替米沙坦对糖尿病大鼠肾小球表达整合素α3β1的影响

目的 观察整合素α3β1在糖尿病大鼠肾小球的表达以及替米沙坦对其影响｡方法 制备糖尿病大鼠模型,随机将动物分为糖尿病组､治疗组, 另设对照组｡治疗组给予替米沙坦3 mg·kg^-1·d^-1｡6周后,检测各组24 h尿白蛋白定量､肌酐清除率､血糖､血胰岛素､血压､肾重/体重;免疫组化法检测肾小球整合素α3β1表达部位及表达水平｡分离肾小球,Western印迹法检测肾小球整合素α3β1蛋白表达水平｡ RT-PCR 检测肾小球TGF-β1mRNA 的表达｡光镜下观察肾组织病理改变;电镜下观察肾组织超微结构变化｡结果 免疫组化结果显示,正常大鼠整合素α3β1主要沿肾小球血管袢呈线性表达,系膜区有少量表达｡糖尿病组肾小球整合素α3β1表达比正常对照组明显减弱;替米沙坦治疗组整合素α3β1表达较糖尿病组明显增加,24 h尿白蛋白定量及其它肾功能指标以及病理改变明显改善,血压无明显变化, 肾小球TGF-β1mRNA表达比糖尿病组显著下降｡结论 替米沙坦可以减少糖尿病肾病大鼠早期的尿蛋白,改善病理变化,保护肾功能,其作用机制可能部分通过减少TGF-β1表达,上调整合素α3β1表达而实现｡     

绞股蓝总皂苷防治单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化的实验研究

目的探讨绞股蓝总皂苷(GPs)对单侧输尿管结扎(UUO)大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)表达及肾间质纤维化的影响。方法采用UUO大鼠模型,将大鼠随机分为3组假手术组、模型组、GPs组。假手术组和模型组仅给予标准饲料30g,GPs组于术前3d至术后9d每天给予GPs200mg·kg-1·d-1灌胃,第9d处死各组大鼠。免疫组化法检测各组肾组织CTGF、转换生长因子β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;RT-PCR方法检测各组CTGFmRNA含量;Masson染色评定各组肾小管间质损害程度。结果模型组CTGF、TGF-β1、α-SMA的表达及肾小管间质损伤指数明显高于假手术组(P<0.01),而GPs组各项指标明显低于模型组(P<0.01)。各项指标作相关分析,CTGF与肾小管间质损伤指数(r=0.788,P<0.01)、TGF-β1(r=0.879,P<0.01)、α-SMA(r=0.940,P<0.01)为正相关关系。结论绞股蓝总皂苷可以抑制肾纤维化时结缔组织生长因子表达,从而遏制肾纤维化的进展。     

蝉花菌丝对单侧输尿管结扎大鼠肾间质TGF-β_1和CTGF蛋白及mRNA表达的影响

目的：探讨蝉花菌丝对肾间质纤维化大鼠肾间质TGF-β1、CTGF蛋白及mRNA表达的影响。方法：采用单侧输尿管结扎的方法制备单侧输尿管梗阻（UUO）肾间质纤维化大鼠模型。实验分组为正常组、模型组、假手术组、冬虫夏草组、蝉花高剂量组、蝉花中剂量组和蝉花低剂量组,实验周期为25d。采用免疫组织化学和原位杂交方法,分别检测肾组织TGF-β1、CTGF蛋白及其mRNA表达,使用图像分析系统对结果进行处理,采用SPSS11.5统计软件统计分析。结果：UUO模型组大鼠肾间质中TGF-β1、CTGF蛋白及mRNA的表达量均明显高于正常组和假手术组（P〈0.05～0.01）;不同剂量的蝉花菌丝组TGF-β1、CTGF蛋白及mRNA的表达量明显低于模型组（P〈0.05～0.01）,呈明显的量效依赖关系;蝉花菌丝大剂量组的TGF-β1、CTGF蛋白及mRNA的表达量较虫草组为低（P〈0.05～0.01）。结论：蝉花菌丝可以通过下调TGF-β1、CTGF蛋白及其mRNA的表达,对UUO肾间质纤维化大鼠肾脏起一定的保护作用。     

银杏叶提取物对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏的TGF-β_1表达影响

目的：观察银杏叶提取物（EGB）对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾组织转化生长因子-β1（TGF-β1）参与的肾间质纤维化的影响。方法：建立UUO大鼠模型,分组：UUO组、治疗组（UUO＋EGB）、对照组（假手术组）。治疗组给予EGB200mg·kg^-1.d^-1灌胃,用免疫组化方法检测术后7d、10d、14d的肾组织TGF-β1表达量并观察肾脏病理改变及测定肾功能、血TGF-β1等指标。结果：治疗组与UUO组相比,治疗组的肾组织TGF-β1表达及血TGF-β1水平均明显降低（P〈0.01）,肾间质炎性细胞浸润、肾小管扩张、萎缩及肾间质纤维化均较UUO组减轻,并且血TGF-β变化与病理轻重相平行。结论：银杏叶提取物可通过下调肾组织TGF-β1减轻UUO术后肾组织间质纤维化。     

祛毒颗粒对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的干预作用

目的：观察祛毒颗粒对单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction,UUO）大鼠肾间质纤维化的干预作用,并探讨其作用机制。方法：将90只雄性Wistar大鼠随机分为5组：假手术组、模型组、尿毒清组（对照组）、祛毒颗粒低剂量组（低剂量组）、祛毒颗粒高剂量组（高剂量组）,每组18只,除假手术组,其余各组用单侧输尿管梗阻法（UUO）建立肾间质纤维化动物模型,术前1天起各组给予相应浓度和剂量的药物,分别在术后第3天、7天、14天分批处死大鼠,检测大鼠尿N-已酰-β-氨基葡萄糖苷（NAG）酶、血肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）变化,梗阻侧肾组织行HE染色和Masson染色,HE染色观察肾组织病理变化并半定量计算肾小管损伤指数（tubulointerstitial injuryindex,TII）,Masson染色测定肾间质胶原面积,免疫组化法检测结缔组织生长因子（CTGF）、Ⅰ型胶原（ColⅠ）、肝细胞生长因子（HGF）、骨形成蛋白（BMP）-7在肾组织的表达。结果：与模型组及对照组相比,祛毒颗粒能明显降低UUO大鼠术后14d的尿NAG酶、Scr、BUN（P〈0.05）;对梗阻侧肾组织HE染色进行TII评分发现,不同时间点,2个试验组大鼠肾小管损伤指数低于模型组和对照组（P〈0.05～0.01）;Masson染色测定肾间质胶原面积,2个实验组大鼠肾间质胶原面积少于模型组和对照组（P〈0.05～0.01）;免疫组化法染色发现,与模型组和对照组相比,2个试验组大鼠CTGF、ColⅠ在肾组织的表达下调（P〈0.05）,HGF、BMP-7在肾脏组织的表达上调（P〈0.05）。结论：祛毒颗粒具有改善肾间质纤维化的作用,其机制可能与下调UUO大鼠致纤维化因子CTGF、ColⅠ在肾脏的表达,上调抗纤维化因子HGF、BMP-7在肾脏的表达有关。     

积雪草颗粒对UUO大鼠肾组织CTGF、α-SMA、HGF、MCP-1表达的影响

目的:探讨积雪草对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)、α-肌动蛋白(α-SMA)、肝细胞生长因子(HGF)、单核细胞趋化蛋白(MCP-1)-1表达的影响,为临床上应用积雪草延缓肾衰竭提供依据。方法:50只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、积雪草大剂量组、积雪草小剂量组、对照(福辛普利)组。每组10只,除假手术组外均成功建立UUO大鼠模型,术后21 d腹主动脉采血,检测肝、肾功能的变化;免疫组化检测CTGF、α-SMA、HGF、MCP-1的表达部位及含量。结果:模型组CTGF、α-SMA、MCP-1的表达高于假手术组(P<0.01),药物干预组指标低于模型组(P<0.01);药物干预组HGF含量显著高于模型组(P<0.01);其中积雪草大剂量组的表达高于小剂量组(P<0.01),但与福辛普利组相似(P>0.05)。药物干预组BUN水平下降,Scr、ALT、AST变化不明显。结论:积雪草可通过上调UUO大鼠肾组织HGF的表达,抑制UUO大鼠肾组织CTGF、α-SMA、MCP-1表达而实现其抗肾小管间质纤维化(TIF)的作用,大剂量组与福辛普利组作用相似,且没有明显的肝肾毒性。     

活性维生素D3抑制UUO模型大鼠肾间质纤维化作用的实验研究

目的:研究活性维生素D3[1,25(OH)2D3]在肾间质纤维化(RIF)中的保护作用,探讨1,25(OH)2D3的抗肾间质纤维化作用机制。方法:将40只SD大鼠随机分为UUO空白对照组、1,25(OH)2D3治疗组、贝那普利组、假手术组和假手术+1,25(OH)2D3组。采用单侧输尿管梗阻(UUO)致大鼠RIF模型。于术后第9周处死动物,取血标本做血钙浓度和肾功能检测。取肾组织行苏木素-伊红(HE)染色观察肾间质病理变化。免疫组化法检测HGF、TGF-β1和α-SMA蛋白表达,RT-PCR法检测肾组织HGF和TGF-β1mRNA的表达水平。结果:1,25(OH)2D3治疗组、贝那普利组血肌酐、尿素氮均较UUO空白对照组显著降低(P<0.05);各组间血钙浓度差异无统计学意义(P>0.05)。光镜下观察1,25(OH)2D3治疗组和贝那普利组RIF程度轻于UUO空白对照组。1,25(OH)2D3治疗组HGF和TGF-β1蛋白和mRNA表达水平与UUO空白对照组相比,分别显著上调(P<0.05)和下调(P<0.05)。结论:1,25(OH)2D3抑制RIF的作用与其抑制TGF-β1表达和肌成纤维细胞转分化,同时上调HGF表达有关。     

结缔组织生长因子在输尿管梗阻大鼠肾间质中的表达

笔者以单侧输尿管结扎建立梗阻性肾病大鼠(UUO)的肾间质纤维化模型,检测转化生长因子-β(TGF-β)、结缔组织生长因子(CTGF)在肾间质中的表达,同时检测细胞外基质中纤维连结蛋白(FN)和平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。     

缺氧诱导因子-1α在肾间质纤维化中的表达及意义

目的：探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）致肾间质纤维化的作用。方法：60只雄性SD大鼠随机分为假手术组（SOR）和单侧输尿管梗阻（UUO）模型组。术后第3天,第7天,第14天各处死大鼠10只,肾组织行HE染色并观察病理变化。采用免疫组织化学和荧光定量逆转录聚合酶链反应（Q-RT-PCR）法检测肾脏组织中HIF-1α、CTGF、TGF-β1蛋白和mRNA表达。结果：与假手术组相比,模型组大鼠肾脏病理损害进行性加重;HIF-1α、CTGF、TGF-β1蛋白表达随梗阻时间的延长逐渐增加;与假手术组相比HIF-lα、CTGF、TGF-β1mRNA表达明显增加（P〈0.05）;相关分析显示,模型组第3天HIF-lαmRNA表达与CTGFmRNA,TGF-β1mRNA表达分别呈正相关（r=0.748,0.659,P〈0.05）,模型组第7天组HIF-1αmRNA分别和CTGFmRNA、TGF-β1mRNA呈正相关（分别为r=0.663,0.645,P〈0.05）,模型组第14天组HIF-1αmRNA分别和CTGFmRNA、TGF-β1mRNA呈正相关（分别为r=0.515,0.752,P〈0.05）。结论：HIF-1α可能通过调节CTGF、TGF-β1的表达参与了肾间质纤维化发生和发展的过程。     

肾衰泄浊汤对肾间质纤维化小鼠HGF调节的作用

目的:观察中药复方肾衰泄浊汤对肾间质纤维化小鼠肾组织肝细胞生长因子(HGF)蛋白表达的调节及其抗肾间质纤维化的机制。方法:将60只小鼠随机分为:假手术组、模型组、中药低剂量组、中药高剂量组、苯那普利组,采用单侧输尿管梗阻(UUO)动物模型,术后7d观察梗阻肾组织病理改变,用免疫组化检测肾组织HGF、TGF-β1、MMP-9蛋白,Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及FN的表达。结果:中药高剂量组和苯那普利组较模型组小鼠肾组织HGF、MMP-9蛋白表达均增强,TGF-β1蛋白表达减弱,而Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原、FN生成减少,两组无统计学差异,而HGF表达与TGF-β1表达呈明显负相关性。结论:肾衰泄浊汤可能是通过诱导HGF表达,抑制TGF-β1表达,促使肾组织分泌更多MMP-9,抑制Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及FN等ECM的过度沉积,加强肾保护作用,对抗肾间质纤维化。     

钙三醇抑制肾间质成纤维细胞的活化

目的 通过观察钙三醇对肾间质成纤维细胞增殖和凋亡的影响，及其对转化生长因子（TGF）β1诱导的成纤维细胞转分化和细胞外基质(ECM)合成的干预作用，旨在探讨钙三醇抗肾间质纤维化的潜在效应及相关机制。 方法 体外培养大鼠肾间质成纤维细胞NRK-49F，分别以不同浓度TGF-β1（1、2、5和10 μg/L）和（或）不同浓度钙三醇（10－4、10－5、10－6、10－7、和10－8 mmol/L）进行干扰。MTT法观察细胞增殖情况；流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡改变；实时定量PCR和Western印迹法分别检测细胞内α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、结缔组织生成因子（CTGF）及纤连蛋白（FN）的mRNA和蛋白表达。 结果 钙三醇能明显抑制正常和TGF-β1（5 μg/L）诱导的NRK-49F细胞增殖（P < 0.01）。经不同浓度钙三醇（10－4、10－5、10－6、10－7、和10－8 mmol/L）作用48 h后，NRK-49F细胞G2/S期细胞比例较TGF-β1刺激组均明显减少（分别为25.88%、21.81%、21.73%、23.28%、23.61%比27.42%，均P < 0.05），但对细胞凋亡无明显影响。NRK-49F细胞经TGF-β1刺激后，其α-SMA、CTGF、FN mRNA表达量显著上升，并在TGF-β1 1~5 μg/L的范围内呈剂量依赖效应。钙三醇能明显抑制TGF-β1诱导的α-SMA、CTGF、FN mRNA表达上调（均P < 0.05），而不同钙三醇浓度干预组之间差异无统计学意义。钙三醇能显著降低TGF-β1诱导的α-SMA和FN蛋白表达（P < 0.05）。 结论 钙三醇可通过G1期停滞抑制大鼠肾间质成纤维细胞增殖，但不影响凋亡。钙三醇具有拮抗 TGF-β1致肾间质纤维化的潜在作用。     

Effect of thymosin β4 on transforming growth factor-β/connective tissue growth factor of renal tubular interstitial fibrosis rats

Objective To investigate the influence of thymosin beta 4 (Tβ4) with two different dosages on the expression of transforming growth factor beta (TGF-β) and connective tissue growth factor (CTGF) in rats with renal tubular interstitial fibrosis, and to further estimate the changes of renal tubular interstitial lesions. Methods Rat models of renal tubular interstitial fibrosis were established by unilateral ureteral occlusion (UUO). The male SD rats were randomly divided into 4 groups and 15 rats in each group: sham group, model group, treatment group with 1 mg/L Tβ4 and treatment group with 5 mg/L Tβ4. Rats in sham group and model group were poured into the same amount of saline. The renal function and renal pathological changes were observed after the second week. The mRNA and protein expression of TGF-β and CTGF in renal tissues was tested by in-situ hybridization and Western blotting. Results Compared with that in sham group, the expression of TGF-β mRNA and its protein, CTGF mRNA and its protein was significantly higher in model group (all P＜0.01). Compared with rats of model group, Tβ4 treatment rats had lower mRNA and protein expression of TGF-β and CTGF (all P＜0.01), and the expression in treatment group with 5 mg/L Tβ4 was lower than that in treatment group with 1 mg/L Tβ4 (P＜0.05). And the expression of TGF-β mRNA was positively correlated with CTGF mRNA expression (r=0.697, P＜0.01). The 24 h total urinary protein and the area of renal tubular interstitial lesion in model group were significantly more than those in sham group, and also more than those in Tβ4 treatment group (all P＜0.05). Tβ4 treatment attenuated kidney damage, and the effects in treatment group with 5 mg/L Tβ4 were better than those in treatment group with 1 mg/L Tβ4. No difference in serum creatinine and blood urea nitrogen was observed among 4 groups (all P＞0.05). Conclusions Tβ4 treatment can inhibit the renal TGF-β and CTGF expression of rats with tubular interstitial fibrosis in a dose-dependent manner, and play a protective role in kidney.     

血管内皮生长因子C参与肾间质纤维化的进程

目的探讨血管内皮生长因子C（VEGF-C）在大鼠。肾小管上皮细胞向间充质细胞转化（EMT）过程中的变化及其作用通路,并利用动物模型研究血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂替米沙坦对VEGF-C的影响,从而探讨VEGF-C在肾间质纤维化中的作用。方法体外培养大鼠肾小管上皮细胞（NRK52E）,用转化生长因子B1（TGF-β1）孵育不同时间,观察其对VEGF-C、上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（vimentin）、磷酸化AKT（P-AKT）等表达的影响,并在TGF-131作用同时加入PBK抑制剂Wortmannin,观察上述指标的变化;用单侧输尿管结扎术（UUO）制作SD大鼠肾间质纤维化模型,将21只大鼠随机分为假手术组、模型组和替米沙坦治疗组,每组7只。2周后,用免疫组织化学法检测α平滑肌肌动蛋白（mSMA）及VEGF-C在肾组织的分布,用RT-PCR和Westernblot—ring法检测其mRNA和蛋白表达。结果TGF-β1促进EMT的同时促进VEGF-C的表达增加。加入Wortmannin后EMT被抑制,同时VEGF-C的表达减低。动物模型组α-SMA和VEGF-C表达较假手术组高,替米沙坦治疗组α-SMA和VEGF-C表达较模型组低。结论TGF-β1可通过P13K—AKT通路促进VEGF-C的表达,VEGF-C与α-SMA的变化有同步性,提示VEGF-C可能参与肾间质纤维化的进程。     

姜黄素对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的 探讨姜黄素对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型的影响及其可能机制.方法 将30只大鼠随机分为3组,每组10只:假手术组、模型组、姜黄素组.模型组和姜黄素组行右侧输尿管接扎术,假手术组只游离不接扎.术后第14天处死各组中的大鼠,股动脉取血,检测血清肌酐、尿素氮;留取梗阻侧肾脏,Maason染色观察肾间质纤维化程度,免疫组织化学方法测定TGF-β1、CTGF的表达情况,RT-PCR技术榆测肾组织TGF-β1 mRNA、CTGF mRNA表达.结果 姜黄素降低了BUN、Scr的含量,同时姜黄素显著减少了大鼠肾间质TGF-β1、CTGF的表达,并有效改善了肾脏的病理学损伤.结论 姜黄素对单侧输尿管梗阻大鼠有较明显的保护作用,这可能与其能减少大鼠肾间质TGF-β1、CTGF的表达有关.     

骨形态发生蛋白-7在幼年大鼠肾小管间质损伤中的表达及意义

目的：探讨单侧输尿管梗阻（UUO）幼年大鼠肾间质纤维化形成过程中骨形态发生蛋白-7（BMP-7）的表达趋势及其与转化生长因子-β1（TGF-β1）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的相关关系;观察血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）和血管紧张素受体拮抗剂（ARB）的干预作用。方法：采用单侧输尿管结扎制备UUO模型。3～4周龄幼年Wistar雄性大鼠随机分为对照组、模型组和干预组。于实验第3、7、14、28天取大鼠8只处死。HE及Masson染色观察肾组织的病理改变;免疫组化半定量检测各组大鼠肾组织BMP-7、TGF-β1及α-SMA蛋白表达。了解BMP-7与TGF-β1、α-SMA、肾间质纤维化程度的关系。结果：随梗阻时间延长,模型组BMP-7表达逐渐下降,TGF-β1、α-SMA表达进行性增高,干预组BMP-7表达较模型组显著增加（P〈0.05）;TGF-β1、α-SMA表达较模型组明显减少（P〈0.05）。模型组肾小管间质TGF-β1、α-SMA表达明显增高（P〈0.05）,BMP-7表达显著减少（P〈0.05）。与模型组相比,干预组肾小管间质TGF-β1、α-SMA表达显著减少（P〈0.05）,而BMP-7表达显著增多（P〈0.05）。BMP-7与TGF-β1、α-SMA、肾间质纤维化程度成负相关（r分别为-0.844、-0.787、-0.952,P均〈0.01）。结论：BMP-7表达减少伴随着肾小管上皮细胞转分化出现,提示BMP-7可能具有维持小管上皮细胞表型作用。苯那普利联合氯沙坦可能通过下调TGF-β1、α-SMA蛋白的异常高表达,上调BMP-7蛋白的异常低表达,直接或间接负性调控肾小管上皮细胞转分化,阻止肾间质纤维化进展。     

血管内皮生长因子抑制肾小管上皮间充质转化及其与结缔组织生长因子和PI3K-Akt信号通路的关系

目的　探讨血管内皮生长因子（VEGF）对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导的肾小管上皮间充质转化（EMT）的作用,及其与结缔组织生长因子（CTGF）、PI3K-Akt信号通路的关系。 方法 （1）将体外培养的HK2细胞分为正常对照组、TGF-β1（5 μg/L,下同）组、VEGF组（100 μg/L,下同）、TGF-β1＋VEGF组。HK2细胞体外培养48 h,用免疫组化双染方法检测肾小管上皮细胞α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和E钙黏蛋白的表达。（2）将体外培养的HK2细胞分为正常对照组、TGF-β1组、VEGF组、TGF-β1＋VEGF组、PI3K-Akt信号通路阻断剂LY294002组（25 μmol/L,下同）、TGF-β1＋LY294002组、VEGF＋LY294002组、TGF-β1＋VEGF＋LY294002组。HK2细胞体外培养48 h,用Western印迹和RT-PCR方法检测α-SMA和CTGF的表达;用ELISA方法检测培养上清中纤连蛋白（FN）和I型胶原（ColⅠ）的表达。 结果 免疫组化结果显示,TGF-β1组α-SMA表达比正常对照组增强,而E钙黏蛋白表达减弱; TGF-β1＋VEGF组α-SMA表达比TGF-β1组显著减弱,而E钙黏蛋白表达增强。 TGF-β1组α-SMA、CTGF蛋白和 mRNA及FN、ColⅠ表达比正常对照组显著增强（均P < 0.05）;TGF-β1＋VEGF组α-SMA、CTGF蛋白和mRNA及FN、ColⅠ表达比TGF-β1组显著减弱（均P < 0.05）;TGF-β1＋VEGF＋LY294002组α-SMA、CTGF蛋白和 mRNA及FN、ColⅠ表达比TGF-β1＋VEGF组显著增强（均P < 0.05）。 结论　VEGF能抑制TGF-β1诱导的体外培养的HK2细胞发生EMT,其机制可能与VEGF下调HK2细胞CTGF表达及减少细胞外FN、ColⅠ合成有关。VEGF的这种作用可能部分通过PI3K-Akt信号转导通路实现,其确切机制有待进一步研究。     

Inhibition of Src kinase can ameliorate renal interstitial fibrosis in unilateral ureteral obstruction mice

Objective To investigate the effect and mechanism of Src kinase in renal interstitial fibrosis of unilateral ureteral obstruction (UUO) mice. Methods Male C57BL/6J mice were randomly divided into 4 groups, including sham operation group (n=8), sham operation+PP2 group (n=8), UUO operation group (n=8) and UUO operation+PP2 group (n=8). The mice were injected 2 mg/kg PP2 by intraperitoneal everyday after surgery in sham+PP2 group and UUO+PP2 group. PP2 dissolved in 1% DMSO (formulated with normal saline). Sham and UUO group were given equal 1% DMSO. The mice were sacrificed at 7th day. Renal collagen was observed with Sirius red stain. The activities of Src, protein kinase B (PKB, AKT), p38 mitogen-activated protein kinase (p38 MAPK), extracellular signal-regulated kinase (ERK) and the protein expressions of α-smooth muscle actin (α-SMA) and fibronectin (FN) were detected by Western blotting. The expression of collagen I (COLⅠ) was detected by immunohistochemistry and the expressions of matrix metalloprotein 9 (MMP-9), tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP-1), transforming growth factor-β1 (TGF-β1), monocyte chemotactic protein-1 (MCP-1), interleukin-6 (IL-6) were measured by ELISA. Results Compared with sham mice, UUO mice on 7th day displayed obvious renal fibrosis. Meanwhile, UUO mice had increased expressions of COLⅠ and FN, and activities of AKT, ERK and p38 MAPK (all P＜0.05). Their renal expressions of α-SMA, TGF-β1, MMP-9, TIMP-1, MCP-1 and IL-6 were also raised (all P＜0.05). Compared with those in UUO group, in UUO+PP2 group the activities of Src, AKT, p38 MAPK and ERK, and expressions of TGF-β1, MCP-1 and IL-6 decreased (all P＜0.05). Additionally, expressions of COLⅠ, FN and α-SMA, collagen deposition and renal fibrosis receded in UUO+PP2 group (all P＜0.05). However, the expressions of MMP-9 and TIMP-1 were not influenced by PP2 treatment. Conclusions Src kinase promotes myofibroblasts accumulation and inflammatory reaction through activating its downstream signaling pathway in the progressing of renal interstitial fibrosis.     

γ-干扰素对梗阻性积水肾间质纤维化的治疗作用

目的 探讨γ干扰素(IFN-γ)对梗阻性肾积水肾间质纤维化的抑制作用及其可能的机制.方法 将65只雄性SD大鼠随机分成4组:治疗组(20只)、模型组(20只)、药物对照组(20只)、假手术组(5只).在建模和给药后的第3、7、14、21、28天,每组各随机处死动物4只(假手术组1只).采用苏木素-伊红(HE)和Masson染色观察病变肾脏间质纤维化的情况;采用聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)的mRNA表达情况;免疫组织化学法观察以上三种蛋白的变化.结果 模型组大鼠术后肾间质逐渐出现纤维化改变,并随梗阻时间的延长逐渐加重,TGF-β1、α-SMA和Col-Ⅰ的mRNA和蛋白表达亦逐渐升高.第14天,模型组TGF-β1和α-SMA的表达量达到高峰,28 d时各指标的表达均达到最高,TGF-β1、α-SMA和Col-Ⅰ分别为51.84%、72.59%和68.73%.治疗组各指标在不同时间点均低于模型组,第28天时,三项指标依次为33.84%、32.59%和48.73%,与模型组比较P＜0.05.Banff评分显示治疗组间质纤维化程度明显减轻(P＜0.01).其余两组未见肾间质纤维化改变.结论 IFN-γ具有减轻积水后肾间质纤维化程度的作用,该作用与其下调TGF-β1的表达、抑制肌成纤维细胞(MyoF)激活和减少Col-Ⅰ生成有关.