菲牛蛭素体内外抗凝实验研究

目的:研究广西菲牛蛭中提取的两种菲牛蛭素--菲牛蛭素A(Bufrudin A,BA)和菲牛蛭素B(Bufrudin B,BB)在人体外及动物体内的抗凝作用.方法:观察菲牛蛭素在人体外及动物体内对部分活化凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)的影响.结果:在体内外实验中,BA、BB均能明显延长活化部分APTT、PT及TT,但两者的三个指标有明显差异性,其中BA对TT的作用最显著,BB则对PT的作用更强.结论:广西菲牛蛭中的抗凝物质BA、BB在体内外均有较强的抗凝活性.     

广东菲牛蛭水蛭素基因的克隆和序列测定

目的：研究地理因素对水蛭素基因结构变异的影响。方法：抽提广东菲牛蛭基因组DNA，根据已发表的水蛭素基因设计一对引物，从基因组DNA扩增出一特异性的大约700bp片段，再回收，克隆和测序。结果：广东菲牛蛭水蛭素基因全长为642bp，基因有4个外显子，被三个内含子隔开，与马尼拉菲牛蛭水蛭素基因Hm1,Hm2的同源性分别为90％与88．6％，结论：地理因素会影响菲至蛭水蛭素基因结构的变异。     

广东菲牛蛭生长和生殖的研究

目的研究室内菲牛蛭生长动态和生殖,为人工饲养菲牛蛭提供基础资料.方法在同一个卵袋产下的幼蛭,放入盛有天然水的80 cm×60 cm×50 cm的玻璃缸内饲养,每10 d称牛蛭体重1次,每天记录水温,每月换水一次,每次在野外采回的水要检测10种化学成分.在活兔身上吸血,每次称出吸血量.观察生长发育变化、记录交配产卵过程.结果从孵化出的幼蛭经14个月时间,吸血5,6次,生长发育达到性成熟,第1,2,3次吸血为幼体阶段,第4次吸血后进人亚成体阶段,第5次吸血后,部分个体达到性成熟,有的个体第6次吸血后进人性成熟.生长动态曲线是一跳跃曲线.记录了交配、产卵过程.结论阐明牛蛭生长动态和生殖过程.在室内饲养牛蛭成功.     

广东菲牛蛭生活水体的化学环境

蛭类俗称蚂蟥,是传统中药。《本草纲目》对水蛭的药理、疗效、使用方法作了较全面记载。现代药理实验表明水蛭注射液能使肿瘤细胞坏死、消失,对网状内皮细胞有增强作用。与非吸血蛭类比较,吸血的菲牛蛭唾液腺含有较丰富的抗血液凝固水蛭素,在医药学上有重要价值。有关吸血蛭类繁殖饲养研究,国内谭恩光(2002)曾报道广东菲牛蛭H irud inariam an illensis Lesson的生长和生殖,及吸血山蛭的生态分布、生长、摄食和生殖[1~3]。国外K eegan(1968)对东南亚的菲牛蛭生活习惯进行观察[4]。1992年Steiner从产自马尼拉的菲牛蛭中分离纯化新的水蛭素,…     

不同试剂处理对菲牛蛭冻干粉抗凝活性的影响研究

目的:研究比较不同试剂处理对菲牛蛭冻干粉抗凝血活性的影响。方法:采用凝血酶直接滴定法对不同试剂处理后的菲牛蛭冻干粉的抗凝血活性进行测定。结果:与对照组相比较,乙酸乙酯、正己烷、环己烷、丙酮、石油醚、蒸馏水6种试剂对菲牛蛭冻干粉抗凝血活性基本无影响;甲醇和乙醇对其活性损失最大,超过33%;氯仿、二氯甲烷损失较小,接近17%。结论:菲牛蛭冻干粉抗凝血活性强弱与其处理的试剂有较大关系。在菲牛蛭深加工时,建议选择石油醚、乙酸乙酯、蒸馏水3种试剂,既可保证其安全性,也能有效保留菲牛蛭冻干粉的抗凝血活性,最大程度利用资源。     

广西菲牛蛭提取物抗动物血栓形成的作用

目的:研究菲牛蛭提取物对抗动物血栓形成的作用.方法:采用家兔动脉血栓和大白鼠静脉血栓模型,静脉注射菲牛蛭提取物每千克60个抗凝血酶单位 (60ATU /kg),用生理盐水作阴性对照.测定其对动脉及静脉血栓形成的作用. 结果:给药后,菲牛蛭提取物对动脉血栓、静脉血栓湿重和干重均有明显减轻作用,与生理盐水对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论:菲牛蛭提取物有较强的抗动物血栓形成作用,具有潜在的临床应用价值.     

广东菲牛蛭水蛭素基因的克隆和序列测定

【目的】研究地理因素对水蛭素基因结构变异的影响。【方法】抽提广东菲牛蛭基因组DNA ,根据已发表的水蛭素基因设计一对引物 ,从基因组DNA扩增出一特异性的大约 70 0bp片段 ,再回收、克隆和测序。【结果】广东菲牛蛭水蛭素基因全长为 6 42bp ,基因有 4个外显子 ,被三个内含子隔开。与马尼拉菲牛蛭水蛭素基因Hm1、Hm2 的同源性分别为 90 %与和 88 6 %。【结论】地理因素会影响菲牛蛭水蛭素基因结构的变异。     

凝血酶滴定法测定云南菲牛蛭中水蛭素含量的改进研究

目的 改进原云南省菲牛蛭质量标准中水蛭素的含量测定方法。方法 考察白瓷板法代替原试管方法、两种浓度的凝血酶溶液、几种滴定体积对含量测定的影响;用原方法和改进后的方法分别对五批样品进行滴定比较。结果 改进后,用白瓷板法测定,配制两种浓度的凝血酶溶液（40NIH·mL-1与20NIH·mL-1）,采用几种滴定体积（1～5μL）,每1min滴加1次,先滴加高浓度凝血酶溶液初测消耗的凝血酶溶液体积后,再用两种浓度的凝血酶溶液重新进行精确测定;增加空白对照实验,限定反应时间为10min;菲牛蛭样品浓度在0.00678～0.0597g·mL-1（r=0.9983）内与消耗的凝血酶单位量呈线性相关;五批样品的含量为156.68～234.25U·g-1,RSD均小于5%;含量供试品溶液在4℃下24h内稳定。结论 改进后的方法简便、快速,重复性和准确度较原方法好,可作为一种新的云南菲牛蛭水蛭素含量测定方法。     

菲牛蛭对实验性高脂血症血脂及血液流变学的影响

目的：研究菲牛蛭对高脂血症鹌鹑血脂及血液流变学的影响。方法：在高脂饲料喂饲鹌鹑2周后,用药组再同时灌服3个不同剂量的菲牛蛭（0.075g/kg、0.15g/kg、0.3g/kg）4周,6周后测定血脂水平及血液流变学指标。结果：菲牛蛭各组的TC、TG、LDL-C均显著低于模型对照组（P〈0.01）。菲牛蛭0.15g/kg、0.3g/kg剂量组的全血黏度（高切）红细胞刚性指数显著低于模型对照组（P〈0.05或P〈0.01）。菲牛蛭0.3g/kg剂量组的全血黏度（中切）、红细胞压积显著低于模型对照组（P〈0.05或P〈0.01）。结论：菲牛蛭可降低血脂,同时对血液流变学有改善作用。     

菲牛蛭素对血管新生作用的研究

目的：通过菲牛蛭素刺激人脐静脉内皮细胞（HUVEC）和鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）血管,研究其对血管新生的影响.方法：体外培养HUVEC,以血管内皮生长因子（VEGF）作阳性对照药,采用四甲基噻唑蓝（MTT）比色法测定菲牛蛭素对HU-VEC细胞活力的影响,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测菲牛蛭素对HUVEC培养液中VEGF释放含量的影响;制备CAM模型,生理盐水作对照,观察不同浓度菲牛蛭素对血管生成的影响.结果：菲牛蛭素终浓度0.25 U/mL时细胞活力最强,与空白对照组比较增殖率为28.4％,且在此浓度培养液中VEGF含量最高,比空白对照组高出80.7％;与生理盐水对照组比较,CAM血管总数明显增加,大、中血管数增加显著（P＜0.01）,小血管数变化不明显（P＞0.05）,其中以22 U/mL剂量组增生作用最明显.结论：菲牛蛭素对血管新生具有促进作用,这可能为缺血性疾病治疗提供依据.     

毛木耳多糖的抗凝血和降血脂作用

从毛木耳Auricularia polytricha中提取得毛木耳多糖(APP)。APP po 150和37 mg/kg能分别延长小鼠凝血时间和家兔白陶土部分凝血活酶时间;APP能延长体外凝血时间,但对凝血酶元时间无明显影响;APP po 150,300 mg/kg对正常小鼠血清胆固醇水平无影响;APP po 100,150 mg/kg可预防实验性高胆固醇血症的形成;APP po 50 mg/kg×10 d,可降低高脂血症大鼠血清总胆固醇(TC)、血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯,升高血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)/TC;APP的LD_(50)为1165±275 mg/kg。     

心安宁的降血脂和抗凝血作用

心安宁ｐｏ３,６ｇ／ｋｇ对实验性高血脂症大鼠能明显降低其血清和肝脏中的ＴＣ和ＴＧ含量（Ｐ＜０．０１）,并能明显提高血清ＨＤＬ－Ｃ的含量（Ｐ＜０．０１）及降低ＡＩ值;心安宁ｐｏ２,４ｇ／ｋｇ能明显延长小鼠凝血时间（Ｐ＜０．０１）;心安宁ｐｏ１,３ｇ／ｋｇ能明显减轻大鼠动静脉血栓重量（Ｐ＜０．０１）。     

血液透析过程中抗凝措施的研究进展

血液的凝固是一个非常复杂的过程。凝血过程的研究在基础医学和临床医学上都有着重要的意义。为了给透析过程提供一个安全有效的环境，适当的抗凝措施是非常必要的。抗凝药物的不断开发，与之伴随的是不断更新的临床实践经验，因此对于血液透析的临床医师来说，需要做的是不断拓展这方面的知识。本文对当今的抗凝措施进行了回顾。     

SD大鼠脑皮质星形胶质细胞的纯化

目的 改进实验步骤获取符合体外研究使用的富含星形胶质细胞的培养物.方法无菌条件下取新生1天内的SD乳鼠的脑皮质,先机械吹打,然后以差速贴壁、摇床振荡以及传代的方法去处其他细胞,SABC法和免疫荧光双标方法GFAP鉴定纯度.结果成功获取星形胶质细胞比例>95%的培养物.结论上述方法可靠地获取了符合体外研究要求的培养物,免疫荧光双标方法较直观.     

SPA和SPGSepharose亲和层析分离提纯单克隆抗体IgG

用葡萄球菌Ａ蛋白（ＳＰＡ）和链球菌Ｇ蛋白（ＳＰＧ）Ｓｅｐｈａｒａｓｅ亲和层析分离提纯衣原体脂多糖（ＬＰＳ）和合成衣原体属特异性多糖抗原单克隆抗体ＩｇＧ，方法简便快速，分离后的ＩｇＧ纯度高，优于ＬＰＳ特异性抗原Ｓｅｐｈａｒｏａｅ亲和层析法。     

心房颤动患者低强度抗凝与抗血小板治疗及蛋白C及S活性改变

目的 观察口服华法林低强度抗凝相对于阿司匹林抗血小板治疗对心房颤动血栓事件的作用,并探讨血浆蛋白C及蛋白S活性变化及临床意义。方法 选择笔者医院于2012年6月~2013年6月收治72例老年心房颤动患者作为研究对象,采用数字表法随机分组,每组36例,观察组采取华法林低强度抗凝,初始剂量为2.5mg/d,调整剂量使INR控制在1.5~2.5,对照组采取阿司匹林治疗,均测定两组患者抗凝前后血浆蛋白C及蛋白S活性,比较两组患者疗效及血浆蛋白C及蛋白S活性。结果 两组出血发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组共血栓发生率1(2.78%)明显低于对照组6例(16.67%)(P<0.05)。抗凝后观察组PC、PS活性均低于对照组(P<0.05)。观察组抗凝后与抗凝前比较PC、PS活性降低(P<0.05)。结论 口服华法林低强度抗凝应用于心房颤动患者效果明显,低强度华法林虽降低血浆蛋白C及蛋白S活性,并未增加血栓事件发生率。     

金鸡菊提取物对微循环及抗凝血作用的实验研究

目的:观察金鸡菊提取物A、B对小鼠耳廓微循环的影响;观察金鸡菊提取物A、B对小鼠出血时间(BT)、凝血时间(CT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)的影响。方法:灌胃给药7 d后,用WX-9型微循环显微镜观察小鼠耳廓血管口径;小鼠以剪尾法测定BT;玻片法测定CT;应用体外测定PT、APTT、TT。结果:金鸡菊提取物A、B可明显延长实验小鼠BT、CT、PT、APTT、TT;同时明显增加血管口径和毛细血管网交叉结点数。结论:金鸡菊提取物A、B具有抗凝血活性;并具有增强微循环的作用。提示金鸡菊提取物可能具有活血、改善高血压患者的血液流变学异常的作用。     

非瓣膜性心脏病心房颤动的抗凝治疗进展

非瓣膜性心脏病心房颤动(NVAF)是指风湿性心脏病以外的其他心脏病所致的心房颤动。随着社会的老龄化,NVAF逐年增多,栓塞和卒中的发生率也随之升高。其治疗主要存在三大难题:一是心房颤动复律与窦律的维持;二是心室律的有效控制,是对不能复律者的有效控制;三是防止发生卒中。本文就NVAF的流行病学特征、栓塞和卒中的危险因素,华法令在抗凝治疗中的临床应用、局限性、出血并发症及新型口服直接凝血酶抑制剂的出现和应用前景,中药在抑制血小板聚集、改善纤溶能力、减少或延缓血栓的形成中的抗凝治疗作用等问题进行综述。