天然水蛭素对实验性肝纤维化大鼠肝脏结缔组织生长因子mRNA表达的影响

目的观察水蛭素对肝纤维化大鼠肝脏组织结缔组织生长因子（Connective tissue growth factor,CTGF）mRNA表达的影响。方法SD大鼠60只随机分为空白对照组、模型组和水蛭素组共3组,每组20只,用40％四氯化碳（carbon tetra-chloride,CCl4）复制大鼠肝纤维化模型,水蛭素干预12周后处死大鼠,采用实时荧光定量PCR法检测大鼠肝组织CTGFmRNA的表达。结果模型组CTGFmRNA2^-ΔΔCt值（3．59±0．52）显著高于正常对照组（1．02±0．23）（P〈0．05）,表明模型组CTGFmRNA表达上调。与模型组比较,水蛭素组CTGFmRNA2^-ΔΔCt值（1．83±0．34）显著降低（P〈0．05）,表明CTGFmRNA表达下调。结论水蛭素可能通过下调CTGFmRNA的表达,抑制肝脏细胞外基质异常增生发挥抗肝纤维化作用。     

复方六月青对肝纤维化大鼠肝脏Ⅰ型胶原合成的抑制作用

目的:研究复方六月青(CLYQ)对四氯化碳(CCl4)致肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ型胶原(Col I)合成的抑制作用。方法:SD大鼠sc CCl4建立肝纤维化模型,随机分为5组:模型对照组、秋水仙碱组、CLYQ高剂量组、中剂量组、低剂量组,并设正常SD大鼠为空白对照组。模型组和空白对照组ig生理盐水,其他组ig相应的药物,连续4周。采用实时荧光定量PCR法检测各组肝组织Col I mRNA表达情况,采用免疫组织化学法检测各组肝组织Col I蛋白表达情况。结果:与模型对照组比,CLYQ各剂量组大鼠肝组织Col I mRNA的表达均下调(P0.01),且表现一定的剂量依赖性;CLYQ各剂量组大鼠肝组织Col I蛋白阳性表达面积和强度显著减少和减弱(P0.01或P0.05),且呈明显的剂量依赖性。结论:CLYQ可下调肝纤维化大鼠肝组织Col I mRNA表达及其蛋白质合成以抑制细胞外基质的沉积,从而发挥其抗肝纤维化的作用。     

水蛭桃仁煎剂抗实验性大鼠肝纤维化机理研究

目的:观察水蛭桃仁煎剂对肝纤维化大鼠肝星状细胞(HSC)的活化、转化生长因子β1(TGF-β1)及金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)mRNA含量的影响,并探讨其对肝纤维化是否具有防治作用及其作用机制。方法:以二甲基亚硝胺(DMN)制备大鼠肝纤维化模型,同时给予水蛭桃仁煎剂灌胃治疗,另设正常对照组和模型组,免疫组化检测肝组织的α-平滑肌动蛋白(α-SMA)和TGF-β1,RT-PCR检测肝内TIMP-1的mRNA含量。结果:经图像分析,药物防治组α-SMA和TGF-β1较模型组显著减少(P<0.01);TIMP-1mRNA表达降低,与模型组比较差异显著(P<0.01)。结论:水蛭桃仁煎剂抗肝纤维化的机制可能为抑制HSC的激活、减少TGF-β1的生成和降低TIMP-1mRNA的表达。     

重组水蛭素对UUO大鼠肾间质纤维化影响及机制研究

目的：探讨重组水蛭素（recombinant hirudin,rH）对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠对肾间质纤维化（RIF）的作用及其可能机制研究.方法：将48只SD大鼠随机分为假手术组（N组）、模型组（M组）、依那普利治疗组（Y组）和重组水蛭素组（R组）,后3组建立UUO大鼠模型.治疗结束后处死大鼠,测大鼠肾功能,行HE、Masson染色观察肾间质病理变化,用免疫组化半定量法测定肾TGF-β1、α-SMA的表达.结果：两治疗组大鼠BUN、SCr低于模型组（P＜0.01）,两治疗组组间差异无统计学意义（P＞0.05）;免疫组化结果表明,两治疗组TGF-β1和α-SMA的表达量均低于模型组（P＜0.01）,两治疗组组间差异无统计学意义（P＞0.05）.结论：重组水蛭素可能通过下调TGF-β1和α-SMA,减少促纤维化生长因子及肌成纤维细胞的增殖、活化、表型转化从而起到防治RIF.     

水蛭素对大鼠纤维化肝组织Smad4 mRNA表达的影响

目的:观察水蛭素对肝纤维化大鼠肝脏组织Smad4mRNA表达的影响。方法:SD大鼠60只随机分为空白对照组、模型组和水蛭素组共3组,每组20只,用40%四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)复制大鼠肝纤维化模型,水蛭素干预12周后处死大鼠,采用实时荧光定量PCR法检测大鼠肝组织Smad4mRNA的表达。结果:模型组Smad4mRNA2-ΔΔCt值(4.63±0.86)显著高于正常对照组(1.00±0.13)(P<0.05),表明模型组Smad4mRNA表达上调。与模型组比较,水蛭素组Smad4mRNA2-ΔΔCt值(2.26±0.49)显著降低(P<0.05),表明Smad4mRNA表达下调。结论:水蛭素可能通过下调Smad4mRNA的表达抑制肝脏细胞外基质异常增生,从而发挥抗肝纤维化作用。     

加味四逆散对肝纤维化大鼠肝组织转化生长因子β1、结缔组织生长因子mRNA影响的研究

目的 观察加味四逆散对肝脏转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF) mRNA的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机制.方法 采用二甲基亚硝胺腹腔注射制备大鼠肝纤维化模型,加味四逆散灌胃给药,采用实时定量PCR技术检测各组大鼠肝组织TGF-β1和CTGF mRNA表达的水平.结果 加味四逆散能明显降低肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1和CTGF mRNA水平,与病理模型组比较有显著性差异(P<0.05).结论 加味四逆散能够降低肝组织TGF-β1和CTGF mRNA表达,从而发挥其抗纤维化的作用.     

水蛭桃仁煎剂对血吸虫性肝纤维化小鼠HSC活化影响

目的：观察水蛭桃仁煎剂对肝纤维化小鼠肝星状细胞（HSC）的活化影响,并探讨其对肝纤维化是否具有治疗作用及其作用机制。方法：制备小鼠血吸虫肝纤维化模型,给予水蛭桃仁煎剂灌胃治疗,另设模型对照组和干扰素治疗组。免疫组化检测肝组织的α-平滑肌动蛋白（α-SMA）。结果：经图像分析,中药治疗组和干扰素治疗组α-SMA较模型对照组均显著减少（P〈0.01）。结论：抑制HSC的激活可能是水蛭桃仁煎剂抗肝纤维化的机制之一。     

复方六月青对实验性肝纤维化大鼠肝脏超微结构的影响

目的研究复方六月青(CLYQ)对实验性肝纤维化大鼠肝脏超微结构的影响。方法 SD大鼠皮下注射(s.c.)CC l4建立实验性肝纤维化大鼠模型,随机分为5组:模型对照组,阳性对照组,CLYQ高剂量组、中剂量组、低剂量组,并设正常SD大鼠为空白对照组。模型组和空白对照组灌胃(i.g.)生理盐水,其他组i.g.相应的药物,连续4周。于肝左叶同一部位取肝组织约1 cm×1 cm×1 cm大小,固定于10%中性福尔马林溶液,作光镜观察;另一部分约1 cm×1 cm×1 cm大小,固定于2.5%戊二醛作电镜观察。结果 CLYQ高、中剂量组大鼠肝脏肝小叶结构完整,汇管区有少量纤维组织增生。CLYQ低剂量组肝细胞排列紊乱,肝小叶结构有破坏,尚完整,结节周围纤维组织增生,少量炎细胞浸润。结论 CLYQ能有效地减轻肝组织病理损害,抑制肝纤维化形成,从而发挥其抗肝纤维化的作用。     

排钱草对实验性肝纤维化大鼠肝脏胶原蛋白含量的影响

目的 :观察排钱草对四氯化碳 (CCL4 )致肝纤维化大鼠肝脏胶原蛋白含量的影响。方法 :通过灌胃(ig)给药相当于原生药 5g/kg体重和 3g/kg体重 (下同 )的排钱草水提物和醇提物。结果 :连续给药 8周后各治疗组肝脏胶原蛋白含量明显低于模型组 (分别P <0 .0 5、P <0 .0 1或P <0 .0 0 1) ,肝脏病理组织检查亦显示各治疗组肝细胞变性坏死及肝纤维化程度较模型组轻 ,而各治疗组之间以及与阳性组、空白组之间的差异并不明显。结论 :排钱草具有抗肝纤维化作用 ,其机理可能与其能保护肝细胞免受损伤破坏 ,从而间接减少肝内胶原纤维形成有关。     

清热祛湿法对肝纤维化模型大鼠CTGF影响的实验研究

目的：探讨结缔组织生长因子(connectire tissue growth factor，CTGF)在肝纤维化大鼠的表达及清热祛湿法代表方清香散对其的影响作用。方法：采用复合因素建立肝纤维化大鼠模型，用免疫组化方法观察清香散对肝纤维化大鼠肝组织CTGF表达的影响．结果：CTGF在模型大鼠肝组织中表达明显增加，清香散能明显抑制大鼠肝纤维化组织CTGF的表达。结论：清香散可有效抑制肝纤维化组织CTGF的表达，这可能是该药抗肝纤维化作用的分子机制之一。     

怡心饮对糖尿病心脏病大鼠心肌CTGF-mRNA和MCP-lmRNA表达的影响

目的观察怡心饮对糖尿病心脏病大鼠心脏单核趋化因子1（MCP-1）和结缔组织生长因子（CTGT）mRNA表达的影响。方法运用高糖高脂饲料加链脲佐茵素腹腔注射建立大鼠2型糖尿病心肌病模型,分为怡心饮高剂量组、怡心饮低剂量组、生脉饮对照组、正常组、模型组。灌胃治疗8周后,观察糖尿病心肌病大鼠的心脏单核趋化因子1和结缔组织生长因子mRNA的表达,以及血清结缔组织生长因子的变化,分析其减轻大鼠心肌病变的机制。结果怡心饮能明显降低大鼠心肌单核趋化因子1和结缔组织生长因子ITIRNA表达,降低大鼠血清结缔组织生长因子含量。结论怡心饮对糖尿病大鼠心肌病变有一定的改善作用,其作用机制可能与降低单核趋化因子1和结缔组织生长因子mRNA的表达有关。     

膈下逐瘀汤对大鼠纤维化肝组织TIMP1和MMP-2表达的影响

目的:探讨Sprague-Dawley(SD)大鼠皮下注射四氯化碳诱发中毒性肝纤维化病理模型后肝组织TIMP1 mRNA和MMP-2表达的变化及膈下逐瘀汤对其干预作用.方法:Sprague-Dawley(SD)大鼠60只随机分为空白对照组(n=20)、模型对照组(n=20)和膈下逐瘀汤组(n=20)共3组.结论:大鼠皮下注射四氯化碳可诱导肝脏组织TIMP1 mRNA和MMP-2表达水平明显增高,膈下逐瘀汤可以抑制肝组织TIMP1 mRNA和MMP-2的表达,从而发挥抗肝纤维化的作用.     

肝乐颗粒对肝纤维化大鼠纤维化指标的影响

目的观察肝乐颗粒对肝纤维化大鼠纤维化指标的影响。方法将大鼠随机分为6组,除正常组外,其余各组采用CCl4诱导肝纤维化模型。于造模第7周起,给药组分别灌胃给予相应的受试药物,正常组和模型组灌胃生理盐水,疗程6周。实验结束后,放射免疫法测定血清透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)、四型胶原(CⅣ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量;RT-PCR技术测定肝组织中Ⅰ型前胶原mRNA的表达。结果肝乐颗粒各剂量组能明显降低肝纤维化大鼠血清HA、LN、PⅢNP、CⅣ和TGF-β1的含量,抑制肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ型前胶原mRNA的表达。结论肝乐颗粒能有效抑制CCl4诱导的肝纤维化大鼠纤维化指标的表达。     

肝心宁胶囊对大鼠肝纤维化超微结构的影响

目的探讨中药复方肝心宁胶囊抗实验性肝纤维化(HF)的疗效及作用机理。方法以CCl4复合因素制作大鼠HF模型,并给予肝心宁灌胃治疗,同时设秋水仙碱、大黄蜇虫丸作为对照。观察肝心宁对大鼠光镜、电镜观察下超微结构等病理形态影响。结果本药对肝损伤后的超微结构有明显的保护作用。结论肝心宁有良好的抗HF作用,其作用机制可能与减轻氧自由基对细胞器损伤,保护肝细胞超微结构有关。     

加味茵陈蒿汤对肝损伤大鼠TLR4 mRNA及其蛋白表达的影响

目的:探讨加味茵陈蒿汤对湿热内蕴证大鼠急性肝损伤的治疗作用机制.方法:SPF级SD大鼠,雌性,72只,随机分为空白组、模型组、西药组(复方甘草酸苷)组、中药加味茵陈蒿汤低、中、高剂量组.所有大鼠均适应性喂养在室温15～20℃,相对湿度60％ ～ 80％的实验室7d.7d后给模型组、西药组、中药组予1次性ip D-氨基半乳糖600 mg· kg-1以造成急性肝损伤模型,造模后除模型组外余各组ig给予药物,每日2次,复方甘草酸苷组剂量为15.75 mg· kg-1,加味茵陈蒿汤低、中、高剂量组剂量分别为14.7,29.4,58.8 g·kg-1,空白组予以0.9％的生理盐水ig,灌药体积每次10 mL·kg-1,2次/d,共ig治疗2d.造模48 h后断颈处死动物剖取肝脏,RT-PCR和Western blot法检测肝脏细胞Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR-4) mRNA及其蛋白表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠肝脏组织TLR-4mRNA和TLR-4蛋白均有极显著增加(P＜0.01);与模型组比较,加味茵陈蒿汤可显著下调TLR-4 mRNA(P ＜0.01)及TLR-4蛋白(P＜0.01)的表达.结论:加味茵陈蒿汤可通过下调肝脏细胞TLR-4 mRNA及TLR-4蛋白表达有效干预肝脏细胞纤维化病变.     

纤克颗粒对肺纤维化大鼠CTGF，ILK表达的影响

目的： 观察中药纤克颗粒对大鼠肺纤维化模型的病理形态学改变及肺组织中结缔组织生长因子（connective tissue growth factor, CTGF）和整合素连接激酶（intergrin-linked kinase, ILK）表达的影响,探讨纤克颗粒干预肺纤维化的机制。 方法： 将清洁级大鼠分为正常对照组,模型组,强的松组（5 mg·kg^-1）,纤克高、中、低剂量组（10,5,2.5 g·kg^-1）,分别于造模后连续给药的第7,14,28天,取肺组织行HE染色,Masson染色,确定肺泡炎和肺纤维化程度;采用免疫组化技术测定肺组织中CTGF,ILK的表达。 结果： 与正常对照组比较,各时间点模型组肺组织CTGF,ILK表达明显增加,显著高于空白组,肺间质及肺泡壁周围,可见大量棕黄色颗粒,病灶内血管、支气管周围渗出的部分炎症细胞、间质细胞病灶内、肺泡间隔中的间质细胞均有深黄色颗粒,差异有显著的统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,纤克高、中、低剂量组、强的松组7,14,28 d组在肺间质及肺泡壁周围均有CTGF,ILK阳性表达降低,有显著的统计学意义（P<0.05）;7 d时纤克高、中剂量组与强的松组相比,无统计学意义;纤克低剂量组与强的松组相比,有显著的统计学意义（P<0.05）;14,28 d时纤克高剂量组与强的松组相比,无统计学意义;纤克中、低剂量组与强的松组相比,有显著的统计学意义（P<0.05）。 结论： 纤克颗粒通过抑制肺纤维化模型大鼠肺组织中CTGF,ILK的表达,改善细胞外基质的异常沉积,从而发挥对肺纤维化的治疗作用,这可能是纤克颗粒防治肺纤维化的机制之一。     

糖肝康对糖尿病脂肪肝大鼠肝组织cAMP反应元件结合蛋白表达的影响

目的观察糖肝康对糖尿病脂肪肝大鼠肝组织cAMP反应元件结合蛋白(CREB)表达的影响,探讨其作用机制。方法采用链脲佐菌素联合高脂饮食复制糖尿病脂肪肝大鼠模型。造模成功后随机分为模型组、护肝宁组和糖肝康小、中、大剂量组,每组10只,另取10只正常大鼠作为空白组。各给药组给予相应药物干预,12周后采用Western blot检测大鼠肝组织CREB的表达。结果与空白组比较,模型组肝组织CREB表达明显增高(P0.01);与模型组比较,各给药组肝组织CREB表达明显减少(P0.01),糖肝康中、大剂量组优于护肝宁组(P0.01)。结论糖肝康可能通过降低CREB表达水平改善肝脏代谢,进而保护肝脏。     

褐藻糖胶(FPS)对高脂血症大鼠肝脏LDL-R mRNA表达的影响

目的：探讨褐藻糖胶（FPS）对高脂血症大鼠肝低密度脂蛋白受体（LDL—R）mRNA表达的影响。方法：取健康雄性SD大鼠60只，随机分为六组，正常组、模型组、绞股蓝组、FPS低剂组、FPS中剂组、FPS高剂组。除正常组外，其余各组以高脂乳剂灌胃形成大鼠高脂血症模型。观察各给药组大鼠肝脏LDL—RmRNA的表达。结果：FPS中、低剂量组LDL—RmRNA相对含量显著高于模型组；FPS中剂组与绞骨蓝组相比，含量无显著性差异。结论：FPS可显著增强高脂血症大鼠肝脏LDL—RmRNA的表达，促进低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）的清除，达到有效降低血清胆固醇的作用。     

鳖甲煎丸对肺纤维化模型大鼠外周血CTGF表达的影响

目的：探讨鳖甲煎丸对肺纤维化模型大鼠外周血结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响。方法：SD大鼠50只随机分为生理盐水对照组、模型对照组、醋酸泼尼松组、鳖甲煎丸中剂量组、鳖甲煎丸高剂量组,采用博莱霉素气管内注入制备肺纤维化模型,造模后各组分别用生理盐水、西药、中药灌胃,第3、14、28天乙醚麻醉后毛细玻管眼眶静脉丛采血,ELISA法检测CTGF表达明显减少,与模型对照组比较有显著性差异（P〈0.05）。结果：模型对照组外周血中CTGF表达明显增加,第14天鳖甲煎丸中、高剂量组外周血CTGF的表达。结论：鳖甲煎丸可抑制肺纤维化模型大鼠外周血CTGF的表达,可能是抗肺纤维化作用的机制之一。     

雷公藤多苷对糖尿病大鼠结缔组织生长因子异常表达及肾功能的影响

目的:研究雷公藤多苷对实验性糖尿病大鼠结缔组织生长因子(CTGF)异常表达及肾功能指标的影响,探讨其保护肾功能的机制。方法:雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和雷公藤多苷治疗组(1.8 g.kg-1.d-1灌胃,1次/d,连续8周),链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,给药第4,8周末分别测定大鼠体重、血糖、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)及24 h尿蛋白定量;HE染色法观察大鼠肾脏病理学变化;免疫组化染色测定肾组织中CTGF蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组血糖、BUN,Cr,24 h尿蛋白定量在第4,8周末显著增加(P<0.01),肾脏CTGF蛋白表达增加(P<0.01),雷公藤多苷干预后可显著抑制模型组的病理改变(P<0.05或P<0.01)。结论:CTGF表达与糖尿病肾病的进展有关,雷公藤多苷可能通过下调CTGF的表达,减少糖尿病大鼠尿蛋白排泄量,改善肾脏功能,延缓糖尿病肾病肾脏的损害。