人参皂苷Rg1抑制NLRP3/Caspase-1通路抵抗肾纤维化的作用研究

目的：通过体内外实验探讨人参皂苷Rg1对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞HK2纤维化细胞株中炎症及其抗纤维化的机制。方法：将HK2细胞诱导分组为对照组、纤维化模型组（2 ng/mL的TGF-β1诱导纤维化）、低剂量人参皂苷Rg1治疗组（2 ng/mL的TGF-β1+15μg/mL人参皂苷Rg1）、高剂量人参皂苷Rg1治疗组（2 ng/mL的TGF-β1+45μg/mL人参皂苷Rg1）;Western印迹及免疫荧光检测结缔组织生长因子（CTGF）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原蛋白（Col-1）表达水平;Western印迹检测NOD样受体蛋白3(NLRP3)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)表达水平;透射电镜检测细胞焦亡水平。动物研究将大鼠诱导分为对照组、模型组（单侧输尿管梗阻）、低剂量人参皂苷Rg1治疗组（单侧输尿管梗阻大鼠+50 mg/kg人参皂苷Rg1）、高剂量人参皂苷Rg1治疗组（单侧输尿管梗阻大鼠+100 mg/kg人参皂苷Rg1）;Western印迹检测肾组织中蛋白表达水平;苏木精-伊红（HE）及Masson检测肾脏病理...     

人参总皂苷诱导HL-60细胞凋亡作用及对Caspase-3、Fas表达的影响

目的 探讨人参总皂苷诱导HL-60细胞凋亡的作用机制及其对凋亡相关基因Caspase-3、Fas表达的影响.方法 采用人参总皂苷0、100、200及400 μ g/ml作用于HL-60细胞,并在不同时间内用MTT法检测人参总皂苷对HL-60细胞的抑制率;48h后予普通光镜、荧光显微镜检测HL-60细胞形态的变化;予流式细胞仪、DNA凝胶电泳检测HL-60细胞凋亡;予RT-PCR法检测Caspase-3、Fas基因表达的变化.结果 人参总皂苷抑制HL-60细胞生长呈剂量及时间依赖性;在100～400 μ g/ml时,HL-60细胞凋亡逐渐增加,可见典型的凋亡细胞形态和明显的DNA梯度;在该浓度范围内,Caspase-3、Fas表达逐渐增加.结论 一定浓度的人参总皂苷可诱导HL-60细胞发生凋亡,且细胞凋亡率与人参总皂苷浓度呈一定的量效依赖关系,Caspase-3、Fas基因的表达变化在人参总皂苷诱导HL-60细胞凋亡中可能起重要作用.     

人参皂苷Rg1对衰老大鼠免疫系统的影响

【目的】 面临人口老化进程加快和人们寿命提高的趋势,老年人群的健康已经成为社会科学和医学科学高度关注的重大问题。免疫系统衰老是生物体衰老的关键环节,它将导致机体免疫、造血、修复功能障碍和肿瘤发生率提高。本研究阐释人参抗衰老成分Rg1对免疫系统衰老调控作用及其相关机理,为防治衰老相关疾病,促进祖国医学发展提供理论与实验依据。 【方法】 建立D-半乳糖致免疫功能衰退大鼠模型,通过体内注射人参皂苷Rg1干预衰老进程。检测以下指标:(1)外周血白细胞与淋巴细胞总数及CD4⁺/CD8⁺T细胞比例;(2)股骨骨髓有核细胞数、细胞增殖与形成CFU-GM能力;(3)脾脏、胸腺实质结构比例与衰老细胞比例,脾细胞、胸腺细胞增殖能力,分泌IL-2/6,TNF-α,GM-CSF水平和细胞产生活ROS、SOD、MDA、GSH、GSSH水平;(4)腹腔巨噬细胞吞噬功能与吞噬指数。 【结果】 连续注射D-半乳糖能成功建立免疫功能衰退大鼠模型。与衰老模型组大鼠比较,注射人参皂苷Rg1使衰老大鼠白细胞和淋巴细胞总数提高,CD4⁺/CD8⁺T细胞比例升高;股骨骨髓有核细胞数升高、细胞增殖与形成CFU-GM能力提升;脾脏与胸腺实质结构比例增加,衰老细胞比例减少;脾细胞和胸腺细胞增殖能力提高,分泌IL-2/6、TNF-α、GM-CSF水平提高,产生AGEs、ROS、MDA、GSH/GSSG水平下降,SOD活性明显回升;腹腔吞噬细胞吞噬中性红能力明显增强,吞噬指数增加。 【结论】 (1)D-半乳糖能成功建立免疫功能衰退大鼠模型;(2)人参皂苷Rg1是人参的抗衰老成分,能有效提高免疫系统功能,阻止致衰剂导致的免疫系统衰退,其机理与拮抗D-半乳糖对免疫系统的氧化损伤密切相关。     

人参皂苷Rg1联合人参皂苷Rg3对雄性生殖功能损伤模型小鼠生殖功能的改善作用

目的：探讨人参皂苷Rg1联合人参皂苷Rg3对邻苯二甲酸二丁酯（DBP）诱导的雄性生殖功能损伤模型小鼠生殖功能的改善作用,阐明人参皂苷Rg1和人参皂苷Rg3对生殖功能保护作用的相关机制,为其深入开发提供实验依据。方法：28只清洁级雄性C57BL/6小鼠随机分为模型组（400 mg·kg^-1 DBP）、人参皂苷Rg1+DBP组（20 mg·kg^-1人参皂苷Rg1,400 mg·kg^-1 DBP）、人参皂苷Rg3+DBP组（20 mg·kg^-1人参皂苷Rg3,400 mg·kg^-1 DBP）和联合组（20 mg·kg^-1人参皂苷Rg1,20 mg·kg^-1人参皂苷Rg3,400 mg·kg^-1DBP）,每组7只。DBP溶于玉米油于每天上午灌胃给药,人参皂苷Rg1和人参皂苷Rg3溶于生理盐水于每天下午皮下注射给药,每天各给药1次,连续给药35 d。采用WLJY-9000型精子质量检测系统检测各组小鼠的精子密度、精子活力和总畸形率,HE染色观察小鼠睾丸组织病理形态表现,采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测小鼠血清中睾酮（T）、卵泡刺激素（FSH）和黄体生成素（LH）水平,采用免疫荧光法检测睾丸组织缝隙连接蛋白43（Cx43）蛋白表达水平。结果：与模型组比较,联合组小鼠睾丸脏器系数明显升高（P<0.05）,人参皂苷Rg1+DBP组、人参皂苷Rg3+DBP组和联合组小鼠精子密度和精子活力明显升高（P<0.01）;与模型组比较,人参皂苷Rg1+DBP组、人参皂苷Rg3+DBP组和联合组小鼠血清中T和LH水平明显升高（P<0.01）,FSH水平明显降低（P<0.01）,小鼠睾丸组织中Cx43蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。HE染色,模型组小鼠睾丸组织生精上皮较薄,管腔中生精细胞严重脱落;与模型组比较,人参皂苷Rg1+DBP组和人参皂苷Rg3+DBP组小鼠睾丸组织生精上皮变厚,管腔中脱落细胞较少;联合组小鼠睾丸组织生精上皮结构完整,各级生精细胞排列规则,腔内精子丰富。析因分析,人参皂苷Rg1联合人参皂苷Rg3可致小鼠精子活力（F=6.704,P=0.016）、血清中T水平（F=4.912,P=0.036）和睾丸组织中Cx43蛋白表达水平（F=6.937,P=0.018）升高。结论：人参皂苷Rg1和人参皂苷Rg3单独使用及人参皂苷Rg1与人参皂苷Rg3联合使用,可提高精子密度和精子活力,使小鼠血清中T和LH水平升高,FSH水平降低,减轻小鼠生殖功能损伤,其作用机制可能与上调Cx43表达水平发挥生精保护作用有关,可抑制DBP所致的生殖功能损伤,且人参皂苷Rg1与Rg3联合使用表现为协同作用。     

HPLC法测定人参皂苷Rg3、Rh1的含量

目的：建立人参发酵品中人参皂苷Rh1、Rg3的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定,色谱条件：ODS色谱柱（4.6 mm ×250 mm,5μm）;检测波长203 nm;流动相（Rh1）：乙腈-水（26.5：73.5）,流动相（Rg3）：乙腈-0.05％磷酸（37：63）;柱温30℃,流速1.0 mL/min。结果人参皂苷Rh1的含量测定线性范围0.1~1.1μm,相关系数r＝0.9998,平均加样回收率96.90％,RSD 2.67％。人参皂苷Rg3的含量测定线性范围0.4~3.0μm,相关系数为r＝0.9997,平均加样回收率98.56％,RSD 2.51％。结论本方法检测灵敏度高,检测结果可靠。     

抗人参皂苷Rg3抗血清的制备

目的:通过构建人工抗原制备抗人参皂苷Rg3的特异性抗血清.方法:采用高碘酸盐氧化法将Rg3与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)共价偶联,分别合成免疫抗原Rg3-BSA和包被抗原Rg3-OVA.用合成的Rg3-BSA免疫家兔,制得抗人参皂苷Rg3的特异性抗血清,并通过酶联免疫方法(ELISA)对抗血清进行鉴定.结果与结论:人工抗原Rg3-BSA制备成功,由其所得抗血清的效价为1:51 200,交叉反应率低于3%,具有很强的特异性.     

人参皂苷Rg3对大鼠脑胶质瘤GFAP,Vimentin表达的影响

目的：观察人参皂苷Rg3对大鼠C6胶质瘤胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、波形蛋白（Vimentin）表达的影响,探讨人参皂苷Rg3抗胶质瘤作用机制.方法：制备大鼠脑C6胶质瘤模型,实验分为人参皂苷Rg3溶媒混合物治疗组,溶媒组,生理盐水组,在接种细胞模型建立2wk后,人参皂苷Rg3溶媒混合物治疗组给予人参皂苷Rg3,4wk后处死大鼠并观察肿瘤形成情况,进行GFAP,Vimentin免疫组织化学检测并分析组间差异.结果：免疫组织化学染色显示GFAP,Vimentin在各组均表达.溶媒组和生理盐水组GFAP表达面密度值分别为（0.12±0.01）,（0.11±0.01）;光密度值分别为（692.80±146.38）,（647.54±127.62）.应用人参皂苷Rg3后,GFAP面密度值和光密度值表达明显增强,分别为（0.24±0.02）,（882.80±150.67）,差异具有统计学意义（P〈0.01）;溶媒组和生理盐水组Vimentin表达面密度值分别为（0.19±0.02）,（0.20±0.01）,光密度值分别为（792.80±131.28）,（817.54±137.62）.应用人参皂苷Rg3后,Vimentin面密度值和光密度值表达明显减弱,分别为（0.10±0.01）,（682.31±126.38）,差异具有统计学意义（P〈0.01）.而溶媒组与生理盐水组之间GFAP,Vimentin面密度值与光密度值表达差异无统计学意义.结论：人参皂苷Rg3可能是通过抑制脑胶质瘤Vimentin的表达,同时增强GFAP的表达以起到抗肿瘤的作用.     

人参皂苷Rg3剂型的研究进展

人参皂苷Rg3作为人参中的有效活性成分,抗肿瘤作用明显,能有效抑制肺癌、胃癌、肝癌、肠癌和乳腺癌的发展,提高机体免疫力.人参皂苷Rg3单体水溶性差、口服吸收慢、消除快、血药浓度和生物利用度低,因此如何克服其溶解度低,改善其生物利用度成为研究的重要方向.本文通过查阅相关文献,综述了人参皂苷Rg3的剂型研究.     

人参皂苷Rg1对大鼠血管球囊损伤后原癌基因c-myc表达的影响

目的 观察人参皂苷Rg1( Rg1)对大鼠颈动脉球囊损伤后原癌基因c-myc表达的影响,补充说明Rg1对球囊损伤所致血管狭窄形成的防治机制.方法 建立大鼠颈总动脉球囊损伤模型,制模后随机分为假手术组、模型组、Rg1低剂量(4 mg/kg)组和Rg1高剂量(16 mg/kg)组.制模次日腹腔注射给药,模型组及假手术组给予等体积生理盐水,连续给药14d后取损伤侧颈总动脉,行H.E.染色并测量管腔面积(Lumen area,LA)以判定血管腔狭窄程度;采用实时荧光定量RT-PCR (real-time RT-PCR)法检测管壁c-myc mRNA的表达.结果 颈总动脉球囊损伤模型组大鼠血管腔面积较假手术组明显狭窄(P＜0.01).Rg1低剂量及高剂量均明显改善球囊损伤所致的颈动脉狭窄,使球囊损伤后狭窄的血管腔面积增大(P＜0.05);Rg1高剂量显著下调损伤血管壁的c-myc mRNA表达(P＜0.01).结论 Rg1能减轻球囊损伤所致大鼠颈动脉狭窄,可能与其下调c-myc基因的表达有关.     

人参皂苷Rg3对胃癌肝转移患者血清VEGF的影响

胃癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,肝转移发 生率高,是影响预后的主要因素之一。肿瘤血管生 成是胃癌生长与转移的重要条件,需要多种因素调 节[1],而血管内皮细胞生长因子（VEGF）是目前已知 最强的直接作用于血管内皮细胞的生长因子,与肿 瘤的复发、转移及预后密切相关[2]。人参皂苷Rg3是 一种人参二醇类四环三萜皂苷,分子式 C42H72O13, 分子量 785.02,为我国自主开发的新型重组人血管 内皮抑素,具有多靶点抗肿瘤血管生成作用。本研 究以人参皂苷Rg3和（或）化疗治疗胃癌肝转移患者 56例,观察患者血清VEGF水平变化,现将结果报道 如下。     

人参皂苷Rg1对异氟醚诱导caspase-3活化的影响

目的 探讨人参皂苷Rg1对异氟醚诱导caspase-3活化的影响及其机制。 方法 通过培养人神经胶质瘤细胞(H4 naïve cell)和稳定转染APP基因的细胞(H4-APP cell),给予25μmol/L人参皂苷Rg1预处理12h或者24h后接受异氟醚麻醉。采用蛋白免疫印迹法检测细胞凋亡效应蛋白caspase-3活化程度,利用化学发光法检测5'-三磷酸腺苷(adenosine-5'-triphosphate,ATP)水平的变化,流式细胞仪观察线粒体通透性转运孔(mitochondrial permeability transition pore,mPTP)的开放程度。 结果 给予25μmol/L人参皂苷Rg1预处理12h,H4 naïve细胞及H4-APP细胞的caspase-3活化程度,ATP水平及mPTP开放程度均与异氟醚处理组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。延长人参皂苷Rg1预处理时间至24h,H4 naïve细胞及H4-APP细胞的caspase-3活化程度,ATP水平及mPTP开放程度均与异氟醚处理组差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 人参皂苷Rg1可能通过保护线粒体功能降低异氟醚诱导caspase-3的活化程度。     

Ginsenoside Rg1 Attenuates Isoflurane-induced Caspase-3 Activation via Inhibiting Mitochondrial Dysfunction

Objective The inhalation anesthetic isoflurane has been shown to induce mitochondrial dysfunction and caspase activation, which may lead to learning and memory impairment. Ginsenoside Rg1 is reported to be neuroprotective. We therefore set out to determine whether ginsenoside Rg1 can attenuate isoflurane-induced caspase activation via inhibiting mitochondrial dysfunction. Methods We investigated the effects of ginsenoside Rg1 at concentrations of 12.5, 25, and 50 μmol/L and pretreatment times of 12 h and 24 h on isoflurane-induced caspase-3 activation in H4 na?ve and stably transfected H4 human neuroglioma cells that express full-length human amyloid precursor protein (APP) (H4-APP cells). For mitochondrial dysfunction, we assessed mitochondrial permeability transition pore (mPTP) and adenosine-5’-triphosphate (ATP) levels. We employed Western blot analysis, chemiluminescence, and flowcytometry. Results Here we show that pretreatment with 50 μmol/L ginsenoside Rg1 for 12 h attenuated isoflurane-induced caspase-3 activation and mitochondrial dysfunction in H4-APP cells, while pretreatment with 25 and 50 μmol/L ginsenoside Rg1 for 24 h attenuated isoflurane-induced caspase-3 activation and mitochondrial dysfunction in both H4 na?ve and H4-APP cells. Conclusion These data suggest that ginsenoside Rg1 may ameliorate isoflurane-induced caspase-3 activation by inhibiting mitochondrial dysfunction. Pending further studies, these findings might recommend the use of ginsenoside Rg1 in preventing and treating isoflurane-induced neurotoxicity.     

人参皂甙Rg3抗肿瘤作用研究进展

人参皂甙Rg3作为中药抗肿瘤药物具有诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤生长,抗肿瘤细胞黏附、侵袭和转移,抑制肿瘤新生血管形成作用;其抗肿瘤浸润、转移作用与人参皂甙Rg3抑制细胞内Ca2+浓度的升高,降低细胞的侵袭能力有关。Rg3与化疗药物联合应用具有增效减毒作用,可逆转肿瘤细胞的多药耐药性,提高机体免疫力,延长生存期,改善患者生活质量。     

Caspase-3和Fas在上皮性卵巢癌中的表达

①目的检测Caspase-3和Fas在正常卵巢组织、良性上皮性卵巢肿瘤及上皮性卵巢癌组织中的表达,分析其与临床病理特征的关系。②方法利用免疫组织化学方法检测30例正常卵巢组织、30例良性上皮性卵巢肿瘤和60例上皮性卵巢癌中Fas和Caspase-3的表达。③结果正常卵巢组织中Caspase-3和Fas表达显著高于上皮性卵巢癌,差异有统计学意义（P〈0.05）。上皮性卵巢癌组织中,随着病理分级和临床分期的增高,Fas和Caspase-3的表达逐渐降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。Caspase-3和Fas的表达呈正相关（r=0.702,P〈0.05）,并具有良好的共位性,Fas表达高的组织和区域,Caspase-3也相对的高表达。④结论 Caspase-3和Fas在上皮性卵巢癌中表达下调,且二者具有相关性。     

人参皂甙Rg3联合槐耳颗粒对免疫抑制小鼠的免疫调节作用

目的：探讨人参皂甙Rg3联合槐耳颗粒对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法实验小鼠随机分为正常对照组、环磷酰胺模型组、人参皂甙Rg3组以及联合用药组（人参皂甙Rg3＋槐耳颗粒）。正常对照组腹腔注射生理盐水,其余各组注射环磷酰胺建立免疫低下模型。正常对照组与模型组每日灌胃生理盐水,人参皂甙Rg3组每日灌胃200mg／kg人参皂甙Rg3,联合用药组每日灌胃100mg／kg人参皂甙Rg3和900mg／kg槐耳颗粒,7d后测定小鼠免疫功能。结果与模型组比,人参皂甙Rg3组及联合用药组的脾指数、胸腺指数、吞噬指数、血清溶血素含量、淋巴细胞转化率明显提高,联合用药组效果更显著。结论人参皂甙 Rg3联合应用槐耳颗粒可改善免疫抑制小鼠的免疫功能,两种药物有一定的协同辅助作用。     

健心丹中人参皂苷Rg1的含量测定

目的：测定健心丹中人参皂苷Rg1的含量。方法：采用薄层扫描法进行测定。结果：人参皂苷Rg1在2．10μg～12．60μg间有良好的线性关系，回收率为97．10％，RSD为2．75％。结论：本法灵敏、可靠，回收率好，精密度高，结果准确。     

人参皂甙Rg3对免疫功能的影响

对人参皂甙Ｒｇ３的免疫功能进行了实验研究,结果表明：人参皂甙Ｒｇ３能明显提高小鼠碳粒廓清速率、免疫器官重量、血清溶血素含量、脾淋巴细胞转化和ＮＫ活性,其结果均具有显著性差异（Ｐ＜０．０５）,表明人参皂甙Ｒｇ３具有提高免疫功能的作用。     

薄层扫描法测定乳癖消片中人参皂苷Rg1的含量

目的研究乳癖消片的质量控制指标.方法采用薄层扫描法对乳癖消片中主要有效成分人参皂苷人Rg1的含量进行测定.结果方法简单,灵敏,重复性好.结论该方法可以用于乳癖消片的质量控制.     

人参皂甙Rg3对荷宫颈癌裸鼠血管生成的抑制作用

目的:探讨人参皂甙Rg3(简称Rg3)对人宫颈癌裸鼠模型中肿瘤的生长及其血管生成的影响。方法:人宫颈癌HeLa细胞株接种于14只雌性裸鼠,随机均分为2组:①对照组:0.5 m l生理盐水灌胃;②人参皂甙Rg3组:0.5 m l浓度为5 mg/kg人参皂甙Rg3灌胃;用药5周,动态监测肿瘤的重量和体积。肿瘤组织免疫组化染色,计数瘤内微血管密度(MVD)。结果:Rg3组裸鼠生存质量好,毒副反应未增加,抑瘤效果持久而稳定,肿瘤生长缓慢;肿瘤组织CD31表达明显下降,MVD明显低于对照组(P<0.01)。结论:Rg3能抑制宫颈癌细胞生长,降低肿瘤MVD,抑制宫颈癌肿瘤血管生成。