三氧化二砷诱导人卵巢癌细胞凋亡机制的研究

目的：探讨三氧化二砷（arsenic trioxide,As2O3)诱导人卵巢癌细胞株3AO细胞凋亡的机制。方法：以人卵巢癌细胞株3AO细胞为体外实验对象。通过台盼蓝染色法，测定不同浓度As2O3作用不同时间对3AO细胞的生长抑制率；采用流式细胞仪检测法，通过碘化丙（PI）／罗丹明123（Rhodammine 123,Rh123)双重染色测定3AO细胞线粒体跨膜电位（△ψm) ；通过吖啶橙染色，荧光显微镜观察As2O3作用后3AO细胞的形态变化。结果：As2O3对3AO细胞的生长具有明显的抑制作用，且具有时间与剂量依赖性（P＜0．05）；3.0μmol/L的As2O3作用48h后3AO细胞中PI－Rh123^-细胞与对照组相比，差异有显著性（P＜0．05）；As2O3作用后，3AO细胞呈现典型的凋亡细胞形态特征。结论：As2O3通过诱导凋亡来抑制人卵巢癌细胞株细胞的生长，其机制与线粒体跨膜电位△ψm下降有关。     

三氧化二砷诱导K562细胞凋亡机制的研究

目的了解三氧化二砷(As2O3)诱导慢粒细胞系K562细胞株凋亡是否与线粒体跨膜电位(mitochondrial transmembrane potentials,△ψm)改变有关及其可能机制。方法联合应用As2O3、DTT和BSO处理K562细胞株,通过细胞内荧光染料PI/Rh123的色强度分析(△ψm),测定细胞活力、亚G1期细胞含量及形态学观察等鉴定细胞凋亡。结果As2O3可明显诱导K562细胞线粒体△ψm下降。BSO可加强As2O3诱导的K562细胞凋亡和线粒体△ψm下降,而DTT则有部分拮抗作用。在2×10-6mol/L As2O3处理72h的K562细胞,PI-Rh123-细胞达(26.0±2.5)%,当1×10-3mol/LBSO同时处理时,PI-Rh123-细胞和凋亡细胞数上升达(37.2±5.7)%和(39.1±4.5)%;而当2×10-4mol/L DTT同时处理时,PI-Rh123-细胞和凋亡细胞数分别降至(11.5±1.3)%和(15.4±3.5)%。结论线粒体跨膜电位下降是As2O3诱导K562细胞凋亡的关键环节,其机制可能与巯基氧化有关,巯基可能是As2O3凋亡细胞的重要靶分子。     

三氧化二砷对不同种类人卵巢癌细胞株细胞的体外作用

[目的]了解新型抗癌药物三氧化二砷对不同种类人卵巢癌细胞株细胞体外生长的作用。[方法]采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法 ,测定不同浓度三氧化二砷作用不同时间对人卵巢癌细胞株3AO、SKOV3、TYK细胞生长的抑制作用 ;采用流式细胞(FCM)技术 ,观察三氧化二砷作用后3AO细胞的凋亡率及细胞周期的变化 ;通过吖啶橙染色 ,荧光显微镜观察三氧化二砷作用后SKOV3 细胞的形态变化。[结果]三氧化二砷可有效地抑制3AO、SKOV3、TYK细胞的生长 ,具有时间、浓度依赖性 (P<0.05);不同细胞株之间的细胞生长抑制率差异无显著性 (P>0.05) ;在一定浓度范围内 ,三氧化二砷诱导3AO细胞的凋亡率具有时间、浓度依赖性(P<0.05) ;3.0μmol/L是诱导细胞凋亡的最佳浓度 ;三氧化二砷低浓度时阻滞3AO细胞S期细胞通过 ,高浓度时选择性诱导S期细胞凋亡 ;三氧化二砷作用后 ,SKOV3 细胞呈现典型的凋亡细胞形态特征。[结论]三氧化二砷通过诱导S期细胞凋亡而抑制人卵巢癌细胞的生长 ,具有量效性、时效性及周期特异性     

三氧化二砷诱导骨髓瘤细胞凋亡机制研究

目的 了解三氧化二砷（As2O3)诱导多发性骨髓瘤细胞（MM）凋亡的可能机制及其与维甲酸和干扰素的相互作用。方法 联合应用As2O3和巯基还原剂（DTT）、谷胱甘肽耗褐剂（BSO）、全反式维甲酸（ATRA）或干扰素（ＩＦＮ－α）处理MM细胞系RPM18226和U266细胞;应用台盼蓝拒染法计数细胞活力,经细胞形态学和流式细胞仪等判定细胞凋亡的程度;通过测定细胞内荧光染料Rhodamine123的色强度分析线粒体跨膜电位（△ψm)。结果 BSO可加强As2O3诱导的RPM18226和U266细胞线粒体△ψm下降和凋亡,而DTT则有部分拮抗的作用,ATRA诱导RPMI8226细胞闻过则喜亡,但它和As2O3之间无协同效尖,ATRA并不诱导U266细胞凋亡。此外,INF-α,既不抑制RPMIS226和U266细胞的生长和活力,也不改变As2O3对这些细胞的作用。结论 As2O3诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡和巯基有关,但ATRA干扰素和As2O3无协同效应。     

三氧化二砷诱导恶性肿瘤细胞凋亡机制的研究进展

三氧化二砷已广泛应用于白血病和各种实体瘤化学治疗的基础研究和临床实践中。近年来国内外多项研究证实三氧化二砷诱导凋亡是其杀伤肿瘤的主要机制,其分子机制尚未得到系统阐明,本文就其抗凋亡作用机制的研究进展作一综述。     

三氧化二砷诱导人胆囊癌GBC细胞凋亡及其机制研究

背景与目的：胆囊癌由于缺乏特异性的临床表现，确诊时多属晚期，手术切除率较低；且常规化疗药物对胆囊癌的疗效较差，因此需寻找治疗胆囊癌新的有效药物。三氧化二砷在治疗急性早幼粒细胞白血病中取得了突破性成果，近年来它在实体瘤的研究中颇受关注。本研究旨在探讨As2O3对人胆囊癌GBC细胞系诱导凋亡的生物学效应及作用机制。方法：用Hoechest33258染色、流式细胞仪和DNA凝胶电泳研究As2O3诱导细胞凋亡情况。用Western blot分析As2O3对凋亡相关蛋白Bcl-2、Bcl—xL、Bid、Bak、Bax、cleaved—Caspase-3和cleaved—Caspase-9的表达影响。构建Bcl-2的表达质粒，并用Lipo2000转染GBC细胞，并检测As2O3诱导细胞凋亡情况。结果：As2O3可诱导GBC细胞凋亡。蛋白水平的检测表明As2O3可使细胞Bcl-2、Bcl—xL的表达下降，Bid、Bak和Bax表达升高，并促进Caspase-3和Caspase-9的剪切。过表达Bcl-2可抑制As2O3诱导的凋亡。结论：As2O3可诱导胆囊癌细胞的凋亡，并主要通过下调Bcl-2基因的表达来实现。     

三氧化二砷对人不同种类卵巢癌细胞系的体外作用

目的；研究新型抗癌药物三氧化二砷对人不同种类卵巢癌细胞系细胞体外生长的作用。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法，测定不同浓度三氧化二砷作用后3AO细胞的凋亡率及细胞周期的变化；通过吖啶橙染色，荧光显微镜观察三氧化二砷作用后SKOV3细胞的形态变化。结果：三氧化二坤可有效的抑制3AO、SKOV3、TYK细胞的生长，具有时间、浓度依赖性（P＜0.05）；不同细胞株之间的细胞生长抑制率差异无显著性（P＞0.05）；在一定浓度范围内，三氧化二砷诱导3AO细胞的凋亡率具有时间、浓度依赖性（P＜0.05）；3.0μmol/L是诱导细胞凋亡的最佳浓度；三氧化二砷低浓度时阻滞3AO细胞于S期，高浓度时选择性诱导S期细胞凋亡；三氧化二砷作用后，SKOV3细胞呈现典型的凋亡细胞形态特征。结论：三氧化二砷通过诱导S期细胞凋亡而抑制人卵巢癌细胞的生长，具有量效性、时效性及周期特异性。     

三氧化二砷诱导恶性肿瘤细胞凋亡机制的研究进展

三氧化二砷已广泛应用于白血病和各种实体瘤化学治疗的基础研究和临床实践中。近年来国内外多项研究证实三氧化二砷诱导凋亡是其杀伤肿瘤的主要机制,其分子机制尚未得到系统阐明,本文就其抗凋亡作用机制的研究进展作一综述。     

三氧化二砷与重组人肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体协同诱导胃癌细胞凋亡的机制

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)和重组人肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(rhTRAIL)协同诱导胃癌细胞SGC7901凋亡的机制.方法 分别以As2O3、rhTRAIL及两者联合处理人胃腺癌细胞株SGC7901,用AnnexinV-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡,用DiOC6荧光染色流式细胞术检测细胞线粒体跨膜电位(△Ψm),比色法测定细胞Caspase-8、9活性的变化,观察Caspase-8阻断剂(Z-IETD-fmk)与二硫基还原剂(DTT)对SGC7901细胞凋亡、ΔΨm和Caspase-8、9活性变化的影响.结果 As2O3和rhTRAIL均可以导致SGC7901细胞ΔΨm 随时间延长逐渐下降,两者联用可增加SGC7901细胞ΔΨm下降.Caspase-8阻断剂Z-IETD-fmk可减少rhTRAIL诱导的SGC7901细胞发生凋亡与ΔΨm下降,但不影响As2O3的上述作用.二硫基还原剂(DTT)可减少As2O3诱导的SGC7901细胞凋亡与ΔΨm下降,但不影响rhTRAIL的上述作用.As2O3可导致SGC7901细胞Caspase-9活性升高,这种作用可被二硫基还原剂部分取消,但不受Caspase-8阻断剂的影响;rhTRAIL可导致SGC7901细胞Caspase-8、9活性升高,这种作用可被Caspase-8阻断剂部分取消,但不受二硫基还原剂的影响.结论 As2与rhTRAIL通过不同机制激活SGC7901细胞凋亡的线粒体途径,两者联合增强了线粒体途径的激活,从而在诱导胃癌细胞凋亡方面形成协同作用.     

氧化还原系统在砷剂诱导卵巢癌细胞凋亡中的作用

[目的]观察氧化还原系统在砷剂诱导卵巢癌细胞凋亡中的作用。[方法]砷剂孵育卵巢癌细胞48小时后,琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪检测细胞凋亡,分光光度法检测细胞内谷胱甘肽、活性氧及丙二醛含量。[结果]砷剂具有诱导卵巢癌细胞凋亡作用,砷剂诱导后细胞内谷胱甘肽含量减少(P<0.01)、活性氧及丙二醛含量增加(P<0.05)。[结论]氧化还原系统的改变是砷剂诱导卵巢癌细胞凋亡的重要途径之一。     

三氧化二砷联合抗坏血酸对高转移性卵巢癌细胞系HO-8910PM的抗肿瘤实验研究

[目的]在高转移性上皮性卵巢癌细胞株HO-8910PM中观察AS2O3联合抗坏血酸（VitaminC）的抗肿瘤效应。[方法]本研究以高转移性上皮性卵巢癌细胞株HO-8910PM为研究对象,以MTT药敏实验、流式细胞仪以及Western-blot方法检测AS2O3和VitaminC单药及联合的抗肿瘤效应及其机制。[结果]AS2O3和VitaminC单药对HO-8910PM细胞株均具有剂量依赖性的生长抑制作用。AS2O3联合VitaminC后具有明显的协同抗肿瘤效应,并且出现S期阻滞效应。Western-blot结果显示。AS2O3和VitaminC联合作用后,凋亡抑制蛋白bcl-2和凋亡促进蛋白bax分别进一步表达下调和上调。[结论]对高转移性的上皮性卵巢癌细胞株,VitaminC和AS2O3单药均具较好的抗肿瘤效应,VitaminC对AS2O3有较好的化疗增敏效应,两者的联合应用值得在卵巢癌方面进一步研究探讨。     

Bcl-2基因家族相关蛋白在人卵巢癌耐药细胞凋亡中的作用

[目的]探讨bcl-2基因家族相关蛋白在卵巢癌耐药细胞SKOV3／ADM发生凋亡中的作用。[方法]用免疫细胞化学法测定SKOV3和SKOV3／ADM细胞的bcl-2蛋白；以不同浓度的阿霉素作用于SKOV3/ADM细胞，用流式细胞仪动态分析细胞周期和凋亡，并在不同时间点观察其bcl-2、bax、bad和p21蛋白变化。[结果]SKOV3/ADM细胞的bcl-2蛋白显著高于SKOV3（P〈0．01）；大剂量阿霉素（10μg／ml和40μg/ml）作用3h后，能明显下调SKOV3／ADM的bcl-2蛋白和增加bad蛋白；小剂量（0．5μg／ml）阿霉素作用（24、48、72h）后，SKOV3/ADM细胞的凋亡发生率（10．08％、30．53％和33．7％），显著低于SKOV3（40．01％、65.38％和77．65％）（P〈0．01）；SKOV3／ADM细胞p21、bad蛋白增加，bcl-2蛋白下降。[结论]SKOV3／ADM细胞bcl-2高表达能拮抗化疗剂诱导凋亡的作用，bcl-2基因家族相关蛋白与卵巢癌耐药细胞凋亡密切相关。     

Bcl-2基因家族相关蛋白在人卵巢癌耐药细胞凋亡中的作用

[目的]探讨bcl-2基因家族相关蛋白在卵巢癌耐药细胞SKOV3／ADM发生凋亡中的作用。[方法]用免疫细胞化学法测定SKOV3和SKOV3／ADM细胞的bcl-2蛋白；以不同浓度的阿霉素作用于SKOV3/ADM细胞，用流式细胞仪动态分析细胞周期和凋亡，并在不同时间点观察其bcl-2、bax、bad和p21蛋白变化。[结果]SKOV3/ADM细胞的bcl-2蛋白显著高于SKOV3（P〈0．01）；大剂量阿霉素（10μg／ml和40μg/ml）作用3h后，能明显下调SKOV3／ADM的bcl-2蛋白和增加bad蛋白；小剂量（0．5μg／ml）阿霉素作用（24、48、72h）后，SKOV3/ADM细胞的凋亡发生率（10．08％、30．53％和33．7％），显著低于SKOV3（40．01％、65.38％和77．65％）（P〈0．01）；SKOV3／ADM细胞p21、bad蛋白增加，bcl-2蛋白下降。[结论]SKOV3／ADM细胞bcl-2高表达能拮抗化疗剂诱导凋亡的作用，bcl-2基因家族相关蛋白与卵巢癌耐药细胞凋亡密切相关。     

三氧化二砷诱导人鼻咽低分化鳞癌BALB/C裸鼠移植瘤的细胞分化和凋亡的研究(英文)

目的探讨三氧化二砷(As_2O_3)对人鼻咽低分化鳞癌可移植瘤在 BALB/C 裸鼠体内生长的抑制作用并探讨其机制,重点观察其对鼻咽癌细胞的分化诱导作用。方法 CSNE-1鼻咽癌细胞株接种于裸鼠体内构建移植瘤模型。腹腔注入 As_2O_3(5 mg/kg)。光镜及电镜观察移植瘤的形态学变化,TUNEL 染色计算凋亡率,应用免疫组化法检测 PCNA,p53,Bcl-2和 bax 基因的表达。结果腹腔注射 As_2O_3后,鼻咽癌 BALB/C 裸鼠移植瘤生长抑制,瘤组织中癌细胞密度减少,细胞皱缩,胞浆红染,瘤组织分化渐成熟,出现角化细胞和角化珠;间质结缔组织增多。透射电镜下肿瘤细胞出现成熟分化及明显角质化,细胞表面微小突起增多,细胞间桥粒增多并以桥粒互相连接,细胞核浆比例减少,胞浆中出现大量张力原纤维并围绕核周。TUNEL 检查提示凋亡细胞增多;用药后野生型 p53及 bax 高表达,PCNA 低表达,Bcl-2无变化。结论 As_2O_3能诱导人低分化鼻咽裸鼠移植瘤分化和凋亡,可能与 p53及 bax 高表达相关,与 Bcl-2无关。     

三氧化二砷诱导人鼻咽低分化鳞癌BALB/C裸鼠移植瘤的细胞分化和凋亡的研究

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对人鼻咽低分化鳞癌可移植瘤在BALB/C裸鼠体内生长的抑制作用并探讨其机制,重点观察其对鼻咽癌细胞的分化诱导作用。方法 CSNE-1鼻咽癌细胞株接种于裸鼠体内构建移植瘤模型。腹腔注入As2O3(5 mg/kg)。光镜及电镜观察移植瘤的形态学变化,TUNEL染色计算凋亡率,应用免疫组化法检测PCNA,p53,Bcl-2和bax基因的表达。结果 腹腔注射As2O3后,鼻咽癌BALB/C裸鼠移植瘤生长抑制,瘤组织中癌细胞密度减少,细胞皱缩,胞浆红染,瘤组织分化渐成熟,出现角化细胞和角化珠;间质结缔组织增多。透射电镜下肿瘤细胞出现成熟分化及明显角质化,细胞表面微小突起增多,细胞间桥粒增多并以桥粒互相连接,细胞核浆比例减少,胞浆中出现大量张力原纤维并围绕核周。TUNEL检查提示凋亡细胞增多;用药 后野生型p53及baX高表达,PCNA低表达,Bcl-2无变化。 结论As2O3能诱导人低分化鼻咽裸鼠移植瘤分化和凋亡,可能与p53及bax高表达相关,与Bcl-2无关。     

促黄体生成激素释放激素激动剂对卵巢上皮性癌增殖影响

了解促黄体生成激素释放激素激动剂（丙氨瑞林）对人卵巢上皮性癌HO－8910细胞的作用。方法：用MTT比色法和计细胞分裂指数方法，检测与不同浓度丙氨瑞林（0．1－1000nmol／L）共同培养48小时后的人卵巢上皮性癌HO－8910细胞。结果：丙氨瑞林可抑制癌细胞的增殖，使核分裂指数明显降低，与对照比较P＜0．01，MTT比色结果显示抑制作用存在着量效关系，10nmol／L浓度的丙氨瑞林可明显抑制HO－8910细胞的增殖，与对照比较差异有显著性意义（P＜0．05）。结论：丙氨瑞林在体外可明显抑制HO－8910细胞的增殖。     

三氧化二砷治疗原发性肝胆癌的研究进展

近年来中药吡霜制剂－三氧化二砷注射液抗实体瘤，尤其是抗肝癌及胆囊癌作用受到国内外肿瘤学界的广泛关注。作者结合自己的工作，综述该的最新进展，认为三氧化二砷在治疗原发性肝胆部方面，对癌细胞选择性强，作用机理独特，临床疗效确切，且毒副反应小，与化疗药联合还可以增效，应用前景诱人。     

三氧化二砷抑制人鼻咽癌细胞侵袭的体外实验研究

 目的 观察三氧化二砷(As₂O₃)对人鼻咽癌细胞株HNEl-LMPl侵袭、转移的影响。方法 鼻咽癌细胞在含3μmol／L的As₂O₃培养基中培养48小时。然后在无含砷的培养基中继续培养48小时后，收集此时间点贴壁的细胞作为研究对象；用细胞-基质黏附实验、细胞运动实验和肿瘤细胞重组基底膜侵袭实验检测As₂O₃对HNEl-LMPl细胞黏附、运动及侵袭能力的影响；用激光共聚焦的方法检测EB病毒编码的潜伏膜蛋白1(LMPl)的表达情况。结果 肿瘤细胞-基质黏附实验结果显示，经As₂O₃处理的HNEl-LMPl细胞，其黏附能力(平均吸光度为0．524±0．09)低于对照组细胞(平均吸光度为0．665±0．14)，两者相比有差异(P<0．05)。运动实验和肿瘤细胞重组基底膜侵袭结果均显示，经As₂O₃处理后，穿过游离的聚乙烯吡咯烷酮膜(PVP-F)的肿瘤细胞数明显减少(P<0.01)，同时As₂O₃能够下调LMPl的表达。结论As₂O₃具有抗人鼻咽癌细胞株转移的潜力，其机制可能与抑制LMPl的表达相关。     

三氧化二砷对鼻咽癌放射增敏的近期疗效

[目的]探讨三氧化二砷对鼻咽癌放射增敏作用。[方法]87例T1-4N0-1期鼻咽癌病人随机分为单纯放疗组（对照组）和三氧化二砷＋放射治疗组（试验组），观察两组病人鼻咽肿瘤和颈部肿瘤消退情况，1、2年生存率及毒副反应。[结果]放射治疗40Gy时试验组和对照组的鼻咽肿瘤消退率分别为45．45％（20，44）和18．60％（8／43），差异有统计学意义（x^2=7．183，P=0．007）。两组的颈部肿瘤消退速度无统计学差异。40Gy时肿瘤消失组和残留组1、2年无病生存率分别为100％、90．9％和82．2％、69.3％，差异有统计学意义。试验组白细胞降低和恶心呕吐较对照组发生率高，但多为Ⅰ～Ⅱ度反应。其他毒副反应两组间差异无统计学意义。[结论]放疗联合三氧化二砷增敏使鼻咽肿瘤消退更快，且无严重毒副作用。