代谢相关基因在先兆子痫胎盘中的表达情况分析

目的探讨细胞代谢相关基因在先兆子痫胎盘组织中的表达变化及其影响机制。方法使用含12000个与代谢、凋亡、细胞粘附、信号传导、转录因子等有关基因的cDNA表达谱芯片,检测4例重度妊娠高血压疾病子痫前期及正常的胎盘组织的基因表达谱差异,并差异表达的细胞代谢相关基因进行了Northern验证。结果4先兆子痫胎盘中同时有44种基因表达发生了变化,其中糖原磷酸化酶（GP—M）基因、瘦素（1eptin）基因、脂蛋白酯酶（LPL）基因及糖代谢相关基因（Glucose transporter）表达增强,核苷酸代谢基因（CD73）与能量代谢调节基因（Creatine kinase B）表达下降。结论多种基因表达异常与先兆子痫的病理发生有关,细胞代谢相关基因表达异常可能是血管内皮损伤的原因之一。     

凋亡及免疫激活相关基因在先兆子痫胎盘中的表达

目的：探讨细胞凋亡相关基因在先兆子痫胎盘组织中的表达谱及其影响机制。方法：采用分别包含220余种人类细胞因子相关基因或人类环境激素相关基因cDNA片段的基因芯片，检测严格配伍的先兆子痫和正常胎盘组织中基因表达谱的差异。结果：先兆子痫胎盘中与细胞增殖周期调控及凋亡相关的多种基因表达发生了变化，且大多数呈现表达增强。此外，与免疫系统激活有关的多条基因在先兆子痫胎盘中的表达也比正常胎盘高。结论：胎盘组织中多种与细胞凋亡调节有关的基因表达异常与先兆子痫的病理发生有关，而免疫系统激活也可能是其原因之一。     

应用基因芯片研究代谢相关基因在先兆子痫胎盘中的表达

目的:研究部分代谢相关基因在先兆子痫胎盘组织中的表达变化。方法:采用包含220余种人类环境激素相关基因cDNA片段的基因芯片,对经过严格配伍的正常和先兆子痫胎盘组织中基因表达谱的差异进行检测。结果:先兆子痫胎盘中与氧化还原代谢相关的基因(GenBank:U78168、X16699、D32143、AL035079、AF069668、X53463、J03746、X02317、X91247等)表达增高。另外,与激素等其它代谢相关的一些基因(如GenBank:NM_-001718、Z22535、M38180、M76665、X75252、J03258、U56725)在先兆子痫胎盘中的表达也增强。结论:胎盘内基因表达的变化与先兆子痫患者体内多种代谢改变有关。     

滋养层细胞侵入相关基因在先兆子痫胎盘中的表达

探讨与滋养层侵入有关的细胞外基质分子相关基因在先兆子痫胎盘中的表达，采用分别点样有220余种人细胞因子相关基因和人类激素相关基因cDNA片段的两款基因芯片，检测经过严格配伍的先兆子痫和正常胎盘组织的基因表达谱差异。结果显示：钙粘蛋白、胶原、整合素、选择蛋白等18种细胞外基质分子基因的表达在先兆子痫和正常胎盘组织间相差2倍以上，且全部表现为在先兆子痫胎盘中的表达增强。先兆子痫患者的胎盘组织中基质金属蛋白酶(MMP)-10、-13、-15和金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-2、TIMP-3、纤溶酶原、纤溶酶原激活物等的表达均较正常者高。提示胎盘中细胞外基质分子及其降解酶基因表达异常可能与先兆子痫的病理发生关系密切。     

细胞命运决定因子numb在先兆子痫胎盘组织中的表达及作用

目的探讨先兆子痫胎盘组织中细胞命运决定因子numbs表达情况及意义。方法获取正常妊娠胎盘组织以及先兆子痫胎盘组织,分别运用实时荧光定量PCR法、免疫印迹法、免疫组织化学法检测numbmRNA、蛋白分布及其表达水平。结果numb在以上两种胎盘组织中均有表达,且主要集中在细胞膜上表达。numb在先兆子痫组（实验组）的表达水平明显高于正常胎盘组（对照组）（P〈0．05）。结论numb参与的滋养细胞凋亡失调可能是先兆子痫的发病机制之一。     

血清学及胎盘上肿瘤坏死因子表达与子痫前期的相关性

目的研究子痫前期患者血清和胎盘组织中TNF-α的表达情况。方法血浆TNF-α测定采用放射免疫分析法,采用SP免疫组化法检测TNF-α石蜡包埋的胎盘组织,切片,HE染色,光镜观察。将制好切片置显微镜下观察。结果判定：每张切片至少观察10个高倍视野,观测胎盘绒毛滋养细胞及间质细胞TNF-α的表达。结果子痫前期患者血浆和胎盘组织中TNF-α的表达均明显的高于对照组（P〈0.05）,且与疾病的严重程度相一致。结论TNF-α可能通过直接或者间接途径影响滋养细胞的侵袭能力,参与子痫前期的发生发展,研究TNF-α可能为子痫前期的早期诊断和治疗提供新的方法。     

丙型肝炎患者肿瘤坏死因子和白细胞介素6的水平及意义

本文采用肿瘤坏死因子单克隆抗体的 ELISA 法检测了72例丙型肝炎、丙型肝炎合并乙型肝炎及乙型肝炎患者血浆肿瘤坏死因子并测定其细胞诱生白细胞介素6的生物活性.结果发现,患者肿瘤坏死因子及白细胞介素6水平增高,尤以丙型肝炎病毒感染患者为甚.并且,患者肿瘤坏死因子和白细胞介素6呈显著相关.这一结果表明,肿瘤坏死因子和白细胞介素6在丙型肝炎病毒感染的致病原理中可能有一定意义.     

肿瘤坏死因子,白细胞介素—1对鼠甲状腺激素的影响

目的：探讨肿瘤坏死因子和白细胞介素－１对机体甲状腺激素的影响。方法：将重组人的肿瘤坏死因子和白细胞介素－１分别或联合注入大白鼠体内,检测其体内甲状腺激素水平变化,采用放射免疫分析法检测血清Ｔ３、Ｔ４、游离Ｔ３（ＦＴ３）,游离Ｔ４（ＦＴ４）及ＴＳＨ。结果：给予鼠一次性注射瘤坏死因子（ＴＮＦ）５０μｇ／只,其血清Ｔ３,ＦＴ３,ＦＴ４明显低于对照组,而血清Ｔ４、ＴＳＨ无明显改变。给予白细胞介素－１（ＩＬ     

枸杞子水提取物对白细胞介素6和肿瘤坏死因子产生的影响

研究了枸杞子水提取物（ＬＢｒ）对全血培养细胞白细胞介素６（ＩＬ－６）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）产生的影响。结果表明，ＬＢｒ单独不能诱导ＴＮＦ产生，ＬＢｒ０．５μｇ／ｍｌ可明显促进ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ产生，但ＬＢｒ１０μｇ／ｍｌ则对ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ产生无明显作用ｉＬＢｒ０．５μｙ／ｍｌ不仅可促进ＬＰＳ诱导的ＩＬ－６产生，单独亦可诱导ＩＬ－６产生，但ＬＢｒ１０μｇ／ｍｌ则对ＩＬ－６的产生无明显调节作用。     

抗CEA单链抗体与人hTNF-α融合基因的构建、表达和纯化

采用基因重组技术将已获得的抗癌胚抗原（ＣＥＡ） 单链抗体基因（ＳｃＦｖ） 与人肿瘤坏死因子α（ｈＴＮＦ α） 基因拼接成抗ＣＥＡＳｃＦｖ ｈＴＮＦ α（免疫毒素） 融合基因, 并克隆进大肠杆菌分泌性表达载体ｐＥＴ ２２ｂ （ ＋ ） 中, 在大肠杆菌中表达了６ ×Ｈｉｓ免疫毒素融合蛋白, 其６ ×Ｈｉｓ 位于ＳｃＦｖ 的Ｎ 端, 在胞内以可溶性存在, 其表达量占菌体总蛋白的６％ , ＳＤＳ ＰＡＧＥ 和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 显示表达产物分子量为４３ｋＤ, 与其基因编码蛋白的理论推算值相符。经Ｎｉ２＋ ＩＤＡＳｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ亲和柱一步纯化的６×Ｈｉｓ 免疫毒素纯度可达９０％ 以上, 得率为０－２ｍｇ／１００ｍｌ。表达产物除了具有与ＣＥＡ 结合的活性, 也具有对Ｌ９２９细胞杀伤的功能。     

子痫前期患者白细胞介素-8和胎盘生长因子的表达及其意义

目的通过检测子痫前期患者羊水中白细胞介素-8（IL-8）和胎盘组织中胎盘生长因子（PLGF）的水平．以探讨IL-8和PLGF在子痫前期发病中的作用。方法采用酶联免疫吸附法和免疫组化法分别测定20例轻度子痫前期患者,22例重度子痫前期患者和30例正常妊娠妇女（对照组）的羊水中IL-8和胎盘组织中的PLGF的表达。结果子痫前期轻度组及重度组羊水IL-8均高于对照组,重度组羊水IL-8显著高于轻度组,差异均有统计学意义（P〈0．01）。子痫前期轻度组及重度组胎盘组织中PLGF表达量均低于对照组（P〈0．01）,而重度组低于轻度组（P〈0．01）。子痫前期轻、重度组及对照组胎盘组织中PLGF表达量与羊水IL-8水平均呈高度负相关（P〈0．01）。结论子痫前期患者羊水中IL-8增高,而胎盘组织中PLGF表达下降,可能与子痫前期的发生、发展有关。     

ORIGINAL ARTICLE: Tumor Necrosis Factor (TNF)–TNF Receptor Gene Polymorphisms and Their Serum Levels in Korean Women with Endometriosis

Problem The aim of this study was to investigate the relationship between the polymorphisms of the tumor necrosis factor‐α (TNF‐α) and TNF receptor (TNFR) genes and serum levels of TNF‐α and its soluble receptor (sTNFR) in Korean women with endometriosis. Method of study The TNF‐α C(?857)T, C(?863)A and T(?1031)C, and TNFR1 A(36)G, TNFR2 T(676)G, A(1663)G, T(1668)G and C(1690)T polymorphisms, and serum levels of TNF‐α, sTNFR1, and sTNFR2 were analyzed in women with (n = 105) and without endometriosis (n = 101). Results Serum sTNFR1 and sTNFR2 levels were significantly higher in women with endometriosis than in those without endometriosis, whereas no difference in serum TNF‐α level was noted. Single polymorphisms of TNF‐α and TNFR genes were not significantly different between the two groups. The frequencies of the TNF‐α T/C/C haplotype allele and the TNFR2 G/G/T haplotype allele were significantly decreased in women with endometriosis compared to women without endometriosis. Women carrying at least one copy of the TNFR2 T/G/T and /or G/G/C haplotype allele had an approximately two times higher risk of endometriosis than women without these haplotype alleles. Conclusion The haplotype alleles of the TNF‐α and TNFR2 gene polymorphisms are genetic factors associated with endometriosis, and circulating sTNFR rather than TNF‐α, may be involved in the development of endometriosis in Korean women.     

Tumor Necrosis Factor Receptors Encoded by Poxviruses

Poxviruses encode several cytokine response modifying (Crm) proteins. The Crm proteins possess sequence homology to several human proteins important in immunity. This homology and the conservation of Crm proteins among poxvirus strains suggest an immunomodulatory function that provides a survival advantage to the virus. Cowpox virus encodes several tumor necrosis factor (TNF) receptor family homologues: CrmB, CrmC, and CrmD. CrmB and CrmD encode a similar approximately 155 amino acid COOH-terminus region distal to their TNF ligand-binding portions. These C-terminus regions contain no significant homology with sequences in public databases. It is not known whether the C-terminus regions have a complementary function to the TNF ligand-binding domains, or an unrelated function. Myxoma virus, a rabbit poxvirus, encodes a protein termed T2 which is homologous to CrmB and CrmD. Deletion of the T2 gene results in decreased pathogenicity of myxoma in rabbits. T2 has also been shown to interfere with TNF-induced apoptosis in vitro. Understanding the role viral TNF receptor homologues play in altering host immune responses may suggest ways to develop specific anti-inflammatory therapeutics.     

Interleukin 2 Induces Tumor Necrosis Factor Gene Expression In Vivo

Interleukin 2 (IL-2) treatment of malignancies is often associated with severs toxicity, and the alterations observed after high dose administration of IL-2 are similar to those induced by recombinant tumor necrosis factor (TNF). We therefore examined the hypothesis that IL-2 induces TNF gene expression in vivo. Purified, recombinant human IL-2 was injected intraperitonealy into mice which had been previously primed with complete Freund's adjuvant (CFA). Biologically-active TNF was detected in the ascites fluid of CD-1 mice; it was detectable 30 minutes after IL-2 and peaked at 1 hour (500 ± 158 units/ml). Plasma levels of TNF also peaked at 1 hour at 32 ± 4 units/ml. Similar kinetics were observed in CBA/J mice. TNF specific mRNA was also present in the ascites cells, and peaked 30 minutes after IL-2 injection into CBA/J mice. Injection of vehicle containing 10 times the maximum contaminating dose of endotoxin did not induce TNF above background levels. As a further control for potential endotoxin contamination, IL-2 was injected into endotoxin hyporesponsive C3H/HeJ mice. These mice also demonstrated the rapid upregulation of biologically-active TNF in the ascites, with peak production occuring at 1 hour (125 ± 47 units/ml). The induction of biologically-active TNF in the C3H/HeJ mice was associated with a peripheral blood neutrophilia and lymphopenia, pathophysiologic alterations that have been attributed to TNF. These data show that a single injection of purified, recombinant IL-2 induces TNF gene expression in vivo.     

Graves病患者治疗前后血清TNF-α和IL-6的动态变化

目的：检测Ｇｒａｖｅｓ病（ＣＤ）患者治疗前后血清白细胞介素－６（ＩＬ－６）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）的动态变化，探讨甸子与ＣＤ发生发展之间的内在联系。方法：于治疗前和治疗后８周与２４周采集患者静脉血，分别采用放免法和超敏酶免法检测血清ＩＬ－６和ＴＮＦ－α含量。结果：ＣＤ患者血清ＩＬ－６和ＴＮＦ－α水平明显升高；应用抗 状腺药物８周和２４周甲状腺激素恢复正常后，ＩＬ－６和ＴＮＦ－α水平明显升高；应     

低频超声开放大鼠血脑肿瘤屏障与TNF-α表达之间的关系

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与低频超声开放大鼠血脑肿瘤屏障之间的关系。方法应用1MHz低频超声辐照C6胶质瘤大鼠,采用伊文思蓝(EB)法检测血脑肿瘤屏障通透性的变化,应用透射电镜观察脑微血管内皮细胞紧密连接的变化,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测脑组织中TNF-α含量的变化。结果低频超声辐照后大鼠血脑肿瘤屏障的通透性逐渐增加,在辐照后1.5h￣3h达高峰,12h恢复至正常水平;透射电镜显示低频超声辐照后,0.5h至9h血管内皮细胞的紧密连接均有不同程度的开放,至12h时关闭;低频超声辐照后大鼠胶质瘤侧脑组织中TNF-α含量逐渐增加,在1.5h￣3h达高峰,12h恢复至正常水平。结论低频超声辐照大鼠脑胶质瘤模型后引起TNF-α量的变化与血脑肿瘤屏障通透性变化的趋势及达到峰值的时间相一致。TNF-α的增加可能是低频超声辐照开放大鼠脑胶质瘤血肿瘤屏障的重要因素之一。     

湖北地区汉族人群TNF基因多态性分布研究

目的 :了解TNF α和TNF β基因多态性在湖北地区汉族人群中的分布特点。方法 :应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性法(PCR RFLP)检测 2 1 5例正常汉族人TNF α和TNF β基因型并与其它种族和地区的分布进行比较。结果 :TNF α基因型以TNF α1 /1型最为多见(8 7.0 % ) ,而TNF β基因型以TNF β1 / 2型出现频率最高 ( 5 0 .7% )。二种基因多态性分布在男女间均无显著差异 (P >0 .0 5 )。与其它种族和地区比较 ,发现不同种族和不同地区间TNF α和TNF β基因型分布及等位基因频率均存在显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :在湖北地区汉族人群中存在TNF基因多态性 ,但在不同种族和不同地区间分布有明显的差异 ,这种差异可能是导致一些疾病在不同种族、不同地区间的发生、转归和预后不同的遗传因素之一。     

抗重组人肿瘤坏死因子-α(rHTNF-α)单克隆抗体特性及功能的研究

应用杂交瘤技木制备抗重组人肿瘤坏死因子-α单克隆抗体对于r-HTNF-α的纯化和TNF-α分子的抗原性及功能的研究将是一种主要工具。本实验对一组抗rHTNF-α单克隆抗体的特性和功能进行了研究。Western blotting结果表明Z_4、Z_8、Z_(12)、Z_ (20)、Z_(21)、B_3和E_6 抗体特异性地识别分子量为17000道尔顿的TNF-α它们与rIL-1、rIL-2、rIFNγ、rIFNα、和E coli菌裂解液无交叉反应。竞争性ELISA结果证实7种抗体分别识别TNF-α分子上5个不同的抗原决定簇。其中4个抗体可以识别TNF-α活性中心部位。两个抗体还可以识别天然TNF-α分子。