利用聚合酶链式反应方法检测转基因大豆和玉米中的基因修饰物质

采用聚合酶链式反应 (PolymerasechainreactionPCR)来检测转基因大豆 (RR大豆 )和玉米 (Bt 176玉米 )中基因修饰物质 (GeneticallyModifiedOrganismsGMOs)的方法。利用已知GMOs准确含量的转基因大豆和玉米对PCR检测方法进行了探讨 ,检测限可以达到 0 1% ,即 ,可以把食品中含量仅为 0 1%的GMOs检测出来 ,检测为定性检测。检测的步骤包括 :(1)大豆和玉米基因组DNA的提取 ;(2 )对转入的CaMV35s启动子和NOS终止子利用PCR方法进行扩增 ;(3)对食品的house -keeping基因进行PCR扩增 ,以确定我们所检测的食品确实来自于大豆和玉米 ;(4)利用琼脂糖凝胶电泳及XmnI限制性内切酶方法对PCR产物进行描述与确认。RR大豆含有CaMV35s启动子和NOS终止子 ,而Bt 176玉米只含有CaMV35s启动子。由于玉米的淀粉含量较高 ,因此其基因组DNA的提取效果不如大豆 ,最终的电泳图谱也不如大豆的清晰     

逆转录聚合酶链式反应检测某些动物性产品中冠状病毒初探

对于引起人类严重急性呼吸综合征的冠状病毒 (SARS associatedcoronavirus) [1] 检验方法有免疫荧光法、ELISA法和分子生物学方法 ,这些方法全部针对临床标本。目前食品中检测的病毒种类仅限于甲肝病毒、轮状病毒、诺瓦克病毒、柯萨奇病毒等肠道病毒。由于环境样品不同于医学标本 ,样品中病毒数量极少 ,传统方法需要从大量样本中富集、分离病毒 ,再经过如组织培养等方法检测 ,这些方法因细胞病变不明显、重复性差、时间太长等均不适用。对环境样品中的RNA病毒的检测一般情况下先对样本中的病毒进行富集分离 ,然后用RT PCR方法检测[2 …     

聚合酶链式反应诊断2型猪链球菌

目的从分子水平鉴定四川省2005年不明原因疾病病原菌的属、种、型及毒力基因,为诊断和治疗提供科学依据。方法聚合酶链式反应(PCR)检测链球菌属特异性基因(TUF)、猪链球菌种特异性基因(Species)、2型和毒力特异性基因(CPS2J)以及毒力基因溶菌酶释放相关蛋白基因(MRP)和溶血素基因(SLY);同时与VITEK2等全自动生化鉴定仪鉴定结果进行比对。结果所试103份标本中,98份均具有所检测的5个基因,确定为猪链球菌2型;另5份标本排除猪链球菌可能。73株纯培养细菌用VITEK2全自动生化鉴定仪鉴定有68株菌被鉴定为猪链球菌2型,3株菌被鉴定为猪链球菌1型,2株菌不能鉴定。结论2005年四川省不明原因疾病疫情为猪链球菌2型感染人造成。PCR检测5个特异基因鉴定猪链球菌2型,其结果优于VITEK2全自动生化鉴定仪。     

从转基因大豆说起专家解答：转基因食品安全吗

转基因技术利用现代生物技术，将目的基因进行人工分离、修饰和转移而培育出新品种，从而赋予原来品种以新的优良性状。如转基因抗除草剂（草甘膦）大豆，就增加了耐受除草剂的特性，节约了防除杂草的人工和成本。转基因食品从一开始进入市场就备受争议，也受到了部分言论的批判，以及传统消费者的抵触。虽然如此，转基因技术仍在有条不紊的进行中，这是因为这项技术对现代以及未来农业的发展有不可忽视的作用：1提高农作物产量。     

转基因食品检测技术与安全性评价

1　转基因食品及其安全性研究现状1.1　转基因食品定义　按卫生部《转基因食品卫生管理办法》给出的定义[1] :转基因食品是指利用基因工程技术改变基因组构成的动物、植物和微生物生产的食品和食品添加剂。从目前来看 ,转基因微生物主要用来生产食品用酶 ,而直接用作食品的转基因微生物如发酵食品则市面上还未见 ;转基因动物因研究费用较高 ,未直接用于食品 ,主要用于医药方面的研究 ,目前市面上主要的转基因食品是转基因植物及其加工品。1.2　转基因植物食品的研究现状　截至 2 0 0 0年底 ,全球转基因作物品种达到 10 0多种 ,由转基因作物…     

基于聚合酶链式反应的肠道病原菌检测技术

正肠道感染性疾病重要病原菌,如志贺菌和沙门菌等感染发病率高、传播速度快、耐药发生率也高~([1-2])。据文献报道,肝硬化~([3])、HIV感染~([4])、炎症性肠道病~([5])以及血糖调节~([6])等均与肠道菌群失调有关。此外,引起胃肠道感染的食源性致病菌是食品安全的严重隐患~([7]),可引起胃肠炎、败血症等疾病。因此,快速检测威胁人类健康的病原菌刻不容     

基于数字聚合酶链式反应的生物芯片分析仪的审评要点

数字聚合酶链式反应(dPCR)已被广泛用于分子诊断的各个方面.基于dPCR技术的生物芯片分析仪通过采集微滴荧光信号,对载有处理后核酸样本的生物芯片进行数据处理和分析,从而实现对核酸的精准绝对定量.现针对医疗器械注册申报材料提出技术审评关注点,以评价生物芯片分析仪安全有效性,以期对该类产品注册申报和技术审评提供参考.     

乳鹿干燥工艺及聚合酶链式反应研究

目的 建立乳鹿药材的工艺及质量标准研究.方法 选取2018年7月至2019年3月之间收集到的10批乳鹿药材进行研究.所有样品采用以药材性状特征为指标,通过鼓风干燥法优化乳鹿的最佳干燥工艺.根据不同基源乳鹿的差异基因,设计特异性引物,以乳鹿基因组DNA为模板,通过聚合酶链式反应对差异基因进行扩增,琼脂糖凝胶电泳检测目的 ...     

大豆和玉米加工产品中外源转基因成分检测技术的建立

目的：建立检测大豆和玉米加工产品中转基因成分的PCR技术.方法：采用PCR技术检测CaMV 35S启动子,并进一步通过PCR检测RoundUp Ready Soybean（RRS）和Bt176 Maximaizer的特异性DNA片段,判断大豆和玉米加工产品中是否含相应转基因成分.结果：在1份豆粕和豆腐样品中检测到了RoundUp Ready大豆特异性的498bp片段,而在玉米粒样品中检测到了Bt176特异性转基因成分.PCR检测的灵敏度达到0.1%,稳定性良好.结论：PCR技术检测外源基因是灵敏和准确的,可以广泛地应用到转基因作物及其加工产品的转基因成分检测中.     

聚合酶链式反应对食物中肉毒的检测

目的用PCR方法鉴定肉毒食物中毒的病原菌。方法用1对人工合成的寡核苷酸引物护增A、B、E、F和G型肉毒神经毒素基因的一段264bp的DNA片段，并对2个食物中毒样品的增菌产毒培养液及分离的菌株进行检测。结果从食物中毒样品中检测出肉毒梭菌。结论PCR方法能快速、准确的鉴定肉毒食物中毒样品中的病原菌。     

非转基因和转基因大豆中低聚糖含量的分析

目的本实验对大豆中低聚糖的分析方法进行研究,比较非转基因和转基因大豆中低聚糖的含量。方法样品用乙腈水溶液溶解,经超声提取、离心过膜后,超高效液相-示差折光分析仪(UPLC-RI)测定,外标法定量。结果本实验应用40%乙腈水直接对大豆样品进行溶解超声提取,方法的回收率为91%～97%,相对标准偏差小于5%。非转基因和转基因大豆样品的低聚糖分析,转基因大豆中的含量与非转基因大豆不存在显著差异,可以满足人体健康需要。结论该方法准确快速、重现性好,适用于大豆中低聚糖含量分析的检测要求。[营养学报,2019,41(3):304-307]     

逆转录-聚合酶链式反应用于麻疹实验室诊断初探

为了探索对麻疹病例更好的实验室确诊方法,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),对76例已确诊或疑似麻疹病例的咽拭子检测了麻疹病毒核酸,结果61例麻疹病例咽拭子中有32例检出阳性,检出率52.5%;8例风疹病例的咽拭子无阳性检出;麻疹、风疹IgM抗体均阴性的7例疑似病例咽拭子中,有1例检出阳性,并进一步分离到麻疹病毒.在麻疹病例中,RT-PCR阳性检出率随病例出疹天数的延长逐渐降低.检测结果提示RT-PCR方法特异,可提早发现并诊断麻疹,进而可以作为网络实验室诊断麻疹的补充手段.     

非转基因大豆将迎来机遇

今年2月，国务院法制办在其官网公布了《粮食法（征求意见稿）》。意见稿规定，转基因粮食种子的科研、试验、生产、销售、进出口应当符合国家有关规定，任何单位和个人不得擅自在主要粮食品种上应用转基因技术。意见稿的出台，一方面意味着转基因食品或将受到国家政策的遏制，另一方面使非转基因粮食，特别是非转基因大豆产业再次受到了社会的关注。     

聚合酶链反应鉴定伤寒沙门氏菌

聚合酶链反应鉴定伤寒沙门氏菌北京市卫生防疫站（１０００１３）王劲，张凤琴，任保国我们引入先进的分子生物学技术，以自行设计的寡核苷酸序列作引物，通过聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对伤寒菌进行鉴定，其结果特异、快速、简便。现报告如下。材料和方法：（１）菌株来...     

多重聚合酶链式反应在脓毒血症病原体检测中的应用

目的探讨多重聚合酶链式反应(PCR)在脓毒血症病原体检测中的灵敏度、特异性及检测时间,为多重PCR在脓毒血症病原体检测中的应用提供理论依据。方法采用多重PCR和血培养检测医院40例脓毒血症患者血液中的病原体,并比较两种检测方法的灵敏度、特异性、检测速度、检测菌种的差异,并以同期40名健康体检者血标本作为对照;采用SPSS 15.0软件进行数据处理,检测阳性结果以率的形式表示,并进行χ2检验。结果对照组中两种方法的阳性率差异无统计学意义,脓毒血症组多重PCR检测的阳性率为55.0%,血培养为82.5%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05),且血培养检测出18例脓血症患者中共有11例PCR检测为阳性,占61.1%;多重PCR特异性为80.7%,灵敏度为95.7%;脓毒血症组多重PCR的平均检测时间为(6±0.56)h,血培养法为(30.78±1.45)h,差异有统计学意义(P<0.05);从22份阳性血培养中共分离出4种病原菌,分别为金黄色葡萄球菌10株、铜绿假单胞菌7株、鲍氏不动杆菌3株、表皮葡萄球菌2株,多重PCR均能检测上述病原菌的DNA。结论在脓毒血症病原学的检测中,多重PCR较血培养具有更高的敏感性和特异性,检测时间也较血培养明显缩短,有利于脓毒血症病原体的快速检测,指导临床用药。     

聚合酶链式反应与细胞培养在女性生殖道沙眼衣原体感染诊断中的比较分析

目的:比较荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)与细胞培养对女性生殖道沙眼衣原体感染的检测效果。方法:对门诊300例无生殖道感染症状女性患者的宫颈分泌物分别采用FQ-PCR与细胞培养法进行沙眼衣原体的检测。结果:两种方法均为阳性32例,占10.67%。两种方法均为阴性252例,占84.00%。FQ-PCR阳性而细胞培养阴性13例,占4.33%。细胞培养阳性而FQ-PCR阴性3例,占1.00%。细胞培养的敏感性为72.92%,FQ-PCR的敏感性为93.75%;两种方法的阳性符合率为66.67%,阴性符合率为94.03%。两种检测方法的结果差异有统计学意义(P<0.05)。结论:FQ-PCR和细胞培养两种方法各有优劣,均可适用于沙眼衣原体感染的诊断,临床工作者可根据自己的实际情况进行选择。     

荧光定量聚合酶链式反应种植前胚胎β-地中海贫血基因诊断

目的 用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)方法进行种植前β-地中海贫血一种中国人常见突变类型CD41／42(-TCTT)的基因诊断。方法 来源于β-地中海贫血病人或携带者的289个淋巴细胞和人体外受精-胚胎移植志愿者剩余的胚胎分离137个单细胞用荧光定量PCR方法进行分析。结果 用单个淋巴细胞诊断p地中海贫血扩增效率达96％，准确率达99％～100％，等位基因丢失(ADO)率仅0～5％。单个胚胎细胞扩增效率86％。结论 荧光定量PCR技术是一种敏感、快速、可靠和准确的技术。适合包括β-地中海贫血在内的单基因疾病的种植前诊断。     

对转基因食品安全性的争议

随着生物工程技术的突飞猛进 ,象征第二次“绿色革命”的转基因食品 ,正在悄悄走来 ,有的可能已经静躺在我们面前的货架上 ,等待您的挑选……。是吃耶 ,是不能吃 ?一时成了人们的热门话题 ,也引起了近一年多来 ,全球生物学界的热烈争论。为此 ,由我刊发起 ,上海市预防医学会会同上海市疾病预防控制中心联合召开了“转基因食品学术研讨会” ,现将部分专家的发言发表如下 ,以供读者参考 ,并欢迎读者把希望和建议书面告诉我们。     

转基因食品安全性检验的核酸检测技术研究

以国际市场上转基因食品的主流产品转基因大豆及玉米和我国生产的转基因辣椒为材料 ,以PCR方法为基础 ,研究适用于转基因食品安全性检验的核酸检测技术。针对抗除草剂 (孟山都公司 )GM 大豆 ,转Bt 176玉米 (Novartis Ciba Geigy公司 )及转抗菌肽辣椒 (华农 )产品的插入基因及调控序列设计不同引物进行PCR检测。建立了转基因大豆、玉米、辣椒的鉴别和相关标记基因、目的基因检测的技术 ,该方法简便快速 ,检测结果与标准及申报材料相符。     

转基因大豆食用油安不安全？

如果你去商场买食用油，可以发现有80％是用进口的转基因大豆生产的，为什么会有这么多的转基因大豆油呢，其实厂家之所以选择转基因大豆作为原料，是因为进口大豆价格便宜而且出油率高，进口的转基因大豆出油率在20％～21％之间．而国产的大豆出油率只有17％价格却比进口的贵；据估算，平均每桶5升非转基因大豆油要比转基因大豆油的成本贵2～3元钱，