抗IL-1βscfv抗体与TNF-α可溶性受体融合蛋白的构建及其生物学活性分析

目的 设计原核表达抗人白细胞介素-1β单链抗体(IL-1βscfv)与TNF-α可溶性受体的融合蛋白,并分析其生物学活性,为类风湿关节炎的治疗提供新的候选药物.方法 利用RT-PCR方法从HeLa细胞总RNA中扩增了人肿瘤坏死因子Ⅰ型受体胞外区基因片段,与抗人IL-1βscfv通过抗体铰链区融合,克隆至pET27b(+)表达载体中,构建成pET-IL-1scfv:TNFR1质粒;转化大肠杆菌Rosetta进行表达.从包涵体中纯化得到IL-1scfv:TNFR1蛋白,进行IL-1scfv:TNFR1的鉴定及活性检测.结果 ELISA结果证明,IL-1scfv:TNFR1可以分别结合hIL-1β和hTNF-α,并呈现剂量依赖性,表明IL-1scfv:TNFR1的单链抗体部分和可溶性受体部分可以各自形成正确的空间构象;免疫斑点分析证明,IL-1scfv:TNFR1与hTNF-α结合后仍可以结合hIL-1β,具有同时结合hIL-1β和hTNF-α的两种靶分子的能力,表明IL-1scf:TNFR1的两个部分不会相互影响与靶分子的结合.活性测定结果表明,IL-1 scfv:TNFR1可以有效封闭肿瘤坏死因子对L929细胞的细胞毒效应,具有显著抑制hIL-1β促进L929细胞增殖的活性,IL-1scfv:TNFR1对两种靶分子的拮抗作用均呈现明显的剂量依赖性.结论 成功构建了能够同时结合hIL-1β和hTNF-α两种靶因子的双特异性IL-1 scfv:TNFR1融合蛋白,并能有效抑制hTNF-α和IL-1β的生物活性,为类风湿关节炎的治疗提供新的候选药物.     

牙周病患者治疗前后血清IL-8、IL-1β和TNF-α检测的临床意义

目的：探讨了牙周病患者治疗前后血清IL-8、IL-1β和TNF-α水平的变化及意义。方法：应用放免法对36例牙周病患者进行了治疗前后血清IL-8、IL-1β和TNF-α检测,并与35名正常健康人作比较。结果：在治疗前,牙周病患者血清IL-8、IL-1β和TNF-α水平非常显著地高于正常人组（P〈0.01）,经系统治疗后3个月,则与正常人组比较无显著性差异（P〉0.05）。结论：检测牙周病患者血清IL-8、IL-1β和TNF-α水平的变化对探讨其发病机理、预防和指导用药物具有重要的临床价值。     

慢性前列腺炎患者治疗前后血清IL-8、IL-1β和TNF-α检测的临床意义

目的：检测了慢性前列腺炎患者治疗前后血清IL-8、IL-1β和TNF-α水平的变化及意义。方法：应用放免法和酶免法对40例慢性前列腺炎患者进行了治疗前后血清IL-8、IL-1β和TNF-α检测,并与35名健康人作比较。结果：慢性前列腺炎患者在治疗前血清IL-8、IL-1β和TNF-α水平均非常显著地高于正常人组（P〈0.01）,经综合治疗2周后,除TNF-α水平与正常人组比较无差异外,血清IL-8、IL-1β水平与正常人组比较仍有显著性差异（P〈0.05）。结论：血清IL-8、IL-1β和TNF-α可能以不同的方式参与慢性前列腺炎的发生与发展,其检测对了解病情和指导治疗、预后观察均具有重要的治疗价值。     

抗TNF-α、IL-1β IgY抗体抗豚鼠过敏性支气管哮喘的实验研究

目的:探讨抗TNF-α、IL-1β IgY抗体治疗过敏性支气管哮喘的作用机制.方法:卵清白蛋白雾化吸入制备Hartley豚鼠过敏性支气管哮喘动物模型,随机分正常对照组(A组)、过敏性支气管哮喘模型组(B组)、0.1%抗TNF-α、IL-1β IgY(C组)和1.0%抗TNF-α、IL-1β IgY雾化吸入治疗组(D组).各组豚鼠治疗结束后2、4、8、24小时处死,肺组织切片H.E.染色;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)Wright's染色计数炎症细胞.结果:①肺组织病理改变:B组各时间点可见肺泡管和肺泡壁结构受损,肺泡腔内充满渗出液、上皮细胞和白细胞,肺间质水肿、炎性细胞浸润、毛细血管扭曲或扩张淤血、有效血流的毛细血管显著减少.C组和D组肺泡管和肺泡壁结构受损轻于B组,肺泡腔内偶见少量炎症细胞,支气管腔及肺泡中的粘液栓较B组明显减少,支气管周围少见炎性细胞浸润,支气管粘膜上皮修复现象明显.②BALF细胞学变化:与B组相比,C和D组嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞数量显著下降(2、4、8小时,P均<0.05);巨噬细胞显著上升(2、4、8小时,P均<0.05).结论:抗TNF-α、IL-1β IgY抗体雾化吸入治疗豚鼠过敏性支气管哮喘能够显著减轻炎症病理反应.0.1%与1.0%的抗TNF-α、IL-1β IgY抗体疗效相当.     

甘氨酸对急性坏死性胰腺炎鼠血和胰腺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-10的影响

目的：探讨甘氨酸对急性坏死性胰腺炎鼠血和胰腺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-10的影响。 方法： Wistar大鼠150只，随机分为3组：假手术组(SO)、急性坏死性胰腺炎组(ANP)和急性坏死性胰腺炎＋甘氨酸处理组(ANP+Gly), 以牛磺胆酸钠复制急性坏死性胰腺炎大鼠模型, ANP+Gly组大鼠胰管内给予牛磺胆酸钠前10 min静脉给予甘氨酸1 g/kg。观察血和胰腺组织中ET、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-10含量变化，同时观察各组大鼠胰腺组织的病理变化、24 h病死率及平均生存时间。 结果: 在0 h、2 h、4 h、8 h和12 h的血和胰腺组织中ET、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 和 IL-10水平, ANP组和ANP+Gly组均显著高于SO组(除0 h组及ANP组的IL-10 12 h外) (P<0.01/P<0.05), 且在ANP和ANP+Gly组ET、TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8随病程进展而升高(P<0.05)，在ANP组 IL-10水平随病程进展降低(P<0.05)，而在ANP+Gly组IL-10水平随病程进展增高(P<0.05)。在相同时段除ET在ANP组和ANP+Gly组无显著差异外(P>0.05), 除0 h组外, TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8水平在ANP组显著高于ANP+Gly组(P<0.01)，而 IL-10水平(除0 h和2 h组无差异外)ANP+Gly组显著高于ANP组(P<0.05/0.01)。虽然ANP组和ANP+Gly组大鼠胰腺组织的病理变化无显著差异，但ANP+Gly组大鼠24 h病死率显著低于ANP组(P<0.05)，平均生存时间显著延长于ANP组(P<0.05)。 结论： ET、TNF-α、IL-1β、IL-6 、IL-8 和 IL－10参与了大鼠ANP的病理过程，甘氨酸可减少促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6 和IL-8 的产生，上调抗炎细胞因子IL－10的负调控作用，有助于减轻ANP时炎性细胞因子瀑布样级联反应，降低大鼠24 h病死率及延长平均生存时间。     

慢性肾衰血透患者IL-1β、IL-6、TNF-α检测及意义

本文检测了93例慢性肾衰患者血透前后白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果发现慢性肾衰患者IL-1β、TNF-α水平均显著高于正常对照组(p<0.01)。单次血透后IL-6水平显著升高(p<0.01),IL-1β水平有所下降。长期血透对IL-1β、IL-6、TNF-α诱生水平影响不大。提示慢性肾功能衰竭患者细胞免疫多方面功能受损,血透能部份纠正这些免疫学异常,但长期血透仍无助于改善慢性肾功能患者的免疫功能受损。     

充血性心力衰竭患者血浆TNF-α、IL-1β 和IL-6含量变化

目的检测充血性心力衰竭(CHF)患者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)水平,了解这些细胞因子在CHF过程中的可能作用。方法取20例正常人和20例Ⅱ°-Ⅲ°CHF患者静脉血,用ELISA法测血清TNF-α、IL-1β和IL-6含量。结果CHF组这些细胞因子水平均明显高于对照组(P＜0.01);CHF程度越重,这些细胞因子浓度越高;TNF-α与IL-1β和IL-6含量之间呈正相关(r=0.9684,0.9768;P均＜0.01)。结论细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6可能参与CHF过程。     

动态监测SARS病人IL-1α、IL-1β、TNFα和IL-6含量及其意义

目的 :动态监测SARS病人IL 1α、IL 1β、TNFα和IL 6含量并探讨其意义。方法 :采用酶联免疫吸附法定量检测早期、恢复期SARS病人以及出院后SARS随访者 ,一线未患SARS健康医护人员及健康体检者血清中IL 1α、IL 1β、TNFα和IL 6含量。结果 :IL 1α和IL 1β含量在早期、恢复期与其他组比较均显著升高 (P <0 0 5 )。SARS早期组TNFα均值显著高于其他组(P <0 0 0 5 ) ,SARS恢复期组均值显著高于SARS随访组、急诊等一线未患SARS组和健康对照组 (P <0 0 1)。SARS早期组IL 6均值显著高于其他各组 (P <0 0 0 5 ) ,SARS随访组与急诊等一线未患SARS组和健康对照组间均值比较 ,均有显著差异 (P <0 0 1)。结论 :SARS在发病过程中其病理损伤与细胞因子IL 1、TNFα和IL 6有关。     

结肠康泰对大鼠结肠炎肠组织内TNF-α、IL-1β、IL-6水平的影响

目的:探讨大鼠实验性结肠炎结肠组织内TNF-α、IL-1β、IL-6水平变化及中药结肠康泰的影响.方法:将SD大鼠随机分为3组,对照组、模型组、模型+结肠康泰组.采用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇复制实验性结肠炎模型,检测各组肉眼和组织病理学记分、肠组织髓过氧化物酶(MPO)活性和TNF-α、IL-1β、IL-6含量.结果:模型+结肠康泰组大鼠结肠肉眼及组织学损伤记分、MPO活性明显低于模型组;模型组结肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显高于正常对照组;模型+结肠康泰组TNF-α及IL-6水平明显低于模型组,而IL-1β水平无显著差异.结论:结肠康泰对大鼠实验性结肠炎的治疗作用可能涉及到结肠组织细胞因子TNF-α、IL-6的免疫调节作用.     

慢性肾炎患者治疗前后血清IL-2、IL-6和TNF-α检测的临床意义

目的：探讨了慢性肾炎患者治疗前后血清IL-2、IL-6和TNF-α水平的变化及临床意义。方法：应用放射免疫分析对32例慢性肾炎患者进行了血清IL-2、IL-6和TNF-α水平测定,并与35名健康人作比较。结果：慢性肾炎在治疗前血清IL-6和TNF-α水平均非常显著的高于正常人组（P〈0.01）,而IL-2则显著的低于正常人组（P〈0.01）。经中西医结合治疗3个月后与正常人组比较仍有显著性差异（P〈0.05）。结论：检测慢性肾炎患者血清IL-2、IL-6和TNF-α水平的变化对观察病情及预后判定均具有重要的临床价值。     

动脉粥样硬化患者血清TNF-α、IL-6和IL-8的变化及其相关性研究

用双抗体夹心ELISA，测定了45例动脉粥样硬化患者血清TNF－a、IL－6和11．－8水平，同时用酶法测定其血含量。动脉粥样硬化患者血清TNF－a、11。－6和11。－8水平均明显高于正常对照（P＜0．01），且TNF-α水平与IL－6和IL－8正相关，TNF－αa和IL－6与血清胆固醇和低密度脂蛋白均呈正相关。     

对脂多糖攻击小鼠血及肝IL-6和TNF-α含量的影响

目的：研究重组人白细胞介素-10（rhIL-10）对脂多糖（LPS）诱导的血、肝IL-6和TNF-α炎症介质含量变化的影响。 方法： 小鼠腹腔注射LPS建立炎症模型，并同时静脉注射不同剂量的rhIL-10，ELISA法测定12 h、24 h、48 h和72 h肝组织和血清IL-6和TNF-α的含量。 结果： 注射rhIL-10后12 h，肝组织和血清IL-6、TNF-α水平开始下调，24-48 h抑制作用最明显（P＜0.05），72 h后抑制作用减弱，且呈剂量效应关系。 结论： 利用基因工程技术制备的重组人白细胞介素10（rhIL-10）显著下调肝组织和血清IL-6和TNF-α的水平。     

尖锐湿疣患者治疗前后血清IL-2、IL-6和TNF-α水平检测的临床意义

为探讨尖锐湿疣患者治疗前后的血清IL-2、IL-6、TNFα-水平及其临床意义,分别应用RIA法和ELISA法对42例尖锐湿疣患者测定血清IL-2、IL-6和TNFα-水平,并与30名健康人(正常组)作比较。结果表明,尖锐湿疣患者在治疗前血清TNF-α水平显著高于正常组(P<0.01),而IL-2、IL-6则显著低于正常组(P<0.01),经6个月治疗后,与正常组比较仍有显著性差异(P<0.05)。结论:尖锐湿疣患者的免疫功能存在明显缺陷。     

新生儿感染性疾病IL-6和TNF-α的水平测定

目的为探讨新生儿感染性疾病与炎性细胞因子白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-a)的关系。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法对28例新生儿感染性疾病急性期和25例恢复期患儿血清进行IL-6和TNF-α的测定,并与25例正常新生儿进行比较。结果IL-6和TNF-α含量在新生儿感染急性期显著高于正常对照组,急性期显著高于恢复期,在3例死亡病例中IL-6和TNF-α水平明显高于死亡病例。结论IL-6和TNF-α是新生儿感染性疾病的重要炎症介质,其水平的高低可以反映疾病的严重程度,对估计病情、观察疗效及判断预后有一定意义。     

牙周病患者治疗前后血清IL-2、IL-6和TNF-α水平及其临床意义

目的：探讨了牙周病患者血清白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子（TNF-α）在牙周病发生、发展过程中的浓度变化及相互关系。方法：应用放射免疫分析检测了48例牙周病患者血清IL-2、IL-6和TNF-α含量的变化,并与35例正常健康人作比较。结果：牙周病患者在治疗前血清IL-6和TNF-α水平非常显著的高于正常人组（P〈0．01）而IL-2水平则显著的低于正常人组（P〈0．01）,经系统治疗后（一个月）除IL-6和TNF-α水平与正常人组比较无差异外（P〉0．05）,IL-2与正常人组比较仍有显著性差异（P〈0．05）。结论：细胞因子IL-2、IL-6和TNF-α在牙周病的发生、发展过程中的相互作用、观察其浓度变化对探讨其发病机理、预防和指导用药均有重要价值。     

妊高征患者治疗前后血清TNF-α、IL-6和IL-8检测的临床意义

目的：探讨了妊高征患者治疗前后血清TNF-α、IL-6和IL-8水平的变化及意义。方法：采用放射免疫分析对36例妊高征患者进行了血清TNF-α、IL-6和IL-8水平检测并与35名正常孕妇作比较。结果：在治疗前血清TNF-α、IL-6和IL-8水平非常显著地高于正常孕妇组（P〈0．01）,经治疗后2周,血清TNF-α、IL-6和IL-8水平与正常孕妇组比较,无显著性差异（P〉0．05）。结论：炎性细胞因子TNF-α、IL-6和IL-8在妊高征的发病机理中具有重要的作用,有一定的临床价值。     

乳腺癌患者血清IL-6、IL-1β、TNF-α的变化及其临床意义

目的探讨乳腺癌患者血清IL-6、IL-1β、TNF-ɑ的变化及其临床意义。方法应用放射免疫法和免疫比浊法检测66例乳腺癌患者、22例乳腺良性增生患者、62名健康对照者空腹血清IL-6、IL-1β、TNF-ɑ水平。用ROC曲线方法确定各指标的最佳诊断临界值,用Logistic回归分析方法进行三种指标联合分析。结果乳腺癌组血清三种指标水平均高于乳腺良性增生组和健康对照组（P〈0.05）。单独用其中一种指标鉴别诊断的敏感性和特异性均不超过83%,若用Logistic回归分析联合＂IL-6＋IL-1β＋TNF-ɑ＂鉴别诊断乳腺癌和乳腺良性增生的敏感度可以达到96.7%,但特异度仅71.4%。结论血清IL-6、IL-1β、TNF-ɑ可作为乳腺癌鉴别诊断的辅助指标。     

慢性前列腺炎患者治疗前后血清TNF-α、IL-6和IL-8检测的临床意义

目的：探讨了慢性前列腺炎患者治疗前后血清TNF-α、IL-6和IL-8水平的变化及意义。方法：应用放射免疫分析对42例慢性前列腺炎患者进行了血清TNF-α、IL-6和IL-8检测,并与35名正常健康人作比较。结果：慢性前列腺炎患者在治疗前血清TNF-α、IL-6和IL-8水平均非常显著地高于正常人组（P〈0.01）,经综合治疗后2周,除TNF-α水平与正常人比较无差异外,血清IL-6和IL-8水平与正常人比较仍有显著性差异（P〈0.05）。结论：血清TNF-α、IL-6和IL-8可能以不同的方式参与了慢性前列腺炎的发病,其检测对了解病情、指导治疗具有重要的临床价值。     

尖锐湿疣患者治疗前后血清TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10检测的临床意义

目的:探讨了尖锐湿疣患者治疗前后血清TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10水平变化及意义.方法:应用RIA和ELISA对40例尖锐湿疣患者进行了血清TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10水平检测并与35名正常健康人作比较.结果:在治疗前尖锐湿疣患者血清IL-6及IL-8低于正常对照组.TNF-α、IL-10水平均非常显著地高于正常对照组(P＜0.01),经治疗3个月后与正常对照组比较仍有显著性差异(P＜0.05).结论:检测尖锐湿疣患者血清TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10水平的变化对疾病的治疗、预后观察有重要的临床价值.