铁蛋白时间分辨荧光免疫分析法的建立

用夹心法建立铁蛋白(FER)时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA),测定血清FER的含量。以FER单克隆抗体(McAb)806#包被板,双功能螯合剂异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合Eu^3 及标记FERMcAb 803#,发光增强系统为以β-二酮体为主的增强液。采用双对数函数数据处理程序,方法的批内和批间CV分别为2．2％和3．7％,平均回收率为118％,灵敏度为0．5μg／L,可测范围为0．5-1000μg／L。ED20、ED50和ED80分别为27．8μg／L、88．5μg／L和247μg／L。Eu^3 FER McAb于-30℃保存至少4个月,免疫反应性基本无损失,同批试剂连续分析4个月结果稳定。本法与PE公司的FER-TRFIA试剂盒所得样品的测定值的相关系数为0．98。本文建立的FER-TRFIA法,是一种适用于人群贫血普查和各种肝脏疾病及肿瘤的联合诊断的良好方法,分析范围、灵敏度和稳定性均较理想,值得推广应用。     

HBeAg-时间分辨荧光免疫分析法的初步临床应用

本文探讨HBeAg时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)的临床应用价值。采用铕离子标记,建立双抗体夹心的HBeAgTRFIA,并对224例乙肝患者和30名正常人血清进行检测。结果表明,HBeAgTRFIA法的灵敏度为0.006NCU/mL,乙肝患者血清HBeAg检出率为41.1%,显著高于ELISA法(P<0.05),与MEIA法相比较无显著差异(P>0.05)。HBeAgTRFIA法是一种灵敏度高、特异性强和重复性好的检测技术,对提高临床检测水平、指导临床治疗、监测方面有实用价值。     

胃蛋白酶原Ⅰ时间分辨荧光免疫分析法的建立

目的　采用时间分辨荧光免疫分析技术建立高灵敏的胃蛋白酶原Ⅰ的快速全自动检测方法。方法　以PGⅠ单克隆抗体 80 0 3#包被板 ,双功能螯合剂异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合Eu3 及标记PGⅠ单克隆抗体 80 16 # ,发光增强系统为以 β 二酮体为主的增强液。采用平衡饱和法建立PGⅠ时间分辨荧光免疫分析 ,数据采用Log Logit法函数和四参数Logitc函数数据处理程序处理。结果　方法的批内和批间CV分别为 1.9%和 4 .7% ,平均回收率为 10 2 .6 5 % ,灵敏度为 0 .0 5 μg L ,可测范围为 3.5～ 32 8μg L ,ED2 0 、ED50 和ED80 分别为 11.34μg L、38.73μg L和 132 .3μg L。Eu3 标记抗体 2 0℃保存 8个月免疫反应性基本无损失 ,同批试剂连续 8个月应用分析结果稳定 ,临床结果与免疫放射分析法的结果相符。结论　胃蛋白酶原Ⅰ时间分辨荧光免疫分析法是目前胃蛋白酶原Ⅰ检测中最灵敏的方法 ,该分析法稳定性好 ,具有很好的应用前景。     

镧系元素时间分辨荧光免疫分析

一、概述 应用镧系元素的时间分辨荧光(TRF)分析技术,已在免疫检测中显示出它的优越性。在医学各学科中;如内分泌激素的检查、肿瘤标志物的检测,以及体内各种内或外源     

NSE时间分辨荧光免疫分析法的建立

采用夹心法建立神经元特异烯醇化酶（NSE）时间分辨荧光免疫分析技术（TRFIA）来测定血清中NSE的含量。以NSE单克隆抗体E1包被板,双功能螯合剂异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合Eu3＋及标记NSE单克隆抗体E7,发光增强系统为以β-二酮体为主的增强液。采用平衡饱和法建立NSE-TRFIA,数据采用双对数函数数据处理程序处理。本方法的连续批内和批间CV分别为2.4%和4.8%,平均回收率为102.6%,灵敏度为0.31ng/mL,可测范围为0.31～320ng/mL,ED20、ED50和ED80分别为20.72ng/mL、57.23ng/mL和157.25ng/mL。本方法与AFP、CEA均无交叉反应。Eu3＋标记抗体-20℃保存8个月免疫反应基本无损失,同批试剂连续8个月应用分析结果稳定。临床应用检测结果与E170所测值高度相关。实验结果表明,本文所建立的NSE-TRFIA的灵敏度、特异性、准确度等均符合临床应用要求。     

CEA时间分辨荧光免疫分析

以ＣＥＡ单克隆抗体Ｃ５０包被微孔板,异硫氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合Ｅｕ＾３＋标记Ｃ１７单抗。采用平衡法建立ＣＥＡ时间分辨荧光免疫分析,数据采用Ｌｏｇ＝Ｌｏｇｉｔ函数数据自理程序处理。方法的批内和批间ＣＶ分别为２．９７％和１．６０％,平均回收率为１０１．９８％,灵敏度为０．２０μｇ／Ｌ,可测范围为２．３９～５０８．９μｇ／Ｌ,ＥＤ５０为６０．９１μｇ／Ｌ。本方法与ＡＦＰ和ＣＡ１２５和ＣＡ１５３无交     

时间分辨荧光免疫分析方法建立中有关问题的探讨

本文报告了时间分辨荧光免疫分析技术建立中有关问题的实验研究结果。包括对Eu~(3+)标记技术的改进,增强液的配制和检定,抗体包被固相材料的选择及操作中必须注意的防止稀土元素污染的措施。     

胃蛋白酶原Ⅱ时间分辨荧光免疫分析法的建立

建立胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)的时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA).包被PGⅡ单抗8101#和使用DTTA络合Eu3 标记PGⅡ单抗8102#,建立PGⅡTRFIA.结果用Log-Logit函数和四参数Logit函数数据处理.批内和批间CV分别为2.1%和3.8%,平均回收率为104.6%,灵敏度为0.02μg/L.标准曲线呈直线,EDs0为16.21μg/L.与PGⅠ、AFP、CA50、CA125及CA242等无交叉反应.Eu3 标记单抗在-30℃保存,可达一年以上,免疫活性基本无损失.同批试剂连续分析8个月结果稳定,与IRMA测定结果基本吻合.应用TRFIA检测血清PGⅡ具有灵敏度高、操作简便和时间短等特点,是一种适用于人群胃病普查的良好方法,具有推广应用价值.     

时间分辨荧光免疫分析法测定人血清α-FP

本文报告应用时间分辨荧光免疫分析技术测定人血清α-FP浓度。研究结果表明,将BAS引入该技术,使方法学稳定性和灵敏度有明显提高。本法批内CV为3.8～5.2％。批间CV为4.80～12.3％,最小检出值<1ng/ml,平均回收率为102.8％。健康成人测定参考值为5.56±5.38ng/ml(±SD)。聚苯乙烯微量滴定孔条经戊二醛处理后可提高包被抗体含量。     

层粘连蛋白时间分辨免疫分析方法的建立

采用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立高灵敏的层粘连蛋白(LN)的快速的全自动检测方法.以羊抗鼠IgG抗体包被板,采用抗人LN单克隆抗体(McAb)、Eu3 标记人LN和以β-二酮体为主的增强液建立竞争LN-TRFIA,数据采用双对数函数处理程序处理.结果表明LN的标记率为11.5 Eu3 /LN,方法的批内和批间CV分别为3.9%和6.7%,平均回收率为91.2%,灵敏度为5μg/L,可测范围为5～1000μg/L,ED20、ED50和ED80分别为723.1μg/L、183.4μg/L和56.95μg/L.临床结果与RIA结果相符.本文建立的LN-TRFIA灵敏、稳定,可全自动操作,有很好的应用前景.     

时间分辨荧光免疫法测定血清AFP的方法学评价

对时间分辨荧光免疫法(TRFIA)测定血清AFP的方法学予以评价.评价TRFIA法测定AFP的线性范围、灵敏度、精密度、回收率及与ELISA法和RIA法的相关性.结果显示:AFP线性范围1～1000U/mL,检测下限≤0.1 U/mL,批内及批间变异系数分别为2.3%、5.3%,回收率97.85%,与ELISA法及RIA法高度相关,r值分别为0.982与0.991.正常血清AFP参考值0.8～10.5 U/mL.结论:TRFIA测定AFP线性范围宽,稳定性好,灵敏度与准确度高,无放射性污染,是当前免疫分析中有发展前途的一项超微量检测技术.     

赭曲霉毒素A时间分辨荧光免疫分析法的建立及其考核

采用稀土离子标记技术,应用多克隆抗体建立高灵敏的赭曲霉毒素A(OTA)时间分辨荧光免疫分析法(OTA-TRFIA).以OTA-KLH为免疫原制备抗OTA抗体;OTA与BSA的联结物(OTA-BSA)为固相抗原,与游离OTA共同竞争有限的兔抗OTA抗体;用Eu3 标记的羊抗兔抗体.该方法的灵敏度为0.02μg/L,测量范围为0.02μg/L～400μg/L,批内和批间CV分别为2.6%和5.2%,平均回收率为95.8%,与赭曲霉毒素B对OTA的检测有5.6%交叉反应,而黄曲霉毒素B1及BSA则没有交叉反应.不同时间进行的OTA-TRFIA的ED80、ED50、ED20效应点值分别为0.2μg/L、1.0μg/L和5.3μg/L.研究表明,OTA-TRFIA是目前OTA检测中最灵敏的方法之一,该分析方法稳定性好、可测范围宽,具有很好的应用前景.     

CA19-9时间分辨荧光免疫分析方法的建立及应用

以CA19－9单抗192＃包被板条,双功能螯合剂异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合Eu^3 及标记241＃单抗,发光增强系统为以β-二酮体为主的增强液,采用平衡饱和法建立了CA19－9时间分辨荧光免疫分析。采用Log-Logit函数和四参数Logistic函数两种程序处理数据。结果表明方法的批内和批间CV分别显3．26％和5．74％,平均回收率为99．61％,灵敏度为1．66U/mL,可测范围为18．69－967U／mL,ED20、ED50t ED80分别为40．55U／mL、114．2U/mL和396．9U/mL。本方法与CEA有6％交叉反应,与CA125、CA153和AFP均无交叉反应,Eu^3 标记抗体于－30℃,保存六个月免疫反应性基本无损失,连续5个月应用同批试剂,分析结果稳定。78份血清样品的检测结果与化学发光吻合,本文提示,采用CA19－9时间分辨荧光免疫分析,可以高效灵敏地检测出血清中的CA19－9的含量,值得临床推广。     

TR-FIA与RIA法检测HBV标志物的比较分析

铕(Eu)标记时间分辨荧光免疫技术(TR-FIA)是新近推出的一种非放射性标记微量检测技术, 将其与RIA比较分析, 结果表明: TR-FIA法较RIA法灵敏度高, 测量范围宽, 准确度相近; 在乙型肝炎病毒标志物(HBV M)常见的8种组合模式中, 有7种完全符合(符合率为100%),只有HBSAg 抗-Hbe 抗-HBc组合模式符合率为73.3%,而HBeAg值差异较大.     

新型铕络合物用于HBsAg的时间分辨荧光免疫检测

利用稳定的新型铕荧光络合物BHHCT与Eu3+标记羊抗人HBsAb和Eu3+标记BSA-SA,建立定量测定血清HBsAb的Eu3+-BHHCT-HBsAb-TRFIA法和Eu3+-BHHCT-BSA-SA-TRFIA法.结果表明,这两种方法最低检出值分别为0.2ng/mL和0.05ng/mL,标准曲线范围均为0-100ng/mL,批内变异系数CV均小于10%,后者回收率为85%-115%.用Eu3+-BHHCT-BSA-SA-TRFIA法与ELISA法同时检测118份血清样品,结果表明前者的检出率比后者高.