壮骨止痛方对去势雌鼠转化生长因子β1mRNA及Ⅰ型胶原纤维mRNA表达的影响

目的:观察壮骨止痛方对去势雌鼠转化生长因子β1(Transforming growth factor-β,TGF-β1)m RNA及Ⅰ型胶原纤维mRNA表达的影响,并探究其治疗骨质疏松的具体机制。方法:将75只健康雌性SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、壮骨止痛方组、无水乙醇提取A部位组,每组15只。除空白组、假手术组外,其余各组建立绝经后骨质疏松病理模型,假手术组去除卵巢周围相应体积脂肪。造模后5 d开始给药,13周后取股骨,原位杂交法检测分析骨组织中Ⅰ型胶原纤维mRNA和TGF-β_1mRNA的表达。结果:模型组TGF-β_1mRNA和Ⅰ型胶原mRNA表达明显低于空白组(P0.05),壮骨止痛方组、无水乙醇提取A部位组TGF-β_1m RNA和Ⅰ型胶原纤维mRNA表达明显高于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:壮骨止痛方可能是通过提高TGF-β_1mRNA和Ⅰ型胶原纤维mRNA的表达,促进成骨细胞分化,发挥改善骨质疏松的效应。     

壮骨止痛方对去势骨质疏松症雌鼠垂体-甲状腺轴及其骨密度的影响

目的:观察、探讨壮骨止痛方对去势雌鼠骨质疏松模型的疗效。方法:选取40只3月龄SD雌性大鼠,按体质量随机分为4组,10只/组,分别为正常对照组、假手术组、模型组、壮骨止痛方组。术后5d拆线后开始给药,连续l3周后处死。取血和骨标本从骨密度、血清雌二醇(E2)、甲状腺激素(T3、T4)、促甲状腺激素(TSH)和甲状旁腺激素(PTH)等几个方面研究其疗效。结果:模型组与空白组相比,大鼠血清E2、骨小梁密度明显降低,差异显著(P0.01),表明造模成功。壮骨止痛方组与模型组相比,血清中E2浓度明显增加,T3、T4、TSH浓度降低,PTH浓度明显降低,并能明显增加平均骨小梁密度(P0.01)。结论:壮骨止痛方能降低血清T3、T4、TSH、PTH中水平的趋势.增加壮骨止痛方组大鼠平均骨小梁密度及血清E2浓度,调整垂体-甲状腺轴功能,从而抑制骨吸收,促进骨形成,降低骨转换率,纠正骨代谢的负平衡能有效预防及治疗骨质疏松症。     

壮骨止痛方对去势骨质疏松模型雌鼠血清瘦素及胰岛素的影响

目的:观察壮骨止痛方对去势骨质松模型雌鼠血清瘦素及胰岛素的影响,探讨壮骨止痛方治疗骨质疏松的可能机理。方法:选取3月龄250g左右SD雌性大鼠60只,按体重随机分为模型组、假手术组、空白组、壮骨止痛方组,每组15只。术后5天拆线后开始给药,连续13周。腹主动脉取血,放免法检测血清瘦素及胰岛素。结果:与去势模型组比较,壮骨止痛方组雌鼠血清瘦素及胰岛素含量明显降低(P<0.05)。结论:壮骨止痛方能显著降低去势骨质松模型雌鼠血清瘦素及胰岛素水平,这可能是其治疗骨质疏松的机理之一。     

壮骨止痛方对去势雌鼠ERRα基因表达及血清E_2水平的影响

目的:从雌激素/雌激素相关受体信号通路探讨壮骨止痛方抗绝经后骨质疏松症的作用机制。方法:将60只雌性SD大鼠建立去卵巢骨质疏松症病理模型,将其随机分为壮骨止痛方高、中、低剂量组,模型组,雌二醇组,每组12只;另将12只雌性SD大鼠只切除卵巢附近等体积的脂肪组织作为假手术组。各组分别采用相对应药物进行灌胃治疗,治疗13周后各组随机选取6只雌鼠提取股骨组织mRNA样本进行PCR反应检测ERRα基因的表达,选取8只雌鼠经腹主动脉采血,凝固后离心分离出血清,应用雌二醇(E2)ELISA试剂盒检测血清E2水平。结果:与假手术组比较,模型组E2浓度及骨组织ERRα基因表达均显著降低,差异有统计学意义(P0.01);与模型组比较,壮骨止痛方高、中剂量组及阳性对照组血清E2浓度及骨组织ERRα基因表达均显著升高,差异有统计学意义(P0.01,P0.05),壮骨止痛方低剂量组较模型组升高,但差异无统计学意义(P0.05)。结论:壮骨止痛方通过同时提高去势雌鼠血清E2水平和骨组织ERRαmRNA表达来发挥抗绝经后骨质疏松症的作用。     

壮骨止痛方治疗大鼠去卵巢骨质疏松症的蛋白质组学分析

目的:探讨壮骨止痛方治疗骨质疏松相关蛋白改变谱。方法:利用二维凝胶电泳分离股骨组织的总蛋白,通过软件分析2-DE图谱,比较各组间蛋白的表达量,然后利用MALDI-TOF-MS制作差异蛋白点的肽谱,确定各差异蛋白的种类,通过生物信息学分析所得蛋白的功能。结果:壮骨止痛方能调节骨骼肌的能量代谢、物质转运,对大鼠去卵巢骨质疏松症产生调节作用。     

壮骨止痛方无水乙醇提取A部位对去势雌鼠骨质疏松的疗效及机制研究

目的:观察壮骨止痛方无水乙醇提取A部位对去势雌鼠骨质松模型的疗效,并探讨其可能的作用机制。方法:选取250 g左右SD雌性大鼠75只,按体重随机分为模型组、假手术组、正常组、壮骨止痛方无水乙醇提取A部位组(0.12 g.kg-1.d-1)、壮骨止痛方组(13.2 g.kg-1.d-1),每组15只。去卵巢术后5 d开始给药,连续13周。取血和骨标本从骨密度、骨生物力学、病理形态学等几个方面研究其药效,从血清雌激素(E2)、骨钙素(BGP)、甲状旁腺素(PTH)、降钙素(CT)方面研究其作用机制。结果:壮骨止痛方无水乙醇提取A部位能明显增加去卵巢模型鼠股骨、腰椎骨的骨密度(P<0.05);显著提高股骨头平均骨小梁密度(P<0.01);显著增强模型大鼠胫骨的最大应力和最大抗弯强度(P<0.01);与去势模型组比较壮骨止痛方无水乙醇提取A部位明显增加子宫系数(P<0.05),能显著降低去势模型鼠血清CT(P<0.01)。结论:壮骨止痛方无水乙醇提取A部位能增加模型鼠骨密度及骨最大应力和最大抗弯强度,逆转骨质疏松症的病理形态学改变。其作用机制之一可能是发挥药物自身的雌激素样作用,改善激素代谢紊乱,直接或间接调节了机体的骨代谢和细胞因子,降低了骨转换,促进骨形成,抑制骨吸收。     

壮骨止痛方药效部位的筛选及其对骨质疏松雌鼠骨代谢相关激素的影响

目的:筛选壮骨止痛方的药效部位,研究其对骨代谢相关激素的影响,探讨其可能的作用机制。方法:选取3月龄250 g左右SD雌性大鼠150只,按体重随机分为模型组、假手术组、正常组、壮骨止痛方无水乙醇提取A部位组、无水乙醇提取B部位组,石油醚提取A部位组,水提A部位组,水提B部位组,乙酸乙酯提取A部位组,壮骨止痛方组,共10组,每组15只。去卵巢术后5 d拆线后开始给药,连续13周。取血和骨标本从骨密度、骨生物力学、病理形态学等几个方面研究其药效,从血清雌激素(E2)、骨钙素(BGP)、甲状旁腺素(PTH)、降钙素(CT)、瘦素、胰岛素方面研究其作用机制。结果:与模型组相比,壮骨止痛方无水乙醇提取A部位、水提B部位、石油醚提A部位能明显增加去卵巢模型鼠股骨、腰椎骨的骨密度(P<0.05或P<0.01);能显著提高股骨头平均骨小梁密度,差异非常明显(P<0.01),能显著增强去势骨质疏松模型大鼠胫骨的最大应力和最大抗弯强度(P<0.05或P<0.01);与壮骨止痛方组比较无明显差异。与去势模型组比较,壮骨止痛方能显著增加血清E2,预防雌激素不足导致的子宫萎缩(P<0.05);显著降低去势模型鼠血清BGP,PTH,CT(P<0.05)。结论:壮骨止痛方无水乙醇提取A部位、水提B部位、石油醚提A部位是壮骨止痛方治疗骨质疏松症的药效部位;壮骨止痛方能够增加去卵巢骨质疏松模型大鼠血清E2含量,降低血清BGP,PTH,CT,直接或间接调节了机体的骨代谢和细胞因子,改善骨基质的分子结构,加强骨生物力学性能,从而治疗骨质疏松症。     

从蛋白质组学探讨壮骨止痛方治疗骨质疏松症的作用机理

目的:用蛋白质组学的方法研究壮骨止痛方治疗骨质疏松的作用机理。方法:建立去卵巢大鼠骨质疏松症模型,分为壮骨止痛方组、模型组、假手术组,13周后骨质疏松症模型成功,提取股骨组织蛋白质样品,双向电泳分离,得到各组股骨组织总蛋白质分子解剖图谱,用图像分析软件,分析各组间差异蛋白质点,MAlDI-TOF-MS质谱分析,结合蛋白质生物信息库(Marx science Ltd database),对各蛋白质初步鉴定。结论:鉴定了2个差异蛋白,分别P1为膜联蛋白A1,P2为蛋白质二硫键异构酶A3,初步认为这两种蛋白质在壮骨止痛方治疗该病过程中发挥着重要调控作用。     

壮骨止痛胶囊治疗去卵巢雌鼠骨质疏松症疗效的实验研究

目的:验证壮骨止痛胶囊治疗骨质疏松症的疗效。方法:选取10~12月龄雌性SD大白鼠60只,随机分为假手术组、去卵巢模型组、骨松宝对照组、壮骨止痛胶囊低、中、高剂量组共6组,每组10只。术后5d拆线后开始给药,连续13周。取血尿骨标本从骨密度、性激素(E2)、病理形态学等几个方面进行研究。结果:1.壮骨止痛胶囊能明显增加去卵巢模型鼠股骨、胫骨、腰椎骨矿含量和骨密度(P<0.01);2.与模型鼠比较,壮骨止痛胶囊有增加血清E2趋势,且各组体重增长和子宫湿重与模型组接近(P>0.05);3.壮骨止痛胶囊各剂量组股骨颈梁髓比、股骨头平均骨小梁密度都明显升高,差异有非常显著意义(P<0.01)。结论:壮骨止痛胶囊能增加模型鼠骨密度,逆转骨质疏松症的病理形态学改变,有效治疗骨质疏松症。     

壮骨止痛胶囊对去卵巢雌鼠骨质疏松症无机元素的影响

1 材料与方法 1.1 实验动物 10～12月龄SD系雌性大白鼠60只,体重319g±29.7g,由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供,合格证号02-49-2.     

壮骨止痛方对去卵巢骨质疏松大鼠下丘脑瘦素及其受体的影响

目的观察壮骨止痛方对去卵巢骨质疏松大鼠下丘脑瘦素及其受体的影响,探讨其抗骨质疏松机制。方法 72只200 g左右的SD大鼠按体质量随机抽出假手术组12只,造模组60只,造模组采用双侧去卵巢法造模,假手术组只切除卵巢周围相应质量的脂肪。造模成功后,造模组大鼠按体质量随机分为模型组、壮骨止痛方高剂量组(13.2 g/kg)、中剂量组(6.6 g/kg)、低剂量组(3.3 g/kg)和戊酸雌二醇组,每组12只。术后第5天开始药物干预,模型组和假手术组给予相应体积的纯净水,持续13周。给药结束后,检测大鼠骨密度和下丘脑Leptin含量及OB-Rb蛋白表达。结果模型组大鼠下丘脑Leptin及OB-Rb含量显著降低,骨密度显著减少,与假手术组比较差异有统计学意义。壮骨止痛方各剂量组大鼠OB-Rb蛋白表达显著增加,骨密度显著增加,与模型组比较差异有统计学意义。结论促进OB-Rb蛋白表达,可能是壮骨止痛方抗骨质疏松的作用机制之一。     

济阴颗粒对去势雌性血脂异常大鼠的影响＊

目的 探讨济阴颗粒对女性绝经后血脂异常的影响。方法 雌性SD大鼠去除双侧卵巢，确定未出现动情期后随机分为模型组、西药对照组、中药对照组、济阴颗粒组，每组15只，灌胃给予高脂乳剂构建血脂异常模型。造模同时各干预组给予相应药物，与空白组（15只）共同常规饲养，连续8周。检测全血血液流变学指标，血清TC、TG，HE染色观察肝细胞形态，免疫组织化学法检测肝组织GPR30、PPARγ、MAPK蛋白表达，荧光RT-PCR法检测Bcl-2和Bax mRNA表达。结果 与空白组比较，模型组血液流变学指标和血清TC、TG值升高（P < 0.01），肝细胞损伤严重，GPR30、PPARγ蛋白和Bcl-2 mRNA表达抑制，MAPK蛋白和Bax mRNA表达上调；济阴颗粒干预后，血液流变学指标、血清TC、TG（P < 0.01）和肝细胞损伤程度均得到改善，GPR30、PPARγ蛋白表达上调（P < 0.01），MAPK蛋白表达抑制（P < 0.01）；Bcl-2mRNA表达升高（P < 0.05）和Bax mRNA表达降低（P < 0.05）。结论 济阴颗粒可有效干预女性绝经后血脂异常，调节GPR30/PPARγ/MAPK信号通路，可能是其作用机制之一，并通过Bcl-2 mRNA和Bax mRNA抑制细胞凋亡和炎症保护肝组织。     

补肾益智方对卵巢切除大鼠学习记忆的影响

目的：观察补肾益智方对去卵巢大鼠学习记忆的影响。方法：月龄约3个月SD雌性大鼠，随机分为假手术组、模型组、补肾益智方组、雌激素对照组，模型组行双侧卵巢切除术，补肾益智方组、雌激素对照组分别在卵巢切除术后予补肾益智方灌胃和结合雌激素皮下注射。运用Morris水迷宫测试各组大鼠参考记忆和工作记忆的变化。结果与结论：SD大鼠在卵巢切除16周后，雌激素水平明显降低，行为学也发生了相应的变化，表现为工作记忆的能力降低，而参考记忆则没有明显的变化。补肾益智方及结合雌激素对卵巢切除大鼠工作记忆能力的降低能够起到明显的保护作用。     

温肾通络止痛颗粒对去卵巢大鼠骨密度及骨代谢的影响

目的:观察温肾通络止痛颗粒对去卵巢大鼠骨密度及骨代谢的影响,探究其防治骨质疏松症的机制。方法:将90只雌性大鼠随机分成空白对照组,模型组,温肾通络止痛颗粒低、中、高剂量组(按生药量计为4,8,16 g.kg-1)及尼尔雌醇组(1 mg.kg-1)共6组,采用卵巢切除的方法制成骨质疏松动物模型,ig给药3个月后进行骨密度(BMD)、降钙素(CT)、骨钙素(BGP)及雌二醇(E2)等骨代谢指标的检测。结果:对照组、模型组、尼尔雌醇组、温肾通络止痛颗粒低、中、高剂量组BMD分别是(0.231 8±0.003 6),(0.198 8±0.003 9),(0.219 9±0.002 4),(0.201 1±0.000 9),(0.202 3±0.002 7),(0.220 2±0.002 1)g.cm-2;CT含量分别为(74.61±10.54),(48.33±13.72),(71.72±14.83),(56.76±12.58),(68.39±13.74),(75.29±15.63)ng.L-1;E2含量分别为(88.61±17.54),(28.45±11.39),(71.71±8.69),(68.11±12.63),(70.93±10.42),(75.21±9.37)ng.L-1。模型组及各治疗组BGP含量与空白对照组比较无显著差异。温肾通络止痛颗粒低、中、高剂量组股骨BMD,CT,E2含量升高,与模型组相比差异具有显著意义(P<0.05),以高剂量组效果最明显(P<0.01)。结论:温肾通络止痛颗粒能够明显提高去卵巢大鼠骨密度值,改善其骨代谢状况,从而起到抗骨质疏松作用。     

左归丸对去势雌性大鼠子宫和阴道的影响

目的 观察左归丸对去势大鼠子宫和阴道的影响.方法 将雌性育龄期大鼠分为正常组(20只)、假手术组(17只)和去势组(40只).去势组将去势成功的大鼠分为模型组(8只)、倍美力组(11只)、左归丸高剂量组(左高组,6只)、左归丸低剂量组(左低组,9只),药物连续灌胃11周后,测定血清雌二醇(E2),取子宫、阴道组织作病理切片.结果 与模型组比较,左高组、左低组大鼠子宫的重量、脏器指数、内膜厚度、内膜被覆上皮厚度、肌层厚度、腺体直径、内径、腺上皮高度、腺体个数和阴道的重量、脏器指数、上皮层数和黏膜厚度差异均无统计学意义(P>0.05);左高组阴道皱襞数和阴道固有层血管数均高于模型组(P<0.05);血清E2值左高组、左低组差异无统计学意义(P>0.05).结论 补肾中药复方左归丸对去势大鼠子宫无明显影响,可通过增加局部血液供给来延缓去势大鼠的阴道衰萎.     

温阳补肾方对去卵巢大鼠骨钙素及股骨显微结构的影响

目的：探讨温阳补肾方对去卵巢大鼠骨钙素及股骨显微结构的影响。方法：取3月龄SPF级健康雌性SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、治疗组和对照组,每组10只。正常组行假手术,其余3组行双侧卵巢摘除术,术后30 d开始治疗。治疗组灌胃给予温阳补肾方,对照组给予戊酸雌二醇,治疗组及对照组均按0.01 mL·g-1体质量灌胃,正常组和模型组每日按体质量给予同等剂量的生理盐水。于给药治疗12周后解剖股骨,进行光镜观察,同时测定血清骨钙素。结果：光镜观察表明：正常组为骨小梁网状结构完整,骨小梁较厚,骨髓腔小,模型组骨小梁明显稀薄、缺失、坍塌、扭曲,网状结构被严重破坏,骨髓腔显著增大;治疗组及对照组骨小梁结构基本完整,骨髓腔较小。治疗组骨钙素明显高于模型组。结论：温阳补肾方能提高成骨细胞的活力,抑制破骨细胞的活力,有一定的抗骨质疏松作用。     

温肾通络止痛汤对去卵巢模型大鼠骨密度与血清生化指标的影响

目的:通过观察温肾通络止痛汤对去卵巢模型大鼠骨代谢的影响,探究其治疗绝经后骨质疏松症的机制。方法:选用3个月龄SD雌性大鼠72只,60只行双侧卵巢切除(OVX)后,随机分为模型组(OVX组),戊酸雌二醇组,温肾通络止痛汤高剂量组、中剂量组、低剂量组,其余12只为假手术组。通过骨密度和骨代谢生化指标测定,评价温肾通络止痛汤治疗绝经后骨质疏松症的效果。结果:温肾通络止痛汤可以防止去卵巢SD雌性大鼠胫骨骨密度降低,减少血清白细胞介素-6(IL-6)、核因子κB受体活化因子配基(RANKL)表达,提高血清骨保护素(OPG)水平,从而降低血清RANKL/OPG比值,达到抗骨质疏松的作用。结论:温肾通络止痛汤治疗绝经后骨质疏松症的作用机制主要为下调血清IL-6、降低RANKL/OPG比值,从而抑制破骨细胞活性,提高骨密度。     

补肾益智方对卵巢切除大鼠海马长时程增强的影响

目的：观察补肾益智方对卵巢切除大鼠海马长时程增强(LTP)的影响。方法：3月龄SD雌性大鼠，随机分为假手术组、模型组、补肾益智方低剂量组、补肾益智方高剂量组、雌激素对照组，模型组行双侧卵巢切除术，补肾益智方高、低剂量组、雌激素对照组分别在卵巢切除术后予补肾益智方灌胃和结合雌激素皮下注射。运用电生理学检测方法，观察大鼠长期雌激素剥夺对大鼠海马长时程增强的影响以及中药补肾益智方的干预作用。结果与结论：卵巢切除大鼠海马齿状回产生LTP的幅度明显低于卵巢保留组，并且维持的时间也较短；雌激素替代和补肾益智方高剂量组的LTP增幅和维持时间与卵巢保留组相比均无明显降低。说明二者使卵巢切除大鼠的突触易化机制得以保护和维持。