杜仲组织培养中培养基与含胶量关系的研究

以杜仲幼苗的茎、叶为外植体,在附加植物激素的ＭＳ、Ｂ５和Ｈ培养基上,诱导出了大量的愈伤组织（平均诱导率９４．２％）。在继代培养中建立了３个愈伤组织无性系。绝大多数愈伤组织系以橡胶烃表示的杜仲胶含量都超过了对照（幼苗茎、叶）的５０％。Ｂ５培养基适宜于生产杜仲胶,附加激素Ｂ有利于提高含胶量。愈伤组织系的平均含胶量５．６２％,为对照的５９．４％。     

杜仲叶片及愈伤组织无性系中杜仲胶含量测定

用化学方法间接测定杜仲叶片及杜愈伤组织无性系中杜仲胶含量，重现性好。     

杜仲愈伤组织诱导与继代培养研究

[目的]对杜仲进行愈伤组织诱导及继代培养,建立愈伤组织的培养系统。[方法]以杜仲子叶、幼叶、下胚轴为外植体,接种于不同培养基中诱导和继代。[结果]不同外植体愈伤组织的诱导率高低顺序为：下胚轴〉子叶〉幼叶。子叶和幼叶在MS＋NAA 1.00 mg/L、MS＋2,4-D 1.00 mg/L培养基中诱导出的愈伤组织在MS＋6-BA 1.00 mg/L＋NAA 2.00 mg/L、MS＋2,4-D 1.00 mg/L培养基中继代培养为佳;胚轴在MS＋NAA 3.00 mg/L、MS＋6-BA 1.00 mg/L＋NAA 1.00 mg/L和MS＋2,4-D 1.00 mg/L培养基中诱导出的愈伤组织在MS＋6-BA1.00 mg/L＋NAA 2.00 mg/L、MS＋6-BA 1.00 mg/L＋NAA 1.00 mg/L和MS＋2,4-D 1.00 mg/L培养基中继代培养为佳。[结论]杜仲的子叶、幼叶和胚轴可采用多条途径实现愈伤组织的诱导和继代增殖培养,为进一步筛选高产细胞系打下基础。     

杜仲组织培养中杜仲胶的提取与检测研究

用苯浸提－甲醇沉淀法,从仲愈伤组织干粉中提取杜仲胶。仲胶的平均得率为２．４５％。比较了不同浸提时间和不同浸提温度对胶产量的影响。２４－２８ｈ是最佳 浸提高时间,２８－３５℃最于胶的提取。经红外光谱和紫外光谱检测,证明了愈伤组织中的杜仲胶与原植株中的相同。     

不同因子对杜仲愈伤组织继代培养的研究

实验进行NAA,NAA与BA及KT的组合,光照条件,培养基pH和糖种类对杜仲愈伤组织继代培养的影响.结果表明,单独使用NAA时,以0.5 mg·L-1愈伤组织继代生长率最高.NAA与细胞分裂素配合使用时,以0.5 mg·L-1NAA+0.5 mg·L-1BA最好,其愈伤组织生长量明显大于单独使用NAA,KT的加入不利于愈伤组织的生长.光照条件以12 h光照12 h暗培养最好,pH以6.3最为适宜,糖以分析纯的蔗糖比葡萄糖和市售普通白糖生长量大.     

杜仲组织培养过程中部分生理特征的变化研究

杜仲(Eucommia Ulmoidues Olive)愈伤组织继代培养于MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+KT 1.0 mg/L培养基上,在愈伤组织的增殖过程中,发现增殖周期为24 d,生长曲线呈"S"型,可溶性蛋白含量,过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性在增殖周期不同的阶段有较大的差异,光照和黑暗下培养具有较相似的曲线.可溶性蛋白含量在第18天左右最高,POD、SOD的活性也在第18天左右达到高峰.     

茶树不同外植体组织培养与试管苗保存研究初探

选取福鼎大白茶的种子、子叶、叶片、根、短穗作为外植体,进行愈伤组织诱导培养、愈伤组织继代培养和愈伤组织分化培养,结果表明:(1)叶片是诱导愈伤组织最好的外植体,适合的诱导培养基为N6+2,4 D(2.5mg.L-1);(2)愈伤组织通过多次继代培养扩大繁殖,可获得充足的愈伤组织;(3)愈伤组织在20种分化培养基中分化生长,绝大多数愈伤能长出绿色小突起,有一部分愈伤能分化出根。     

杜仲含胶细胞的整体观察

利用变性处理和整体透明相结合的方法对杜仲各组织中含胶细胞的形态和分布,以及不同生长条件下含胶细胞的分布密度进行了研究。结果表明,杜仲含胶细胞是一种细长的、两端略膨大的、丝状分泌单细胞,在植株体内的分布与维管系统密切相关。在当年生杜仲幼茎中主要分布于初生韧皮部并靠近形成层的部位。光照有利于杜仲胶合成。西北林学院学报21卷第3期申延等杜仲含胶细胞的整体观察     

乙酸对杜仲愈伤组织胶含量的影响

对培养基中影响杜仲愈伤组织胶合成的前体物质乙酸浓度进行了研究。结果表明,以S4代杜仲愈伤组织为原料,随着培养基中乙酸浓度的增加,杜仲愈伤组织中胶含量不断提高,但过高浓度的乙酸会抑制愈伤组织的生长;最适乙酸添加浓度为1.0~1.5 mm o l/L,此时,不会影响愈伤组织的生长,且其平均增长率为1 977.97%,其平均含胶量达原植株的81.20%,从而提高了杜仲愈伤组织的含胶量。     

黄波罗的愈伤组织培养

通过组织培养技术研究了NAA、NAA与6-BA组合、培养基类型、培养基pH值、蔗糖质量浓度、接种量、培养时间及继代次数对黄波罗愈伤组织生长的影响。结果表明:单独使用NAA时,以1.0mg.L-1愈伤组织生长率最高;NAA与6-BA组合,以0.3mg.L-16-BA 1.0mg.L-1NAA最好,其生长量明显大于单独使用NAA的处理。黄波罗愈伤组织最佳的培养体系为:NT 0.3mg.L-16-BA 1.0mg.L-1NAA,培养基pH值为6.3左右,蔗糖质量浓度为20g.L-1,接种量0.4g,继代时间为20d,愈伤组织生长量在培养4代后达到最大,达2.14g左右。     

同源四倍体黄花菜的继代培养

人们以二倍体黄花菜雄穗、未受精子房、心叶、花梗、种子和幼叶为外植体进行组织培养均获得再生植株，并对其愈伤组织和胚状体继代培养进行了相应研究［１～５］。最近周朴华等用秋水仙素诱发黄花菜同源四倍体获得成功。并育成了第一个食用黄花菜同源四倍体新品系［６］。...     

山茱萸疏松愈伤组织诱导及培养条件优化的研究

以山茱萸的叶片,茎段,种子胚等不同部位材料作为外植体进行了山茱萸不同外植体的离体培养研究,比较了不同培养条件对山茱萸疏松愈伤组织诱导和生长效果的影响,并就继代培养过程中,不同培养基组分及培养条件对其生长的影响情况进行了试验与比较分析。结果表明:KT(3 mg/L)+2,4-D(1 mg/L)对嫩叶的诱导效果最好;在光照强度1 500～2 000 lx,3%蔗糖,pH值为5.8左右时,山茱萸细胞生物量的增长率达到最大;合适的继代周期为20～25 d。     

四季桂愈伤组织诱导与继代培养

为提高四季桂的愈伤组织诱导率，以四季桂为材料，对影响四季桂愈伤组织形成和继代培养的几个主要因素进行了研究．结果表明：采用四季桂花梗作外植体，在MS BAl．5mg/L 2，4—D0．1mg/L培养基上，暗处理7d，愈伤组织质量高且诱导串可达85．71％．用2，4—D诱导四季桂愈伤组织效果较NAA显著．继代培养以0．1mg/L NAA为生长素时，褐变致显著低于2，4—D，当2ip质量浓度为1．5mg/L时褐变致最低，为15．0％．     

渗透调节对水稻愈伤组织继代培养效应的研究

<正> 前言在离体继代培养中,多数愈伤组织丧失植株再生能力,从而大大地限制了突变体筛选。近年来继代培养方法的研究颇受重视,并取得一定的进展。赖光隆、Kishor等分别用一定浓度的蔗糖和甘露醇、山梨醇以及NaCl等加入继代培养基中,使水稻愈伤组织继代培养60多代(1500N)仍获高比例的再生植株。陈克贵等在培养到16代以上仍保持很高比例的植株再生能力。本文报道蔗糖和甘露醇、脯氨酸以及烟草愈伤组织分泌物对水稻愈伤组织继代培养的影响。材料与方法一、愈伤组织诱导供试品种:腾板5号,台北309、日本     

孜然芹子叶愈伤组织诱导及继代培养研究

探讨孜然芹种子表面消毒的适宜方法,以孜然芹无菌苗子叶为外植体,研究最适宜愈伤组织诱导及继代培养的激素种类及浓度.结果表明:孜然芹种子经70;酒精10 s+0.1;升汞50 s,20 d萌发率可达97.70;,污染率11.11;;子叶切段在光照时间16 h/d,MS+2,4-D 2 mg/L的愈伤组织诱导启动培养基中,30 d愈伤诱导率达100;, 继代培养在MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.2 mg/L培养基中光照16 h/d培养20 d,愈伤组织增殖率达67;,愈伤组织在同种继代培养基中暗培养20 d,增殖率达80;.     

不同培养基对杜仲愈伤组织诱导和生长的影响

以MS、LS、B5、N6、H、Nitsch、White、WPM为基本培养基,分别添加1.0 mg/L NAA+0.3 mg/L BA,进行不同培养基对杜仲嫩茎及幼叶愈伤组织诱导的研究;以MS、LS、B5、N6、H、Nitsch、White、1/2 MS为基本培养基,分别添加0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L BA,进行不同培养基对杜仲嫩茎及幼叶愈伤组织继代培养的研究.结果表明,MS培养基有利于杜仲幼茎愈伤组织的诱导,而B5培养基不仅对叶的愈伤组织诱导有利,对茎和叶愈伤组织的继代培养也是最理想的.     

杜仲胶累积与异戊二烯代谢途径相关基因表达关系研究

以15年生杜仲雌雄株在2013年3月~11月期间正在生长的叶片、树皮以及5月~10月期间正在发育的果实为材料,测定了叶片、树皮和果实中的橡胶累积量,同时采用荧光定量qPCR技术,分析了相应时期叶片、树皮和果实中异戊二烯代谢途径中的EuDXR1、EuDXR2、EuDXS1、EuDXS2、EuHMGR、EuIPPS、EuFPS、EuGGPPS 8个基因的表达水平,结果表明:随着叶片、树皮和果实的发育,其含胶量逐渐增加,在6~9月份,雌雄株叶片、树皮和雌株果实的胶增加量进入快速积累阶段,雌雄株叶片分别达到2.13%和1.96%,雌雄株树皮分别达到9.83%和9.02%,果实达到12.6%,随后杜仲胶净积累量下降;到11月份橡胶累积量达到最高,此时,雌雄株叶片的胶含量分别为2.64%和2.41%,雌雄株树皮的胶含量分别为12.6%和12.04%,果实的胶含量为14.1%。检测发现,杜仲叶片、树皮和果实在对应的时期,异戊二烯合成途径的8个基因随着杜仲雌雄株叶片、树皮和果实的生长发育,基因表达量也逐渐增加,尤其以EuIPPS、EuFPS、EuGGPPS基因表达量与相应器官中的胶含量增加量呈极显著(P0.01)正相关关系,而且在同一时期,这3个基因的表达量是叶片最低,树皮其次,果实中最高,与其含胶量的顺序相同。说明,杜仲器官中杜仲胶的积累与橡胶合成前体及橡胶合成起始物合成酶基因表达密切相关。     

杜仲不同无性系叶中杜仲胶含量及相对分子质量研究

用有机溶剂法提取杜仲不同无性系叶中的杜仲胶,对其含量进行比较,并用高效液相凝胶渗透色谱对杜仲胶的相对分子质量及相对分子质量分布进行了分析。结果表明,14个杜仲无性系间杜仲胶的含量、相对分子质量及相对分子质量分布均存在极显著差异;无性系G 3叶中的杜仲胶含量最高,G 2中的含量最低,无性系G 3,X 18,L 49和L 1(胶含量均在35.00 g/kg以上)可以作为叶胶产量高的优良无性系;相对分子质量较高(Mw在1.550×105以上)且相对分子质量分布范围较宽(MW D在13.50以上)的无性系G 2,L 23,L 33和G 1叶中的杜仲胶较适合用作高弹性材料,而相对分子质量较低(Mw在1.000×105以下)且相对分子质量分布范围较窄(MW D在10.00以下)的L 45,L 49和L 9叶中的杜仲胶更适合用作热塑性材料。     

杜仲胶生物合成相关蛋白质的研究

杜仲（EucommiaulmoidesOliv．）是我国特有的第三纪了遗树种,不仅是一种名贵的药用植物,而且是温带最有开发前景的胶源植物。长期以来,杜仲胶仅作为生产硬橡胶的原料。近年的研究表明,杜仲胶能象三叶橡胶一样制成弹性橡胶,还能制成具有橡胶和塑料双重特性的高分子新材料,从而极大地提高了杜仲胶的开发价值。杜仲中橡胶颗粒积累在根、茎、叶和果实的韧皮部薄壁细胞中,与银胶菊（PartheniumargentatumGray．）茎中橡胶颗粒的积累相似。国外通过对橡胶颗粒结合蛋白的分离鉴定,已证明与橡胶生物合成相关的一些蛋白存在于胶颗粒中。杜…     

3个香型矮牵牛品种的组织培养再生体系

以3个香型矮牵牛品种的带叶茎尖为外植体,研究了不同BAI、BA及NAA配比对初代培养、继代培养和生根的影响。结果表明:供试的3个基因型诱导成苗和继代培养所需的培养基激素浓度差异较大,BA浓度变化在0.1～1mg.L-1之间;但对于同一基因型而言,高浓度的BA可以直接从茎和叶上诱导出愈伤组织,由愈伤组织形成不定芽苗;中浓度的BA使其形成定芽和不定芽两种苗;低浓度的BA基本为顶芽和侧芽两种定芽成苗。3个品种在1/2MS+0.25mg.L-1NAA+0.25mg.L-1IBA培养基上都能生根,且生根迅速,生根效果较好。