p27kip1基因转染增强放射抗拒人食管癌细胞的放射敏感性

目的研究腺病毒介导的p27kip1基因转染对人放射抗拒食管癌细胞放射敏感性的影响。方法以重组腺病毒介导的p27kip1基因转染人放射抗拒食管癌细胞EC9706R,免疫细胞化学法检测p27kip1表达;流式细胞仪检测转染前后肿瘤细胞周期,克隆形成实验检测p27kip1基因转染前后两种EC9706R细胞的放射敏感性。结果腺病毒转染后放射抗拒食管癌EC9706R细胞p27kip1表达明显升高,细胞周期结果显示G0/G1期阻滞;转染p27kip1前后放射敏感性参数检测结果比较:转染前EC9706R细胞SF2=67.4%,Dq=1.66 Gy,转染后SF2=49.7%,Dq=1.03 Gy,放射增敏比SERSF2、SERDq分别为1.36,1.61,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 p27kip1基因转染能增强人放射抗拒食管癌细胞的放射敏感性。     

食管癌放射抗拒细胞P-gp和GST-π表达的研究

目的研究食管癌放射抗拒细胞多药耐药基因的表达。方法以食管癌EC9706细胞为研究对象,采用长期、间隔、γ射线照射的方法建立放射抗拒的食管癌EC9706细胞系EC9706-R,MTT法测定EC9706-R的耐药指数,免疫细胞化学法和RT-PCR法分别测定P-gp、GST-π的蛋白和mRNA的表达。结果EC9706-R细胞耐药指数是EC9706细胞的1.24倍,P-gp和GST-π的蛋白均有表达,mRNA表达比EC9706细胞高。结论诱导建立的食管癌放射抗拒细胞EC9706-R的化疗耐药性有所增高,原因多为放疗增加了P-gp和GST-π的表达。     

p27kip1在胃癌中的表达和意义

目的 探讨p27kip1（细胞周期素依赖性激酶抑制因子）在胃癌中表达及其与胃癌临床病理学特征的关系。方法 采用免疫组织化学方法检测p27kip1在60例胃癌组织原发灶和淋巴结转移灶中的表达。结果 p27kip1在胃癌的阳性表达率为43．33％（26／60）,阳性细胞定位于细胞浆,在高分化及Ⅰ,Ⅱ期胃癌高表达（P＜0．05）,且与淋巴结转移密切相关（P＜0．01）。结论 p27kip1表达与胃癌组织分化程度、淋巴结转换呈负相关;p27kip1表达对估计胃癌预后有一定意义。     

p27~(kip1)和Cyclin E在子宫内膜癌表达的临床病理意义

目的 :研究 p2 7kip1和 Cyclin E在子宫内膜癌组织的表达以及与临床病理参数的关系 ,探讨其在肿瘤发生、发展及预后的意义。方法 :采用免疫组化 S- P法检测 p2 7kip1和 Cyclin E在正常子宫内膜 ( 8例 )、子宫内膜不典型增生 ( 8例 )和子宫内膜癌 ( 5 2例 )组织中的表达。结果 :1 p2 7kip1和Cyclin E阳性表达主要定位于细胞核 ,与正常子宫内膜和内膜不典型增生组织相比 ,p2 7kip1在子宫内膜癌的表达明显下降 ,Cyclin E明显上升 ,差异具有显著性 ,在内膜癌中 p2 7kip1与 Cyclin E蛋白表达呈负相关 ( r=- 0 .30 2 6,P<0 .0 5 )。 2 p2 7kip1和 Cyclin E蛋白表达与内膜腺癌组织学分化程度和肿瘤肌层浸润程度或有无淋巴结转移有关 ,与病理类型无关 ;Cyclin E表达高低也与临床分期和 5年生存率有关。结论 :p2 7kip1表达降低和 (或 ) Cyclin E过度表达与子宫内膜癌的发生发展有关 ,Cyclin E可作为判定内膜癌预后的指标     

颌骨软骨肉瘤p27kip1的表达意义

0　引言　细胞周期素 (cyclin) - cyclin 依赖性蛋白激酶(CDK) - CDK抑制物 (CKI)网络调控细胞周期 [1 ,2 ] . p2 7kip1是属于 Cip/ Kip家族的一个 CKI新成员 ,在多种肿瘤低表达 [3] .其在软骨肉瘤的表达情况报道很少 .我们用免疫组化法检测 p2 7kip1在颌骨软骨肉瘤组织的表达 .1　材料和方法1.1　材料　颌骨软骨肉瘤 2 0例和骨软骨瘤 8例为本院手术切除经病理证实的标本 .经甲醛固定 ,石蜡包埋 ,5μm厚连续切片 ;鼠抗人 p2 7kip1单克隆抗体 (m Ab)购自美国 Santa Cruz公司 ;免疫组化 ABC试剂盒为美国 Vector公司产品 ;DAB为美国 …     

p27~(kip1)基因及其在恶性肿瘤中的表达

越来越多的证据表明 ,细胞分裂的精确性及定时性是正常细胞生长和分化所必需的 ,包含于这一过程中的蛋白质及基因的改变与肿瘤发生及恶性表型密切相关。其中 ,最令人注目的就是细胞周期素 (Cyclin) -细胞周期素依赖性蛋白激酶(Cyclin dependent kinase,CDKs) -细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制剂 (Cyclin dependent kinaseinhibitors,CDKIs)这一细胞网络调控系统。在哺乳动物细胞中 ,一系列 CDKs与细胞周期素结合 ,催化细胞周期进程 ,CDKIs抑制它们的活性或结合 ,是细胞周期的负性调控因子。 CDKIs根据结构和功能不同分为 INK4家族及…     

Skp2与P27~(kip1)在鼻咽癌组织中的表达及意义

目的:F-box蛋白家族中的一员Skp2参与细胞周期抑制蛋白P27kip1泛素化降解,研究发现Skp2在乳腺癌、胃癌、前列腺癌等多种恶性肿瘤中表达增加。本研究旨在探讨Skp2与P27kip1在鼻咽癌组织中的表达及与鼻咽癌多项临床病理特征的关系,并探讨两者的相关性。方法:鼻咽癌组39例,慢性鼻咽炎组24例。标本均经石蜡包埋,HE染色确诊。Skp2和P27kip1蛋白的检测采用免疫组化染色(PV-9000二步法)。结果:(1)Skp2在鼻咽癌组织中的阳性表达率为71.79%,明显高于其在慢性鼻咽炎组织中的阳性表达率(41.67%),差异有统计学意义(P<0.05);P27kip1在鼻咽癌组织中的阳性表达率为35.90%,明显低于其在慢性鼻咽炎组织中的阳性表达率(79.17%),差异有统计学意义(P<0.01);(2)Skp2、P27kip1的蛋白表达与鼻咽癌的临床分期、颅神经侵犯有关(P<0.05),与年龄、性别、分化程度、颈淋巴结转移无关(P>0.05);(3)Skp2、P27kip1在鼻咽癌组织中的表达呈负相关(rs=-0.373,P=0.019)。结论:鼻咽癌中Skp2蛋白表达与靶蛋白P27kip1蛋白降解有关,Skp2、P27kip1可能与鼻咽癌的发生发展有关,联合检测Skp2、P27kip1蛋白表达可作为判断鼻咽癌生物学行为的指标之一。     

p27kip1、PCNA在脑胶质瘤中的表达及意义

目的　研究细胞周期素依赖性激酶抑制剂 p2 7kip1、增殖细胞核抗原 (PCNA)在脑胶质瘤中的表达及其相关性。方法　应用免疫组化染色SP法 ,检测 12例正常脑组织、6 0例脑胶质瘤中 p2 7kip1、PCNA表达及其特征。 结果　p2 7kip1随着肿瘤恶性度增高 ,阳性表达强度逐渐下降 ;p2 7kip1在正常脑组织、胶质瘤Ⅰ～Ⅱ级、胶质瘤Ⅲ～Ⅳ级的标记指数 (LI)分别为 (72 .2± 17.3) %、(5 2 .3± 11.4 ) %、(7.4± 1.5 ) % ,而PCNA的表达则相反 ;两者在肿瘤中的表达呈负相关。结论　p2 7kip1、PCNA在脑胶质瘤中的表达可预测该肿瘤生物学行为特征     

硒蛋氨酸对食管癌放射抗拒细胞药物耐受性的影响

目的:研究硒蛋氨酸对食管癌放射抗拒细胞药物耐受性的影响。方法:以食管癌EC9706细胞为研究对象,建立放射抗拒的食管癌EC9706细胞株EC9706R,研究硒蛋氨酸对EC9706R细胞的影响。结果:EC9706R细胞耐药指数是EC9706细胞的1.24倍,硒蛋氨酸浓度大于4μmol/L时明显降低EC9706R细胞对顺铂的药物耐受性(P<0.05)。结论:硒蛋氨酸对食管癌放射抗拒细胞的药物耐受性具有一定的逆转作用。     

人乳腺癌PTEN蛋白的表达和意义及其与p27~(kip1)和cyclinD_1表达的相关性

目的　探讨抑癌基因 PTEN蛋白在人乳腺癌的表达定位、表达水平 ,与临床病理指标的关系及其预后意义 ,及其分别与可能的下游基因、抑癌基因 p2 7kip1、癌基因 cyclin D1 蛋白表达之间的相关性。　方法　应用免疫组织化学染色 SP方法 ,检测 6 1例乳腺癌组织石蜡切片 PTEN蛋白、p2 7kip1和cyclin D1 蛋白的表达状况 ,比较 PTEN蛋白表达与临床病理指标 (组织学分级、肿块大小、淋巴结转移程度、TNM分期 )、激素受体 (ER、 PR)的关系 ,观察与 p2 7kip1 、cyclin D1 蛋白表达是否相关。　结果　 PTEN蛋白表达定位于细胞质 ,p2 7kip1 的表达定位于细胞核 ,cyclin D1 蛋白表达大多定位于细胞核 ,少数于细胞质。本组 PTEN蛋白阴性占 6 .6 %(4/ 6 1) ,表达减低者 4 1.0 % (2 5 / 6 1) ,阳性表达者占 5 2 .5 %(32 / 6 1) ;p2 7kip1蛋白阴性表达占 19.7% (12 / 6 1) ,表达减低者占 4 4 .3% (2 7/ 6 1) ,阳性表达者占 36 .1% (2 2 / 6 1) ;cyclinD1 阴性者占 31.2 % (19/ 6 1) ,弱阳性者占 37.7% (2 3/ 6 1) ,强阳性者占 31.2 (19/ 6 1)。 PTEN与淋巴结状态、ER状态及局部复发、远处转移相关。单因素生存分析 ,PTEN蛋白高表达组 5年生存率 (87.5 0 % )优于低表达组 (5 8.6 2 % ,P =0 .0 10 1)。Cox模型多因素分析未显     

三氧化二砷对人肝癌细胞株SMMC-7721中p27~(kip1)及其相关分子Skp2表达的影响

目的 通过检测三氧化二砷(As2O3)对肝癌SMMC-7721细胞周期素依赖性激酶抑制剂(CDKI)p27kip1及S期激酶相关蛋白2(Skp2)的影响,探讨其抗癌作用机制.方法 体外培养人肝癌细胞株SMMC-7721,用2μmol/L As2O3处理72h,流式细胞仪检测细胞周期变化及细胞凋亡率,应用Western blot方法检测p27kip1、Skp2及CDK2基因编码蛋白的表达.结果 与对照组比较,As2O3使SMMC-7721细胞周期阻滞在G2/M期.经As2O3作用的人肝癌细胞p27kip1基因编码蛋白表达增加,而p27kip1相关分子Skp2及CDK2的表达减少.结论 As2O3可干扰细胞周期的进程,抑制SMMC-7721细胞的增殖.其作用机制与上调p27kip1蛋白及下调Skp2、CDK2有关.     

p27~(KIP1)与神经母细胞瘤分化的研究

目的 探讨p27~(KIPl)在神经母细胞瘤诱导分化及预后的作用。方法用BrdU诱导神经母细胞瘤细胞系TGW的分化,免疫组化法分析神经母细胞瘤分化过程中p27~(KIPl)的表达特点,Western blot法分析p27~(KIPl)的总体表达水平。结果 BrdU引起p27~(KIPl)的表达明显增加,主要位于细胞浆,p27~(KIPl)的表达使神经母细胞瘤细胞株的生长停滞,p27~(KIPl)在诱导分化作用下蛋白质表达的总体水平增加。结论 p27钓(KIPl)的表达与神经母细胞瘤的分化呈正相关,p27~(KIPl)可以抑制神经母细胞瘤的生长并可以成为以促进肿瘤细胞分化的基因治疗方案的基础。     

Skp2在大肠癌中的表达及其与p27kip1表达的相关性研究

目的:为探讨大肠癌手术标本中Skp2的表达及其与p27k ip1表达的相关性。方法:应用免疫组织化学STREPT-AVID IN-B IOTIN-COMPLEX法,检测大肠癌手术标本中Skp2、p27k ip1的表达。结果:Skp2的表达的阳性率:浸润于粘膜以及粘膜下层为0%(0/4),浸润达肌层者为40%(2/5)。浸润达浆膜层者为61%(43/71);淋巴结转移阳性者阳性率为77%(36/47);临床病理分期第1、2、3期阳性率分别为22%(2/9),29%(7/24)和77%(36/47)。Skp2在大肠癌中的表达与p27k ip1的表达呈现明显负相关;统计学检验有显著性(P<0.01)。结论:大肠癌组织中,Skp2的过度表达和p27k ip1的表达缺失有明显的相关性,可能通过降低p27k ip1的表达而促进肿瘤的浸润和转移。检测癌组织中Skp2、p27k ip1的表达情况,有助于评估肿瘤的生物学行为,对患者的预后判断具有重要意义。     

Expression and Clinical Significance of p27kip1 Protein in Primary Liver Cancer

Theactivityofcellproliferationisakeyindicatorforevaluatingthetumorcellinvasiveability.Inacellcycle,thetransitionofG1toSisthemostimportantphaseofcellproliferation.p27proteincanextensivelyinhibittheactivityofCDKs,andtherebypreventstheentryofcellstoG1phase,a…     

p27kip1在胃癌中的表达及其意义

目的研究p27kip1在胃癌中的表达及其意义.方法应用免疫组化SP法检测胃癌组织中p27kip1的表达.结果本组58例胃癌中,p27kip1 的阳性率为50%,12例胃良性病变中p27kip1 的阳性率为100%,p27kip1与胃癌的组织学分类、浸润深度、淋巴结转移、临床分级均呈负相关(P<0.05).结论胃癌p27kip1蛋白表达降低与肿瘤低分化和肿瘤进展有关,可作为预测胃癌预后的重要指标.     

p27kip1、VEGF在原发性肝细胞癌中的表达及临床意义

目的 研究细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白p27^kipl、血管内皮生长因子(VEGF)在肝细胞肝癌中的表达及临床意义。方法 用免疫组织化学方法研究p27^kipl、VEGF在40例肝细胞肝癌手术切除标本及5例正常肝组织标本中的表达。结果 40例肝细胞癌中,p27^kipl。和VEGF蛋白的阳性表达率分别为50％和72．5％,且随着肿瘤病理分级、临床分期的增高,p27蛋白阳性表达率呈下降趋势;而VEGF的阳性表达率则增高,两者呈负相关。结论 p27^kipl、VEGF在肝细胞肝癌中的表达与肿瘤的生物学行为及预后密切相关。     

p27kip1在原发性肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的　研究p2 7kip1在原发性肝细胞癌 (HCC)中的表达及其临床意义。方法　应用免疫组化S -P法检测 4 0例HCC、15例肝硬化组织和 5例正常肝组织石蜡标本中 p2 7kip1的表达。 结果　p2 7kip1蛋白在 4 0例HCC中表达阳性率为 32 .5 % (13/40 ) ,在 15例肝硬化组织中为 6 0 % (9/15 ) ,在 5例正常肝组织中为 80 % (4/5 )。p2 7kip1蛋白在HCC中的表达与其在肝硬化组织和正常肝组织中的表达相比有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,p2 7kip1蛋白与HCC的组织学分级、组织学类型、淋巴结转移、远处转移和生存期均有统计学差异。结论　p2 7kip1与HCC的发生、发展可能均有密切联系 ,p2 7kip1蛋白在一定程度上可判断患者的病情进展和预后。     

p27kip1和cyclin D1在肾癌中的表达及临床意义

目的:研究肾癌组织中p27kip1和cyclinD1蛋白的表达,探讨其与肾癌生物学特征的内在联系。方法:应用免疫组化S-P法,对53例肾癌及6例正常肾组织中p27kip1和cyclinD1蛋白进行检测。结果:在正常肾组织中p27kip1均呈阳性表达,p27kip1阳性表达率在肾癌不同临床分期,不同病理分级中差异显著(G1～G2:70.00%,G3～G4:27.27%,P<0.05;T1～T2:70.83%,T3～T4:20.69%,P<0.05)。cyclin D1在正常肾组织呈阴性表达,cyclinD1阳性表达率在肾癌不同临床分期,不同病理分级中差异显著(G1～G2:51.35%,G3～G4:27.27%,P<0.05;T1～T2:58.33%,T3～T4:20.69%,P<0.05)。结论:p27kip1和cyclinD1蛋白在肾癌中的表达与肿瘤生物学行为密切相关,p27kip1和cyclinD1在肾癌的发生、发展中起重要作用。     

肝细胞癌和慢性肝病组织中p27kip1基因表达及甲基化分析

目的研究肝细胞癌和慢性肝病中细胞周期调控因子p27kip1的表达和甲基化的关系.方法应用免疫组织化学、原位分子杂交技术分别检测正常肝组织、肝硬化、癌周肝硬化和肝细胞癌共68例标本中P27蛋白和p27mRNA的表达.应用甲基化特异性PCR技术检测正常肝组织、肝硬化和肝细胞癌共44例标本中p27基因甲基化情况.结果P27蛋白阳性率在正常肝组织(66.7%,4/6)、肝硬化(60.0%,6/10)和癌周肝硬化(50.0%,12/24)各组间差异没有统计学意义(P>0.05),p27mRNA阳性率在正常肝组织(83.3%,5/6)、肝硬化(70.0%,7/10)和癌周肝硬化(75.0%,18/24)各组间差异也没有统计学意义(P>0.05),但肝细胞癌组P27蛋白(21.4%,6/28)和mRNA(25.0%,7/28)的阳性率与各组比较均显著下降(P<0.05).P27蛋白阳性信号在正常肝组织和肝硬化组主要定位于胞核,而癌周肝硬化组和肝细胞癌组主要定位于胞浆.正常组与肝硬化合并组P27蛋白和p27mRNA表达具有相关性,癌周肝硬化组和肝细胞癌组P27蛋白与p27mRNA表达不具有相关性.44例样本中检出1例肝细胞癌的p27基因发生甲基化,其蛋白和mRNA表达均呈阴性.结论P27蛋白及p27mRNA表达下降或缺失可能参与了肝细胞癌的发生和发展,p27基因甲基化可能导致p27mRNA的失转录.