以改良方法建立兔VX2肝癌模型

背景：兔VX2肝癌模型肿瘤呈膨胀性浸润性生长,血供丰富,具有与人类肝细胞癌极为相似的病理学及影像学特征,是较理想的用于影像实验研究的肝癌模型。 目的：建立VX2兔肝癌模型,比较开腹建立兔VX2肝癌模型的两种不同方法的优劣。 方法：将30只新西兰白兔随机分为 2 组,传统开腹法组开腹直接包埋肿瘤颗粒,改良开腹包埋法组开腹穿刺注入肿瘤颗粒。比较两种不同植瘤方式肿瘤的生长特点,用超声监测肿瘤生长。 结果与结论：两组接种成瘤率均为100%;单发率分别为50%、90%;异位种植率分别为50%、10%,均差异有显著性意义(P < 0 .05)。建模后2周内死亡率分别为33%、0,差异有显著性意义(P < 0.05)。结果证实,改良开腹包埋法对肝组织的损伤小,手术时间短,重复性好、模型性质稳定,是可推荐的建立兔肝癌模型方法。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程     

对比组织悬液法及组织块法建立兔VX2皮下肿瘤模型的差异

文题释义：彩色多普勒血流显像(Color Doppler Flow Imaging,CDFI)：是利用红细胞与超声波之间的多普勒原理进行血流显像的技术,根据血流的方向和速度大小,进行伪彩色编码,后经彩色显示器显示,从而完成彩色多普勒血流显像。VX2肿瘤(VX2 Tumor)：来源于Shope病毒,属于鳞状细胞癌的一种,可使乳头瘤恶变成鳞状上皮细胞癌的恶性肿瘤。因具有与人类肿瘤相似的形态学及生物学特性,目前主要用于动物模型的实验研究,尤其是兔VX2各组织器官肿瘤的影像学及肿瘤治疗的动物模型研究。背景：目前建立VX2皮下肿瘤模型的方法有多种,但建模方法各有优劣,能优质高效建立动物肿瘤模型的方法方可满足动物肿瘤实验的需求。目的：对比观察不同方法建立兔VX2皮下肿瘤模型,探索更简单高效的建模方式,为兔VX2皮下肿瘤实验提供大批量高质量的动物模型奠定基础。方法：雄性新西兰大白兔66只。取2只制备VX2荷瘤种兔,再取荷瘤兔肿瘤组织分别制备瘤组织块及肿瘤组织悬液备用。实验分为2组：瘤组织悬液组20只,麻醉后于双侧后肢内侧面注射组织悬液0.15 mL;瘤组织块组20只,麻醉后于双侧后肢内侧面皮下植入瘤组织块。2组分别采用相应接种方式种植2只荷瘤种兔,各传5代。记录并比较2组肿瘤种植时间,采用二维及彩色多普勒超声观察肿瘤形态大小及生长情况,比较2组肿瘤成瘤率及传代情况。实验方案经中国人民解放军第三军医大学动物实验伦理委员会批准(批准号为AMUWE2020016)。结果与结论：①组织悬液法肿瘤种植时间(75.70±11.16) s较组织块法肿瘤种植时间(100.80±9.21) s明显缩短(P=0.00);②组织悬液法成瘤率95%显著高于组织块法成瘤率60%(P < 0.05),肿瘤体积显著大于组织块法(P < 0.05);③组织悬液法传代成功率95%显著高于组织块法传代成功率65%(P < 0.05);④结果说明,组织悬液法建立兔VX2皮下肿瘤模型与瘤块法相比,更简单高效。ORCID: 0000-0002-1281-4437(刘娅)中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

兔腰椎间盘退变模型的建立及影像学分析

目的：建立腰椎间盘退变的动物模型并进行CR和MRI观察.方法：选用新西兰兔20只,沿右腹直肌外缘做15 cm长切口,钝性剥离腹膜至腰椎横突前外侧,咬除右侧L5、L6横突,显露上述节段椎间盘,斜形切开纤维环约1.5 mm,未伤及髓核,然后逐层缝合.所有动物在标准条件下饲养,分别于术后2、4、8、20、40周行腰椎计算机x线摄影术（CR）和核磁共振成像（MRI）以检测终板下骨及髓核的变化.结果：术后作为自体对照组的L1、2、L2、3椎间盘未见异常,而手术组L4、5、L5、6椎间盘则相继出现T2加权像低信号、腰椎不稳畸形,终板下骨质硬化,椎体边缘骨赘增生,椎间隙变窄,椎间盘后突和硬膜囊受压等改变.对手术节段及其邻近和完全正常节段椎间盘髓核信号值的定量分析显示,手术组椎间盘T2加权像信号值减低在术后4、8、20、40周与正常对照组对比具有统计学意义,而临近椎间盘L3、4、L6、7手术8周后与正常椎间盘对比有显著差异.CR扫描结果显示：手术节段椎间盘终板下信号值减低与对照组相比4周后就开始有显著差异.结论：应用纤维环切开法可获得可靠的新西兰大白兔椎间盘退变模型,可通过MRI及CR在早期加以证实.     

VX2肿瘤种植于肾静脉上下建立的兔下腔静脉模型*

背景：目前,临床上对恶性肿瘤侵犯肾静脉以上、以下的下腔静脉处理原则及方式还有争议,而类似的动物模型尚少见文献报道。 目的：分别建立VX2肿瘤侵犯肾静脉以上、以下的下腔静脉的动物模型,观察并对比分析其生长,以及对下腔静脉和腹主动脉的影响。 方法：将24只实验兔随机摸球法均分为肾静脉以上组和肾静脉以下组,分别将VX2肿瘤组织块种植在兔肾静脉以上、以下的下腔静脉附近软组织内,每周在超声下观察肿瘤的大小,下腔静脉和腹主动脉管径大小,对周围组织的侵犯情况。 结果与结论：所有肿瘤均种植成功。两组肿瘤大小与生长时间均呈显著正相关(r1=0.894,r2=0.879),下腔静脉管径及腹主动脉管径与肿瘤大小均显著负相关(r3=-0.663,r4=-0.834;r5=-0.826,r6=-0.870)。两组肿瘤大小变化差异无显著性意义    (P=0.293> 0.05)。在观察期末,肾静脉以上组下腔静脉管狭窄不到50%,肾静脉以下组下腔静脉管已完全闭塞,且有效避免了对腹主动脉的压迫(狭窄不到50%),结果说明VX2肿瘤种植于肾静脉以下可以得到较理想的动物模型。 关键词：下腔静脉;VX2瘤;兔;肿瘤大小;动物模型 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.11.023     

超声引导下经皮穿刺两种兔VX2肝肿瘤模型的建立及超声观察

目的 比较两种不同的兔VX2肝肿瘤模型的建立方法,评价超声在监测肿瘤生长的价值.方法 使用VX2瘤组织悬液及瘤组织块在超声引导下分别对两组共30只新西兰兔进行接种,比较不同植瘤方式肿瘤的生长特点.常规超声监测肿瘤生长并与病理检查进行相关性分析.结果 超声引导下经皮穿刺瘤组织块种植组与混悬液注射组成瘤率分别为66.7%(16/30)和26.7%(8/30).两组兔子原位成瘤共28个;肿瘤多为等回声,比较清楚,部分可见声晕;超声检查诊断符合率为85.7%(24/28).超声对肿瘤平均径线的测值与病理测值相关性高,能准确地反映肿瘤的生长状态.结论 使用超声引导下经皮穿刺瘤块接种法比组织混悬液注射法模型制作成瘤率高、模型更稳定.超声能准确监测种植肿瘤的生长,可为临床利用该模型来评价诊治肝癌的新疗法的疗效提供有效监测方法.     

移植性鳞癌兔模型的建立及生物学特征

背景：兔VX2荷瘤目前已广泛应用于全身多个器官肿瘤动物模型的建立,但在耳郭建立鳞癌动物模型至今少有报道。 目的：采用2种不同移植瘤方法建立稳定的兔耳VX2移植瘤模型,并对所建肿瘤模型的生物学特性进行观察和比较。 方法：将新西兰大白兔分别用瘤细胞悬液注入法和瘤组织块切开植入法移植于兔耳皮下,观察和比较 2种方法所建立的模型的肿瘤生长状况、成瘤率和自发转移发生率。 结果与结论：瘤细胞悬液注入组和瘤组织块植入组的成瘤率分别为73.3%和50%,差异有显著性意义(P < 0.05)。局部淋巴结转移率分别为75%和86%。两种方法建立的兔VX2鳞癌移植瘤模型中,组织呈浸润性生长,瘤细胞核深染,分裂相多见,并呈癌巢排列的符合鳞状细胞癌特征。证实,瘤细胞悬液注入法和瘤组织块切开植入法建立的移植瘤模型均较接近人鳞癌自然生长过程。瘤细胞悬液注入法建立的动物模型,因成瘤率和转移率高,更适合于鳞癌研究。     

兔VX2肝癌模型与实验性肝癌介入治疗

兔VX2肝癌模型是目前较理想的肝癌实验模型，用于肝癌介入治疗的前期研究，为人类肝癌介入治疗的方法学、药代动力学、肿瘤影像学等提供了丰富的实验依据．     

经动脉化疗栓塞兔VX2肝癌后早期肿瘤细胞凋亡

目的　研究介入治疗兔VX2肝癌肿瘤细胞凋亡的早期动态改变 .方法　建立 2 7只新西兰大白兔VX2肝癌模型 ,随机分成肝动脉化疗栓塞组 (Transarterialchemoembolization ,TACE)、灌注化疗组 (Transarterialinfusion ,TAI)、灌注肝素生理盐水组 (对照组 ,Control) ,每组各 9只 .介入治疗后每组再随机分成 3个亚组 ,每亚组 3只 .在治疗后第2 4、72、12 0小时分别处死 3组中一亚组 ,取材肿瘤生长活跃的外带组织用流式细胞仪AnnexinV和PI双标记法定量检测细胞凋亡 ,组织病理切片苏木精 -伊红染色 (HE染色 )和甲基绿 -派洛宁染色 (MG -P染色 )光镜下形态学方法观察不同时间肿瘤细胞的凋亡变化 .结果　TACE、TAI、Control组在治疗后 2 4、72、12 0小时流式细胞仪法定量检测肿瘤细胞凋亡比率分别为 11.4 4± 2 .15、10 .99± 1.74、6 .0 0± 0 .5 8,5 .84± 0 .6 8、4 .6 5± 0 .11、2 .88± 1.2 3和 2 .80± 0 .15、2 .19± 1.6 9、2 .5 1± 2 .13.TACE、TAI、Control组凋亡在各时间点均有显著差异 (p <0 .0 1) ,TACE组 2 4、72小时的凋亡明显高于 12 0小时 (p <0 .0 5 ) .TACE组诱导的肿瘤细胞凋亡比率明显高于TAI、Control组 ;TACE组诱导的肿瘤细胞早期凋亡比率随时间呈下降趋势 ,在 12 0小时凋亡仍明显高于其     

经动脉化疗栓塞兔VX2肝癌后早期肿瘤细胞凋亡

目的研究介入治疗兔VX2肝癌肿瘤细胞凋亡的早期动态改变.方法建立27只新西兰大白兔VX2肝癌模型,随机分成肝动脉化疗栓塞组(Transarterial chemoembolization, TACE)、灌注化疗组(Transarterial infusion, TAI)、灌注肝素生理盐水组(对照组, Control),每组各9只.介入治疗后每组再随机分成3个亚组,每亚组3只.在治疗后第24、72、120小时分别处死3组中一亚组,取材肿瘤生长活跃的外带组织用流式细胞仪Annexin V和PI双标记法定量检测细胞凋亡,组织病理切片苏木精-伊红染色(HE染色)和甲基绿-派洛宁染色(MG-P染色)光镜下形态学方法观察不同时间肿瘤细胞的凋亡变化.结果 TACE、TAI、Control组在治疗后24、72、120小时流式细胞仪法定量检测肿瘤细胞凋亡比率分别为11.44±2.15、10.99±1.74、6.00±0.58,5.84±0.68、4.65±0.11、2.88±1.23和2.80±0.15、2.19±1.69、2.51±2.13.TACE、TAI、Control组凋亡在各时间点均有显著差异(p<0.01),TACE组24、72小时的凋亡明显高于120小时(p<0.05).TACE组诱导的肿瘤细胞凋亡比率明显高于TAI、Control组;TACE组诱导的肿瘤细胞早期凋亡比率随时间呈下降趋势,在120小时凋亡仍明显高于其它2组.结论经肝动脉化疗栓塞诱导癌细胞早期凋亡,是TACE治疗肝癌的主要机制之一.     

兔VX2肿瘤细胞系的建立及其生物学特性的观察

目的建立兔VX2肿瘤细胞系,观察其生物学特性。方法采用小块法对兔VX2肿瘤进行原代培养,体外传代观察,传代40次以上对培养细胞进行形态学观察、组织化学染色、细胞周期检查、核型分析、兔及裸鼠移植。结果新建立的兔VX2肿瘤细胞,呈多角形、短梭形,电镜下细胞内可见张力纤维、细胞间可见桥粒,细胞角蛋白阳性,体外连续培养10个月,传代70次以上,细胞倍增时间为34．5h,细胞周期测定G,期为69．3％,G：期为5．6％,S期为25．1％。染色体为亚三倍体核型,众数为58～62条。同种移植成瘤率100％,裸鼠移植成瘤率100％,无支原体污染。结论兔VX2肿瘤细胞系来源于兔鳞状细胞癌,可用于兔（较大动物）的肿瘤实验研究。     

兔肝VX2移植瘤模型中血清和转移肿瘤组织S100A6蛋白表达的动态变化

目的探讨兔肝VX2移植瘤模型建立和肿瘤发展过程中血清及瘤组织S100A6蛋白表达的动态变化,为阐明其在肿瘤发展过程中的作用积累实验依据。方法建立兔肝VX2移植瘤模型,观察期自接种第7天至第29天。ELISA法检测血清中S100A6的水平,SP免疫组织化学法检测组织中S100A6的表达。结果大体和病理检查证实模型建立成功,成功率为100％（49／49）。ELISA检测发现,对照组的血清S100A6均值为（4．09±0．20）ng／mL;荷瘤组各观测点的S100A6水平均低于对照组,第17、19、21、23、25、27、29天依次较对照组减少37．6％、79．9％、89．9％、92．9％、98．3％、98．5％和99．O％,差异显著（P〈0．05）,且减少趋势也具显著性（P〈0．05）。在各转移癌灶中,S100A6的表达也随荷瘤进程进行性降低趋势（P〈0．01）。结论在兔肝VX2移植瘤模型的肿瘤发展过程中,兔血清和肿瘤组织中S100A6的表达均呈进行性降低。提示S100A6蛋白血清含量可能成为肝癌分期和是否转移的标志物;恢复S100A6的表达可能对兔肝VX2移植瘤的发展和转移产生重要作用。     

Changes in and effects of Kupffer cells on residual tumor after cryoablation in rabbit hepatic VX2 tumor

Objective: Cryoablation can directly kill tumor cells through sudden changes in temperature. It can also enhance lymphocyte function and cause distant tumor regression far from the ablation treatment area. In order to further explore the changes of immune function after cryoablation, the changes of Kupffer cells (KCs), the main immune cells in the liver, and their effects on untreated tumors in vivo were studied. Methods: Rabbit VX2 liver cancer models were constructed. The growth of liver tumors was confirmed by ultrasound after transplantation for 3 weeks. Fifteen Japanese white rabbits were divided into a tumor control group and cryoablation group. Cryoablation group was treated with cryoablation of a single or partial tumor. Histologic and immunohistochemical changes of the treatment area and untreated tumor area before and after cryoablation were observed, and the phagocytic function changes of KCs around the untreated area and treatment area were observed by electron microscopy. Results: Cryoablation areas showed necrosis, infiltration of inflammatory cells (including KCs), and fibrosis of tissue. The number of inflammatory cells in the unfrozen tumor area was increased in the same treated rabbit. There was a significant difference in the maximum diameter of unfrozen tumors between the frozen group and control group at 15th days after cryoablation (P<0.05), while the difference was not obvious at the 3rd and 7th day (P>0.05). Electron microscopy showed that the number of debris fragments engulfed by KCs around the tumor after cryoablation was significantly higher than that of the control group. In the same rabbit, we compared the amount of debris between tissue surrounding the unfrozen area and around the cryoablation area. There was a significant difference on the 3rd day after cryoablation, P=0.043, while there was no significant difference on the 7th day, P=0.348. Conclusion: After cryoablation, inflammatory cells aggregated around the cryoablated area. The activity of KCs had been increased and the function of phagocytosis enhanced. KCs had a certain inhibitory effect on the untreated tumor in the same animal at the early stage (within 15 days), but it was not enough to restrain the growth of the untreated tumors.     

Experimental study of image-guided percutaneous microwave ablation in rabbit lung VX2 tumor model

Purpose: To investigate the efficacy and safety of percutaneous microwave ablation. Methods: Twenty-six rabbits with lung VX2 tumor were randomly divided into experimental and control group. In the experimental group, microwave ablation guided by ultrasound or CT was performed based on location of the tumor. Enhanced CT scan was carried out immediately before and after the ablation for all animals. Two animals from each group were sacrificed immediately or 1 week after the ablation respectively and the others were followed for the rest of their lives. Results: CT scan revealed that the tumor was greatly reduced or ablated after ablation. Pathological examination immediately after ablation also confirmed the tumor reduction or ablation. The survival time of the animals in the experimental group was significantly longer than that in the control group. Conclusions: Microwave ablation is a safe and effective method for treating lung cancer in rabbits, showing potential clinical applicability.     

骨膜联合同种异体骨治疗兔骨缺损模型的实验研究

目的　通过实验动物研究观察骨膜联合同种异体骨治疗骨缺损的效果,探讨其可行性及修复机制。  方法　以新西兰大白兔为研究对象,分为3组,即实验组、对照组和空白组。通过X线、HE染色及荧光定量PCR方法,检测骨膜联合同种异体骨修复骨缺损的效果及其可能机制。  结果　X线检查显示实验组与对照组骨缺损处均已修复,空白组骨缺损处未修复;HE染色结果显示实验组新生骨小梁排列良好,仍有少量异体骨残留,对照组新生骨小梁排列整齐,空白组未见明显新生骨小梁;荧光定量PCR结果显示,术后实验组Spp-1、BMP-2基因表达高于对照组(P<0.05),ColⅠα1基因表达低于对照组(P<0.05)。  结论　骨膜联合同种异体骨能够有效地促进骨缺损的修复。     

碘佛醇对兔VX2肾癌超声血流显像影响的研究

目的评价碘佛醇在兔VX2肾癌超声血流显像中的作用。方法24只实验兔建立肾VX2肿瘤模型，随机分3批，每批8只，分别于种植后第7、14、21天，静脉注射碘佛醇，观察注射前后肿瘤彩色血流信号的变化情况。结果注射碘佛醇后肿瘤内彩色血流信号较注射前增多、增强。其中第7天，肿瘤的CDFl分级变化无显著统计学意义，第14天和第21天差异有显著统计学意义。注射碘佛醇后连续观察20min，血流信号增强仍保持在高峰状态。结论碘佛醇对兔VX2肾癌的彩色多普勒血流显像起增强作用。     

Eyeblink conditioning in the developing rabbit

Eyeblink classical conditioning in pre‐weanling rabbits was examined in the present study. Using a custom lightweight headpiece and restrainer, New Zealand white littermates were trained once daily in 400 ms delay eyeblink classical conditioning from postnatal days (PD) 17–21 or PD 24–28. These ages were chosen because eyeblink conditioning emerges gradually over PD 17–24 in rats [Stanton et al., (1992) Behavioral Neuroscience, 106(4):657–665], another altricial species with neurodevelopmental features similar to those of rabbits. Consistent with well‐established findings in rats, rabbits trained from PD 24–28 showed greater conditioning relative to littermates trained from PD 17–21. Both age groups displayed poor retention of eyeblink conditioning at retraining 1 month after acquisition. These findings are the first to demonstrate eyeblink conditioning in the developing rabbit. With further characterization of optimal conditioning parameters, this preparation may have applications to neurodevelopmental disease models as well as research exploring the ontogeny of memory. © 2011 Wiley Periodicals, Inc. Dev Psychobiol 54:423–432, 2012.     

免肺肿瘤模型射频消融术后血清sIL—2R的变化

目的 探讨恶性肺肿瘤射频消融（RFA）术后的免疫刺激作用及血清中sIL-2R的变化。方法 采用肿瘤细胞VX2悬液种植法建立和肺肿瘤模型,进行RFA后,观察原发灶及肿瘤的转移情况,并测定血清sIL-2R的水平。结果 RFA治疗后的原发灶生长缓慢,sIL-2R的水平下降,腹腔淋巴结转移率低于对照组。结论 RFA后,肿瘤坏死分解产物可刺激机体免疫系统,增强免疫功能。     

新西兰兔糖尿病肾病模型的建立方法

目的: 探讨小剂量四氧嘧啶(ALX)建立新西兰兔糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)模型的可行性。方法: 雄性新西兰兔20只,8只为对照组,给予常规饲料,12只为糖尿病组,给予高糖高脂饮食(常规饲料加5%蔗糖、5%猪油和1%胆固醇)喂养2周,再加用小剂量ALX耳缘静脉注射,分别检测造模前与造模12周后兔血糖、血脂、尿蛋白和肾功能指标,并于12周后进行组织形态学观察。结果: 建模成功动物具有"多饮、多食、多尿、体重减轻"的特点,并出现DN相应的形态及功能改变。结论: 高脂高糖饮食加ALX药物诱导的方法,12 周时可成功制备新西兰兔2型DN模型。