乌鳖颗粒对免疫性卵巢早衰小鼠CD4+/CD8+及Fas、FasL蛋白表达的实验研究

目的:观察乌鳖颗粒对免疫性卵巢早衰小鼠CD4+/CD8+及Fas、FasL蛋白表达的影响。方法:采用雌性BALB/c小鼠皮下多点注射小鼠透明带多肽,建立免疫性卵巢早衰模型。将造模成功的小鼠随机分为模型组、己烯雌酚组、六味地黄丸组、乌鳖颗粒大、中、小剂量组。另设正常组和佐剂组,共灌胃给药4周。实验末应用免疫组化法测定脾脏CD+4、CD8+,计算CD4+/CD8+的比值。应用免疫组化法测定卵巢Fas、FasL蛋白的表达。结果:模型组小鼠脾脏CD4+/CD8+比值明显高于正常组和佐剂组(P<0.05)。乌鳖颗粒各剂量组小鼠脾脏CD4+/CD8+比值明显低于模型组(P<0.05,P<0.01)。模型组小鼠卵巢Fas蛋白表达低于正常组,Fas-L蛋白表达明显高于正常组,卵巢Fas、Fas-L蛋白表达和Fas/Fas-L比值与正常组比较具有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。乌鳖颗粒大剂量组和中剂量组小鼠Fas蛋白表达明显高于模型组,(P<0.05,P<0.01)。乌鳖颗粒各剂量组Fas-L蛋白表达明显低于模型组(P<0.05,P<0.01)。乌鳖颗粒大剂量组、中剂量组小鼠Fas/Fas-L比值与模型组比较具有显著性差异(P<0.01)。结论:乌鳖颗粒对免疫性卵巢早衰小鼠具有调节CD4+/CD8+比值和Fas/FasL系统的作用。     

肺炎合剂对小鼠CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞亚群调节作用的研究

目的 研究肺炎合剂对CD4^ 、CD8^ 细胞百分数的调节作用。方法：建立免疫低下模型，分别检侧CD4^ 、CD8^ 细胞百分数及CD4^ ／CD8^ 比值的变化。结果：肺炎合剂能显著提高免疫功能低下小鼠CD4^ 、CD8^ 细胞百分比，调整CD4^ ／CD8^ 比值。结论：肺炎合剂有提高和保护CD4^ 、CD8^ 细胞的作用。     

CD4^＋／CD8^＋与足三里穴位注射地塞米松治疗化疗后白细胞减少疗效的关系分析

目的探讨足三里穴位注射地塞米松治疗化疗后白细胞减少疗效与治疗前CD4^＋／CD8^＋水平的关系。方法系统分析62例次化疗后白细胞减少患者接受足三里穴位注射地塞米松治疗后的疗效与CD4^＋／CD8^＋之间的关系。结果CD4^＋／CD8^＋的水平和足三里穴位注射地塞米松的疗效密切相关。结论足三里穴位注射地塞米松治疗化疗后白细胞减少主要是通过激活机体免疫机制发挥作用的。对临床应用有较重要的指导价值。     

乌鳖颗粒拮抗D半乳糖致小鼠卵巢早衰的实验研究

目的:探讨D半乳糖致雌性小鼠卵巢早衰动物模型的可行性和乌鳖颗粒的作用机理。方法:选取有正常动情周期的雌性小鼠,随机分为7组,每组10只,分别为正常组、模型组、己烯雌酚组、六味地黄丸组、乌鳖颗粒大、中、小剂量组。除正常组外,其余各组按每天0.5mL/只的剂量颈背部皮下注射5%D半乳糖溶液。第11天开始,灌胃给予治疗药,连续给药32天。每天定时观察阴道细胞,确定动情周期变化。实验末取血清测E2血清水平,取子宫和卵巢称湿重,计算子宫指数和卵巢指数,卵巢、子宫作组织形态学观察。结果:模型组小鼠动情周期紊乱,动情间期延长,乌鳖颗粒各剂量组小鼠在给药2周左右出现动情期延长。乌鳖颗粒各剂量组的卵巢指数、子宫指数与模型组小鼠比较具有显著性差异(P<0.01)。模型组小鼠的血清E2水平明显下降,与正常组比较具有显著性差异(P<0.01)。乌鳖颗粒大、中剂量组血清E2水平比模型组有明显的升高,与模型组比较具有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。乌鳖颗粒各剂量组的卵巢、子宫组织形态学明显改善。结论:乌鳖颗粒能促进子宫、卵巢的生长发育,改善卵巢、子宫的组织形态,调节卵巢内分泌的激素水平。     

坤泰胶囊对卵巢早衰大鼠Fas、FasL蛋白及mRNA表达的影响

目的:探讨坤泰胶囊对卵巢早衰大鼠的作用机制。方法:将12周龄SD雌性大鼠随机分为空白组、模型组、坤泰胶囊0.3、0.6、1.2g/kg组、结合雌激素片0.075mg/kg组。用75mg/kg雷公藤灌胃法建立卵巢早衰大鼠模型,于造模14天后各组分别灌胃给予相应药物,连续36天,实验过程中观察大鼠行为学改变及动情周期的变化。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清性激素水平;光镜下观察大鼠卵巢组织结构的变化;免疫组化法和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法分别检测大鼠卵巢组织相关因子Fas、FasL蛋白及mRNA表达水平的变化。结果:治疗组与模型组相比,大鼠体质量显著增加,血清性激素水平明显改善,Fas蛋白及mRNA表达明显升高、FasL蛋白及mRNA表达明显降低。结论:坤泰胶囊可纠正卵巢早衰大鼠紊乱的动情周期,调节大鼠体内的性激素水平,上调Fas蛋白及mRNA的表达,下调FasL蛋白及mRNA的表达,促进受损卵巢功能的修复,保护和改善卵巢功能。     

狼疮静颗粒对NZB／NZWF1小鼠外周血CD4＋、CD8＋细胞及ICAM-1表达的影响

目的探讨狼疮静颗粒对自发性狼疮小鼠的免疫调节作用机制。方法运用狼疮静颗粒、强的松及狼疮静合强的松三组药物，对3月龄雌性NZB／NZWF1狼疮模型小鼠进行干预治疗6周，观察各组小鼠CD4 、CD8 细胞及ICAM-1表达的影响。结果中西药物均能改善模型小鼠CD4 、CD8 细胞分布，抑制血清和血浆淋巴细胞表面ICAM-1的高表达，以申狼疮静结合强的松组效果明显为优。结论狼疮静颗粒能有效改善并调节自发性狼疮小鼠细胞免疫功能，抑制过亢的免疫反应，结合西药后可协同发挥疗效并显示出疗效优势。     

内异消癥汤对子宫内膜异位症大鼠CD4^＋及CD8^＋ T细胞表达的影响

目的探讨内异消癥汤对子宫内膜异位症模型大鼠CD4^＋、CD8^＋T细胞表达的影响。方法将47只大鼠随机分为对照组,模型组和内异消癥汤高、低剂量组,除对照组外均采用大鼠子宫组织自体移植手术制作子宫内膜异位症模型,灌胃给药4周后用免疫组化方法检测大鼠子宫内膜异位移植物局部CD4^＋、CD8^＋T细胞表达。结果与模型组相比,低剂量组CD4^＋表达显著降低（P〈0.05）,高、低剂量组CD8^＋的表达强度降低更显著（P〈0.01）;高、低剂量组的CD4^＋/CD8^＋比值较模型组增高,低剂量组比值增高尤为明显;高、低剂量组之间CD4^＋、CD8^＋表达比较无显著差异（P〉0.05）。结论内异消癥汤能改善大鼠子宫内膜异位移植物局部组织免疫学变化,降低CD4^＋及CD8^＋表达,并有提高CD4^＋/CD8^＋比值的趋势,可能通过此途径达到治疗效果。     

扫癣灵对寻常型银屑病患者外周血CD4^＋、CD8^＋及CD4^＋／CD8^＋水平的影响

1临床资料 本组病例均为2005—08—2007—02就诊于黑龙江中医药大学附属第一医院皮肤科门诊的患者。共93例，男54例，女39例；年龄16～65岁，平均34．34岁。分为治疗组50例，对照组43例；另设正常对照组25例。分期属于寻常型银屑病（PV）进展期，证候分类属于风热证。诊断依据中华人民共和国卫生部2002年试行的《中药新药临床研究指导原则》。     

心肌康对慢性病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡及Fas／FasL蛋白表达影响的实验研究

目的：观察心肌康对慢性病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡及Fas／FasL蛋白表达的影响，探讨心肌康的作用机制。方法：给Balb／c小鼠多次接种嗜鼠心肌柯萨奇B3病毒制作慢性VMC模型，首次感染病毒50天后将存活小鼠分为模型组、心肌康组及氯沙坦组，同时设正常对照组，分别予以相应药物干预30天，采用原位末端标记法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡及免疫组化方法检测Fas／FasL蛋白表达。结果：正常组未见到心肌细胞凋亡，模型组心肌细胞凋亡，凋亡率较正常组显著增加（P〈0．05），心肌康组和氯沙坦组凋亡率较模型组显著降低（P〈0．05）。模型组Fas／FasL蛋白表达较正常组显著增多（P〈0．01），心肌康组和氯沙坦组较模型组显著降低（P〈0．01）。结论：心肌细胞凋亡参与了慢性病毒性心肌炎的发病，心肌康能够抑制VMC心肌细胞的凋亡，通过下调Fas／FasL蛋白表达，对心肌细胞起到保护作用。     

胃肠道癌肿患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞的表达及临床意义

目的：研究胃肠道癌肿患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T（Treg）细胞的表达,并探讨其临床意义。方法：通过免疫荧光术及流式细胞仪检测20例胃癌患者及20例结肠癌患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg细胞、CD4^＋CD25^＋high Treg细胞、CD4^＋T细胞及CD4^＋ CTLA-4^＋T细胞。结果：胃癌组、结肠癌组与健康献血者比较外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋ Treg细胞、CD4^＋CD25^＋high Treg细胞及CD4^＋CTLA-4^＋T细胞显著增多,CD4^＋T细胞显著减少;胃癌、结肠癌患者之间其外周血中CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg细胞、CD4^＋CD25^＋high Treg细胞、CD4^＋T细胞及CD4^＋CTLA-4^＋T细胞无显著差异。结论：胃肠道癌肿患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg细胞显著高于健康献血者,这可能与胃肠道癌肿患者的免疫抑制和肿瘤的进展相关。     

VEGF和Fas／FasL蛋白在妊娠高血压患者胎盘的表达及意义

目的研究VEGF和Fas／FasL蛋白在妊娠期高血压疾病患者胎盘中的表达及其意义。方法收集妊娠期高血压疾病孕产妇74例为病例组,同期住院的正常孕妇70例为对照组,采用免疫组化染色sP法测定胎盘组织中VEGF和Fas／FasL的表达。结果病例组胎盘组织VEGF蛋白、FasL蛋的表达低于对照组,Fas蛋白表达高于对照组,且三者之间存在相关性。结论VEGF和Fas／FasL共同参与了妊娠期高血压疾病的发生和发展。     

穴位埋线对海洛因依赖大鼠戒断症状、CD4~+及CD8~+细胞的影响

目的:通过观察不同干预方法对海洛因依赖大鼠戒断症状及外周血CD4+CD8+、和CD4+/CD8+值的影响,为临床治疗方案的优选提供理论依据。方法:采用逐日递增法建立海洛因成瘾大鼠模型,随机分为自然戒断组、美沙酮组、针刺组和穴位埋线组,正常对照组注射等量生理盐水。于造模成功和干预结束后进行催促试验,比较戒断症状积分变化;采用免疫组化检查外周血CD4+和CD8+细胞百分数、CD4+/CD8+值。结果:干预后美沙酮组戒断症状积分明显低于其它各组(P0.01),而针刺组和埋线组与自然戒断组比较差异无显着性(P0.05);针刺和穴位埋线可以提高外周血CD4+细胞百分数和CD4+/CD8+值,降低CD8+细胞百分数。埋线组与针刺组比较也有差异(P0.05)。而美沙酮组与自然戒断组间比较则无差异(Pp0.05)。结论:美沙酮可以很好地缓解海洛因戒断症状;穴位埋线能改善其紊乱的T淋巴细胞免疫功能。     

慢性肺源性心脏病患者CD4^＋CD25^＋Treg的改变

目的观察慢性阻塞性肺疾病（COPD）所致慢性肺源性心脏病（CPHD）患者急性加重期以及治疗病情缓解后外周血中调节型T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）和血浆中Th1型细胞因子INF-γ及Th2型细胞因子IL-4的水平变化,并与健康对照者外周血中相应指标进行比较。探讨慢性肺源性心脏病患者细胞免疫功能状态,为CPHD患者治疗开辟新的途径。方法对CPHD患者急性加重期及治疗病情缓解后、健康对照者采用流式细胞仪技术检测外周血中的CD4^＋CD25^＋Treg水平。采用酶标记免疫吸附测定法（ELISA）测定血浆中INF-γ、IL-4的浓度。结果 CD4^＋CD25^＋Treg在CPHD急性期组高于缓解组和健康对照组,缓解组低于健康对照组（P〈0.05）。CPHD患者血浆中INF-γ在急性期组高于缓解组和健康对照组,缓解组高于健康对照组（P〈0.05）。CPHD患者急性期组、缓解组与健康对照组三组之间血浆IL-4的差别无统计学意义。结论 CPHD患者急性加重期和治疗病情缓解后均存在免疫功能的低下和免疫功能的失调。     

中药复方肺积散对肺癌小鼠Fas／FasL蛋白表达影响的实验研究

目的：观察Fas／FasL在荷瘤小鼠肺癌模型中的表达，探讨中药复方肺积散在治疗肺癌增效的确切机制。方法：将40只lewis小鼠随机分为四组，分别给予不同处理。结果：中药复方肺积散可影响荷瘤小鼠Fas／FasL蛋白的表达，与顺铂合用可加强抗Lewis肺癌的作用。结论：中药复方肺积散具有良好的免疫抑制作用。     

361 小青龙汤对小鼠CD4^＋T细胞生成Th1／Th2特异性细胞因子的调节作用

探讨了小青龙汤对BALB／c小鼠脾细胞中CD4^＋T细胞的影响。添加小青龙汤后CD4^＋T细胞数尽管没有变化，但其表面蛋白CD69表达减少，IL-2及IL-2R-2mRNA表达增加。IL-4mRNA减少，IFN-Y明显增加。     

天灸血清对过敏性哮喘大鼠肺脏和脾脏中CD4~+、CD8~+的影响

目的:通过观察天灸血清对过敏性哮喘大鼠肺支气管和脾脏中CD4+、CD8+T淋巴细胞数量的变化及其比值的影响,探讨天灸血清是否具有与天灸疗法相类似的抗哮喘作用。方法:将天灸后制备出的大鼠血清,经尾静脉注射于哮喘模型大鼠体内,连续注射5次,于末次注射12h后处死,观测5组大鼠肺支气管和脾脏中CD4+、CD8+T淋巴细胞数量的变化并计算其比值。结果:与模型组和空白血清组相比,天灸血清组肺支气管和脾脏CD4+/CD8+的比值降低(P0.05),且与天灸组无统计学差别。结论:天灸血清可降低哮喘大鼠肺支气管和脾脏CD4+/CD8+的比值,具有与天灸疗法相类似的抗哮喘作用。     

扶正抑瘤颗粒对小鼠肝癌H22细胞凋亡及Fas和FasL表达的影响

目的：观察扶正抑瘤颗粒含药血清诱导小鼠肝癌H22细胞凋亡的作用和对细胞Fas、FasL表达的影响．方法：应用血清药理学方法，用不同剂量的含药血清与小氟肝癌细胞在体外共同孵育后，应用相差显微镜，流式细胞仪、电子显微镜对肿瘤细胞的生长和凋亡进行观察，用SABC法检测H22细胞Fas和FasL的表达结果：小鼠肝癌H22细胞经含药血清作用后，发生明显的形态学改变，相差显微镜下可见细胞体积缩小，折光性增强，染色质浓缩，核浆比例增大，密度增高，胞浆出现颗粒样物质。电镜下可见明显的凋亡形态变化，流式细胞仪可测到凋亡峰；SABC法显示，扶正抑瘤含药血清可上调小鼠H22细胞Fas的表达，而对FasL表达的影响不明显结论：扶正抑瘤颗粒能诱导H2：细胞发生凋亡，其机制可能与其上调H22细胞Fas的表达有关，     

麦门冬汤对BALB／C硬皮病小鼠CD4＋、CD8＋T细胞及腹腔巨噬细胞活力的影响

目的：观察麦门冬汤对BALB／C硬皮病小鼠外周血CD4＋、CD8＋T细胞及腹腔巨噬细胞活力的影响。方法：选8周龄60只BALB／C小鼠,实验前剃去小鼠背部中央区被毛,并随机分为5组,每组12只,分别为正常对照组（正常组）、模型对照纽（模型组）、麦门冬汤大剂量组、麦门冬汤中剂量组、麦门冬汤小剂量组。除正常组外,其他组用博莱霉素（BLM）制作硬皮病模型。使用麦门冬汤大、中、小剂量治疗3周。眼球采血,用流式细胞仪采用单平台操作法检测CD4＋、CD8＋T细胞。进行腹腔灌洗并收集灌洗液,用预冷RP—MI-1640培养液洗涤细胞3次,每次4lCl500rpm离心10min,去上清液,再用预冷的适量RPMI-1640培养液悬浮细胞。用移液器取100pL的细胞悬液,加100pL的胎盼蓝与800μL的RPMI一1640放入1．5mL的离心管中染色,计算腹腔巨噬细胞活力。结果：麦门冬汤小剂量组CD4＋T细胞的含量高于模型组（P〈0．01）i大、中剂量组CD8＋T细胞含量高于模型组（分别为P〈0．01和P〈0．05）。中、小剂量组腹腔巨噬细胞活力均高于模型组（P〈0．01）。结论：麦门冬汤能提高CD4＋、CD8＋T细胞水平,提高模型小鼠腹腔巨噬细胞的活力。这可能是麦门冬汤对SSc模型小鼠发挥作用的机制之一。     

中药狼疮静颗粒对狼疮性BXSB小鼠外周血CD4、CD8、CD19细胞的影响

目的：研究中药狼疮静颗粒对BXSB狼疮性小鼠外周血CD4、CD8、CD19细胞分布的影响，探讨其免疫调节机理。方法：运用微量全血免疫双荧光染色法及流式细胞仪进行检测。结果：中药狼疮静颗粒可升高BXSB狼疮鼠外周血CD4、CD8细胞及降低外周血CD19细胞分布。结论：中药狼疮静颗粒通过调节T淋巴细胞功能紊乱，降低B细胞分布，抑制了B细胞的异常增生活化，使自身抗体产生减少而达到治疗SLE的目的。     

狼疮方对体外扩增小鼠CD4^＋CD（25）^＋调节性T细胞的影响

目的：狼疮方对体外扩增小鼠CD4＋CD25＋调节性T细胞数量的影响。方法：免疫磁珠法分离狼疮方治疗组与未治疗组小鼠CD4＋CD2＋5T细胞;通过流式细胞仪检测CD4＋CD25＋T细胞Foxp3表达情况;用抗CD3和抗CD28包被的微珠来进行刺激,体外扩增小鼠的CD4＋CD25＋调节性T细胞;用CFSE法检测CD4＋CD25＋调节性T细胞体外抑制CD4＋CD2-5T细胞的增殖情况。结果：经抗CD3和抗CD28包被的微珠刺激后,在TGF-β1和IL-2存在的环境中CD4＋CD25＋T细胞数量明显升高,扩增后的CD4＋CD25＋T细胞高表达Foxp3。与此同时,经狼疮方处理后的小鼠CD4＋CD25＋T细胞扩增后数量增加133.3±18.9倍,未经狼疮方处理的对照细胞数量增加104.7±10.8倍,两者比较有显著性差异（P〈0.05）。狼疮方治疗组与未治疗组中分离的CD4＋CD2＋5T细胞和扩增的CD4＋CD25＋T细胞对CD4＋CD2-5T细胞的增殖皆有明显抑制作用,荧光强度分别为32.1±4.8,33.1±4.9,30.1±3.8,32.9±4.2。结论：狼疮方有助于提高小鼠CD4＋CD25＋调节性T细胞的扩增效率,扩增的CD4＋CD25＋调节性T细胞表达Foxp3,具有体外免疫抑制功能。