组织芯片技术检测人睾丸基因TDRG1在睾丸肿瘤组织中的表达

目的:探讨人睾丸基因TDRG1在睾丸肿瘤组织中的蛋白表达及其病理学意义。方法:运用组织芯片技术、免疫组化法检测人睾丸特异基因TDRG1在睾丸肿瘤组织和正常睾丸组织中的表达。结果:15例正常人睾丸对照组中11例(73.3%)TDRG1蛋白表达为阳性;26例精原细胞瘤中7例(26.9%)TDRG1蛋白表达为阳性,7例畸胎瘤中4例(57.1%)TDRG1蛋白表达为阳性。而12例胚胎癌中10例(83.3%)TDRG1蛋白表达为阳性,10例卵黄囊瘤中8例(80.0%)TDRG1蛋白表达为阳性。精原细胞瘤实验组与正常人睾丸对照组相比较,两组间具有极显著性差异(P<0.01)。畸胎瘤实验组与正常人睾丸对照组相比较,两组间具有显著性差异(P<0.05)。而胚胎癌组和卵黄囊瘤组与正常人睾丸对照组相比较,没有显著性差异(P>0.05)。结论:TDRG1蛋白在精原细胞瘤和畸胎瘤的表达水平较正常对照睾丸组织显著降低,TDRG1可能为候选的抑癌基因。     

应用组织芯片研究HRG-1基因在前列腺癌和前列腺增生组织中的表达

目的 观察HRG-1基因在前列腺增生和前列腺癌组织的表达,探讨HRG-1作为肿瘤标志物的可能性.方法 应用原位杂交法,检测含有前列腺癌组织（83例）和前列腺增生组织（95例）的组织芯片上HRG-1 mRNA的表达.结果 前列腺腺癌标本中有57例为HRG-1阳性表达,而且大部分为强阳性,阳性率为68.68% 前列腺增生组织中12例表达阳性,阳性率仅为12.63%.HRG-1 mRNA在前列腺癌组织和前列腺增生组织中的表达具有显著差异（P〈0.01）.而在癌组织与癌旁组织的比较中,55例癌旁及正常前列腺组织均为阴性表达,HRG-1 mRNA在癌组织的表达明显高于癌旁及正常组织（P〈0.01）.结论 HRG-1在前列腺癌组织表达水平的特异性升高,提示HRG-1基因有可能作为一种新的肿瘤标志物用于前列腺肿瘤的诊断.     

MTS1/p16基因在原发性胆囊癌中的表达及临床意义

ｐ16基因又称多肿瘤抑制基因,是新近发现的肿瘤抑制基因,其在许多肿瘤细胞系和肿瘤组织中存在缺失和点突变。ｐ16基因失活与多种肿瘤的发生相关,但目前有关ｐ16基因在原发性胆囊癌中表达的研究甚少。本研究采用免疫组化方法检测了ｐ16基因在原发性胆囊癌及慢性胆囊炎组织中的表达,以探讨ｐ16基因与胆囊癌的发生、发展及生物学行为之间的关系。1　材料与方法38例胆囊癌组织及20例慢性胆囊炎组织均取自我院外科1992年至1997年手术切除标本,10%福尔马林固定,石蜡包埋切片。免疫组化染色采用ＳＰ法。一抗为兔抗人ＭＴＳ1/ｐ16多克隆抗体,由美国…     

利用组织芯片研究Rb基因在原发性肝细胞肝癌中的表达

目的：研究原发性肝细胞肝癌（HCC）中Rb基因的表达，方法：利用组织芯片技术和免疫组织化学技术（SP法）检测40例HCC有其相应癌旁，远癌正常组织中Rb蛋白的表达情况。结果：40例原发性HCC患者标本中，肿瘤组织中Rb蛋白表达缺失者有17例，癌旁组织中有4例，在远癌 正常组织有1例，HCC肿瘤组织中Rb蛋白缺失率显著高于相应癌旁及远癌正常组织（P＜0．05），Rb蛋白表达的缺失与肿瘤的大小，病理学分级无统计学相关性（P＞0．05），结论：HCC的发生，发展与Rb蛋白的缺失可能有关，组织芯片是一种可高效进行肿瘤分子病理研究的技术平台。     

KiSS-1基因及其受体在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨人类转移抑制基因KiSS-1及其受体hOT7T175在乳腺癌中的表达情况及临床意义。方法 以逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测40例癌组织和癌旁正常组织中KiSS-1 mRNA和hOT7T175 mRNA的表达。结果 40例乳腺癌组织中，17例（42．5％）KiSS-1基因表达阳性，10例（25％）hOT7T175基因表达阳性；正常组织中29例（72．5％）KiSS-1基因表达阳性,20例（50％）hOT7T175基因表达阳性。KiSS-1基因和hOT7T175基因失表达与临床分期、肿瘤大小等均无显著相关性，而KiSS-1基因在淋巴结阴性者表达阳性率为63．6％，阳性者仅为16．7％。两者差异有统计学意义（P＜0．01）。结论 KiSS-1基因失表达与乳腺癌的淋巴结转移密切相关，提示该基因的表达可能是乳腺癌中一个重要的监控淋巴结转移的生物学标志。     

FAP-1和RAC-1在胆囊癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨Fas相关磷酸酯酶1（FAP-1）和RAC-1在胆囊癌中的表达及其与胆囊癌侵袭转移之间的关系.方法 应用免疫组化SP技术,检测30例胆囊癌组织中FAP-1和RAC-1的表达.分析其与胆囊癌侵袭转移之间关系.结果 30例胆囊癌组织中FAP-1和RAC-1的表达与胆囊癌的侵袭转移能力密切相关,FAP-1和RAC-1的表达具有高度协同性.结论 FAP-1和RAC-1的表达能反映胆囊癌的侵袭转移能力,联合检测两种蛋白在胆囊癌组织中的表达,可以更准确判断胆囊癌的恶性程度和生物学行为.     

Shh和Ptch在胆囊癌组织中的表达及其意义

目的 研究表明,Shh和Ptch是Hh传导通路的核心,消化系肿瘤中Hh通路的高度激活状态与消化系肿瘤的发生相关.本研究检测人胆囊腺癌标本中Shh和Ptch的表达,并探讨其意义.方法 采用免疫组化SP法对41例胆囊癌、21例胆囊腺瘤和20例正常胆囊组织中Shh和Ptch基因蛋白进行检测.结果 41例胆囊癌组织标本中Shh的阳性表达率为75.6%(31/41),Ptch的阳性表达率为78.0%(32/41).Shh和Ptch染色主要位于胆囊癌细胞的胞质和胞膜.20例正常胆囊组织中,Shh的阳性表达率为5%(1/20),Ptch的阳性表达率为10%(2/20).21例胆囊腺瘤组织中Shh的阳性表达率为4.7%(1/21),Ptch的阳性表达率为9.6%(2/21),各组间Shh和Ptch阳性表达率差异均有统计学意义(P＜0.001),而在不同性别、不同年龄组(年龄≥60岁及＜60岁)、不同病理组织学分级、Nevin不同分期、组织学不同分化程度、有无淋巴结或远处转移、有无伴发胆囊结石组间的Shh和Ptch阳性表达率表达差异均无统计学意义(P＞0.05).胆囊癌组织中Shh阳性表达率为75.6%与Ptch阳性表达率为78.0%之间存在显著正相关(r=0.72,P＜0.01).结论 原发性胆囊癌的发生可能与Hedgehog-Gli信号通路的异常活动密切相关.     

组织芯片检测前列腺癌中BRG1表达的研究

目的:探讨前列腺癌组织中BRG1基因的表达情况及临床病理意义。方法:运用组织芯片技术、免疫组化EnV ision法检测37例前列腺癌[其中9例中分化腺癌(G leason评分5~7分),28例低分化腺癌(G leason评分8~10分)]、13例前列腺上皮内瘤、14例良性前列腺增生组织中BRG1的表达和分布情况。结果:BRG1在前列腺癌、前列腺上皮内瘤和良性前列腺增生组织中阳性表达率分别为81.08%(30/37)、38.46%(5/13)、14.28%(2/14)。就BRG1阳性表达率而言,前列腺癌组织与前列腺上皮内瘤、前列腺增生组织比较差异均有显著性(P<0.05),前列腺上皮内瘤与前列腺增生组织比较、中分化腺癌与低分化腺癌比较差异均无显著性(P>0.05)。结论:BRG1蛋白在前列腺癌中高表达,对前列腺癌的发生、发展可能起重要作用。组织芯片技术具有高信息量、简捷、快速、高效、成本低、重复性好等优点,在病理学领域中具有重要的实际意义和广阔的应用前景。     

NADPH氧化酶1在胆囊癌组织中的表达及临床意义

[摘 要] 目的 探讨NADPH氧化酶1（NOX1）在胆囊癌组织中的表达及其临床意义。方法 运用实时荧光定量PCR（qPCR）及免疫组化分别检测正常胆囊组织及胆囊癌组织中NOX1 mRNA及蛋白表达量,并分析其表达量与胆囊癌患者临床病理学资料及生存预后之间的关系。结果 （1）qPCR及免疫组化显示,胆囊癌组织中NOX1 mRNA及蛋白表达量较正常胆囊组织显著升高,差异具有统计学意义（均P < 0.05）;（2）胆囊癌组织中NOX1蛋白表达水平与患者有无吸烟、胆囊结石、血清CA19-9水平、淋巴结转移、肿瘤分级及TNM分期相关（均P < 0.05）;（3）淋巴结及远处转移、TNM分期、手术方式及NOX1 蛋白表达水平是影响胆囊癌患者预后的独立危险因素。结论 NOX1在胆囊癌组织中表达显著升高,有望成为胆囊癌恶性生物学行为的重要指标。     

黏蛋白1在胆囊癌中的表达和意义

目的 探讨黏蛋白1（MUC1）在原发性胆囊癌组织中的表达及其在胆囊癌诊断和免疫治疗中的意义。方法 采用免疫组化方法检测42例原发性胆囊癌组织和17例正常胆囊组织中MUC1的表达。结果 MUC1在胆囊癌组织中的阳性表达率为76．19％，明显高于正常胆囊组织（29.41％），两组存在统计学差异（P〈0．05）。MUC1在胆囊癌组织中阳性表达率与胆囊癌组织病理类型、组织学分化、淋巴结转移及Nevin分期也有相关关系。但与有无合并胆囊结石无相关关系。结论 MUC1可作为胆囊癌患者预后评价指标，有可能作为肿瘤微转移的诊断及免疫治疗的靶抗原。     

KiSS-1在甲状腺乳头状癌中的表达及其临床意义

目的通过检测KiSS-1蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达情况,探讨其在甲状腺乳头状癌中的表达及其意义。方法选取32例临床确诊的甲状腺乳头状癌患者癌组织及其癌旁组织病理蜡块标本,采用免疫组化检测KiSS-1蛋白的表达,并分析其与甲状腺乳头状癌临床病理特征的关系。结果 KiSS-1蛋白主要表达于细胞膜与细胞质中。32例患者癌旁组织中KiSS-1蛋白表达均为阳性(100%),在癌组织中表达减少或缺失,11例(34.4%)表达阳性,21例(65.6%)表达阴性,其差异有统计学意义(χ2=31.256,P0.001)。KiSS-1蛋白在癌组织中表达的平均A值为119.5952,在癌旁组织中为174.8050,差异有统计学意义(t=34.429,P0.001)。癌组织中KiSS-1蛋白的表达与患者性别(P=0.618)及年龄(P=0.061)均无关,而与肿瘤TNM分期有关(P=0.034)。KiSS-1蛋白在有淋巴结转移的癌组织中和无淋巴结转移的癌组织中的表达阳性率分别为100%(4/4)和25.0%(7/28),差异有统计学意义(P=0.003)。结论 KiSS-1蛋白在甲状腺乳头状癌中表达减少或缺失,可能参与肿瘤的发生、侵袭和转移。     

正常人胆囊组织基因表达谱的研究

目的：建立正常人胆囊组织基因表达目录。方法：采用含17000cDNA克隆的基因微矩阵与2例正常胆囊之cDNA杂交，取基因表达平均值，分析胆囊的基因表达谱。结果：正常胆囊有11047条基因表达，其前10位高表达基因与平滑肌收缩及物质转运有关。在前200位高表达的基因中，离子通道和转运蛋白、蛋白翻译和合成类以及发育相关类基因占多数。在胆囊所有表达的基因中，12、2、21号染色体表达的数目最多。另外，21条胆石病候选基因在胆囊中有表达，其中主要为脂类代谢相关基因。两条胆囊特异性表达基因：NPC1L1、SLC17A2。结论：胆囊高表达的基因可能与胆囊收缩和胆汁深缩有关，胆囊不仅参与机体的消化功能，还参与调节脂类代谢平衡。     

Identification of Novel Gene Expression in Healing Fracture Callus Tissue by DNA Microarray

Fracture healing requires controlled expression of thousands of genes. Only a small fraction of these genes have been isolated and fewer yet have been shown to play a direct role in fracture healing. The purpose of this study was threefold: (1) to develop a reproducible open femur model of fracture healing that produces consistent fracture calluses for subsequent RNA extraction, (2) to use this model to determine temporal expression patterns of known and unknown genes using DNA microarray expression profiling, and (3) to identify and validate novel gene expression in fracture healing. In the initial arm of the study, a total of 56 wild-type C57BL/6 mice were used. An open, stabilized diaphyseal femur fracture was created. Animals were killed at 1, 5, 7, 10, 14, 21, and 35 days after surgery and the femurs were harvested for analysis. At each time point, fractures were radiographed and sectioned for histologic analyses. Tissue from fracture callus at all stages following fracture yielded reproducibly large amounts of mRNA. Expression profiling revealed that genes cluster by function in a manner similar to the histologic stages of fracture healing. Based on the expression profiling of fracture tissue, temporal expression patterns of several genes known to be involved in fracture healing were verified. Novel expression of multiple genes in fracture callous tissue was also revealed including leptin and leptin receptor. In order to test whether leptin signaling is required for fracture repair, mice deficient in leptin or its receptor were fractured using the same model. Fracture calluses of mice deficient in both leptin or leptin receptor are larger than wild-type mice fractures, likely due to a delay in mineralization, revealing a previously unrecognized role of leptin signaling in fracture healing. This novel model of murine fracture repair is useful in examining both global changes in gene expression as well as individual signaling pathways, which can be used to identify specific molecular mechanisms of fracture healing.     

肿瘤坏死因子及其受体在胆囊癌及结石性胆囊炎中的表达

目的　研究肿瘤坏死因子 (TNF)及其受体 (TNFR)在胆囊粘膜单纯性增生到胆囊癌的发展过程中的表达 ,并探讨其在胆囊癌发生、发展中的意义。方法　采用原位杂交和免疫组织化学SP法染色检测胆囊结石引起的胆囊粘膜单纯性增生、不典型性增生及胆囊癌的TNFmRNA、TNF蛋白及TNFR的表达。结果　①TNFmRNA在胆囊粘膜单纯性增生、不典型性增生和胆囊癌上皮细胞或癌细胞的表达阳性率分别为 0、2 0 %和 90 %(P<0 .0 5 ) ,在高倍视野下计数的阳性细胞数分别为 0个、(3.2 5± 1.89)个和 (12 .2 8± 4 .99)个 (P<0 .0 1) ;②TNFmRNA在胆囊粘膜单纯性增生、不典型性增生及胆囊癌组织中单核细胞 (mononuclearcell,MNC)的表达阳性率分别为 15 %、85 %和 90 % (P<0 .0 5 ) ,其阳性细胞数分别为 (4 .85± 1.5 0 )个、(6 .0 0± 2 .71)个和 (9.33± 3.0 7)个 (P<0 .0 5 ) ;③在胆囊癌组织中 ,癌细胞及MNC表达TNFmRNA随肿瘤进展而增多 ,Ⅰ～Ⅲ期及Ⅳ～Ⅴ期胆囊癌中呈阳性表达的癌细胞数分别为 (9.13± 4 .39)个和 (14 .80± 4 .0 2 )个 (P<0 .0 1) ,MNC数分别为 (7.13± 2 .5 3)个和(11.10± 2 .2 3)个 ,其差异有显著性意义 (P<0 .0 5 ) ;④在胆囊癌组织中 ,癌组织及MNC表达TNFmRNA随肿瘤直径的增大而增高 ,直径 ≥2 .0cm及 <2     

p16、Rb基因表达与原发性胆囊癌病理生物学行为及预后的关系

目的：探讨p16,Rb基因在原发性胆囊癌中的表达及其与病理生物学行为和预后的关系。方法：采用免疫组化（SP）法对56例胆囊癌进行p16和Rb蛋白的定位观察。结果：p16和Rb基因在原发性胆囊癌中的表达阳性率分别为46．3％和71．4％，显著低于在胆囊良性病变中的表达（P＜0．05），Rb表达与胆囊癌的病理组织学分级，组织类型，浸润，转移和预后无明显关系（P＞0．05），而p16与胆囊癌的浸润，转移和预后有明显相关性（P＜0．05），p16和Rb基因蛋白表达存在着明显的互补性。结论：p16和Rb基因蛋白丢失是胆囊癌发生，发展中的重要分子事件，与细胞周期G1－S期的负反馈调节环路中断关系密切，p16蛋白表达可作为评估胆囊癌病理生物学行为及预后的参考指标。     

结肠癌组织中Shh和Gli1基因的表达及临床意义

目的探讨Shh和Gli1基因在结肠癌组织中的表达及意义。方法应用RT-PCR方法和免疫组织化学对38例结肠癌手术切除的标本进行Shh和Gli1基因表达检测,评估Shh和Gli1基因表达与结肠癌临床病理的关系。结果癌组织的Shh和Gli1基因呈高表达,与癌旁组织比较,两者有显著性差异;Shh和Gli1基因表达强度与癌的分期密切相关,早期结肠癌的表达强度明显高于进展期癌。结论 Shh信号通路异常的活性状态有可能参与结肠癌的发生过程。Shh和Gli1基因检测对评估结肠癌的分期和预后具有重要意义。     

肺癌患者金属蛋白酶组织抑制因子—1基因表达的研究

目的了解金属蛋白酶组织抑制因子-1在肺癌发展过程中的作用。方法术中取19例肺癌患者癌组织及正常肺组织，提取组织总核糖核酸(RNA)，用逆转录共扩增定量多聚酶链反应(PCR)方法测定金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达水平。结果肺癌组织金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达水平明显高于正常肺组织(P＜0.01)，肺癌患者金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达水平与肿瘤大小呈负相关(r=-0.467，P＜0.05)；与肿瘤组织学类型无关。结论金属蛋白酶组织抑制因子-1在阻止肺癌的浸润、转移中可能起重要作用。     

大鼠下丘脑KiSS-1与GnRH mRNA的表达

目的:观察不同发育阶段雄性大鼠下丘脑KiSS-1和GnRH mRNA表达,探讨KiSS-1在性发育的启动和正常生殖功能调节中的作用。方法:雄性SD大鼠分为幼年期(12d)、未发育期(20d)、发育早期(35d)、性发育期(45d)和性成熟期(75d)共5组,每组6只,分离下丘脑,采用RT-PCR和实时定量-PCR的方法检测各发育阶段大鼠下丘脑KiSS-1和GnRH mRNA的水平。化学发光法检测各发育阶段大鼠血清睾酮水平。结果:大鼠随发育过程KiSS-1 mRNA转录水平逐渐升高,到性发育期水平最高,成年期略下降,但保持相对较高水平。未发育期、发育早期、性发育期和性成熟期大鼠KiSS-1 mRNA水平分别是幼年期的1.7、2.1、3.5、2.0倍。GnRH与KiSS-1表达变化呈正相关(r=0.905,P<0.05),GnRH激活晚于KiSS-1。GnRH在性发育期转录水平最高,未发育期、发育早期、性发育期和性成熟期表达水平分别是幼年期的1.1、1.9、2.4、1.9倍。大鼠在性发育期睾酮水平较发育前显著升高,性成熟期水平最高。结论:KiSS-1表达与GnRH表达具有正相关性,其可能参与GnRH的调控,与青春期启动和生殖功能调节有关。