人参、银杏叶提取物对Aβ1-40诱导的大鼠原代神经元凋亡的保护作用

目的:观察β-淀粉样蛋白1-4(Aβ1-40)对原代神经元的损伤以及人参、银杏叶提取物(extracts of ginseng and ginkgobiloba,EGGB)的保护作用.方法:以Aβ1-40诱导大鼠原代神经元建立Aβ毒性损伤细胞模型,结合Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术、MTT比色法、透射电镜及Western blot法,确定Aβ1-40的造模浓度与时间,检测EGGB对原代神经元细胞增殖活性、凋亡率、超微结构和细胞caspase-3蛋白表达的影响.结果:1 μmol·L-1Aβ1-40作用24 h可诱导原代神经元凋亡率显著升高(P<0.01);EGGB(5,50 mg·L-1)可明显增强细胞增殖活性(P<0.05);EGGB(50 mg·L-1)可明显抑制神经元凋亡、改善细胞超微结构、抑制caspase-3的过度表达(P<0.05,P<0.01).结论:Aβ1-40可明显诱导体外培养的原代神经元凋亡,EGGB则有较好的神经保护作用,可有效抑制神经元凋亡,这种作用可能是与其改善神经元及亚细胞器结构、提高细胞增殖活性、抑制caspase-3的过度表达等有关.     

三七皂苷Rg1对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用及机制探讨

目的探讨三七皂苷R g1对局灶性脑缺血-再灌注损伤大鼠大脑皮质中脑源性神经营养因子(BDNF)阳性蛋白的水平和阳性神经元数目是否具有上调作用。方法选取成年雄性SD大鼠60只,随机分为脑缺血-再灌注模型组、三七皂苷R g1高、中、低剂量(200、100、50 m g/kg)组和阳性对照(尼莫地平,1 m g/kg)组,采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型,各组ig给药并分别于给药后1、3、7 d随机取4只大鼠,以灌注法取脑组织,冰冻法切片,免疫组织化学ABC法染色,用高清晰度彩色病理图文报告分析系统测量、分析各组大鼠大脑皮质中BDNF阳性蛋白的水平和阳性神经元数目的变化,并观察大鼠脑缺血-再灌注后的神经功能缺失症状。结果与模型组相比,三七皂苷R g1高、中、低剂量均能明显改善脑缺血-再灌注的神经功能缺失症状,并能上调大鼠脑缺血-再灌注损伤的大脑皮质中BDNF阳性蛋白的水平和阳性神经元数量(P<0.05);各剂量的作用强于或相当于阳性对照。结论三七皂苷R g1能上调BDNF阳性蛋白的表达,通过BDNF对脑缺血-再灌注神经元损伤所起的保护作用,从而发挥其对脑缺血的治疗作用。     

心脑舒通胶囊对氧糖剥夺/复氧星形胶质细胞神经营养因子分泌的影响及对神经元的保护作用

[目的]探讨心脑舒通胶囊对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)处理的星形胶质细胞(C8-D1A)神经生长因子分泌的影响,以及研究心脑舒通药物处理的OGD/R胶质细胞条件培养液对神经元细胞(Neuro-2A)的保护作用。[方法] CCK-8检测心脑舒通对正常培养和OGD/R胶质细胞活力的影响;酶联免疫吸附(ELISA)法检测心脑舒通对OGD/R胶质细胞的脑源性神经营养因子(BDNF)、胶质源性神经营养因子(GDNF)、睫状神经营养因子(CNTF)释放的影响;CCK-8检测心脑舒通处理的胶质细胞条件培养液对OGD/R神经元细胞活力的影响。[结果] 1)心脑舒通对正常培养的胶质细胞活力无显著影响,但可以提高OGD/R后胶质细胞的增殖活力。2)0.1μg/mL心脑舒通可以显著提高OGD/R胶质细胞BDNF的释放。3)0.1μg/mL心脑舒通药物处理的胶质细胞条件培养液可提高OGD/R神经元的存活能力。[结论]心脑舒通对OGD/R损伤后的胶质细胞有一定保护作用,其处理后的胶质细胞条件培养液对神经元有一定的保护作用。     

丹皮酚对大鼠离体海马神经元NMDA受体的影响

目的:研究丹皮酚对大鼠海马神经元缺糖缺氧的保护作用。方法:以原代培养的新生大鼠海马神经元作为研究对象,建立缺糖缺氧损伤模型,倒置相差显微镜下进行一般形态学的动态观察,用MTT法测定神经元存活率。通过放射配基结合实验测定海马NMDA受体结合力变化。结果:丹皮酚可显著降低神经元缺糖缺氧时细胞死亡率,减弱NMDA受体结合力。结论:丹皮酚对离体培养的大鼠海马神经元缺糖缺氧具有保护作用,其作用机制与减弱NMDA受体结合力有关。     

丹皮酚对大鼠反复性脑缺血的保护作用

采用大鼠反复性短暂脑缺血再灌注模型,观察丹皮酚的抗脑缺血作用。丹皮酚100,50mg/kg,ip 7d,均能不同程度降低脑缺血引起的脑组织Ca~(2 )聚集,改善Ca~(2 )-ATPase活性,抑制超氧化物歧化酶(SOD)活性下降及丙二醛(MDA)含量增加,显示了对脑缺血的保护作用。结果表明,丹皮酚改善脑缺血作用与其抑制细胞Ca~(2 )内流及抗氧自由基作用有关。     

丹皮酚对Aβ诱导的AD模型大鼠脑细胞凋亡因子的影响及作用机理

目的:研究丹皮酚对β淀粉样蛋白(Aβ)诱导的大鼠老年痴呆症(Alzheimer disease AD)动物模型的干预作用,探讨丹皮酚对AD模型大鼠脑细胞凋亡的影响及其作用机理。方法:32只大鼠随机分为正常对照组、假手术组、Aβ诱导AD模型组和丹皮酚治疗组。动物喂养40 d后取大鼠脑组织观察其病理变化,用免疫组化染色法和原位杂交法检测大脑细胞凋亡因子P53和活化的Caspase-3以及凋亡细胞的表达水平。结果:用丹皮酚干预减轻Aβ诱导的大脑组织病理结构变化,明显抑制AD模型鼠凋亡因子P53和Caspase-3的表达,减少了凋亡细胞的产生。结论:丹皮酚能保护神经组织,具有明显的抗凋亡作用,可减缓AD的发生发展。     

丹皮酚对氧应激致HSC-LX2细胞TGF-β1及Smad4表达的影响

目的:研究丹皮酚对氧应激致肝星状细胞HSC-LX2增殖及TGF-β1、Smad4和CollagenⅠmRNA表达的影响。方法:在建立体外过氧化氢(H2O2)致HSC-LX2细胞氧应激模型基础上,MTT法检测丹皮酚对HSC-LX2细胞增殖的影响,生化检测HSC-LX2细胞内MDA含量及SOD活性,荧光定量PCR检测丹皮酚对氧应激致HSC-LX2细胞TGF-β1、Smad4和CollagenⅠmRNA表达的影响。结果:与DMSO组比较,丹皮酚呈剂量依赖性抑制H2O2诱导HSC-LX2增殖,降低细胞MDA含量并提高SOD活性,以50μmol/L浓度时最为明显(P<0.01);丹皮酚各剂量作用24 h后,HSC-LX2细胞中TGF-β1、Smad4和CollagenⅠmRNA的水平降低(P<0.01),并作用呈剂量依赖性。结论:丹皮酚预处理可下调肝星状细胞TGF-β1、Smad4 mRNA的表达,进而抑制肝星状细胞CollagenⅠ的合成,发挥抗肝纤维化作用。     

独活香豆素对Aβ所致神经元损伤的神经保护作用研究

目的:探究独活香豆素(TCA)对Aβ所致的小鼠海马神经元损伤的神经保护作用及其作用机理。方法:从胎鼠大脑海马中分离出神经元细胞,培养9 d待神经元成熟后将细胞分为正常组(control)、模型组(30 mmol/L Aβ孵育24 h)和给药组(经Aβ处理后给予不同浓度TCA处理的细胞)。MTT法和LDH法检测各组海马神经元的活性,RTPCR法检测环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)和脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达的变化,免疫组织化学染色法检测突触素-1(synapsin~(-1))、磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(p-CREB)和BDNF蛋白表达的变化。结果:孵育Aβ的海马神经元显现较强神经毒性。与模型组比较,TCA组明显增强神经细胞的存活能力,增加synapsin~(-1)的表达量,提高BDNF mRNA的表达,增强p-CREB和BDNF蛋白的表达。结论:TCA对Aβ所致的海马神经元损伤具有保护作用,此神经保护作用可能是与促进CREB的磷酸化使p-CREB表达增多,并刺激神经营养因子BDNF的生成增多有关。     

针刺的神经保护作用及BDNF信号通路活化机制

近年来,通过大量科研证实,针刺在许多神经疾病中具有保护作用。针刺的神经保护与信号通路相关,越来越多的实验证明多种内源性生物介质参与,如神经营养素(NT)家族的脑源性神经营养因子(BDNF)等。针刺可以通过表达及活化BDNF来抑制神经性退化,本研究综述近年来关于针刺神经保护作用和针刺诱导的BDNF及其信号通路激活的治疗意义。     

2-羟丙基-β-环糊精对丹皮酚的增溶作用

目的:考察不同pH条件下2-羟丙基-β-环糊精(HPCD)对丹皮酚的增溶作用及包合物的稳定常数。方法:在25℃运用相溶解度法进行增溶试验,采用紫外分光光度法测定丹皮酚的浓度。结果:随着HPCD浓度增加,丹皮酚的溶解度增加。在pH3及HPCD浓度为133.33mmol·L^-1条件下,丹皮酚与HPCD形成的包合物表观稳定常数为1425,丹皮酚的溶解度可达到10mg·mL^-1。结论:对于难溶性药物,丹皮酚是较理想的增溶剂。     

丹皮酚对糖尿病大鼠血管内皮细胞的保护作用

目的:观察丹皮酚对糖尿病大鼠血管内皮细胞的保护作用.方法:腹腔注射链脲佐菌素60 mg/kg制备糖尿病动物模型,分别以高、中、低剂量的丹皮酚对模型鼠进行灌胃,分别采用放射免疫法和ELIZA法检测各组大鼠给药前后PGI2、TXA2、ET、NO、CRP、ICAM-1、VCAM-1的变化.结果:各给药组给药前后的血糖值无明显变化,与对照组相比无显著性差异,各给药组大鼠的血清ET、TXA2、CRP、ICAM-1、VCAM-1均有所降低,其中以高剂量组最明显,与对照组相比差异显著(P＜0.05或P＜0.01);各给药组大鼠的NO稍有升高,但与对照组相比无显著性差异,各给药组大鼠的PGI2α升高,与正常对照组相比有显著性差异.结论:丹皮酚对糖尿病大鼠的血清PGI2、TXA2、ET、NO、CRP、ICAM-1、VCAM-1均有一定的改善作用,可以保护血管内皮细胞.     

丹皮酚-壳聚糖膜的制备及丹皮酚缓释性的研究

目的:探索丹皮酚-壳聚糖膜的制备方法,了解药膜的性状及体外释放规律。方法:以1∶1壳聚糖和羧甲基壳聚糖混合物作为基质,采用溶剂挥发法制备丹皮酚药膜。通过对4种不同甘油含量的膜的多种物理性质的研究来寻找最佳的制膜配方,同时以体外释放法研究药膜对丹皮酚的控释能力。结果:以1∶1的壳聚糖和羧甲基壳聚糖混合为溶质(甘油含量为2%)制备的药膜具有较理想的物理性质和药物缓释能力。结论:丹皮酚-壳聚糖膜制作工艺简单,物理性质优良,缓释效果理想。     

丹皮酚拮抗过氧亚硝基阴离子致大鼠成骨细胞凋亡的作用

目的探讨丹皮酚拮抗过氧亚硝基阴离子(ONOO-)对体外培养大鼠成骨细胞凋亡的作用。方法用改良的组织块法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞,采用淬灭流动反应方法体外制备ONOO-,以1 mm o l/L终浓度加入成骨细胞培养体系,作用30 m in后弃去,继续常规培养12 h,用Hoechst33258染色法及TUNEL法检测成骨细胞的凋亡,并以0.1 mm o l/L丹皮酚消除ONOO-(1 mm o l/L)对大鼠成骨细胞凋亡的影响。结果1 mm o l/L的ONOO-可导致大鼠成骨细胞凋亡;0.1 mm o l/L丹皮酚能拮抗ONOO-(1 mm o l/L)所引起的大鼠成骨细胞凋亡。结论丹皮酚0.1 mm o l/L在体外具有拮抗ONOO-(1 mm o l/L)致大鼠成骨细胞凋亡的作用。     

丹皮酚对四氯化碳诱导急性肝损伤小鼠的保护作用

目的研究丹皮酚对四氯化碳诱导急性肝损伤小鼠的保护作用。方法 36只小鼠随机分为空白组、对照组、模型组(10%四氯化碳,5μL/g)及丹皮酚低、中、高剂量组(50、100、150 mg/kg),每组6只。给药24 h后,测定小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6 (IL-6)水平,HE染色观察小鼠肝组织形态变化及肝损伤情况,检测小鼠肝组织半胱氨酸蛋白酶-3 (Caspase-3)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性。结果与模型组比较,丹皮酚组显著降低ALT、AST、MDA、Caspase-3活性及TNF-α、IL-6水平(P0. 05,P0. 01),改善肝组织形态学病变,提高SOD、GSH-Px、CAT活性(P0. 05,P0. 01)。结论丹皮酚对四氯化碳诱导急性肝损伤小鼠具有保护作用,其机制可能与抗脂质过氧化、减少炎症细胞因子产生、抑制肝细胞凋亡有关。     

巴戟天低聚糖对Aβ25-35致拟痴呆模型大鼠的保护作用

目的:观察巴戟天低聚糖(oligosaccharides of Morinda officinalis,OMO)对Aβ25-35致SD大鼠拟痴呆模型的影响,阐明其治疗痴呆症的药效机制.方法:采用SD大鼠双侧海马区注射Aβ25-35各10μg制备拟痴呆模型,实验设置空白对照组、假手术组、模型组、阳性药安理申组(0.125 mg·kg-1·d-1)、OMO高、低剂量组(60,20mg·kg-1 ·d-1).手术后15 d开始连续给药25 d后,采用试剂盒-酶标仪法测定脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GSH-Px)、乙酰胆碱(ACh)、乙酰胆碱酯酶(AChE)以及Na+/K+-ATPase等水平.结果:与模型组比较,各给药组大脑组织中SOD,CAT,GSH-Px活力增加,MDA含量降低(P＜0.01);各给药组乙酰胆碱水平升高,乙酰胆碱酯酶水平降低和脑能量代谢水平Na +/K+-ATPase活性升高.结论:OMO通过提高抗氧化能力、激活脑能量代谢、改善胆碱能系统损伤等作用以改善Aβ25-35致大鼠痴呆症状.     

丹皮酚对动脉粥样硬化大鼠的防治作用及其机制

目的探讨丹皮酚对动脉粥样硬化大鼠的防治作用及其机制。方法 48只SD大鼠随机分成6组(正常对照组,模型组,辛伐他汀组,丹皮酚低、中、高剂量组),高脂饮食法制备动脉粥样硬化模型。实验8周后,测定全血黏度、血浆黏度等血液流变学指标;电镜下观察心肌组织超微结构;q RT-PCR法检测心肌组织粘附分子E-选择素m RNA的表达水平。结果与正常对照组比较,模型组的全血黏度、血浆黏度及红细胞压积均显著升高(P0.05,P0.01)。心肌粘附分子E-选择素m RNA的表达水平明显升高(P0.01)。与模型组比较,丹皮酚组能有效改善全血黏度(高切、低切),血浆黏度,红细胞压积多项血液流变学指标(P0.01),降低心肌粘附分子E-选择素m RNA的表达,使心肌细胞超微结构损伤程度减轻。结论丹皮酚可以干预大鼠动脉粥样硬化的形成,其作用机制可能与改善大鼠血液流变学异常及降低粘附分子的表达有关。     

逍遥丸对皮质酮诱导小鼠抑郁样行为的干预机制※

目的:观察逍遥丸对皮质酮诱导小鼠抑郁样行为的干预作用,并探讨其分子机制。方法:将50只ICR雄性小鼠,随机分为5组:正常组、皮质酮模型组、阳性对照氟西汀组(20 mg/kg)、低剂量逍遥丸(200 mg/kg)组、高剂量逍遥丸组(600 mg/kg),通过皮下注射皮质酮诱导小鼠抑郁模型。持续35天后,采用糖水偏好实验和强迫游泳实验评价动物抑郁样行为;采用ELISA方法测小鼠血清中皮质酮含量及小鼠海马组织中脑源性神经营养因子(BDNF)的含量。结果:皮质酮可以降低糖水偏好值、增加小鼠强迫游泳的不动时间,而逍遥丸可以显著提高糖水偏好值、减少小鼠不动时间;长期注射皮质酮可增加血清皮质酮水平,降低海马组织中BDNF含量,而逍遥丸可以降低小鼠血清中皮质酮的含量并且能够提高海马组织中BDNF含量。结论:逍遥丸可以有效降低小鼠血清中皮质酮的含量并增加小鼠海马中BDNF含量,改善神经营养系统,产生抗抑郁样作用。     

红景天苷对Aβ1~40所致阿尔茨海默病模型大鼠 认知功能改善作用及机制探讨

目的:研究红景天苷对Aβ1～40海马内注射所致阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型大鼠的治疗作用并探讨其可能的影响机制。方法:Aβ1～40海马内注射制备AD大鼠模型,术后用不同剂量红景天苷(25,50,75 mg.kg-1)灌胃治疗,每日1次,共21 d。建模成功后,经Morris水迷宫评测大鼠学习记忆能力,并分别测定大鼠海马组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、核转录因子κB(NF-κB)及糖基化终末产物受体(RAGE)蛋白表达。结果:AD大鼠在定位航行试验中逃避潜伏期延长,单位时间内跨越原平台次数减少,学习记忆力受损,海马组织SOD活性明显降低,MDA含量明显增高,NF-κB,iNOS及RAGE蛋白表达明显上调。红景天苷50,75 mg.kg-1组大鼠的学习记忆受损得到显著改善(P<0.01)。与模型组相比,红景天苷50 mg.kg-1组SOD活性上调,MDA含量降低,NF-κB,iNOS及RAGE的表达均得到有效抑制(P<0.01)。结论:红景天苷可能通过综合抗氧化应激效应起到治疗阿尔茨海默病的作用。     

丹皮酚对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察丹皮酚对脑缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其作用杌埋.方法:采用大鼠大脑中动脉栓塞造成局灶性脑缺血2h再灌注22h模型,观察缺血再灌注24h后,大鼠神经功能症状评分、脑梗死体积测定、病理组织学变化,并采用分光光度法测定脑组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(CSH-Px)、丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)的含量.结果:丹皮盼能提高大鼠神经功能症状评分,缩小脑梗死体积,减轻脑缺血再灌注损伤脑组织的病理改变,提高SOD、GSH-Px、CAT的活性,减少MDA的含量.结论:丹皮酚具有保护缺血脑组织的作用,其机理可能与抗自由基损伤有关.     

香萱益神方对血管性痴呆模型大鼠神经元凋亡机制研究

目的:探讨香萱益神方治疗血管性痴呆(VD)模型大鼠认知功能作用及其对神经元凋亡机制的研究。方法:两血管阻断法建立VD大鼠模型,给予中药方香萱益神方灌胃治疗6周,分别于造模后、中药喂养6周后进行Morris水迷宫行为学检测,测试大鼠认知行为能力改变,行为学测试结束后,检测VD模型大鼠海马中海马组织脑源性神经营养因子(BDNF)表达水平的变化。结果:香萱益神方治疗6周后,血管性痴呆大鼠模型学习记忆能力得到改善,上调脑内海马组织神经营养因子水平,海马神经元凋亡率下降。结论:香萱益神方是治疗血管性痴呆的有效方剂,可以有效改善VD大鼠模型认知行为功能的障碍情况,起到减少海马神经元细胞凋亡,诱导海马神经元细胞修复的作用。香萱益神方可能是通过激活BDNF相关通路,起到保护海马神经元的作用。