猫杯状病毒及疾病诊疗研究进展

猫杯状病毒是杯状病毒科的成员之一,是猫科动物的一种重要病原,也可以作为研究诺如病毒的替代模型。该病毒呈世界性分布,对猫及其他猫科动物的健康造成了巨大的威胁。对猫杯状病毒的检测主要依靠实验室手段,无特异性的治疗药物,现有疫苗不能对所有毒株产生免疫保护。论文就猫杯状病毒及其疾病的诊疗方法研究现状进行综述,为该病毒及相关疾病的研究提供参考。     

猫杯状病毒分子生物学特征及研究进展

猫杯状病毒（Feline calicivirus,FCV）是在猫科动物中高度流行的重要病原体,能够引起猫科动物急性口腔溃疡、上呼吸道传染病和慢性胃肠炎等疾病。目前研究证明疫苗免疫可有效减少该病的发生。此外,已开展FCV反向遗传操作系统的研究,并成功表达外源基因,为进一步研究特定蛋白的结构和功能、病毒致病机理、构建杯状病毒嵌合载体疫苗打下了基础。本文从FCV的病原及生物学特性、基因组结构及其编码产物、致病机理、流行病学及疫病的防治等方面进行综合阐述。     

猫杯状病毒分子致病机制的研究进展

猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)是引起猫科动物的一种急性、高度接触性传染病的病原,严重危害猫科动物的健康。本文从FCV的主要蛋白及其功能、病毒的复制与细胞的相互作用、病毒受体、病毒致细胞凋亡作用等方面综述了FCV分子致病机制的研究进展,以期为FCV的分子生物学特性、遗传与变异规律、新型疫苗的研发及抗病毒药物的筛选提供参考。     

猫杯状病毒的分子生物学

猫杯状病毒（FCV）是猫的上呼吸道感染、口腔水疱性疾病及慢性胃炎等疾病的重要病原。该病毒具有典型的杯状病毒结构。其基因组为单股正链含polyA的RNA，全长约7．6kb，编码3个开放读码框（ORFs)。其中ORF1约5．3kb，编码1763个氨基酸（aa)的非结构蛋白；ORF2长约2．1kb，编码671aa的结构蛋白，ORF3位于基因组3‘末端，长320bp，编码106aa的蛋白。该病毒结构蛋白分子量为58－76kDa，分为6个区，各区具有特殊功能。非结构蛋白包括3C多肽，3C半胱氨酸蛋白酶和3DRNA依赖的RNA聚合酶样区等结构。FCV的基因工程疫苗研究已有一定的进并取得了相应的应用价值。FCV分子生物学的研究有助于研究该病毒的毒力和致病机理以及新型疫苗的研制。     

猫杯状病毒基因组结构与结构蛋白功能研究进展

猫杯状病毒是一种引起猫的急性口腔溃疡、上呼吸道传染病和慢性胃肠炎等病的重要病原。近年来，随着对其研究的不断深入，在病毒分子生物学方面取得了很大的进展。本文主要从基因组结构、编码的结构蛋白功能、基因疫苗等方面系统阐述了猫杯状病毒的研究进展，同时提出了存在的问题和展望。为进一步研制猫杯状病毒基因工程疫苗及诊断试剂提供理论基础，以期能更有效地防治此病。     

猫杯状病毒单克隆抗体的制备

制备猫杯状病毒(feline calicivirus, FCV)的特异性单克隆抗体,为FCV的免疫学诊断方法提供材料。本研究将经蔗糖梯度离心纯化的FCV灭活后免疫BALB/c小鼠,通过间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,并对其进行一系列鉴定。结果成功获得1株能够稳定分泌抗体的单克隆细胞株3B11。MAb 3B11抗体类型鉴定其重链属于IgG₁、轻链为κ链。MAb 3B11能与FCV-SH192发生特异性反应;小鼠腹水MAb 3B11对5株FCV毒株具有较高的ELISA效价;与5株FCV毒株具有间接免疫荧光(IFA)和蛋白免疫印迹(Western blot, WB)结合特性。本研究制备的MAb 3B11对FCV具有良好的特异性、免疫反应性及广谱识别性,为FCV诊断方法的优化、流行毒株筛选以及基础研究提供生物原料。     

猫杯状病毒感染性克隆的构建

为了构建猫杯状病毒感染性克隆,在对FCV CH-GD株全长基因组测序基础上,引入单一酶切位点和T7 RNA聚合酶启动子,用重组PCR方法,获得全长基因组c DNA,体外转录后转染F81细胞。结果成功构建含单一酶切位点的FCV全长c DNA克隆,体外转录并转染F81细胞,培养物上清液对F81细胞有感染性,细胞出现典型病变。表明获得了FCV CH-GD株的感染性克隆,为进一步研究杯状病毒的生物学特性和致病机理及研发新的疫苗奠定了基础。     

杯状病毒受体研究进展

杯状病毒科(Caliciviridae)的病毒是一类多样性的病毒,具有广泛的宿主和组织趋向性。对于其受体的研究,近年来取得了一定的进展。鉴定的受体分子主要集中于两类,一类是碳水化合物,包括组织血型抗原(HBGAs)、唾液酸和硫酸乙酰肝素;另一类是细胞蛋白,如连接黏附分子-A(JAM-A),一种分子质量为105 ku的膜蛋白等。此外,病毒与宿主受体相互识别的分子机制也取得了进展,这些研究对于深入了解病毒与宿主间的相互关系及有针对性地进行抗病毒药物、疫苗的研制具有重大意义。     

一例猫杯状病毒感染的诊治

猫杯状病毒(FCV)属于杯状病毒科疱疹病毒属,为二十面体对称的球形无囊膜病毒.FCV呈世界性分布,在猫科动物中具有高度传染性,猫、老虎、豹等猫科动物均易感染.FCV主要感染6~ 84日龄的幼猫,感染幼猫后,主要在猫口腔与上呼吸道增殖,引发口腔溃疡、慢性口炎、鼻炎、肺炎等上呼吸道炎症.FCV感染14 ~ 18d后临床症状减轻,但仍可以通过猫的唾液、鼻眼分泌物持续排毒,成为危险的传染源.FCV的感染通常以猫的上呼吸道和口腔病变为主,舌上频繁出现水疱和溃疡是典型的感染特征,此外还可导致四肢溃疡、跛行、流产、肺炎和猫慢性龈口炎,而高毒力FCV毒株甚至可导致死亡.     

猫杯状病毒CH-JL2分离株对猫的致病性研究

为研究猫杯状病毒(FCV)CH-JL2分离株对猫的致病性,本研究采用滴鼻方式分别以10~(8.97)TCID_(50)/mL、10~(7.97)TCID_(50)/mL与10~(6.97)TCID_(50)/mL的病毒液(0.5mL/只)感染6~11周龄健康未免疫中华田园猫,通过对临床症状、体温、排毒情况、组织病理变化以及组织中病毒分布情况的观察与监测,评价其致病性。结果显示,不同滴度的FCV CH-JL2分离株感染猫均可发病,发病率依次为100%、50%与25%,FCV感染5d后,感染猫开始排毒,出现体温升高、鼻眼分泌物增多、口腔溃疡等典型临床症状,但在感染猫的肺脏、心脏、脾脏、气管等全身组织脏器中均未检测到FCV的分布。结果表明CH-JL2分离株不同于FCV VSD株,感染猫后仅可引起上呼吸道感染,不能造成全身感染。本研究为FCV的防制奠定了基础。     

猪肠道杯状病毒研究进展

猪的腹泻病一直困扰着养猪业.特别是病毒性腹泻危害最为严重,它可以引起仔猪的死亡,成猪的掉膘,降低饲料报酬率等。在我国,对于诺如病毒和札幌病毒研究还处于起步阶段,对该病毒的进一步研究有利于疾病的治疗和疫苗的开发研究。文章旨在简述其对流行病学、致病机理、诊断方法等总结。     

西安地区猫杯状病毒流行病学调查与分析

为了解猫杯状病毒(FCV)感染的发生与性别、年龄、品种等的相关性,本调查对来西北农林科技大学西安动物医院就诊经PCR检测诊断为FCV感染的病例,以及院外送检样品经PCR检测为FCV阳性的病例,进行信息收集和统计分析。结果显示,FCV好发于雄性家养猫,小于1周岁的幼猫发病率最高,一年四季均可发生,出现眼鼻分泌物是本病最常见的临床症状,血常规检查以单核细胞升高为主。FCV患猫的这些流行病学特征为FCV感染的诊疗提供借鉴。     

北京地区猫杯状病毒和疱疹病毒流行病学调查

为了调查猫杯状病毒(FCV)和疱疹病毒(FHV)在家养猫中的流行情况,对中国农业大学动物医院进行FCV和FHV PCR检测的412例病例进行流行病学调查,结果显示,有呼吸道症状的患猫FCV和/或FHV感染的总发生率为60.2%,其中FHV和FCV的阳性率分别是26.3%和46.3%,混合感染的发生率为11.8%。对性别、品种、年龄因素与FHV和FCV感染的相关性分析显示,家养长毛猫与FHV感染呈显著正相关(P<0.05,OR=3.25),波斯血统猫与FHV感染呈显著负相关(P<0.05,OR=0.32)。其他因素与FCV和FHV感染均无相关性(P>0.05)。症状与FCV或FHV感染的相关性统计显示,FCV感染与打喷嚏和口腔溃疡呈显著相关(P<0.05),而与眼、鼻分泌物、结膜炎和咳嗽等症状无显著相关性(P>0.05);FHV与上述所有临床症状均无显著相关性(P>0.05)。猫的FHV和FCV感染率在北京地区的发病率相对较高,临床中应提高预防意识。     

猫杯状病毒不同分离株致病性的比较

为确定猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)SH、JL-1、JL-2分离株毒力强弱,将其分别人工接种6~11周龄健康非免疫家猫,分成接种组和对照组。接种前后分别测定各组猫体温、体质量,观察发病情况及临床症状,按照欧洲药典对症状进行计分。于感染后14d麻醉处死,制备病料组织切片,观察组织器官的病理变化。结果显示,家猫感染FCV后总发病率为100%,死亡率为66.7%;SH、JL-1、JL-2组临床症状平均得分分别为8、4、9,对照组得分为1。病理解剖观察发现,猫感染FCV后,以鼻、眼分泌物增加,口腔溃疡为特征,消化道病变较轻微,肺部出现不同程度的变性、出血,呈明显病理性肉样变;病理组织学观察发现,肺脏有数量不等的肺泡上皮细胞和巨噬细胞脱落,伴随少量纤维蛋白渗出和弥漫性肺泡损伤。结果表明,FCV SH、JL-1、JL-2分离株均有一定的致病性,其中以JL-2株的毒力最强。     

水貂杯状病毒生物学特性研究进展

水貂杯状病毒（calicivirus）为杯状病毒科成员,能够引起水貂出血性肺炎和胃肠炎等,该病在中国河北、山东等水貂养殖大省暴发并流行,致死性较高,已有学者从血性肺炎病例中分离并鉴定病毒。作者从水貂杯状病毒的分类地位、生物学特性、致病机理和疫病防制等方面进行了综述。     

猫杯状病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

将构建的猫杯状病毒(Feline Calicivirus,FCV)衣壳蛋白VP1重组表达质粒转化感受态细胞,以表达的FCV-VP1蛋白作为包被抗原,以酶标记的兔抗猫IgG作为二抗,建立检测猫杯状病毒抗体的间接ELISA检测方法。确定了最佳封闭液、最佳血清稀释液、最佳酶标二抗稀释液,当酶标记的兔抗猫IgG效价为1∶20 000时可以检出猫杯状病毒血清抗体。利用本实验室建立的检测方法对收集的96份临床血清进行检测,结果表明96份猫血清中检测出40份阳性。     

猫杯状病毒抗原检测胶体金试纸条的研制

以浓缩纯化的猫杯状病毒(feline calicivirus, FCV)免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,用间接ELISA试验检测细胞培养上清,获得5株阳性杂交瘤细胞克隆株,命名为1E2、4C3、5F11、6G9和7D2,分别制备腹水后进行纯化。以多克隆抗体为金标抗体,腹水ELISA和中和效价较高的单抗(4C3)作为检测线抗体,羊抗兔二抗为质检抗体,制备检测FCV病毒抗原的免疫胶体金快速诊断试纸条。在pH为7.4的条件下,金标抗体的最适质量浓度为0.1 g/L,检测线最佳包被质量浓度为1.0 g/L,质控线最终质量浓度为0.5 g/L。经检测该试纸条具有敏感性高,特异性强,稳定性好的特点,用制备的胶体金试纸条与RT-PCR方法同时对76份猫鼻咽拭子进行检测,比较两者的符合率,符合率在90%以上。结果表明,本试验研制的胶体金试纸条可以用于FCV的临床检测。     

6例猫杯状病毒病例的诊断及治疗

上海市某宠物店15只猫中有6只患猫出现呼吸道症状.经临床检查发现,6只患猫体温、呼吸、心率都正常;1#、2#、3#、5#和6#患猫血常规检测正常,4#患猫血常规显示有轻度脱水.对6只患猫的样品进行猫杯状病毒核酸检测和基因测序,结果均为猫杯状病毒阳性.对6只患猫进行抗菌、点眼、清洁口腔等治疗,患猫均在10～14 d内恢复...     

猫杯状病毒的分子鉴定及系统进化分析

猫杯状病毒可引起猫传染性鼻结膜炎,该病是较为常见的传染病之一。猫杯状病毒具有较高的变异性,因此开展该病毒的流行性调查和遗传进化分析对于该病毒的防控具有重要的意义。本研究主要针对分离的一株猫杯状病毒通过RNA提取,cDNA的合成,RT-PCR和目的基因的克隆等方法对毒株进行了分子鉴定,并利用MEGA6.0软件构建遗传进化树,分析该毒株的系统进化关系。结果表明该毒株与目前国内流行的其他毒株相似性较低,初步分析可能为新的变异毒株。本研究为猫杯状病毒的流行病学调查提供了一定的理论基础。