苦豆子总碱对大鼠实验性结肠炎CD4^＋CD25^＋,CD8^＋CD28^-表达的影响

目的：观察苦豆子总碱对实验性结肠炎大鼠的外周血和结肠组织中调节性T细胞CD4^＋CD25^＋，CD8^＋CD28^-表达的影响。方法：实验于2006—03／08在南方医科大学实验室进行。①分组：将72只SD大鼠数字表法随机分成正常对照组，模型组，5-氨基水杨酸组，苦豆子15，30，60mg／kg组共6组，每组12只。②造模：除正常对照组外，其他5组采用三硝基苯磺酸灌肠法制备结肠炎大鼠模型，正常对照组给予等量生理盐水灌肠。③给药：造模第2天开始灌胃给药，2mL／只，1次／d。5-氨基水杨酸组灌胃5-氨基水杨酸400mg／kg，苦豆子15，30，60mg／kg组灌胃酸苦豆子总碱15，30，60mg／kg，其他2组灌等量生理盐水。④取材：在第1周和第3周各组分别取6只大鼠处死，测定结肠黏膜组织和外周血中CD4^＋CD25^＋，CD8^＋CD28^-的表达水平，观察苦豆子总碱对模型大鼠急慢性期T细胞亚群的影响。结果：72只大鼠进入结果分析。①建模第1周：模型组结肠内T细胞亚群CD4^＋CD25^＋，CD4^＋CD25＋／CD25^-，CD8^＋CD28^-及CD8^＋CD28^-／CD28^＋高于正常对照组（P〈0．05，0．01），苦豆子各剂量组数据虽低于模型组，但经统计学处理后差异不显著（P〉0．05）。②建模第3周：模型组大鼠外周血中的CD8^＋CD28和CD8^＋CD28^-／CD28^＋的表达高于正常对照组和苦豆子30，60mg／kg组[CD8^＋CD28：（11.3&;#177;1．3）％，（5．4&;#177;2．2）％，（5．8&;#177;3．2）％，（6．0&;#177;4．2）％；CD8^＋CD28^＋／CD28^＋：（1．2&;#177;0．8）％．（0．4&;#177;0．1）％，（0．5&;#177;0．2）％，（0．5&;#177;0．4）％；P〈0．05，0．01]；结肠组织中的CD8^＋CD28^-和CD8^＋CD28^-／CD28^＋的表达也高于正常对照组和苦豆子30，60mg／kg组[CD8^＋CD28^-：（17．4&;#177;4．2）％，，（3．8&;#177;4．5）％，（3．9&;#177;4．0）％．（4．2&;#177;3．6）％；CD8^＋CD28^-／CD28^＋：（1．8&;#177;0．3）％，（0．7＋0．3）％．（0．7＋0．2）％，（0．7&;#177;0．3）％：P〈0．05，0．01]。结论：苦豆子总碱30，60mrg／kg能下调实验性结肠炎大鼠慢性期高表达的CD8^＋CD28-T细胞。     

大鼠心脏移植急性排斥反应与CD8~+CD28~+T淋巴细胞钙离子的相关性研究

目的探讨CD8~+CD28~+T淋巴细胞胞外~(45)Ca~(2~+)摄取率、胞内Ca~(2~+)浓度与大鼠心脏移植急性排斥反应(AR)的相关性。方法用流式细胞仪分选大鼠对照组(T0)、假手术组(T_1)、实验组(T_2)术后第1、3、5、7、9、11天外周血CD8~+CD28~+T淋巴细胞,测量胞外~(45)Ca~(2~+)摄取率、胞内Ca~(2~+)浓度,进而分析CD8~+CD28~+T淋巴细胞胞外~(45)Ca~(2~+)摄取率、胞内Ca~(2~+)浓度与大鼠心脏移植后AR的相关性。结果T2组CD8~+CD28~+T淋巴细胞胞外~(45)Ca~(2~+)摄取率、胞内Ca~(2~+)浓度较T_1、T_0组明显升高,差异有统计学意义(P0.05);与心脏移植后AR程度的Spearman相关系数分别为0.494(P0.01)、0.688(P0.01)。结论外周血CD8~+CD28~+T淋巴细胞胞外~(45)Ca~(2~+)摄取率、胞内Ca~(2~+)浓度与大鼠心脏移植AR密切相关,有助于早期监测心脏移植术后AR。     

类风湿关节炎患者CD4+、CD8+T细胞及免疫球蛋白的检测及分析

目的探讨类风湿性患者血清中CD4^＋、CD8^＋T细胞状态及免疫球蛋白的变化来分析RA的免疫学发病机制，为RA的临床治疗提供理论依据。方法采用四色流式细胞术（multis color flow cytometry），分析RA患者CD4^＋、CD8^＋T细胞状态；采用免疫速率比浊法检测患者的免疫球蛋白水平。结果与健康对照相比，RA患者外周血CD4^＋T细胞百分率显著升高（P〈0．01），CD8^＋T细胞百分率则无明显变化（P〉0．05），CD4^＋／CD8^＋比例明显升高（P〈0．05），患者血清免疫球蛋白IGG、IGA、IGM水平显著高于健康对照组（P〈0．01）。结论类风湿关节炎患者细胞免疫和体液免疫功能紊乱。     

卡介苗免疫大鼠的抗结核发病和CD4^＋CD8^＋双阳T细胞

目的：探讨卡介苗（BCG）对大鼠结核感染及CD4^＋CD8^＋双阳（DP）T细胞的影响。方法：60只PPD皮试阴性SD大鼠随机分成（1）卡介苗免疫（BCG）组、（2）BCG免疫后结核分枝杆菌（Mtb）攻击（BCG-TB）组、（3）Mtb攻击后不化疗（TB）组。BCG组、BCG-TB组于观察开始接种BCG。BCG-TB组、TB组于3个月末接受Mtb攻击。比较全部大鼠接种Mtb后的死亡率；实验开始和其后3、4、5、6、8个月末检测外周血中T细胞亚群。结果：BCG组、BCG-TB组无死亡；TB组感染后5个月内死亡率45％（9／20）。TB组死亡率高于BCG组和BCG-TB组，P〈O．01。实验开始时3个组组间对应参数比较差异均无显著性（P〉0．05）；3个月末BCG组、BCG-TB组之间各对应参数比较差异均无显著性（P〉O．05）；BCG组和BCG-TB组第3个月末与接种前比较，CD8^＋、DP升高，且显著高于TB组（Mtb干预之前），P〈0．01或P〈0．05。BCG组DP细胞于接种BCG后第6个月后开始回落，但仍显著高于接种前；BCG-TB组于Mtb攻击1个月后CD8^＋、DP继续升高，观察的第8个月CD8^＋、DP回落，但仍显著高于BCG接种前；TB组Mtb攻击后1个月末CD8^＋、DP有升高但低于BCG组和BCG-TB组，同时伴有CD3^＋、CD4^＋降低，差异均有显著性，P〈0．05或P〈0．01，此后维持在相近水平。Mtb攻击2个月末BCG-TB组DP高于BCG组和TB组，P〈0．05或P〈0．01。Mtb攻击5个月后3个组间DP差异无显著性（P〉0．05）。结论：BCG预防接种可保护Mtb感染宿主免于发病和死亡，增强抗结核保护性细胞免疫力表现之一为DP细胞升高，DP细胞是抗结核保护性免疫相关T细胞。DP细胞的形成与CD4^＋SP细胞上CD8^＋抗原表达有关。     

中国HCV/HIV合并感染者T淋巴细胞表面CD81、CXCR3表达的研究

目的探讨T淋巴细胞表面受体CD81、CXCR3，在丙肝病毒（HCV）单纯感染，艾滋病病毒（HIV）单纯感染和HCV／HIV合并感染过程中的表达及意义。方法采用流式细胞术，检测HCV感染组（n=21），HIV感染组（n=14），HCV／HIV感染组（n=28）及正常对照组（n=30）人外周血CD4^＋T淋巴细胞和CD8^＋T淋巴细胞表面CD81、CXCR3的表达。结果HIV感染组及HCV／HIV合并感染组CD4^＋T细胞表面CD81、CXCR3表达显著降低（P〈0．001），CD8^＋T细胞表面CD81、CXCR3表达显著升高（P〈0．001）；HCV感染组CD4^＋及CD8^＋T细胞表面CXCR3表达轻度升高但差异不显著，CD81在CD4^＋T细胞表面轻度升高而在CD8^＋T细胞表面明显升高（P〈0．01）。结论中国HCV／HIV合并感染患者外周血T淋巴细胞表面受体CD81、CXCR3，在CD4^＋T细胞表面表达降低，而在CD8^＋T细胞表面表达升高。     

慢性阻塞性肺疾病长期机械通气患者血清睾酮、CD4+/CD8+ T细胞的变化

目的初步研究长期机械通气慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者血清睾酮和CD4^＋／CD8^＋T细胞的变化，及其相关性。方法长期机械通气COPD患者42例为研究组，稳定期COPD患者34例为对照组，进行血清睾酮检测，流式细胞仪检测CD4^＋／CD8^＋T细胞，并计算其相关性。结果研究组血清睾酮水平、CD4^＋／CD8^＋T细胞比例均低于对照组（P〈0．05），但血清睾酮与CD4^＋／CD8^＋T细胞比之间无相关性（P〉0．05）。结论长期机械通气COPD患者血清睾酮、CD4^＋／CD8^＋T细胞比明显降低，但两者间无相关性。     

人参皂甙对烫伤脓毒症大鼠细胞免疫功能的影响

目的：探讨人参皂甙对烫伤脓毒症后细胞免疫功能的影响及其作用机制。方法：健康雄性SD大鼠66只，随机分为脓毒症组（24只）、人参皂甙组（24只）和对照组（18只）。将大鼠用沸水致背部30％总体表面积Ⅲ度烫伤，烫伤后12h腹腔注射内毒素（5mg／kg）予以“二次打击”，制成烫伤脓毒症模型。用流式细胞仪检测大鼠外周血中CD4^＋T细胞、CD8^＋T细胞、CD25^＋T细胞和CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Tr细胞）的细胞数。结果：“二次打击”后大鼠外周血中CD4^＋T细胞、CD25^＋T细胞比例显著下降，CD8^＋T细胞、CD4^＋CD25^＋Tr细胞比例显著升高；此过程随时间而加重，各时间点与对照组比较差异均有显著性（P均〈0．01）；用药后24h、72h占淋巴细胞百分比人参皂甙组CD8^＋T细胞、CD4^＋CD25^＋Tr细胞占淋巴细胞百分比显著低于脓毒症组（P均〈0．01），CD4^＋T细胞、CD25^＋T细胞比例显著高于脓毒症组（P均〈0．01）。结论：烫伤和内毒素“二次打击”后外周血中CD4^＋CD25^＋Tr细胞表达增强，人参皂甙可有效抑制其表达，显著改善烫伤脓毒症时细胞免疫功能障碍。     

外周血CD3+CD45+T细胞在原发性肝癌患者中的表达及意义

目的探讨原发性肝癌（Hepatocellular Carcinoma，HCC）患者外周血中CD3^＋CD56^＋T细胞、CD3^＋CD56^-T细胞、CD3^＋CD56^＋NK细胞在（HCC）细胞免疫中所发挥的作用。方法采用流式细胞技术对14例HCC患者及30例健康对照人群外周血中的CD3^＋CD56^＋T细胞、CD3^＋CD56^-T细胞、CD3^-CD56^＋NK细胞进行检测。结果14例HCC患者与30例正常对照组外周血测定结果比较发现：HCC患者外周血中CD3^＋CD56^-明显降低，CD3^＋CD56^＋则明显升高，与正常对照组比较差异具有极显著性（P均小于0．005）。HCC患者CD3^-CD56^＋（NK）较正常对照组下降，两组比较差异具有显著性（P小于0．05）。结论CD3^＋CD56^-T细胞在HCC患者外周血中增生活跃，提示高表达的CD3^＋CD56^-T细胞在肝癌免疫应答中具有重要意义。     

CD28／CD152：CD80／CD86分子在强直性脊柱炎患者外周血淋巴细胞上的表达

目的探讨共刺激分子CD28／CD152：CD80／CD86在强直性脊柱炎（AS）患者外周血淋巴细胞上的表达及与免疫功能的关系。方法流式细胞仪检测AS患者及健康体检者T细胞表面标志CD3、CD4、CD8、CD19的表达及CD28／CD152和CD80／CD86在外周血T、B淋巴细胞上的表达水平；采用速率散射比浊法、酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清中免疫球蛋白IgG、IgA、IgM及C-反应蛋白（CRP）和白细胞介素-6（IL-6）水平。结果CD3^＋CD4^＋T细胞及CD4^＋／CD8^＋比值明显高于健康对照组（P〈0．05），而CD3^＋CD8^＋T细胞则明显低于健康对照组（P〈0．05）；CD4^＋和CD8^_T细胞上CD28和CD19^＋B细胞上CD80、CD86的表达均较健康对照组增高（P〈0．05），而CD152在CD4^＋T淋巴细胞上的表达也比健康对照组显著增加，但在CD8%＋T淋巴细胞上的表达却显著降低（P〈0.05）；血清IgG、IgA及CRP、IL-6水平均较健康对照组显著增高（P〈0．05）。结论AS患者外周血淋巴细胞CD28／CD152：CD80／CD86分子的异常表达与其免疫功能紊乱有密切关系。     

自身免疫性甲状腺炎大鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞变化及意义

目的研究CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞在自身免疫性甲状腺炎（AITD）大鼠外周血中的比例变化,并初步探讨其在疾病进程中的意义。方法选取17例A1TD大鼠,取静脉血,应用流式细胞术及定量PCR的方法,分别在蛋白质和mRNA水平检测Foxp3^＋表达,并与甲状腺炎球蛋白抗体（TgAb）,甲状腺过氧化酶抗体（TPOAb）,甲状腺微粒体抗体（TmAb）和甲状腺组织活检结果作相关分析。取正常大鼠作为对照。结果AITD大鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（5．35％±1．27％）显著低于正常对照组（8．02％±2．29％,P〈0．01）,AITD大鼠CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞占CD4‘T细胞比例（3．12％±0．78％）明显低于正常对照组（6．45％±2．12％,P〈0．01）,AITD大鼠Treg与TgAb、TmAb、TPOAb呈负相关（r=-0．291,-0．357,-0．389,P〈0．05,0．05,0．05）,并与小鼠甲状腺组织的炎症程度呈负相关（r=-0．511,P〈0．01）;Foxp3mRNA表达水平与蛋白质表达水平变化相一致。结论AITD大鼠CD4^＋CD25^＋T细胞明显减少,这群调节性T细胞可能参与了AITD的病理进程。     

不同试剂检测北京地区健康献血者淋巴细胞CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋百分比参考值调查

目的探讨北京地区健康献血者CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋百分比的参考值范围，并对国产和进口的淋巴细胞免疫表型双染试剂进行比较。方法收集北京地区500例健康献血者全血标本，分别使用进1：3和国产的CD3FITC／CD4PE和CD3FITC／CD8PE双染试剂，应用同一台流式细胞仪进行检测，并对不同性别、民族和年龄段的结果以及不同试剂的结果进行比较。结果进口试剂检测的北京地区健康献血者CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋百分比以及CD3^＋CD4^＋／CD3^＋CD8^＋的范围（95％可信限）分别为22．92～49．96、14．86～41．70、0．37～2．47，不同年龄段（18-29、30～39与40岁以上组）各项指标均值的差异有统计学意义（P〈0.05），而不同性别的比较仅CD3^＋CD4^＋（％）的差异有统计学意义（P〈0.01），比较汉族（n=484）与少数民族（n=16）中各项指标的差异均无统计学意义（P〉0.05）。国产与进口试剂的检测结果显著相关，CD3^＋CD4^＋（％）、CD3^＋CD8^＋（％）以及CD3^＋CD4^＋／cD3^＋CD8^＋的r值分别为0．970、0．953、0．967。u检验结果显示CD3^＋CD4^＋（％）的差异无统计学意义（P〉0．05），而CD3^＋CD8^＋（％）、CD3^＋CD4^＋／CD3^＋CD8^＋的差异有统计学意义（P〈0．01）。结论初步建立北京地区健康献血者CD3^＋CD4^＋（％）、CD3^＋CD8^＋（％）的参考值，参考值受年龄、性别、民族、检测试剂和仪器等多种因素的影响。国产和进口淋巴细胞免疫表型双染试剂检测结果基本一致，相关性具有显著性。     

CD4+CD25+和CD8+调节性T细胞的作用机制

调节性T细胞（Treg）主要在机体免疫系统中发挥负向调节作用,既能抑制不恰当的免疫反应,又能限定免疫应答的范围、程度及作用时间,对CD4^＋和CD8^＋效应性T淋巴细胞的增殖起抑制作用,因此在移植物抗宿主病、自身免疫病、过敏性疾病等的发病机制和临床治疗中有潜在的应用价值.本文重点介绍CD4^＋CD25^＋Treg和CD8^＋Treg的作用机制,并简述调节性T细胞研究面临的挑战与展望.     

哮喘患儿CD8+CD28+、CD8+CD28-T淋巴细胞检测及其临床意义

目的通过对哮喘患儿CD4、CD8和CD28的联合检测,探讨哮喘患儿淋巴细胞免疫功能状态及其临床意义.方法采用流式细胞术检测哮喘患儿外周血的总T细胞(CD3+)、辅助/诱导T淋巴细胞(CD4+)、抑制/细胞毒T淋巴细胞(CD8+)、细胞毒T细胞(CD8+CD28+)、抑制T细胞(CD8+CD28-).结果哮喘患儿组与对照组比较;CD3+、CD4+、CD8+CD28-细胞均低于对照组(P＜0.01,P＜0.05),CD8+CD28+细胞增高(P＜0.05),CD4+/CD8+比值、CD8+与对照组比较均无显著性差异(P＞0.05).结论哮喘患儿存在T淋巴细胞亚群免疫功能紊乱,而CD8+CD28+、CD8+CD28-T细胞失衡可能是导致机体免疫功能紊乱的主要因素.     

CD4~＋ CD25~＋细胞和CD8~＋ CD28~-调节性T细胞在原发性肝癌患者外周血中的水平变化

目的研究原发性肝癌（HCC）患者外周血中CD4＋ CD25＋细胞和CD8＋ CD28-调节性T细胞的表达及意义。方法采用流式细胞仪测定93例HCC患者和24名健康人外周血中的CD4＋ CD25＋细胞和CD8＋ CD28-调节性T细胞水平。结果 HCC患者外周血中的CD4＋ CD25＋细胞[（14.39±4.58）%]和CD8＋ CD28-调节性T细胞[（24.05±5.64）%]表达均显著高于对照组[（8.37±1.73）%、（15.93±4.84）%,P〈0.05];CD8＋CD28-调节性T细胞与HCC的分期呈正相关（r=0.463,P〈0.001）。结论 CD4＋ CD25＋细胞和CD8＋ CD28-调节性T细胞在HCC患者外周血中呈高表达,且CD8＋ CD28-调节性T细胞与HCC的病情及预后相关。     

慢性乙型肝炎外周血T淋巴细胞亚群CD4+/CD25+和CD8+/CD28-的研究

目的 通过对慢性乙型肝炎患者外周血中CD4+/CD25+和CD8+/CD28-调节性淋巴细胞的分析,探讨其与慢性乙型肝炎患者临床状态的关系.方法 采用流式细胞技术多色荧光分析法,对280例慢性乙型肝炎患者、28例慢性病毒携带者以及22例健康体检者外周血中CD4+/CD25+和CD8+/CD28-淋巴细胞测定.结果 慢性病毒携带者外周血中CD4+/CD25+调节性淋巴细胞为(3.23±1.37)%,明显高于慢性乙型肝炎患者(1.85±1.38)%和正常健康对照(1.59±0.54)%(P＜0.05),但慢性乙型肝炎患者与正常健康对照差别无统计学意义(P＞0.05);而且HBeAg阴性慢性乙型肝炎(1.66±1.09)%与HBeAg阳性慢性乙型肝炎(1.96±1.43)%比较,差别无统计学意义(P＞0.05).慢性乙型肝炎患者和慢性病毒携带者外周血中CD8+CD28-调节性淋巴细胞分别为(79.53±16.07)和89.30±5.12)%,均明显高于正常健康对照(63.93±7.85)%(P＜0.05);另外,HBeAg阳性慢性乙型肝炎组(87.47±17.82)%,也明显高于HBeAg阴性慢性乙型肝炎组(64.90±15.26)%(P＜0.05).结论 慢性病毒携带者处于病毒携带状态可能与体内调节性淋巴胞CD4+/CD25+和CD8+/CD28-的升高有关.     

支气管哮喘患儿外周血淋巴细胞CD19~+CD23~+和CD4~+CD25~+的表达及意义

目的探讨支气管哮喘患儿外周血淋巴细胞CD19＋CD23＋和CD4＋CD25＋的表达及意义。方法采用流式细胞分析技术及免疫化学发光法分别检测34例哮喘发作期（哮喘发作组）和32例哮喘缓解期（哮喘缓解组）外周血CD19＋CD23＋表达率、CD4＋CD25＋表达率和血清总IgE水平,并与25例体检儿童（对照组）进行比较。结果哮喘发作组外周血CD19＋CD23＋表达率为（19.31±9．08）％分别高于哮喘缓解组（8．63±3．54）％和对照组;哮喘发作组CD4＋CD25＋表达率为（2．79±1．69）％和哮喘缓解组为（3.36±1．17）％均低于对照组;哮喘发作组IgE水平为（177．01±90．38）IU/ml和哮喘缓解组为（160．76±77．54）IU／ml均高于对照组．三组的差异均有统计学意义（F分别=36．62、24．67、24．35,P均〈0．05）。CD19＋CD23＋表达率与IgE呈正相关,CD4＋CD25＋表达率和IgE呈明显负相关,CD19＋CD23＋表达率和CD4＋CD25＋表达率亦呈明显负相关,差异均有统计学意义（r分别：0．22、-0．41、-0．34,P均〈0．05）。结论哮喘急性发作时外周血CD19＋CD23＋和CD4＋CD25＋改变明显。     

外周血中CD4~+CD25~+与CD8~+CD28~-调节性T细胞与Graves病的关系研究

目的分析Graves病(GD)患者外周血中CD4+CD25+和CD8+CD28-调节性T(Tr)细胞的变化。方法选择该院内分泌科门诊或住院部43例GD患者为研究对象,其中内分泌科门诊确诊的19例GD患者为试验初发组。接受治疗且甲状腺功能恢复正常的24例GD患者为治疗缓解组;选择同期健康体检者20例为健康对照组。采用流式细胞术检测3组外周血中CD4+CD25+和CD8+CD28-Tr细胞水平。结果试验初发组外周血CD4+CD25+Tr细胞水平为(4.56±4.14)%,明显低于健康对照组的(8.84±4.45)%,差异有统计学意义(P0.05),CD8+CD28-Tr细胞水平为(14.95±5.38)%,与健康对照组的(10.65±6.37)%比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗缓解组外周血中CD4+CD25+Tr细胞水平为(6.99±6.35)%,与健康对照组比较,差异无统计学意义(P0.05),但其CD8+CD28-Tr细胞水平为(20.48±6.07)%,高于健康对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 CD4+CD25+Tr细胞水平可能与GD发病有关,CD8+CD28-Tr细胞可能与GD病程发展有关。     

RA患者外周血CD4/CD8 T细胞比值及CD4+ CD25+ T细胞的检测及其临床意义

目的 观察活动期类风湿性关节炎（RA）患者外周血T细胞CD4／CD8比值及CD4^＋ CD25^＋T细胞（Tn细胞）的数量,探讨其在RA诊治中的价值。方法 用流式细胞术检测CD4^＋ CD25^＋T细胞及TR细胞的数量。结果 49例急性期RA患者的CD4／CD8比值和TR细胞数量显著高于正常人群组。28例RA患者治疗后的TR细胞数量显著高于治疗前,而CD4／CD8比值的变化无统计学意义。结论 RA治疗后症状改善患者,TR细胞数量明显上升,RA的发病和发展与该细胞数量密切相关。     

CD4+CD25+ T细胞发育调控模型的建立及其意义

目的 建立小鼠胸腺CD4^＋CD25^＋双阳性T细胞发育调控的模型,为天然调节性T细胞调控研究提供基础平台。方法 采用14.5天龄胚鼠胸腺进行体外培养,以FACS检测不同时间点胸腺CD4^＋CD25^＋细胞的变化,同时计数每个胸腺小叶的细胞数变化。结果体外胸腺培养的第1-6天胸腺细胞比例、细胞数量趋势变化与胸腺体内发育的第14.5、15、16、17、18、19天CD4^＋CD25^＋双阳性T细胞的比例、细胞数量的趋势变化相似;在胸腺体外培养的第1-6天,CD4^＋CD25^＋T细胞占CD4^＋T细胞的比例分别为58.29%、12.14%、6.08%、17.78%、9.06%、4.04%,占CD25^＋T细胞的比例分别为3.75%、10.81%、17.20%、51.93%、61.64%、80.06%,这一发育趋势与体内结果具有一致性。结论 体外培养的CD4^＋CD25^＋双阳性胸腺细胞数量和比例变化与体内发育变化趋势一致,这将为天然调节性T细胞的调控研究提供有效的参考依据。     

microRNA在人脐血CD34^＋CD38^-、CD34^＋CD38^＋细胞中的差异性表达

为进一步探讨microRNA（miRNA）在造血调控中的作用奠定基础,比较了miRNA在人脐血CD34^＋CD38^-、CD34^＋CD38^＋细胞中的差异性表达。从人脐血中分离单个核细胞（MNC）,应用FACSVantage分选流式细胞仪分选CD34^＋CD38^-、CD34^＋CD38^＋细胞;抽提miRNA后与miRNA芯片杂交,应用生物信息学技术分析miRNA芯片的表达结果。结果发现,miRNA在人脐血CD34^＋CD38^＋细胞的表达水平比在CD34^＋CD38^-细胞的表达水平降低至1／2以下者共11个,表达水平升高至2倍以上者共73个,以上84个miRNA被称为“干细胞性”miRNA。经比较Georgantas等和芯片表达结果,发现有12个（14、29％,12／84）相同的miRNA。部分miRNA经历了类似于CD34在造血细胞表面的发展历程。应用生物信息学技术可寻找到新的与造血调控相关的miRNA簇及miRNA的下游靶基因。结论：“干细胞性”miRNA在正常造血中发挥着重要作用,即miRNA的系统表达模式一造血干／祖细胞基因表达谱一造血干／祖细胞的自我更新和系列定向分化。