型后,采用流式细胞仪分析各组小鼠胸腺ＣＤ４、ＣＤ８细胞ＤＮＡ含量、增殖九以及ＩＬ－２Ｒ的情况。结果：吗啡成瘾组小鼠ＣＤ４、ＣＤ８细胞Ｓ,Ｇ２＋Ｍ期和增殖指数显著低于正常组和人参四物汤组动物,而Ｃ０／Ｃ１期高于后二者;吗啡依赖小鼠ＩＬ－２Ｒ表达下降,人参四物汽组动物的Ｔ细     

恶性葡萄胎患者化疗前后血清IL-2、SIL-2R和外周血B细胞和T淋巴细胞亚群检测的临床意义

目的:探讨了恶性葡萄胎患者化疗前后血清IL-2、SIL-2R和外周血B细胞及T淋巴细胞亚群水平及临床意义.方法:分别应用放射免疫分析、ELISA法和单克隆抗体法对32例恶性葡萄胎患者进行了血清IL-2、SIL-2R和外周血B细胞及T淋巴细胞亚群进行了检测,并与35名正常健康人作比较.结果:恶性葡萄胎患者在化疗前血清SIL-2R和B细胞数均非常显著地高于正常人(P＜0.01),而IL-2、CD3、CD4、CD4/CD8比值则显著地低于正常人组(P＜0.01),经化疗后6个月,与正常人比较仍有显著性差异(P＜0.05).结论:恶性葡萄胎患者是一种自身调节免疫异常的疾病.     

驱虫斑鸠菊对正常小鼠免疫功能的影响

目的探讨驱虫斑鸠菊对小鼠免疫功能的影响,揭示其免疫作用机理.方法利用[3H]-TdR掺入法分别测定了驱虫斑鸠菊对环胞菌素A(Con A)诱导的小鼠脾脏T淋巴细胞和细菌脂多糖(LPS)诱导的B淋巴细胞增殖活性以及脾脏T淋巴细胞分泌白细胞介素-2(IL-2)活性的影响,运用酶联免疫吸附试验测定了驱虫斑鸠菊对小鼠血清中抗体活性的影响;采用流式细胞仪测定脾脏B淋巴细胞表面抗原CD19的表达水平.结果驱虫斑鸠菊的低、中、高3个剂量体内对脾脏T、B淋巴细胞的增殖活性、血清总抗体和针对人A375黑素瘤细胞抗原特异性抗体含量、B细胞表面抗原CD19的表达以及对脾脏T淋巴细胞分泌IL-2活性都具有明显抑制作用.结论驱虫斑鸠菊对机体体液免疫和细胞免疫功能都具有明显抑制作用.     

九代清源口服液增强反复呼吸道感染患儿免疫功能的临床实验研究

目的：探讨九代清源口服液在增强反复呼吸道感染患儿免疫功能中的作用。方法：将１００例ＲＲＩ患儿随机分为２组,即常规治疗组和九代清源口服液辅助治疗组（简称九代组）,分别于治疗前、治疗后抽取静脉血检测Ｔ淋巴细胞亚群（ＳＰ法）、ＮＫ细胞活性（ＭＴＴ法）、ｓＩＬ－２Ｒ（ＥＬＩＳＡ法）、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ（透比浊法）。结果：ＲＢＩ患儿治疗前ＣＤ３＾＋、ＣＤ４＾＋、ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋、ＮＫ细胞活性及ＩｇＧ、ＩｇＡ显著降低,ＣＤ８＾＋、ＩｇＭ和ｓＩＬ－６Ｒ显著升高常规治疗指标明显好转,与正常对照组比较,仍有显著差异（Ｐ〈０．０５）;九代组治疗后有所恢复,但与正常对照组比较均无显著性差异（Ｐ〉０．０５）。结论：九代清源口服液具有较强的免疫调节作用,可明显增强ＲＲＩ患儿的细胞和体液免疫功能。     

2型糖尿病男性患者骨代谢指标与骨密度的相关性研究

目的：探讨2型糖尿病男性患者骨密度与骨代谢生化指标间的关系。方法：选取我科2014年1月至2015年12月入院的2型糖尿病男性患者102例,采用双能X线骨密度仪,测定腰椎(L2~L4)、股骨上端[包括股骨颈(Neck)、华氏三角(Ward)及股骨粗隆(Troch)]和全身的骨密度(bone mineral density, BMD)值;根据T值将这些患者分为骨量正常组(44例)、骨量减少组(36例)和骨质疏松组(29例),采用酶联免疫法测定各组碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、N-端中段骨钙素(N-MID-OT)、总Ⅰ型胶原氨基端延长肽(type 1 amino-terminal propeptide,tP1NP)和β胶原特殊序列(β-CTX)的浓度,比较三组骨代谢指标的变化,并对BMD与各项骨代谢指标进行相关性分析。结果：随着骨密度的降低,骨代谢指标的水平逐渐增高,其中,N-MID-OT和β-CTX的水平在三组间的差异皆有统计学意义(P<0.05);tP1NP在骨质疏松组和其余两组有统计学差异(P<0.05);ALP在三组间无统计学差异(P>0.05)。骨量减少组中,N-MID-OT与Neck、Troch及全身的BMD呈负相关(r=?0.754,?0.663,?0.743;P<0.05),β-CTX与Ward的BMD呈负相关(r=?0.273;P<0.05);骨质疏松组中, N-MID-OT与所有部位的BMD呈负相关(r=?0.736,?0.562,?0.715,?0.521,?0.436;P<0.05),β-CTX与Neck、Ward及全身的BMD呈负相关(r=?0.532,?0.614,?0.764;P<0.05)。结论：2型糖尿病男性患者骨密度与骨代谢指标呈负相关,两者联合评估有助于早期预防骨质疏松。     

非小细胞肺癌患者放疗前后机体免疫功能变化的研究

目的：报道３０例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）患者放疗前后免疫功能的变化。方法：采用双抗体夹心法和比浊法检测血清中ｓＩＬ－２Ｒ、免疫球蛋白（ＩｇＧ,ＩｇＡ,ＩｇＭ）含量,用单克隆抗体和流式细胞仪技术检测外周血中Ｔ细胞亚群,Ｂ细胞,ＮＫ细胞百分数;与健康人做对照。结果：放疗前ｓＩＬ－２Ｒ显著增高（Ｐ〈０．０１）,ＩｇＧ及ＩｇＭ６亦增高（Ｐ〈０．０５）,Ｂ细胞百分数低于（Ｐ〈０．０１）,ＣＤ３＾＋细胞降低