染料木素的体外抗肿瘤作用研究

目的观察染料木素的体外抗肿瘤作用。方法采用溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)检测法测定染料木素对子宫内膜腺癌细胞系(JEC)、人肝癌SMMC-7721细胞系体外增殖的影响,按台盼蓝排染法计数活细胞,绘制细胞生长曲线。结果MTT法检测显示,染料木素对JEC细胞和SMMC-7721细胞增殖的抑制作用呈现剂量和时间依赖性;随染料木素浓度的升高,JEC和SMMC-7721细胞的生长曲线逐渐下移,10-4mol.L-1的染料木素作用下的JEC细胞生长曲线呈现与5Fu相似的下降趋势。结论染料木素具有一定的抗肿瘤作用。     

黄豆苷元、染料木素对葛根素小肠吸收影响

目的 通过黄豆苷元、染料木素对葛根素小肠吸收影响,研究中药葛根成分间的相互作用.方法 利用雄性SD大鼠小肠作为透析膜,采用扩散池法研究观察葛根素小肠吸收行为以及表观渗透系数.以及黄豆苷元和染料木素存在时对吸收的影响.结果 黄豆苷元、染料木素均能促进葛根素吸收、抑制外排,随着黄豆苷元、染料木素浓度增加效果增强.结论 黄豆苷元、染料木素能够影响葛根素小肠吸收.     

异黄酮类化合物抗肿瘤细胞增殖作用

目的　研究 3个从怀槐 (Maackia amurensis)中提取分离得到的异黄酮单体化合物 (染料木素genistein、芒柄花黄素 form ononetin、鸢尾种苷元 tectorigenin)的抗肿瘤细胞增殖效应。方法　采用 MTT法将不同浓度的异黄酮单体化合物分别对 2种肿瘤细胞进行生长抑制实验。结果　三者在浓度为 10 μg/m l和10 0 μg/ml时对人胃癌细胞 (BGC)和人淋巴样白血病细胞 (HL- 6 0 )的生长均有不同程度的抑制作用。结论　三者中染料木素 genistein对 BGC细胞的生长抑制作用最强 ,鸢尾种苷元 tectorigenin对 HL- 6 0细胞的生长抑制作用最强     

瑶药黄酮化合物体外抗肿瘤活性研究

目的：研究瑶族药用植物中黄酮化合物的体外抗肿瘤活性，并初步分析它们的构效关系。方法：采用四甲基偶氮唑盐（MTT）吸收减少实验，测定6个黄酮化合物对2种正常细胞的毒性和对7种肿瘤细胞的增殖抑制作用。结果：6种化合物中，圣草苷、柚皮苷、槲皮素和槲皮苷对2种正常细胞非洲绿猴肾细胞Vero和人黑色素细胞MC基本不显示出毒性，柚皮素对这2种细胞的毒性都较大，而圣草酚对Vero细胞毒性很小，对MC细胞的毒性非常大。柚皮素有较广谱的抗肿瘤活性，它对7个受试肿瘤细胞都显示出较强的增殖抑制，尤其对乳腺癌细胞MCF-7的半数抑制浓度达到了50μg/ml。在7种肿瘤细胞中，MCF-7和肝癌细胞HepG2对受试黄酮化合物最为敏感，两者都被圣草酚、柚皮素和槲皮素以较低浓度有效地抑制。这些化合物对肿瘤细胞的抑制作用都显示出浓度依赖性。结论：圣草酚、柚皮素和槲皮素对肿瘤细胞的生长有较好的抑制作用．而官们的葡萄糖苷的细胞毒性较小．     

糙叶败酱提取物的体外抗肿瘤活性比较

目的：比较糙叶败酱提取物糙叶败酱粗多糖、糙叶败酱总木脂素、糙叶败酱总皂苷的体外抗肿瘤活性,初步筛选糙叶败酱抗癌作用有效成分。方法：采用四甲基偶氮唑盐比色法（monotetrazolium test,MTT）测定不同浓度糙叶败酱粗多糖、糙叶败酱总木脂素、糙叶败酱总皂苷分别对人肺源腺癌细胞SPCA-1、人肝癌细胞系HepG2、和人慢性髓系白血病细胞K562生长的影响。结果：糙叶败酱总木脂素、总皂苷对体外培养的肿瘤细胞SPCA-1、HepG2、K562均有抑制作用,且抑制作用与药物浓度及作用时间有相关性;糙叶败酱总木脂素对K562细胞生长的抑制作用尤为显著,400μg/ml,作用96h,IC50为21.16μg/ml;糙叶败酱粗多糖对SPCA-1细胞的增殖有抑制作用。结论：糙叶败酱不同成分有不同的抗肿瘤作用,糙叶败酱总木脂素对人慢性髓系白血病细胞生长有明显的抑制作用。     

酸碱位移结合喷雾干燥法制备染料木素三元包合物体系

目的 优选染料木素三元包合物的制备工艺,并对其体外抗癌活性进行评价。方法 通过相溶解度及分子模拟对染料木素二元与三元包合物的溶解性和稳定性进行评价,优选染料木素包合物的种类。通过处方和制备工艺研究,确定三元包合物的处方组成和制备工艺。利用傅里叶变换红外光谱、X射线粉末衍射、差示扫描量热法和扫描电子显微镜等对染料木素三元包合物进行表征,采用人乳腺癌MCF-7细胞和人非小细胞肺癌A549细胞对染料木素三元包合物的抗癌活性进行考察。结果 染料木素三元包合物与二元包合物相比溶解度更高、稳定性更好。研究表明,以处方染料木素与HP-β-CD物质的量比（1∶1.8）,加入染料木素-HP-β-CD总质量5%聚乙烯吡咯烷酮（PVP）K30,通过酸碱位移结合喷雾干燥法制备染料木素三元包合物,染料木素的溶解度可达8.8 mg/mL,溶出度为93%;体外抗癌活性实验表明,染料木素三元包合物能明显增强染料木素对MCF-7细胞和A549细胞的抑制作用。结论 优选工艺为酸碱位移结合喷雾干燥法制备染料木素三元包合物,能明显提高染料木素的溶解性,并显著增强染料木素对MCF-7细胞和A549细胞的抑制作用。     

高良姜素对不同肿瘤细胞抑制作用

目的比较高良姜素对不同肿瘤细胞的抑制作用。方法采用MTT法检测不同浓度高良姜素对7种肿瘤细胞(MCF-7、A549、MGC-803、PC-3、A875、Hela、HepG-2)的增殖抑制作用。结果高良姜素对7种肿瘤细胞均有不同程度的抑制作用,最敏感的肿瘤细胞为MCF-7,24 h与48 h的IC_(50)为38.76 μmol/L、20.43 μmol/L,其次为HepG-2、MGC-803、A549、Hela、PC-3,敏感度较差的为A875,48 h的IC_(50)为161.25 μmol/L。结论高良姜素具有较为广谱的抗肿瘤作用,对不同的肿瘤细胞抑制作用不同,这种抑制作用呈现出了时间与浓度依赖性。     

白花丹素和白花丹素-铜配合物体外抗肿瘤活性研究

目的:观察白花丹素及白花丹素-铜配合物对肿瘤细胞株的生长抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法:采用MTT法检测不同浓度的白花丹素及白花丹素-铜配合物对体外培养的多种肿瘤细胞株的生长抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50)。结果:白花丹素-铜配合物对大多数肿瘤细胞株的抑制率大于白花丹素,但抗肿瘤谱小于白花丹素,推测白花丹素-铜配合物的抗癌活性强于白花丹素,但抗肿瘤谱缩小,可能与白花丹素-铜配合物的配位关系、构效关系有关。结论:白花丹素及白花丹素-铜配合物具有体外抗肿瘤活性。     

黄酮类化合物抑制新型冠状病毒主蛋白酶的研究

目的 探讨部分黄酮类化合物对新型冠状病毒主蛋白酶的抑制作用。方法 以奈玛特韦为阳性对照化合物,利用主蛋白酶荧光偏振法筛选模型检验黄酮类化合物橙皮素、木犀草素、染料木素、毛蕊异黄酮、芹菜素、根皮素、芹菜素-7-葡萄糖苷、染料木苷、染料木素-4’-葡萄糖苷和橙皮苷对于新型冠状病毒主蛋白酶的抑制活性。结果 阳性对照物奈玛特韦在100、50、25μmol/L浓度对于主蛋白酶的抑制率分别为91%、76%和70%,而黄酮类化合物橙皮素、木犀草素、染料木素、毛蕊异黄酮、芹菜素、根皮素、芹菜素-7-葡萄糖苷、染料木苷、染料木素-4’-葡萄糖苷和橙皮苷在对应药物浓度均未表现出对主蛋白酶的有效抑制活性。结论 上述黄酮类化合物在细胞水平具有抗新型冠状病毒的药理活性,其作用机理极可能为抑制新型冠状病毒RNA聚合酶,而并非抑制主蛋白酶,实验数据可为后续抗新型冠状病毒药物的研发提供思路和参考。     

UPLC同时测定淡豆豉中6种异黄酮的含量

目的:建立同时测定淡豆豉中的大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、黄豆苷元、黄豆黄素、染料木素6种异黄酮类成分含量的UPLC方法。方法:采用ACQUITY UPLC~ BEH C_(18)色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相为0.1%冰乙酸-乙腈,梯度洗脱;流速0.3 mL/min;检测波长254 nm;柱温25℃;进样量10μL。结果:大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、黄豆苷元、黄豆黄素、染料木素分别在0.088~5.280μg/mL(r_1=0.9997)、0.092~5.520μg/mL(r_2=0.9998)、0.152~9.120μg/mL(r_3=0.9998)、0.100~6.000μg/mL(r_4=0.9999)、0.072~4.320μg/mL(r_5=0.9998)、0.048~3.840μg/mL(r_6=0.9995)范围内线性关系良好,精密度、重现性、回收率均符合要求。结论:该方法快速、简便,重复性好,适用于同时测定淡豆豉中大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、黄豆苷元、黄豆黄素、染料木素的含量。     

Inhibitory Effects of Isoflavonoids on Rat Prostate Testosterone 5α-Reductase

Testosterone 5α-reductase inhibitors represent important therapeutic drugs for use against androgen-dependent diseases such as benign prostatic hyperplasia, male pattern baldness, and acne. We have searched for inhibitors of rat prostate testosterone 5α-reductase in the cultured broths of many kinds of soil bacteria, and have found that cultured soybean-casein digest broths of certain bacterial strains have a potent inhibitory effect on the enzyme. We tested 10 selected isoflavonoids, including isoflavones and O-methylated isoflavones, for inhibitory effects on rat prostate testosterone 5α-reductase to determine the important structural elements for inhibition of the enzyme. Genistein, biochanin A, equol, and 3′,4′,7-trihydroxyisoflavone showed considerably higher inhibitory effects whereas daidzein, formononetin, glycitein, prunetin, ipriflavone, and 4′,7-dimethoxyisoflavone showed lower inhibitory effects. The IC₅₀ values of genistein, biochanin A, equol, 3′,4′,7-trihydroxyisoflavone, and riboflavin, a positive control, for rat prostate testosterone 5α-reductase were 710 μm, 140 μm, 370 μm, 690 μm, and 17 μm, respectively. Daidzein, genistein, biochanin A, formononetin, and equol are already known to be testosterone 5α-reductase inhibitors, but this is the first characterization of 3′,4′,7-trihydroxyisoflavone as an inhibitor of the enzyme.     

四种甘草对人乳腺癌细胞增殖抑制和诱导凋亡作用的比较研究

目的比较新疆四种野生甘草活性成分对人乳腺癌细胞的增殖抑制作用,以期筛选出药效最佳的甘草种类。方法采用MTT法检测不同样品对BCAP-37细胞的增殖抑制作用,Hoechst33258荧光染色法检测各样品诱导BCAP-37细胞凋亡的作用。结果4种甘草的活性成分对人乳腺癌BCAP-37细胞具有显著的增殖抑制与诱导凋亡的作用,且存在显著的种间与产地间差异。结论抗癌药效最佳的甘草种类为阿拉尔甘草。     

染料木素对大鼠主动脉平滑肌细胞增殖及脂质过氧化的影响

目的:探讨染料木素对主动脉平滑肌细胞(SMC)增殖及抗脂质过氧化作用.方法:培养大鼠主动脉平滑肌细胞,同时加入不同浓度染料木素,观察其对平滑肌细胞增殖和培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、3',5'-环磷酸腺苷(cAMP)、6-酮-前列环素(6-Keto-PGF1α)的影响,细胞增殖测定采用MTT法.结果:与对照组比较,染料木素在0.1～100 μmol/L范围内能明显抑制平滑肌细胞增殖(P＜0.05,P＜0.01),且呈计量依赖性;一定浓度染料木素能提高培养液SOD活性,降低MDA含量,升高cAMP和6-Keto-PGF1α水平.结论:染料木素可能通过提高SOD活性,降低MDA含量,升高cAMP和6-Keto-PGF1α水平抑制平滑肌细胞增殖.     

染料木素对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响

目的:探讨染料木素体外对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响。方法:用改良的组织块法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞,染料木素以不同浓度加入细胞培养体系,作用不同时间后,用MTT法检测成骨细胞的增殖情况;用对硝基苯二钠基质动力学法测定细胞内碱性磷酸酶的活性,用改良的Lowry法测蛋白含量。结果:染料木素在1×10~(-5)～1×10~(-9)mol/L浓度范围内作用24h、48h均能促进成骨细胞增殖,在1×10~(-7)～1×10~(-5)mol/L范围内作用72 h可提高成骨细胞内碱性磷酸酶的活性。结论:染料木素体外能促进成骨细胞的增殖与分化。     

地鳖纤溶蛋白含药血清对人肝癌和乳腺癌抑制作用

目的研究地鳖纤溶蛋白(EFP)及含药血清对人肝癌HepG-2和人乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用。方法制备EFP,并制备不同浓度EFP小鼠含药血清;采用MTT法分别将EFP和EFP含药血清加入HepG-2和MCF-7细胞悬液中,分别检测增殖抑制效果。结果 EFP直接用药各组均对HepG-2无抑制作用,而EFP含药血清各组对HepG-2细胞均有明显抑制细胞增殖作用;EFP组和EFP含药血清组均能不同程度的抑制MCF-7细胞增殖。结论 EFP有较强的体外抗肿瘤活性;血清药理学方法更能真实的反映药物作用。     

淫羊藿苷与染料木黄酮对体外培养成骨细胞增殖及矿化成熟影响的对比研究

目的:对比研究淫羊藿苷( icariin,I)与染料木黄酮(genistein,G)对体外培养大鼠成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROB)增殖与分化成熟的影响及其药理活性的强弱.方法:取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法获得成骨细胞,培养子含10％ FBS的MEM培养液中,3d后首次换液,铺满90％皿底后传代培养;I与G的作用终浓度为1×10-5 mol·L-1,增殖分析采用96孔板,MTT法分析;分化成熟分析采用24孔板,于成骨性诱导培养第3,6,9,12天分别测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、钙盐沉积量、骨钙素,第12天进行ALP组织化学染色、茜素红染色和钙化结节计数;于成骨性诱导培养0,6,12,24,48,72 h提取总RNA,Real-time RT-PCR法检测Runx-2,bFGF,IGF-I,Osterix( OSX)等成骨性相关因子的表达情况.结果:终浓度为1×10-5 mol·L-1的I与G均不促进ROB的增殖,均能显著提高细胞ALP活性、增加钙含量、促进骨钙素分泌,并增加钙化结节数量;同时上调Runx-2,bFGF,IGF-I和Osterix等成骨性相关因子的表达量;在成骨细胞水平上I促进ROB矿化成熟的药理学活性明显强于G的活性.结论:1×10-5 mol·L-1的I与G均能促进ROB矿化成熟,均有抗骨质疏松的作用,但在成骨细胞水平上I促进ROB矿化成熟的药理学活性显著强于G.     

冬凌草甲素对HL-60细胞的诱导凋亡作用及其作用机制

目的:探讨冬凌草甲素对白血病HL-60细胞的诱导凋亡作用及其作用机制.方法:以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的HL-60细胞,应用MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡,TRAP-PCR-ELISA及FCM法检测细胞凋亡前后端粒酶活性及P53蛋白表达水平的变化.结果:8 umol/L以上的冬凌草甲素对HL-60细胞具有显著的诱导凋亡及增殖抑制作用,并呈现出明显的量-效与时-效关系.药物作用48小时后细胞的凋亡率达高峰,在Hoechst染色图片上可见核浓缩及核碎裂等典型的凋亡改变.在细胞凋亡过程中,端粒酶活性下降,同时P53蛋白的表达水平显著升高.结论:冬凌草甲素对HL-60细胞具有显著的诱导凋亡及增殖抑制作用,升高P53蛋白的表达水平及降低细胞端粒酶活性可能是其重要作用机制之一;这为冬凌草甲素进一步应用于临床治疗急性白血病提供了有力的试验依据.     

染料木黄酮在雌雄大鼠体内的药动学

 目的观察染料木黄酮(genistein)在雌、雄大鼠体内的药动学差异。方法大鼠ig给予9mg·kg^-1染料木黄酮,用反相高效液相色谱法测定不同时间大鼠血浆中原型药物、β-葡萄糖醛酸结合型药物及组织器官中药物的浓度。结果药物在卵巢和子宫中的分布显著高于睾丸,在其他组织器官内的分布未观测到明显的雌雄差异。雌性大鼠的AUC,ρ_max和t_1/2分别为1.120 mg·h·L^-1,0.167mg·L^-1和5.767h。而雄性大鼠的AUC,ρ_max和t_1/2分别为0.592mg·h·L^-1,0.106mg·L^-1和4.486h。雌性大鼠血浆中葡萄糖醛酸结合形染料木黄酮浓度高于雄性大鼠。结论染料木黄酮在雌雄大鼠性器官中的分布具有差异显著;与雄性大鼠相比,雌性大鼠对染料木黄酮的吸收多、葡萄糖醛酸结合量高,使染料木黄酮的半衰期延长。     

黄芩素对鼻咽癌CNE2细胞增殖和凋亡的影响

目的研究黄芩素对鼻咽癌CNE2细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其阻滞细胞周期和诱导凋亡的机制。方法通过CCK-8法和克隆形成实验检测黄芩素对CNE2细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期变化,荧光显微镜观察细胞形态改变,试剂盒检测Caspase-3蛋白活性变化,实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测P53、P21、CDK2、Caspase-3m RNA表达情况。结果黄芩素对鼻咽癌CNE2细胞增殖具有显著的抑制作用,且呈剂量和时间依赖性,与对照组比较,不同浓度的黄芩素作用于CNE2细胞48 h后,细胞出现典型的凋亡特征,并出现周期阻滞,Caspase-3活性增强,P53及其下游基因P21、Caspase-3 m RNA表达水平增高,CDK2 m RNA表达水平下降。结论黄芩素可抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖,可能是通过上调P53表达诱导细胞凋亡并阻滞细胞周期于S期。     

染料木素磷脂复合物的制备及其光谱性质研究

 目的 为了提高染料木素的生物利用度,制备染料木素磷脂复合物,并对其光谱性质进行研究。方法 以染料木素与大豆卵磷脂的结合率为评价标准,对反应溶剂、反应时间、反应物浓度、反应温度和投料比5个因素对结合率的影响进行了考查,利用UV、IR、XRD、DSC等分析技术对复合物结构进行分析。结果 最佳制备条件为：四氢呋喃为反应溶剂,染料木素质量浓度为2 mg·mL-1,投料摩尔比为1∶3,反应时间为3 h,反应温度为50 ℃,该条件下产物结合率达95.4%。结论 磷脂复合物结构不同于单体及物理混合物,染料木素与卵磷脂极性部位经范德华力、氢键等作用结合形成了复合物。