明胶-白芨胶/丹参材料促进大鼠损伤组织内血管内皮生长因子及转化生长因子-β1表达的效果

目的 观察明胶-白芨胶/丹参材料内丹参浓度对损伤组织血管内皮生因子(VEGF)及转化生长因子(TGF)-β1表达的促进效果.方法 制备明胶-白芨胶/丹参多孔材料.175只大鼠随机分为5组,每组35只.4个实验组大鼠皮下依次植入含丹参浓度为1、2、4、5 ml/100 g的材料,对照组植入单纯明胶-白芨胶多孔材料.术后第1、3、7、14、21、28和56天,每组随机选5只大鼠处死.将含周围组织的材料取出,苏木素-伊红(HE)染色切片.将术后1、3、7、14 d的标本行VEGF及TGF-β1抗体免疫组织化学染色,利用Image J软件,镜下观察分析.结果 材料约8周完全降解,HE染色未示异常反应.免疫组织化学染色阳性点计数显示,实验组VEGF及TGF-β1表达明显强于对照组(P＜0.01).在表达最强的第3天,丹参浓度为2 ml/100 g时,表达值分别为457.7±12.7和1099.7±22.4.丹参浓度超过2 ml/100 g时,实验组间VEGF及TGF-β1表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 明胶-白芨胶/丹参多孔材料具有良好的组织相容性,丹参在材料内促进VEGF及TGF-β1表达的适宜浓度约为2 ml/100 g.     

新型复合纤维蛋白胶的磷酸钙骨水泥的生物安全性研究

目的 研究新型复合纤维蛋白胶的磷酸钙骨水泥的生物相容性和生物安全性,探讨其用于临床修复骨缺损的可行性。方法 制备新型复合纤维蛋白胶的磷酸钙骨水泥,获取材料浸提液。选择急性毒性试验、溶血试验、微核试验、细胞毒性试验,对新型复合人工骨材料进行生物相容性和安全性评价。结果 该磷酸钙骨水泥材料浸提液未引起小鼠急性毒性反应;各实验组肉眼下未见明显溶血反应,溶血率0.05);浸提液对小鼠MC3T3成骨细胞的生长分化无明显影响,细胞毒性分级为Ⅰ级。结论新型复合纤维蛋白胶的磷酸钙人工骨材料具有良好的生物相容性和生物安全性。     

纳米TCP/明胶/鹿茸多肽复合材料的生物相容性评价

目的 评价新型复合材料纳米TCP/明胶/鹿茸多肽的生物相容性,为其在骨缺损修复领域中的临床应用提供实验依据.方法 制备纳米TCP/明胶/鹿茸多肽复合材料,扫描电镜观察其形态.常规培养L929和NIH/3T3细胞,取对数生长期的细胞用于实验.通过急性毒性实验、溶血实验、细胞增殖实验和细胞毒性实验等研究该复合材料的生物相容性.结果 扫描电镜观察示复合材料微球直径约10μm,单个分散存在,微球表面存在纳米级孔洞.急性毒性实验结果显示,实验动物在观察期内一般状态良好,无惊厥、瘫痪和死亡等毒性反应,给药前、后体重无明显变化,该复合材料无急性毒性.溶血实验结果显示溶血率均<5%,符合医用生物材料的溶血实验要求.细胞增殖实验结果显示,不同浓度材料浸提液作用于NIH/3T3细胞均不同程度地促进细胞增殖,具有较好的生物学活性.细胞毒性实验结果显示,该材料细胞毒性为0级.结论 纳米TCP/明胶/鹿茸多肽复合材料具有良好的生物相容性.     

新型支架材料磷酸钙骨水泥-聚乳酸聚羟基乙酸二聚体复合物生物相容性的研究

目的 评价新型支架材料磷酸钙骨水泥-聚乳酸聚羟基乙酸二聚体（CPC-PLGA）复合物的生物相容性。方法 噻唑蓝（MTT）比色法分析3种浓度材料浸提液（100％、50％、10％）对L929细胞生长的影响；分光光度法分析3种浓度材料浸提液的溶血性；复合物植入SD大鼠臀肌2周和4周后取出评价组织相容性；种植BMSC1周扫描电镜观察生长状况。结果 24h3种浓度材料浸提液RGR分别为76％、76％、85％，48h分别为75％、84％、96％，72h分别为76％、77％、84％，细胞毒性评级均为1级；3种浓度浸提液对健康人血的溶血率分别为3．45％、2．59％、0．86％；肌肉内植入2周复合物组炎性反应为Ⅰ级4例、Ⅱ级5例、Ⅲ级1例，纤维囊腔形成10例均为Ⅳ级；4周复合物组炎性反应为Ⅰ级5例、Ⅱ级5例，纤维囊腔形成Ⅲ级3例、Ⅳ级7例；种植1周BMSC形态正常、生长状态良好。结论 CPC-PLGA复合物无细胞毒性，无溶血作用，植入后无炎症反应，种植细胞生长良好，具有良好的生物相容性。     

新型脱细胞骨基质-壳聚糖复合支架的生物相容性研究

[目的]评价新型脱细胞骨基质-壳聚糖(ABECM/CS)骨组织工程复合多孔支架的生物相容性和安全性,为临床应用提供实验依据.[方法]采用联合脱细胞方法对猪股骨进行处理后制备脱细胞骨基质/壳聚糖骨组织工程复合支架.分离、培养兔骨髓间充质干细胞传代后进行实验.采用MTT法观察材料浸提液于1、3、5、7d时进行细胞毒性实验观察细胞的活性;将材料浸提液与稀释血混合离心后观察红细胞溶血情况,检测OD值计算相对溶血率;将材料浸提液经静脉注入兔体内进行热原实验,在规定时间内观察兔体温变化.[结果]细胞毒性实验显示,培养1、3、5、7d后各时间段内三组OD值两两比较(P＞0.05)无显著差异,表明材料无毒性.在溶血实验中观察实验材料的溶血率为3.0％,在标准值溶血率5％范围内,提示无溶血现象发生.热原实验结果显示每只兔体温升高均低于0.6℃,且3只兔体温升高总度数低于1.4℃,符合热原检测规定,复合材料无致热作用.[结论]经联合脱细胞处理制备的ABECM/CS复合支架无细胞毒性、无溶血反应、无热原性,具有良好的生物相容性和安全性,可作为构建组织工程骨的支架载体材料.     

明胶/纳米羟基磷灰石三维多孔骨支架的制备及其生物安全性评价

[目的]探讨冷冻干燥法制备明胶/纳米羟基磷灰石(nano-hydroxyapatite,nHA)三维多孔支架的可行性并评价材料的生物安全性。[方法]取明胶水溶液,将其分别与10 wt%、20 wt%、30 wt%的nHA混合,交联后采用冷冻干燥法制备明胶/nHA三维多孔支架。评价材料的理化性质,通过测定支架孔径、孔隙率、吸水率、抗压强度及降解pH值优化制备条件;MTT法分析支架浸提液毒性;共培养观察细胞在材料表面及周围生长情况;材料埋入背部肌肉内,组织学染色观察评价其生物安全性。[结果]体视显微镜及电镜显示,制备的支架均呈三维多孔隙结构。随着nHA含量的增加,材料成孔效果变差,孔径、孔隙率、吸水率变小,而抗压强度增加。其中以nHA含量为20 wt%的材料表现更为适宜,并选其进行生物相容性实验。MTT法显示不同浓度支架浸提液与对照DMEM培养液吸光度值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。细胞与材料共培养生长状态良好。HE染色观察材料与周围肌肉组织无排斥反应,组织相容性良好。[结论]制备的明胶/nHA支架材料具有三维孔隙结构,具备合适的孔径和孔隙率,无毒,生物相容性良好,可作为骨组织工程支架使用。     

新型碳化硅-碳复合材料用于人工小关节假体的实验研究

目的通过对新型碳化硅-碳(C/C-Si C)复合材料进行生物相容性的相关研究,论证其作为人工小关节假体替代材料上的可行性。方法将灭菌处理后的C/C-Si C复合材料制成表面积与浸提介质体积比率分别为1 cm~2/ml、3 cm~2/ml、5 cm~2/ml的C/C-Si C复合材料浸提液作为实验组,观察小鼠成纤维细胞(3T3)在其中的的生长状态,并测定各自吸光度(A值),评定其细胞毒性情况。按50 ml/kg的比重每隔24 h分别腹腔注射3 cm~2/ml的浸提液、环磷酰胺溶液及生理盐水,毒染4次后取股骨骨髓液,制得涂片,观察含有微核的嗜多染红细胞,分析其遗传毒性情况。沿兔耳缘静脉取8 ml新鲜兔血,抗凝处理后水浴1 h,观察并计算溶血率,判定其是否发生溶血反应。将白化豚鼠背部除毛,在其除毛区上半部分别敷盖C/C-Si C材料表面积与浸提介质体积比为3 cm~2/ml、5%甲醛(阳性对照组)和生理盐水(阴性对照组)的纱布6 h,重复3周后去除,14 d后再于除毛区下半部敷盖三种材料,观察24、48 h的皮肤情况并分级。结果生物毒性方面,实验组中细胞生长情况良好,形态正常,且随时间延长细胞数量逐渐增加。遗传毒性方面,骨髓液中嗜多染红细胞的微核数逐渐增加,与生理盐水组无统计学差异(P0.05)。溶血反应中,实验组与阴性对照组无统计学差异(P0.05),与阳性对照组有统计学差异(P0.05)。致敏试验中,实验组仅1例在24 h内呈现1级反应,且在48 h内消失。结论 C/C-Si C复合材料无细胞毒性及细胞遗传毒性,无致敏反应及溶血反应,具有较好的生物相容性,可替代传统的C/C材料成为人工小关节假体的理想材质。     

三种胶原-壳聚糖多孔支架组织相容性的初步研究

目的制备3种具有良好稳定性的胶原-壳聚糖多孔支架,初步探讨其植入体内后的组织相容性。方法冻干法制备胶原-壳聚糖多孔支架,分别采用真空干热和戊二醛对其交联,制备未交联(材料1)、真空干热交联(材料2)和戊二醛交联(材料3)3种胶原-壳聚糖多孔支架,扫描电镜观察支架微观结构。将12只家兔随机分为4组(n=3),3种支架材料分别交叉埋植入12只家兔耳背部皮下,术后观察、记录全身情况及手术区变化,分别于术后3、7、14及28 d组织切片下见3种材料的稳定性和组织相容性。结果扫描电镜下见3种支架均具有三维多孔结构,孔径分别为120±10、80±15和170±20μm,孔隙率均大于90%。大体观察:实验家兔术后全身情况良好,手术区红肿轻微,切口均愈合良好。组织学观察:材料1降解吸收迅速,能引起明显的炎性反应,材料2降解较快,炎性反应不及材料1明显,材料3降解较慢,炎性反应轻微,术后组织再生较快。结论胶原-壳聚糖多孔支架具有适合组织再生的三维多孔结构,交联能提高胶原-壳聚糖多孔支架的早期稳定性和组织相容性,戊二醛交联优于真空干热交联。     

激光立体成形多孔钛对成骨细胞的影响及生物相容性研究

[目的]评价激光立体成形技术制备的多孔钛材料对成骨细胞生长的影响和其生物相容性。[方法]以DMEM培养液和无菌生理盐水作为浸提介质,对激光立体成形技术制备的多孔钛材料制取浸提液,并在加有此浸提液的培养基中培养成骨细胞,对照组加入等量DMEM培养液和无菌生理盐水,在倒置相差显微镜下观察细胞的生长情况;采用细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测细胞增殖抑制情况以及黏附实验测定细胞黏附能力;对多孔钛分别进行四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定的细胞毒性试验、溶血试验以及短期全身毒性试验等生物相容性检测。[结果]1倒置显微镜观察显示,培养3 d后,发现成骨细胞在激光立体成形多孔钛组能够很好地粘附、生长和分化;CCK-8法和细胞黏附实验均证实,与对照组相比,激光立体成形多孔钛组中成骨细胞抑制率和黏附力均未受明显影响(P0.05);2激光立体成形多孔钛为USP毒性0级,即无细胞毒性;溶血率为3.00%,有良好的血液相容性;无短期全身毒性。[结论]采用激光立体成形技术制备的多孔钛材料有利于成骨细胞增殖,具有良好的生物相容性,在组织工程领域有着广阔的应用前景。     

明胶/白芨胶载药敷料治疗压疮效果观察

目的 探讨明胶/白芨胶栽药敷料治疗压疮的临床疗效.方法 将38例压疮患者随机分成观察组20例(33处)和对照组18例(30处).观察组应用生理盐水擦洗后,用明胶/白芨胶载药敷料包扎;对照组用0.5%活力碘消毒或生理盐水擦洗后用生理盐水湿敷.结果 观察组治疗效果显著优于对照组(P<0.05),治愈时间显著短于对照组(P<0.01).结论 采用明胶/白芨胶栽药敷料治疗压疮效果优于生理盐水湿敷法.     

异种肌腱基质材料生物相容性的体外评价实验

目的：通过对制备的异种肌腱基质材料生物相容性的体外实验研究,鉴定其作为软组织修复充填材料的可行性,为进一步试验研究和临床应用提供依据。方法：参照医疗器械生物学评价标准和要求,采用标准的毒理学方法进行急性毒性试验、致敏试验、皮内刺激实验、细胞毒性试验、遗传毒性试验,对制备的异种肌腱基质材料进行评价。结果：急性毒性实验：各组小鼠活动正常,72h小鼠无死亡,各组动物未见中毒症状或不良反应。致敏试验显示材料组和阴性对照组的皮肤反应指数均为0,无致敏性。皮内刺激实验观察显示,材料浸提液和生理盐水处无明显红斑、水肿和皮肤坏死,极轻微刺激。材料的细胞毒性结果示该材料的相对增殖度较高,细胞毒性分级在0-1级。遗传毒性试验指标均达到标准要求,无遗传毒性。结论：异种肌腱基质材料具有良好的生物相容性,满足作为软组织修复充填材料的生物安全性要求,有望成为一种理想的软组织充填材料。     

多孔钽材料细胞毒性、生物相容性及体内成骨性研究

 目的 探讨国产多孔钽材料的细胞毒性和生物相容性,并通过兔骨内植入成骨示踪观察其成骨作用。方法 扫描电镜观察并测量多孔钽的形态学特征。来源于新西兰胎兔颅盖骨的成骨细胞以多孔钽浸提液（实验组）及完全培养基（对照组）培养,MTT法检测多孔钽的细胞毒性及其对增殖的影响。成骨细胞与多孔钽体外复合培养,观察成骨细胞的黏附、生长及增殖。雄性新西兰大白兔24只,制备股骨髁上多孔钽棒植入模型;4只动物于术后第5天和第19天分别肌肉注射荧光素钙黄绿素和茜素红,术后10 周取材,于488 nm（钙黄绿素激发光）和543 nm（茜素红激发光）波长处,激光扫描共聚焦显微镜观察多孔钽-骨界面成骨;20只动物于术后2、4、8和12 周取材行大体及硬组织切片观察。结果 多孔钽表面及断面可见均匀分布的三维立体连通孔隙结构。MTT法检测显示实验组与对照组细胞随培养时间的延长,其OD值的差异均无统计学意义。扫描电镜显示复合培养早期,细胞在多孔支架表面和孔壁上黏附,相互连接;晚期汇合成片并分泌细胞外基质覆盖材料表面。体内成骨实验显示植入的多孔钽棒与宿主骨结合紧密。硬组织切片显示术后2、4周时多孔钽-骨界面已出现新生骨及小血管,并向孔隙内生长;8、12周时多孔钽表面和孔隙内已长满新生骨组织,新生骨小梁已发育成熟并与材料直接接触。激光共聚焦扫描显微镜显示多孔钽-骨界面及孔隙内可见绿色荧光（钙黄绿素）和红色荧光（茜素红）标记的新生骨组织,红色荧光带位于绿色荧光带周围,早期均呈不连续性,晚期则融为一体。结论 国产多孔钽材料无细胞毒性,具有良好的生物相容性,多孔钽-骨界面为接触及传导性成骨并呈时间依赖性。     

丝素蛋白/羟基磷灰石细胞相容性及异位成骨作用

目的 观察两种丝素蛋白/羟基磷灰石(SF/HA)的细胞相容性及异位成骨作用.方法 相差显微镜及扫描电镜观察兔骨髓基质细胞(BMSCs)在两种SF/HA上的生长;测定ALP活性及噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖;材料浸提液的细胞毒性试验.将成骨诱导的兔BMSCs与材料复合培养3 d后植入兔背部肌肉中,进行异位成骨观察.结果 BMSCs在两种材料上能够良好地黏附和增殖,细胞活性及成骨性能不受材料影响,与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);材料浸提液对细胞生长无毒性作用.异位成骨实验组随时间延长,新骨生成量增多;对照组则均无新骨形成.结论 两种丝素蛋白/羟基磷灰石具有良好的细胞相容性,构建的组织工程化骨具有良好的异位成骨作用.     

壳聚糖膜包裹的多孔聚磷酸钙生物陶瓷的制备

目的探讨壳聚糖膜包裹的多孔聚磷酸钙（calcium polyphosphate，CPP）生物陶瓷的制备方法，为骨缺损的修复提供可行方案。方法采用化学方法制备壳聚糖微球作为致孔剂，通过煅烧、球磨、混浆、烧制等步骤制备多孔CPP生物陶瓷，采用化学方法使多孔壳聚糖膜包裹于其上。对壳聚糖膜包裹的多孔CPP生物陶瓷的理化性质、毒性、生物力学进行检测。结果多孔CPP生物陶瓷孔分布较为均匀，孔径100～300μm，镜下见其内部成孔良好，贯通性较好。壳聚糖微球为淡黄色、较为均匀的小球，粒径200～400μm，抗压性较差，用手即可碾碎。壳聚糖膜包裹的多孔CPP生物陶瓷浸提液对雌、雄小鼠的最大耐受量均〉24g／kg。壳聚糖包裹的多孔CPP生物陶瓷大体孔隙率为60％～80％，抗压强度200MPa，可满足作为骨替代物的抗压强度。结论壳聚糖膜包裹的多孔CPP生物陶瓷是一种良好的多孔状生物陶瓷支架材料，生物力学性能好，无急性毒性，有可能成为骨替代物的优良材料。     

生物可降解人工胸壁的生物相容性与体内降解研究

目的对制备的人工胸壁材料的生物相容性及体内降解情况进行研究,为其应用于临床提供实验依据。方法参照医疗器械生物学评价标准和要求,对人工胸壁组分材料聚对二氧环己酮(A)、壳聚糖(B)、羟基磷灰石/胶原海绵(C)进行评价。溶血实验另设生理盐水为阴性对照组,蒸馏水为阳性对照组,各组取样本5个加抗凝兔血0.2ml,取上清测吸光度(A)值并计算溶血率。取20只小鼠行急性全身毒性实验,每组5只,分为A、B、C和阴性对照组;阴性对照注入生理盐水,A、B、C组由尾静脉注入A、B、C材料浸提液,50ml/kg,于24、48、72h时观察。热源实验取12只大白兔,每组3只,分为A、B、C组和阴性对照组(注入生理盐水),自耳静脉分别注射A、B、C材料浸提液,10ml/kg后,每隔1h测肛温1次,共3次,观察动物的体温变化,并计算各兔体温的升高度数和升高总数。体内植入及降解实验取12只大白兔,将A、B、C材料(制成10mm×10mm大小)分别植入背部肌肉内,于2、4、8、12、16、24周各时间点处死2只,行大体观察,组织学、材料降解及组织相容性观察。结果人工胸壁各组分材料的溶血率均小于国家规定的5%标准,在体外不引起溶血反应;与阴性对照组比较无统计学意义(P>0.05);不引起全身毒性反应,各材料注入后,A、B、C组动物均无死亡,活动进食正常。热源实验各组动物体温升高值均在0.6℃以下,且每组3只兔体温升高值的总数<1.4℃,无致热作用;各材料植入体内初期有轻度炎性反应,随植入时间延长逐步减轻;组分材料分期降解吸收,降解过程中未见组织变性、坏死和异常增生。结论人工胸壁各组分材料具有良好的生物相容性和适宜的降解性能,具有临床开发应用前景。     

神经源性膀胱排尿报警装置的生物相容性研究

目的 研究神经源性膀胱排尿报警装置采用硅胶包埋永磁铁的生物相容性.方法 根据国家标准GB/T16886医疗器械生物学评价的要求对硅胶包埋的永磁铁进行细胞毒性实验、致敏实验、皮内刺激实验和急性全身毒性实验.采用琼脂扩散法计算永磁铁作用24 h后L929细胞的褪色指数和溶解指数,评价样品细胞毒性.使用样品浸提液对30只雄性豚鼠进行常规诱导和激发,24、48 h观察豚鼠腹侧皮肤的红斑水肿反应等级,评价样品的致敏性.观察2只雄性健康新西兰兔皮内注射浸提液后24、48及72 h局部组织的红斑水肿反应等级,评价样品的皮内刺激作用.观察10只雄性昆明种小鼠经尾静脉注射浸提液后4、24、48及72 h一般状态、毒性表现和死亡动物数,评价样品的急性毒性反应.将永磁铁固定在3条犬的膀胱前壁后2、4及8周,观察犬一般反应和局部病理变化.结果 硅胶包埋的永磁铁具有轻微细胞毒性作用,无致敏作用、皮内刺激作用和急性全身毒性作用.永磁铁植入后,犬耐受性好,精神、食欲及二便无明显异常,切口愈合良好,未发生感染.术后2、4周犬大网膜与膀胱壁在永磁铁周围发生粘连,8周犬下腹壁与膀胱壁在永磁铁周围发生粘连.永磁铁周围的纤维囊壁薄,其下方的膀胱壁增厚,膀胱黏膜面正常.镜下见膀胱壁各层均有不同程度充血和水肿,从浆膜层到黏膜层逐渐减轻.在浆膜层内可见大量的急慢性炎性细胞浸润,血管充血明显,肌层明显增厚,肌间可见少量炎性细胞浸润,血管轻度充血.结论 神经源性膀胱排尿报警装置所采用的永磁铁经硅胶包埋后具有良好的生物相容性,符合临床使用要求.     

牛皮质骨棒治疗兔膝关节内骨折的实验研究

了解牛皮质骨棒对动物关节内骨折的内固定作用。方法 １４只新西兰大白兔制成右股骨髁间骨折模型，用牛骨棒行内固定。术后１，２，４，６，８，１０，１２周分批处死动物进行放射学，组织学检查。结果 术后４周所有骨折均完全愈合，随着时间处长，牛骨棒亦逐渐吸收，但炎症反应一直存在。结论牛皮质骨棒作为一种新型内固定材料具有良好的固定效果和生物相容性。     

Comparison of the effects of various immunosuppressive drugs on subrenal capsule assay (SRC assay)

We evaluated the effect of various immunosuppressive drugs in the SRC assay. We chose the most appropriate day to obtain the results of the SRC assay using the MBT-2 tumor. MBT-2 tumor-bearing mice of homogenic and heterogenic strains were separately given one of the three: cyclophosphamide, azathioprine or mizoribine. These drugs were evaluated on the 6th and the 11th day for the immunosuppressive effects expected from a host versus graft reaction. Concerning the homogenic mice that were injected with drugs, on the 11th day, the growth of the tumor was favorably suppressed in comparison with the growth of the control group (A-1) due to the anti-tumor effect of immunosuppressive drugs. We concluded that the 6th day was the most, appropriate day to obtain the results of this assay. Concerning the heterogenic mice, similar results were observed. In the mizoribine-group, we subcutaneously injected 200 mg/kg on alternate days. Yet the implanted tumor grew almost at the same rate as that of the A-1 group. In this group, a histological study showed reduction of the tumor cells and few inflammatory cells. We concluded that this drug was more useful than the others in the SRC assay and the suitable day for judgement was the 6th day.     

Correlation between anti-tumor effect and delayed hypersensitivity induced by topically applied OK-432 with histological findings

Delayed hypersensitivity (DH) against OK-432 was induced in BALB/c mice by injecting 2 KE of OK-432 with Freund's incomplete adjuvant into foot pads. One week after presensitization with OK-432, 2 X 10(5) cells of Meth A tumor were implanted subcutaneously in all mice, followed by intratumoral injection of 1 KE of OK-432 five times every other day starting at 7th day in experimental group. Tumor growth was significantly inhibited in the OK-432 presensitized group comparing to non-sensitized group. In experimental groups marked inhibition was observed in mice which were injected with OK-432 intratumorally 2 to 3 weeks after presensitization. This effect correlated well with delayed hypersensitivity against OK-432. Histological changes after intratumoral injection of OK-432 were examined in order to analyse the mechanism of this effect. The main finding of OK-432 injected specimen by H.E. staining were degeneration of tumor cells and infiltration of inflammatory cells. These changes were stronger in OK-432 presensitized mice. By beta-D-galactosidase staining accumulation of macrophages was found both inside the tumor and the surrounding tissue, and these macrophages increased in OK-432 presensitized mice. Immunoperoxidase staining with antiasialo GM1 anti-serum was also performed. Greater number of activate macrophages were observed to accumulate in the specimen of OK-432 presensitized mice than that of control mice. Some T cells were observed only around tumor tissues and not in the tumor of both presensitized and unsensitized mice. These results suggest that the activated macrophages play a major role in the augmentation of antitumor effect by presensitization with OK-432.