凋亡细胞核DNA片段检测方法进展

当今生物学领域的研究一个热点之一是细胞凋亡,开展对细胞凋亡的研究,首先要解决是方法问题,作者从凋亡细胞的特性性核ＤＮＡ片段检测着手,阐述了多种凋亡细胞核ＤＮＡ片段检测方法以及近年来的一些新进展。     

颅脑损伤后神经元修复和生存能力研究进展

研究表明,许多急性神经功能紊乱和慢性神经退行性疾病都会导致神经元的缺失,细胞凋亡也参与了这个过程,因此,了解导致神经元特异性死亡及细胞凋亡的过程,对于我们制定治疗这些疾病的药理学策略是很重要的。大量研究证实NGF、Bcl-2、Bax的表达与神经元受损后恢复和生存能力有密切的关系。1NGF与颅脑损伤:NGF是典型的神经营养因子,能促进外周及中枢神经元的分化、生长及存活。在个体发育、成熟和衰老过程中,脑内NGF含量有着复杂的变化。出生后明显增加,可在2周内上升5倍~6倍,此后又下降至—个稳定的水平;到老年期,NGF含量又显著下降。…     

急性颅脑损伤后精神障碍（附76例临床分析）

目的 研究颅脑损伤所致精神障碍的临床特点及其相关因素。方法 对76例颅脑损伤病人伴发精神障碍其发病时间、年龄、受伤部位、伤情程度、发病类型进行分析，探讨它们之间的关系。结果 脑外伤后3周内出现精神障碍46例，占60．5％。与额叶损伤有关的病例共54例，占71％。治疗后痊愈68例，占89．5％；显著进步6例，占7．9％；进步2例，占2．6％。结论 颅脑损伤伴发精神障碍多发生在伤后早期，以中青年多见，受伤部位以额叶多见，其次是颞叶；受伤类型中以脑挫裂伤多见，社会、心理因素致病的重要因素，病程多较短。     

脑缺血后迟发性神经元损伤与细胞凋亡

细胞凋亡是指细胞受到一些特殊信号刺激后 ,通过启动其内部遗传机制 ,按照固有程序 ,形成级联式信息传导和基因表达 ,最终导致细胞死亡。近年来的研究表明 ,脑缺血后迟发性神经元与细胞凋亡关系密切。对脑缺血后迟发性神经元死亡与细胞凋亡关系的研究将有助于更进一步了解脑缺血的发病机制及防治药物的研制 ,因此具有重要的意义。现就脑缺血后迟发性神经元损伤与细胞凋亡的研究概述如下。1　细胞凋亡的特征及与坏死的区别细胞凋亡是机体的一种基本生理机制 ,贯穿于机体的整个生命过程中。其形态学特征表现为细胞首先变圆 ,随即与邻近细胞脱…     

甲状腺素对重型颅脑损伤大鼠神经细胞凋亡、NSE及IL-6的影响

目的 通过观察甲状腺素对重型颅脑损伤大鼠神经细胞凋亡、血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、白细胞介素(IL)-6的影响及血清FT3、FT4的改变,探讨甲状腺素对重型颅脑损伤脑组织的保护作用.方法 90只SD大鼠分为对照组、模型组、左甲状腺素钠片低剂量组、左甲状腺素钠片中剂量组、左甲状腺素钠片高剂量组5组,每组各18只,参照Feeney's自由落体打击造模法复制动物模型;于伤后6h灌胃.灌胃后24、72、168 h分别通过TUNEL法、ELISA法及放射免疫法检测神经细胞凋亡、血清NSE、IL-6及血清FT3、FT4水平.结果 (1)重型颅脑损伤大鼠受伤后血清FT3、FT4水平低于正常水平,FT4在168h降到最低,甲状腺素可使FT3、FT4水平升高.(2)重型颅脑损伤大鼠受伤后出现明显的神经细胞凋亡,这种凋亡持续至168 h.中剂量及高剂量甲状腺素在24 h即可以改善神经细胞凋亡,低剂量甲状腺素在168 h才可以改善神经细胞凋亡.(3)重型颅脑损伤大鼠血清NSE、IL-6于伤后明显升高,一直持续到168 h.中剂量及高剂量甲状腺素在72 h即可以降低血清NSE、IL-6水平.结论 外源性甲状腺素对重型颅脑损伤大鼠脑组织具有保护作用.     

急性重度颅脑损伤预后的影响因素

目的：探讨影响急性重度颅脑损伤预后因素。方法：近6年来救治68例急性重度颅脑损伤患者的临床资料，分析影响患者预后的因素。结果：伤后意识障碍程度是衡量颅脑损伤轻重的客观指标；颅内血肿的救治是否及时直接影响预后；瞳孔变化、颅脑CT的改变与患者病死率和致残率的高低密切相关；年龄、病情的监控、复合伤的处理、并发症的预防等因素对患者预后的影响不可忽视。结论：伤后及早正确估计伤情，尽快采取有效措施，能获得理想的救治效果。     

细胞凋亡相关基因与神经疾病

细胞凋亡在生长发育和疾病的发生发展中起着重要作用，细胞以凋亡方式主动“自杀”对维持机体自身的稳定有积极的生理意义，但是，凋亡规律失常也会导致机体肿瘤和疾病的发生。本着重介绍了近年来细胞凋亡相关基因的研究进展及其在神经系统病变中的作用。     

颅脑损伤患者急性胃肠损伤的危险因素分析

目的：分析颅脑损伤患者继发急性胃肠损伤( AGI)的危险因素。方法回顾分析2010年1月至2013年12月在皖南医学院附属黄山市人民医院重症医学科住院的239例颅脑损伤患者的临床资料,并进行统计学分析。结果231例患者(96．65%)发生AGI,其中Ⅰ级180例,Ⅱ级49例,Ⅲ级2例；无AGI 8例(3．35%)。合并低灌注153例,合并高血压23例,合并糖尿病4例。格拉斯哥昏迷评分( GCS评分)是AGI发生的高危因素,合并糖尿病、高血压及低灌注等与AGI关联度不高。结论颅脑损伤后,AGI的严重程度与颅脑损伤的严重程度有关,GCS评分是发生AGI的独立危险因素。     

大鼠急性颅脑伤后下丘脑生长抑素神经元的变化

应用免疫细胞化学和图像分析等技术，观察鼠性颅脑伤室旁核生长抑素神经元的变化。结果表明，损伤初期ＳＳ神经元数目和免疫反应面积均明显减少；伤后３ｈ和６ｈＳＳ含量逐渐增加，恢复至正常水平。     

右美托咪定抑制大鼠创伤性脑损伤后神经细胞凋亡

  目的  探讨右美托咪定（DEX）对创伤性脑损伤（TBI）的神经保护作用是否与抑制神经细胞凋亡有关，是否涉及SIRT1信号通路。  方法  将SD大鼠随机分为Sham组、TBI + NS组、TBI + DEX组和TBI + DEX + EX527组。采用干/湿重法评估脑创伤后脑组织含水量；神经功能缺损评分检查神经功能受损情况；Western blot法检测大鼠皮质Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。  结果  实验结果显示DEX干预后可减少脑创伤后促凋亡的调控蛋白Bax表达，差异有统计学意义（P < 0.05），增加抑制凋亡的调控蛋白Bcl-2表达，差异有统计学意义（P < 0.05），减轻脑水肿，差异有统计学意义（P < 0.05）和改善神经功能，差异有统计学意义（P < 0.05），上述观测指标的变化可被SIRT1抑制剂EX527逆转。  结论  提示DEX通过抑制神经细胞凋亡而减轻脑创伤后的继发性损害，该神经保护作用与SIRT1信号通路之间存在一定相关性。     

caspase-3在创伤性脑损伤诱导神经细胞凋亡中的作用

目的探讨创伤性脑损伤诱导神经细胞凋亡的机制。方法分别采用流式细胞术和借助caspase-3荧光分析试剂盒检测大鼠头颅打击伤后不同时间(3、12、24h和2、3、7、14d)损伤脑组织的神经细胞凋亡率和cas-pase-3活性的变化。结果损伤脑组织神经细胞凋亡率和caspase-3活性均随着伤后时间的延长而迅速增高,两者均至3d达峰值,分别为(14.6±2.4)%和(0.545±0.024)nmolAFC,然后逐渐下降,伤后14d分别下降到(3.2±0.8)%和(0.128±0.012)nmolAFC,但仍高于正常水平(P<0.01)。加入特异性caspase-3抑制剂z-DEVD-fmk后神经细胞凋亡率和caspase-3活性均显著降低(P<0.01)。结论caspase-3参与了创伤性脑损伤诱导的神经细胞凋亡。     

怀牛膝对重度颅脑损伤大鼠神经细胞凋亡的影响

目的：观察具有活血化瘀、补益肝肾作用的中药怀牛膝对重度颅脑损伤大鼠神经细胞凋亡的影响,探讨怀牛膝治疗颅脑损伤的作用机理。方法：以自制改良的Feeney＇s自由落体打击装置造重度颅脑损伤大鼠模型,给怀牛膝水煎剂灌胃治疗1周,采用TUNEL法原位检测损伤区神经细胞的凋亡,观察怀牛膝对颅脑损伤大鼠神经细胞凋亡的影响。结果：与模型组相比,高剂量牛膝组治疗的颅脑损伤大鼠TUNEL阳性细胞数显著增多,P〈0.05;其他各组的差异无统计学意义。结论：活血化瘀、补益肝肾的中药怀牛膝促进颅脑损伤大鼠神经细胞的凋亡,可能是怀牛膝改善了大鼠的免疫功能,增强了机体对受损神经细胞的清除能力,故凋亡细胞数增加。     

PTEN在神经元损伤和脑功能障碍中的作用

磷酸酶与张力蛋白同源物基因(PTEN)是定位于10q23的具有双重磷酸酶活性的抑癌基因,其缺失或失活常会导致肿瘤的发生。PTEN在神经系统表达广泛,它能分别以其脂质和蛋白质磷酸酶活性通过Akt信号通路及与膜受体N-甲基-D-天冬氨酸受体和五羟色胺2c受体的相互作用,调节神经元的损伤和脑功能障碍的发生。因此,对PTEN功能的进一步研究将使其在肿瘤和神经疾病的治疗上具有潜在的临床应用价值。     

实验性大鼠脑挫伤后神经细胞凋亡的观察

目的 观察大鼠脑挫伤后神经细胞凋亡的时序空间变化.方法 建立自由落体打击大鼠脑挫伤动物模型,采用TUNEL染色方法和DNA凝胶电泳分析,研究神经细胞凋亡.结果 ①伤后2 h即可见神经细胞凋亡,挫伤半影区比中央区更显著,P＜0.05;与远隔部位和对照组有显著差异.②挫伤半影区神经细胞凋亡率和平均积分光密度(IOD)变化呈上升趋势,与损伤时间呈线性关系.③脑挫伤后6 h以后出现DNA"梯状"谱带.结论 大鼠脑挫伤后神经细胞凋亡逐渐增强,具有时序性变化特点,有利于探索推断脑损伤时间的新方法.     

不同剂量FTY720对颅脑损伤大鼠神经细胞凋亡的抑制作用

目的 揭示不同剂量FTY720对颅脑损伤大鼠海马组织神经细胞凋亡的影响及相关机制。方法 将175只大鼠随机分成假手术组、模型组、小剂量组、中剂量组和大剂量组,每组35只,再根据2、6、12h、1、2、3和5天7个时间点分成7个亚组,每组5只。采用Feeney自由落体损伤装置建立大鼠颅脑损伤模型。小剂量组、中剂量组和大剂量组大鼠分别按0.5、1和2mg/kg剂量予FTY720腹腔注射,其他组大鼠腹腔注射1ml生理盐水。检测各时间点海马组织凋亡神经细胞、caspase-3蛋白活性和白介素-1β、肿瘤坏死因子-α及白介素-6浓度。结果 模型组大鼠海马组织凋亡神经细胞比例、caspase-3蛋白活性和白介素-1β、肿瘤坏死因子-α和白介素-6浓度较假手术组显著升高,小剂量组、中剂量组和大剂量组大鼠海马组织上述指标均较模型组显著下降,且作用效果呈现剂量依赖性。结论 FTY720可能通过抑制中枢炎性反应从而减少颅脑损伤大鼠海马组织神经细胞凋亡,且呈现剂量依赖性。     

脑缺血/再灌注后MAPK通路与神经细胞凋亡的关系

脑缺血/再灌注后,神经元和星形胶质细胞中调节细胞存活与死亡的多条信号转导通路被激活。其中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)是介导细胞外界信号刺激从细胞表面到细胞核内的重要传递者。实验发现,脑缺血/再灌注后缺血侧皮质及缺血敏感区(如海马)中神经元和星形胶质细胞对MAPK信号转导通路的激活表现出不同的时程变化,其作用及分布高峰也不相同。该文从MAPK信号转导通路的角度深入探讨缺血皮质区和(或)海马各亚区在不同作用及时程上的差异性。     

卵巢摘除对急性肝损模型鼠脑血管内皮细胞凋亡的影响

目的研究卵巢摘除对于急性肝损伤模型鼠脑血管内皮细胞功能的影响。方法对去势（卵巢摘除）与未去势小鼠分别给与四氯化碳制备急性肝损伤模型,另设单纯卵巢摘除组及空白对照组;免疫组织化学法观察各组小鼠脑血管内皮细胞Bax及Bcl-2的表达。结果发现各组小鼠嗅脑及皮层等脑区毛细血管内皮细胞Bax阳性表达结果类似;而Bcl-2表达存在明显差异,急性肝损伤组嗅脑及皮层等各脑区毛细血管内皮细胞Bcl-2阳性表达呈强阳性;而去势＋急性肝损伤组各脑区Bcl-2的阳性表达均偏弱。结论卵巢摘除或卵巢功能退化会影响脑血管内皮细胞应对化学毒性损伤时的抗凋亡功能,从另一个侧面揭示了卵巢相关激素的脑保护作用。     

卵巢摘除对急性肝损模型鼠脑血管内皮细胞凋亡的影响

目的研究卵巢摘除对于急性肝损伤模型鼠脑血管内皮细胞功能的影响。方法对去势(卵巢摘除)与未去势小鼠分别给与四氯化碳制备急性肝损伤模型,另设单纯卵巢摘除组及空白对照组;免疫组织化学法观察各组小鼠脑血管内皮细胞Bax及Bcl-2的表达。结果发现各组小鼠嗅脑及皮层等脑区毛细血管内皮细胞Bax阳性表达结果类似;而Bcl-2表达存在明显差异,急性肝损伤组嗅脑及皮层等各脑区毛细血管内皮细胞Bcl-2阳性表达呈强阳性;而去势+急性肝损伤组各脑区Bcl-2的阳性表达均偏弱。结论卵巢摘除或卵巢功能退化会影响脑血管内皮细胞应对化学毒性损伤时的抗凋亡功能,从另一个侧面揭示了卵巢相关激素的脑保护作用。     

神经细胞凋亡和Caspase-3表达与脑损伤时间的关系

目的观察脑挫伤后神经细胞凋亡和调节因子Caspase-3表达的时序变化,探索损伤时间推断的新方法。方法采用TUNEL和免疫组化染色方法,结合图像分析技术对不同损伤时间组的脑挫伤组织进行染色观察和分析。结果①TUNEL和Caspase-3免疫组化染色的阳性细胞分布在挫伤灶中央及其周围的半影区,与远隔部位和对照组脑组织呈阴性染色形成明显对比;半影区比中央区更显著,两者差异有统计学意义（P〈0．05）。②脑挫伤后随着损伤时间的延长,半影区TUNEL染色和Caspase-3表达逐渐增强,呈平行关系;48h内两种染色方法的平均积分光密度（IOD）增加与损伤时间呈线性关系（r分别为0．93和0．69）。结论观察脑挫伤后神经细胞凋亡和Caspase-3的表达随损伤时间逐渐增强的变化规律,可以作为损伤时间推断的新方法。