小鼠HepA,S180腹水癌抑癌因子的分离提纯及其抑癌活性的观察

从HepA小鼠和S180小鼠腹水液中分离提取抑癌因子,对其抑癌活性进行了观察。证明:经乙醇迥流、无水乙醇抽提、Sphadex G25分离后215nm第一峰即有明显的杀伤癌细胞的作用,且有交叉效应,即一种癌腹水制品对两种癌细胞均有杀伤作用。     

L615白血病抑癌因子协同三种中药成分体内抗白血病的作用

对中药有效成分小蘖胺（Ｂｅｒ），黄芪多糖（ＡＰＳ．）和当归多糖（ＡＰ）协同白血病抑癌因子（ＣＳＦ）体内抗白血病的效应进行了实验性研究。实验结果显示Ｂｅｒ，ＡＰＳ和ＡＰ三种中药有效成分均有一定的抗白血病效应，可使Ｌ６１５白血病小鼠的生存期从６ｄ延长到８．８ｄ．注射ＣＳＦ的实验小鼠生存期显著延长，存活１５ｄ以上的小鼠占３３．３±７．２％，平均存活１５１．７±５８．５ｄ。而ＣＳＦ与Ｂｅｒ，ＡＰＳ和ＡＰ联合使用的各组小鼠生存期延长更为显著，其中ＣＳＦ／Ｂｅｒ组，有７５％的小鼠平均生存期为２７５ｄ，平均生命延长率高达４５８９％，超过治愈标准的３００％。同时各脏器组织结构恢复正常，白血病细胞和标记染色体消失，结果显示：Ｂｅｒ，ＡＰＳ和ＡＰ具有改善机体的免疫功能，促进免疫细胞活化，促进机体释放内原性抗肿瘤生物活性因子，并加强其抗肿瘤的生物活性，与ＣＳＦ联合使用，可明显增强杀伤肿瘤和抑制肿瘤生长的能力。这一结果对于在临床上进一步推广肿瘤生物学治疗的应用将有着非常重要的意义。     

超薄PAGE检测喉癌癌相关蛋白

目的：探讨喉癌血清癌相关蛋白的检测方法及其与喉癌的关系。方法：采用微量薄层垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术检测了53例喉癌病人、51例喉部良性疾病病人和48例正常人的血清癌相关蛋白，并对喉癌的不同分级、是否转移及手术前后作了比较。结果：微量薄层垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳能检出与喉癌相关的三条癌相关蛋白带，喉癌病人、非癌病人和正常人的血清癌相关蛋白检出阳性率分别为71．70％、11．76％和8．33％，转移喉癌和非转移癌的阳性率分别为92．86％和64．10％，手术后1月复查45％的喉癌病人血清癌相关蛋白转阴性。结论：微量薄层垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳检测喉癌病人血清癌相关蛋白诊断喉癌，是一种简便、准确、实用的方法。     

抑癌因子PTEN和血管内皮生长因子在大肠癌的表达

目的探讨抑癌因子PTEN和血管内皮生长因子（VEGF）蛋白在大肠癌中表达的意义。方法采用免疫组化SP法检测48例大肠癌患者PTEN和VEGF蛋白的表达,探讨其与大肠癌临床病理特征及生物学行为的关系。结果大肠癌中PTEN蛋白表达阳性率为45．8％（22／48）,明显低于正常大肠黏膜组织（P〈0．01）;VEGF蛋白表达阳性率为72．9％（35／48）,明显高于正常大肠黏膜组织的阳性率（P〈0．01）;PTEN和VEGF蛋白表达呈负相关（P〈0．01）;PTEN低表达和VEGF高表达与大肠癌Dukes分期、浆膜浸润、淋巴结转移有关（均P〈0．01）,而与年龄和组织学类型无关（P〉0．05）。结论PTEN和VEGF表达与大肠癌临床病理特征和生物学行为密切相关,联合检测FFEN和VEGF蛋白的表达,对大肠癌的恶性程度及预后判断具有重要的临床意义。     

大鼠胚胎小脑提取液蛋白质成分分析

目的：探讨不同胎龄大鼠小脑组织所含蛋白成分的差异。方法：制备１６ｄ、１８ｄ胚胎（Ｅ１６、Ｅ１８）及新生１ｄ（Ｐ１）大鼠小脑提取液（ｃｅｒｅｂｅｌｌｕｍｅｘｔｒａｃｔｓ，ＣＥ），采用ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定ＣＥ内的蛋白成分差异。结果：Ｅ１６和Ｅ１８ＣＥ含有Ｐ１ＣＥ所没有的蛋白带，分子量分别约为２５．８，４５．１，８９．１和１７９．５ｋｄ。结论：为寻找新的神经营养因子提供了线索，并为选择最佳移植物供体提供了依据。     

微量垂直板状聚丙烯酰胺凝胶电泳在癌相关蛋白检测中的价值

用微量垂直板状聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测４５０例癌患者，３３８例良性病患者和１１７名健康对照的结果，三组人群的阳性率分别为４５．５６％，１２．４３％和６．８４％，与文献报道用同样方法检测结果（７５．５％，７．６％及３．６％）有所不同。再探讨了该方法在癌筛选中的应用价值。     

血清癌相关蛋白与喉癌的相关性研究

为探讨喉癌血清中癌相关蛋白的检测方法及其与喉癌的关系，采用微量薄层垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术检测了喉癌患者５３ 例、喉部良性疾病患者５１ 例和正常人４８ 例的血清癌相关蛋白，并对喉癌的不同分级、有无转移及手术前后作了比较。结果显示，微量薄层垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳能检出与喉癌相关的３ 条癌相关蛋白带，喉癌患者、非癌患者和正常人的血清癌相关蛋白检出阳性率分别为７１．７０％ 、１１．７６％ 和８．３３％ ，转移喉癌和非转移喉癌的阳性率分别为９２．８６％ 和６４．１０％ 。手术后１ 月复查，４５％ 的喉癌患者血清癌相关蛋白转阴性。表明用微量薄层垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳检测喉癌患者血清癌相关蛋白诊断喉癌是一种简便、准确、实用的方法。     

SWH信号通路抑癌机制的研究进展

Salvador-Warts-Hippo(SWH)信号通路是一种新的信号转导网络,具有调控组织生长的作用。目前,一共有11种蛋白被鉴定是这个通路的组成成分,并确定了一些下游效应靶点蛋白。这个通路在进化上非常保守,越来越多的证据表明其表达下调与人类肿瘤的发生有关。现对SWH在果蝇中的研究进展予以综述,并将SWH信号通路与人类肿瘤发生的关系进行讨论。     

高转移和低转移人大细胞肺癌细胞株的比较蛋白组学研究

目的 探讨比较人高转移大细胞肺癌细胞株(L9981)和人低转移大细胞肺癌细胞株(NL9980))间蛋白质表达的差异.方法 采用固相pH梯度双向凝胶电泳分离L9981细胞株和NL9980细胞株的总蛋白,用图像分析软件比较分析细胞间的差异表达蛋白质.对13个差异表达的蛋白质点通过胶内酶解,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALD-TOF-MS/MS)和蛋白质数据库检索进行鉴定.结果 经Image Master软件分析后发现有8个蛋白质点仅在L9981中检测到有表达,8个蛋白质点仅在NL9980中检测到有表达,发现19个蛋白质点在两种肺癌细胞株中均存在,其中9个蛋白质点在L9981中表达量显著高于NL9980,10个蛋白质点在NL9980中表达量显著高于L9981 (P<0.05).通过对差异明显的蛋白质点进行质谱鉴定和蛋白质数据库查询,发现线粒体热休克蛋白和谷胱甘肽合成酶在L9981中的表达被上调,P47蛋白、免疫球蛋白重链可变区、烯醇化酶1和真核翻译起始因子3 在L9981中的表达被下调, 丙酮酸激酶仅在L9981中有表达,WD-40重复蛋白仅在NL9980中有表达.结论 人高、低转移大细胞肺癌细胞株蛋白质组的表达存在明显差异, 鉴定的差异蛋白质多与肿瘤的侵袭转移相关,这些差异蛋白质有可能为进一步发现与肺癌转移相关的分子标志物和阐明肺癌转移的分子机制提供线索.     

大鼠锌指蛋白ZFP580的原核表达与分离纯化

【目的】构建ZFP580基因的原核表达质粒,转化大肠杆菌,诱导表达并分离纯化大鼠锌指蛋白ZFP580。【方法】根据ZFP580 cDNA序列的开放阅读框设计引物,利用PCR技术扩增ZFP580的开放阅读框cDNA序列,将PCR扩增的目的片段与载体pET30a分别双酶切、回收纯化后做定向连接,Nco I、Xho I双酶切电泳筛选、鉴定并测序。将构建的重组质粒pET30a-ZFP580转化大肠杆菌BL21(DE3),由异丙基-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达并纯化目的蛋白。【结果】成功扩增ZFP580基因并构建了表达质粒pET30a-ZFP580,测序结果表明与GeneBank公布的序列一致。含有该质粒的大肠杆菌BL21(DE3)经IPTG诱导表达后,产物蛋白分子量约为19 kDa。【结论】成功表达并纯化了大鼠ZFP580蛋白,为进一步研究锌指蛋白ZFP580的功能奠定了基础。     

质粒DNA提取方法的比较研究

采用琼脂糖凝胶电脉对质粒 DNA 提取的三种方法进行比较,结果表明:煮沸法较为快速简便,提取质粒 DNA 含量较高;强碱法作用猛烈,质粒的共价、闭合、环状 DNA 构象容易破坏;SDS 裂解法作用较为温和,适合分子量大于10kbp 的质粒,大量提取时,煮沸法尤佳。     

血管内皮生长因子在肺癌中的表达及临床应用价值

目的:研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达与肺癌临床病理特征的关系,探讨VEGF潜在临床应用价值.方法:采用免疫组织化学法,检测手术切除的68例肺癌组织和50例对照组织标本中VEGF的表达.结果:VEGF在肺癌中的表达率高于对照组.VEGF主要表达于细胞质和细胞膜,与肺癌的TNM分期和淋巴结转移有关,与其它各项临床病理特征无明显统计学相关性.结论:VEGF与肺癌疾病进展、转移和患者的预后有关,可作为评估肺癌病程、转移力和判断预后的一个重要标志物.     

喉癌组织的蛋白质组学比较研究

目的通过对人类的喉癌组表达差异中的高、低分化癌组之间的相互差异性的研究,运用网上数据库对不同蛋白点的肽指纹图进行分析和鉴定。方法选取本院耳鼻喉科2011年1～5月喉癌患者的病理临床资料进行回顾性分析与研究。结果随机将新鲜喉癌标本分为高分化癌组和低分化癌组,并提取两组的组织总蛋白进行双向凝胶电泳分析,将分析结果与正常黏膜组织对照,将得到的高分化与低分化癌组织之间的表达式进行比较分析。结论高分化癌组织与低分化癌组织的表达显示,喉癌细胞的分化程度与蛋白质组学的关系极为密切。     

宫颈癌流行病学及高危因素探讨

宫颈癌是世界性的公共卫生问题之一,是女性恶性肿瘤中发病率较高的疾病,其发病率仅次于乳腺癌。宫颈癌的发生、发展与地理分布、年龄、社会经济状况及性行为等诸多因素有关。世界卫生组织将人乳头瘤病毒正式确定为宫颈癌的病因,为宫颈癌一级预防和二级预防开辟了新的研究领域。     

缺氧诱导因子-1α及碱性成纤维细胞生长因子在人乳腺癌组织中的表达及其与血管生成的关系

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在人乳腺癌组织中的表达,以及两者与乳腺癌血管生成的关系及作用机制。方法:用免疫组化检测67例乳腺癌及39例乳腺纤维腺瘤组织中HIF-1α和bFGF的表达;用CD105标记血管内皮细胞并计数肿瘤微血管密度(MVD)。结果:HIF-1α及bFGF在乳腺癌组织中的表达阳性率分别为80.6%(54/67)、73.1%(49/67),与乳腺纤维腺瘤组织中的表达阳性率[0.0%(0/39)、35.9%(14/39)]比有统计学意义(P<0.001);乳腺癌组织中HIF-1α与bFGF的表达呈正相关(rs=0.314,P<0.01);乳腺癌淋巴结转移阳性组中HIF-1α及bFGF的表达与阴性组比无统计学意义;HIF-1α及bFGF阳性肿瘤组织中的MVD均值显著高于阴性组织,且MVD随着HIF-1α及bFGF表达的增强而增加;淋巴结转移阳性组中MVD高于阴性组(P<0.05)。结论:HIF-1α和bFGF在人乳腺癌组织中均高表达,且两者具有明显的相关性;HIF-1α与bFGF间可能通过相互作用共同调节乳腺癌血管生成。     

肿瘤坏死因子抑制人肺癌细胞增生能力的体外研究

利用多细胞球体 ,探讨体外培养条件下肿瘤坏死因子 (TNFα)对肺癌细胞增生能力的影响。发现TNF( 1 0 4U/mL)与人肺癌细胞系A5 4 9球体共同培养后对A5 4 9细胞球体生长有一定的抑制作用 (P <0 .0 5 )。TNF与A5 4 9单层细胞作用后 ,观察细胞生长曲线的变化 ,计算细胞倍增时间 ,测定细胞集落形成率。发现TNF可改变A5 4 9细胞的生长曲线 ,使细胞倍增时间由 37h延长至 4 3h ,集落形成率由 5 2 %降低为 1 5 %。结果表明TNF对增生性肺癌干细胞有一定的抑制作用。     

前列腺癌中PD-ECGF的表达与血管生成间的相关性研究

目的探讨前列腺癌中血小板源内皮细胞生长因子(PD-ECGF)的表达与新生血管形成的关系。方法用免疫组化技术和Western blot方法检测22例前列腺癌组织中PD-ECGF蛋白的表达和微血管计数(MVD)。结果前列腺癌中PD-ECGF阳性表达率为54.5%(12/22),表达位于肿瘤组织的基质细胞中,肿瘤细胞中均未见表达。在22例前列腺癌组织中平均MVD为71.21±31.14/100倍视野,PD-ECGF的表达与MVD间存在显著地相关性(r=0.50,P=0.005)。结论PD-ECGF在前列腺癌组织中呈高表达与前列腺癌的血管生成显著相关,可促进前列腺癌组织中新生血管的形成。     

成纤维生长因子2对人乳腺癌细胞MCF7骨涎蛋白表达的影响

【目的】研究成纤维生长因子2（FGF2）对人乳腺癌细胞MCF7骨涎蛋白（BSP）表达的影响。【方法】将MCF7细胞随机分为5组：空白对照组、FGF2（10 ng/ml）刺激3、6、12和24 h组,分别应用实时荧光定量PCR和免疫印迹技术检测BSP mRNA和蛋白表达水平。【结果】各实验组均有BSP的mRNA表达,其表达水平在FGF2刺激后呈时间依赖性增加,6 h增强最为明显。BSP蛋白表达量也呈时间依赖性增加,12 h增强最为明显。【结论】乳腺癌细胞MCF7组成性表达BSP,在FGF2作用下BSP表达水平呈时间依赖性增强。