利用同源菌株融合改良农抗5102产生菌：Ⅱ.融合子的检出,筛选？…

以农抗５１０２产生菌同源菌株９０－１１和ＦＲ－００８为亲本的原生质体融合,采用”后涂直接法“在各含５０ｍｇ／Ｌ链霉素和利福平的双抗平板上检出隔合子,经抗药性和抗菌活性筛选获得１株产生２株亲本均不具备的抗细菌活性的融合子ＳＲ－７和１株各种抗菌活性均高于亲本的融合子ＳＲ－Ｔ１９。     

拟无枝酸菌B37与游动放线菌E92－70属间融合

以去甲基万古霉素产生菌Ｂ３７和替考拉宁类抗生素产生菌Ｅ９２－７０为出发菌株，将Ｂ３７原生质体热灭活，进行属间原生质体融合，融合率为１．４×１０~（－６）～４．６×１０~（－６），融合子５０％以上抗菌活性增强。对融合子Ｅ９作了深入研究，其抗ＭＲＳＡ活性明显增强，纸层谱、ＨＰＬＣ图谱以及总ＤＮＡ的ＳａｌＩ酶切图谱与两亲本均有差异，Ｅ９在分类上仍与Ｅ９２－７０同属，其产物为胞壁抑制物，作用点仍在细菌胞壁Ｄ－Ａｌａ－Ｄ－Ａｌａ上，Ｅ９很可能是Ｂ３７与Ｅ９２－７０的重组子，其产物可能是不同于去甲基万古霉素和替可拉宁的新的糖肽类杂合抗生素。     

亚胺培南／西司他丁等对MRSA和MSSA的体外抗菌活性研究

用琼脂稀释法对亚胺培南／西司他丁等７种抗生素进行了对临床分离的１０４株耐甲氧西林金葡球菌（ＭＲＳＡ）和１２０株甲氧西林敏感的金葡球菌（ＭＳＳＡ）的体外抗菌活性比较，结果表明亚胺培南／西司他丁和去甲万古霉素的抗菌活性最强，对ＭＲＳＡ的ＭＩＣ＿（９０）分别为４和２μｇ／ｍｌ，对ＭＳＳＡ的ＭＩＣ＿（９０）为１和２μｇ／ｍｌ。其它５种抗生素对ＭＲＳＡ的抑菌作用均较差。但其中的头孢唑林和头孢拉定对ＭＳＳＡ的抑菌作用较好，１２０株ＭＳＳＡ对两者的敏感率分别为９０％和７４．１７％。     

过氧化氢对兔心肌浆网膜流动性及钙—转移腺苷三磷酸酶活性的影响

用荧光偏振技术测定兔心肌浆网（ＳＲ）膜流动性，定磷法测定Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性，过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）显降低ＳＲ膜流动性和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性；荧光各向异性值与Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性变化呈负相关；过氧化氢酶（２０μｇ·Ｌ＾－１）完全取消Ｈ２Ｏ２（２ｍｍｏｌ·Ｌ＾－１）对ＳＲ的损伤作用，表明Ｈ２Ｏ２能直接损伤ＳＲ，膜流动性改变可能是Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性下降的原因之一。     

新抗生素H4750—D2的研究：发酵,分离,结构鉴定和生物活性

化合物Ｈ４７５０－Ｄ２是从稀有放线菌小多孢菌（Ｍｉｃｒｏｐｏｌｙｓｐｏｒａｓｐ）Ｈ４７５０菌株的培养液中经溶媒萃取、硅胶柱层析、ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ－２０凝胶过滤和反相硅胶柱层析分离得到。经理化性质鉴定和光谱分析（ＵＶ、ＩＲ、１Ｈ－ＮＭＲ、１３Ｃ－ＮＭＲ、ＤＥＰＴ、１Ｈ－１ＨＣＯＳＹ、１３Ｃ－１ＨＣＯＳＹ、ＨＲＦＡＢ－ＭＳ），得知该化合物为一新的手霉素族抗生素。对革兰氏阳性菌有一定的抗菌活性     

链霉菌335发酵液中活性成分的分离和结构测定

从链霉菌３３５的发酵液中分离得到２个具有免疫抑制活性的组分——抗生素３３５Ａ１和３３５Ａ４。基于其各种光谱分析对结构的阐明，抗生素３３５Ａ４为４－［２－（３Ｓ，５Ｒ－ｄｉｍｅｔｈｙｌ－２－ｏｘｏｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ）－２－ｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌ］－２，６－ｐｉｐｅｒｉｄｉｎｅｄｉｏｎｅ；抗生素３３５Ａ１为４－［２－（３Ｓ，５Ｓ－ｄｉｍｅｔｈｙｌ－２－ｏｘｏｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ）－２－ｈｙｄｒｏｘ－ｙｅｔｈｙｌ］－２，６－ｐｉｐｅｒｄｉｎｅｄｉｏｎｅ和４－［２－（３Ｒ，５Ｓ－ｄｉｍｅｔｈｙｌ－２－ｏｘｏｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ）－２－ｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌ］－２，６－ｐｉｐｅｒｄｉｎｅ－ｄｉｏｎｅ的混合体。３３５Ａ１具有较强的免疫抑制活性     

耐甲氧西林金葡球菌对环丙沙星摄取的研究

１１株耐甲氧西林金葡球菌（ＭＲＳＡ）对１４种抗菌药物的敏感度进行了测定，除２株ＭＲＳＡ对环丙沙星敏感外，其他９株ＭＲＳＡ均对环丙沙星耐药，最低抑菌浓度（ＭＩＣ）≥１６ｍｇ／Ｌ。此组耐药菌株对其他受试的氟喹诺酮类药物也呈交叉耐药。ＭＲＳＡ对环丙沙星的摄取在２～５ｍｉｎ内达到稳定态。１９９０年以前的ＭＲＳＡ菌株对环丙沙星的摄取几乎不受氰氯苯腙（ＣＣＣＰ）影响；而１９９０年以后的菌株对环丙沙星的摄取量大多受ＣＣＣＰ影响，ＣＣＣＰ（１０ｍｇ／Ｌ）可增加ＭＲＳＡ对环丙沙星的摄取，为不加ＣＣＣＰ时的１．５３倍。此结果提示能量依赖性流出系统的改变与ＭＲＳＡ对氟喹诺酮耐药有关。诱导耐药株ＭＲＳＡ８７－９０Ｒ对环丙沙星的摄取量较诱导前（ＭＲＳＡ８７－９０）明显为少，但两者对药物的摄取均不受ＣＣＣＰ影响。     

β－内酰胺类抗生素联合舒巴坦对产酶大肠杆菌的体外抗菌活性研究

４种β－内酰胺类抗生素与舒巴坦（ＳＢＴ）以２：１比例联合对临床分离产酶大肠杆菌的体外抗菌活性研究结果表明：氨苄西林（ＡＭＰＣ）、哌拉西林（ＰＩＰＣ）、头孢唑林（ＣＥＺ）、头孢哌酮（ＣＰＺ）联合舒巴坦对４５株产酶大肠杆菌的体外抗菌活性均优于抗生素自身的抗菌活性，尤以ＡＭＰＣ／ＳＢＴ、ＰＩＰＣ／ＳＢＴ、ＣＥＺ／ＳＢＴ明显；８０％以上的产酶株对ＰＩＰＣ／ＳＢＴ、ＣＥＺ／ＳＢＴ、ＣＰＺ／ＳＢＴ和ＣＰＺ敏感；ＣＰＺ／ＳＢＴ与ＣＰＺ的抗菌活性比较差异不明显，可能与ＣＰＺ具有酶稳定性有关。     

国产米诺环素对耐甲氧西林金葡球菌的体外抗菌活性观察

用琼脂稀释法进行国产米诺环素对１０４株耐甲氧西林金葡球菌（ＭＲＳＡ）和１２０株甲氧西林敏感金葡球菌（ＭＳＳＡ）的抗菌活性研究，并与日本产米诺环素等进行了抗菌作用比较。结果表明国产米诺环素对ＭＲＳＡ和ＭＳＳＡ的抑菌效果，与日本产米诺环素基本一致。对ＭＲＳＡ的ＭＩＣ５０和ＭＩＣ９０前者分别为２和８ｍｇ／Ｌ，而后者分别为２和４ｍｇ／Ｌ。两者对ＭＳＳＡ的ＭＩＣ５０和ＭＩＣ９０均为０．５和４ｍｇ／Ｌ。国产米诺环素与其它６种抗生素比较，除去甲万古霉素外，其对ＭＲＳＡ和ＭＳＳＡ的抗菌效果，均优于头孢唑林等抗生素     

RT—PCR检测早幼粒细胞白血病RML—RARa融合基因及其意义

用筑巢式逆转录酶／聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，对１６例早幼粒细胞白血病（ＡＭＬ－Ｍ３）患者进行了ＰＭＬ＝ＲＡＲａ融合基因的检测，所有患者标本均为阳性，１例呈正常核型也检出阳性扩增带，１４例经全反式维甲酸ＡＴＲＡ诱导缓解时，１０例仍可以检测到融合基因的表达，经过两个疗程化疗巩固强化后，其中７例转阴，而３例融合基因持缓阳性的患者均在半年内复发，ＰＣＲ阴性者始终处于完全缓解（ＣＲ）中。结果表明，Ｒ     

2-Amino-5-oxo-2-tetrahydrofuran carboxylic acids,novel γ-lactone antibacterial agents

设计并合成了五种２－酰胺基－５－氧－２－四氢呋喃羧酸类新的抗菌剂。它们的化学结构经ＭＳ、ＩＲ、１Ｈ－ＮＭＲ证实。合成的化合物对所试的２０株革兰氏阳性和阴性细菌中的大多数具有抗菌活性，化合物３ｅ对大多数菌的抗菌活性与头孢曲松相当。     

抗生素89－07联合氟氧头孢实验治疗mec A基因阳性MRSA感染小鼠败血症体内抗菌疗效

应用ｍｅｃＡ基因阳性的甲氧西林耐药金葡球菌２株临床分离菌株，金葡球菌９２－１０６与８９－１８７感染小鼠引起的小鼠败血症实验模型，评价抗生素８９－０７与氟氧头孢联合方案的体内抗菌活性并与去甲万古霉素单独给药进行比较。结果表明去甲万古霉素治疗金葡球菌９２－１０６和８９－１８７引起的小鼠ＭＲＳＡ感染的半数有效剂量ＥＤ５０值分别为５．８±１．１和４．１±０．８ｍｇ／ｋｇ，均显著低于抗生素８９－０７（１０．０，１０．５ｍｇ／ｋｇ）或氟氧头孢（２６；９，２９．２ｍｇ／ｋｇ）。抗生素８９－０７与氟氧头孢联合治疗ＭＲＳＡ９２－１０６与８９－１８７感染小鼠的ＥＤ５０值分别为３．８与２．５ｍｇ／ｋｇ。均显著低于去甲万古霉素、抗生素８９－０７和氟氧头孢相应的ＥＤ５０值。说明抗生素８９－０７与氟氧头孢联合方案的体内抗菌活性比去甲万古霉素强，具有统计学显著意义（Ｐ＜０．０１）。表明两药联合具有很好的体内协同作用。     

佐剂和母体抗体对新生鼠接种RSVBBG2Na疫苗后保护效果的影响

本文报道了重组Ａ亚型呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）融合蛋白ＢＢＧ２Ｎａ疫苗,在不同佐剂组成、不同免疫途径和高水平母体抗体存在的情况下对新生小鼠的保护作用。将１剂ＡＩＰＯ＿４－ＢＢＧ２Ｎａ（２０μｇ）腹腔或肌肉接种卫周龄新生小鼠,４周后取血用ＥＬＩＳＡ测定ＢＢＧ２Ｎａ和ＲＳＶ－Ａ特异性抗体滴度。结果试验组２３只小鼠中有２２只产生较强的疫苗特异性及ＲＳＶ－Ａ特异性ＩｇＧ抗体应答（与接种途径无关）。接种ＰＢＳ的时照组全部抗体阴性。接种后４周,用ＲＳＶ－Ａ攻击,结果显示对照组小鼠肺部病毒滴度很高（３．５ｌｏｇ…     

氯苯扎利钠对正常大鼠及佐剂性关节炎大鼠IL－1活性及大鼠腹腔巨噬细胞H_2O_

研究了氯苯扎利钠（ＣＣＡ）对正常大鼠和佐剂性关节炎大鼠ＩＬ－１活性及大鼠腹腔巨噬细胞Ｈ＿２Ｏ＿２释放的影响。经ＣＣＡ（１０．２００μｇ／ｍｌ）作用后所制备的含ＩＬ－１上清液（正常大鼠腹腔巨噬细胞１．５×１０￣７／ｍｌ，ＬＰＳ８μｇ／ｍｌ）使小鼠胸腺细胞在体外增殖活性（［３￣Ｈ］ＴｄＲ参入法）降低。ＣＣＡ对佐剂性关节炎大鼠ｉｐ￣７天后可使升高的ＩＬ－１活性降低。采用酚红法测定Ｈ＿２Ｏ＿２释放，可见ＣＣＡ５～１００μｇ／ｍｌ对腹腔巨噬细胞Ｈ＿２Ｏ＿２释放抑制作用明显。这些结果表明，ＣＣＡ抗炎和治疗ＲＡ的机制之一可能是通过干扰ＲＯＳ的释放及抑制ＩＬ－１活性，使ＩＬ－１作为肽类炎症介质参与反应和参与免疫调节的过程受阻而达到的。     

新脂肽类抗生素达托霉素的抗菌活性及临床研究进展

在体外抗菌活性研究中,达托霉素（ｄａｐｔｏｍｙｃｉｎ）对革兰氏阳性菌耐药突变株表现出杰出的活性,其中对甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌（ＭＲＳＡ）的ＭＩＣ５０为０．１２５～２ｍｇ／Ｌ,对青霉素耐药性肺炎链球菌的ＭＩＣ５０＜０．０１～１ｍｇ／Ｌ,对万古霉素耐药性肠球菌（ＶＲＥ）的ＭＩＣ５０为０．５～２ｍｇ／Ｌ。一般而言,达托霉素的ＭＩＣ为万古霉素ＭＩＣ的１／２～１／４,并对ＭＲＳＡ和ＶＲＥ有杀菌活性。在各种革兰氏阳性菌中,对达托霉素的抗菌谱和药效学作了评价,达托霉素对所有测试菌的杀菌率都超过９９％,对…     

白芍总甙对正常人与类风湿性关节炎患者单核细胞和淋巴细胞功能的影响

０．１～２．５ｍｇ·Ｌ－１白芍总甙（ＴＧＰ）对正常人的ＬＰＳ诱导外周血单个核细胞产生ＩＬ－１．ＰＨＡ－Ｐ诱导淋巴细胞增殖反应和ＩＬ－２产生均呈现浓度依赖性的双向作用；ＴＧＰ还可浓度（０．１～１２．５ｍｇ·Ｌ－１）依赖性地降低正常人淋巴细胞上ＩＬ－２Ｒ的密度．ＴＧＰ能使类风湿性关节炎（ＲＡ）患者低下的ＰＨＡ－Ｐ致分裂素反应与ＩＬ－２产生能力恢复正常，使外周血中减少的Ｔｓ细胞数目回到正常水平．但可使ＲＡ患者ＰＢＭＣ过度产生ＩＬ－１降低至正常范围．并能显著降低ＲＡ患者增高的淋巴细胞ＩＬ－２Ｒ的密度。上述结果表明．ＴＧＰ对ＲＡ患者有明显的机能依赖性免疫调节作用．ＴＧＰ对ＲＡ的治疗作用可能与其调整ＲＡ患者异常的免疫功能有关。     

新型大肠杆菌融合表达系统表达水蛭素Ⅲ基因研究

选用大肠杆菌Ｌ－门冬酰胺酶（ＡＳＰｓⅡ）高效表达质粒ｐＫＡ作为融合表达载体,将水蛙素Ⅲ（ＨＶ３）人工合成编码基因插入 ｐＫＡ质粒的 ＡＳＰｓⅡ编码基因 ａｎｓＢ中,使 ＡＳＰｓ Ⅱ１Ｎ端的 ８９个氨基酸残基通过甲硫氨酸残基与 ＨＶ３形成融合蛋白,从而构建成 ＡＳＰｓⅡ－ＨＶ３融合蛋白表达质粒 ｐＫＡＨ,通过基因操作将该质粒的低拷贝数复制原长更换成 ｐＵＣ高拷贝数复制原点,进而构建成ＡＳＰｓⅡ－ＨＶ３融合蛋白高效表达载体 ｐＵＫＡＨ。该质粒在大肠杆菌 ＪＭ１０５宿主细胞中表达后,融合蛋白（１５． ６ ｋＤ）占细菌总蛋白 １０ ５％,该融合蛋白经 ＣＮＢｒ切割释放出活性水蛭素分子,抗凝血活力达约 ２０ ＡＴＵ／ｍｌ培养液,为以后进一步研究打下了基础。     

链霉菌种内融合重组子产生新活性物质的分离和初步鉴别

从农抗５１０２产生菌（吸水链霉菌应城亚种）的种内融合中筛选到１株融合重组子ＦＲ－００５，它除了产生亲本所产生的３种抗生素外，尚能产生亲本没有的一种新活性物质。通过正丁醇萃取从发酵滤液中分离到这种对苏云金芽孢杆菌和啤酒酵母有抑制活性的物质，再经过硅胶柱、氧化铝柱和微晶纤维素柱依次连续分离，进一步又用硅胶Ｇ薄层层析分离，即得到纯度相当高的只对苏云金芽孢杆菌有活性的精制品。精制品经过稳定性、呈色反应、紫外可见光谱、纸层析谱、氨基酸组成等检测，表明该物质是一种多肽类抗生素     

黄芪多糖对烧伤小鼠细胞免疫功能的作用

应用小鼠烧伤模型，对黄芪多糖（ＡＰＳ）的免疫增强作用进行了体内外研究。结果表明：体内应用ＡＰＳ（２５０ｍｇ·ｋｇ－１，ｑｄ，连续５ｄ），可明显提高烧伤小鼠Ｔ淋巴细胞转化，ＩＬ－２的产生及ＩＬ－２Ｒ的表达；体外分别应用５０、１００、２５０ｍｇ·Ｌ－１的黄芪多糖，发现其可纠正烧伤小鼠Ｔ淋巴细胞转化，ＩＬ－２的产生及ＩＬ－２Ｒ表达的受抑状态，并促进巨噬细胞产生ＩＬ－１，抑制ＰＧＥ２合成，且呈剂量依赖关系；体外去除烧伤小鼠脾细胞中的巨噬细胞后，ＡＰＳ对Ｔ淋巴细胞转化，ＩＬ－２产生及ＩＬ－２Ｒ表达的调节作用消失。提示ＡＰＳ对烧伤小鼠的免疫调节作用依赖于巨噬细胞，通过调节其分泌ＩＬ－１，抑制ＰＧＥ２合成，而促进ＩＬ－２产生及ＩＬ－２Ｒ表达，进而增强Ｔ淋巴细胞增殖。     

HPLC和~1HNMR分析确定cis－A－和cis－B－羟甲芬太尼的组成和构型

羟甲芬太尼（１）是一个强效的镇痛剂和高亲和、高选择性的阿片μ受体激动剂。通过ＨＰＬＣ和１ＨＮＭＲ分析，ｃｉｓ－Ａ－ｌ被确定为由等量的ｃｉｓ－（＋）－（３Ｒ，４Ｓ，２＇Ｓ）－ｌ和：ｃｉｓ－（—）－（３Ｓ，４Ｒ，２＇Ｒ）－１组成的外消旋体，ｃｉｓ－Ｂ－ｌ被确定为由等量的ｃｉｓ－（—）－（３Ｒ，４Ｓ，２＇Ｒ）－１和ｃｉｓ－（＋）－（３Ｓ，４Ｒ，２＇Ｓ）－１组成的外消旋体。