过表达冷诱导RNA结合蛋白对BHK-21细胞增殖的影响

用常规细胞培养法连续传代培养Cirp过表达BHK-21细胞至第8代标记为BHK-21-Cirp△,通过HE染色和扫描电镜对细胞形态观察,用BHK-21-Cirp△和BHK-21-ShCirp分别与BHK-21-GFP进行细胞增殖速度的比较,并绘制96 h增殖曲线计算比生长速率,用流式细胞仪检测各试验细胞周期.HE染色和...     

鸡冷诱导RNA结合蛋白基因序列分析及组织表达

为研究鸡冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)基因的结构特征和组织定量分布情况,根据GenBank中原鸡CIRP基因(NM-001031347)的编码区序列自行设计引物,从健康雏鸡脾脏中扩增青脚麻羽鸡CIRP基因的编码区(CDS)并进行生物信息学分析;设计引物建立实时荧光定量RT-PCR,检测CIRP mRNA在雏鸡各组织器官中的分布及相对表达水平。结果显示,鸡CIRP基因CDS区全长573bp,编码190个氨基酸,其氨基端包含一个RNA结合域,羧基端富含RGG重复序列,推导的多肽链羧基端比鸭、斑胸草雀及哺乳动物要多18个氨基酸;CIRP基因在鸡各被检组织器官中均有表达,相对表达水平由低到高分别为法氏囊、肺脏、胰腺、胸腺、脾脏、睾丸、盲肠扁桃体、心脏、脑、肾脏、哈德氏腺、肝脏。本研究为进一步探讨鸡CIRP基因的遗传进化及其在病原感染中的作用提供了参考。     

猪卵母细胞在冷应激条件下的体外发育与CIRP基因表达

本试验旨在研究冷应激对猪卵母细胞发育能力及冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)基因表达的影响。常规体外成熟猪GV期卵母细胞,置于室温(25℃)下冷应激处理0.5、1、2、6、12和24 h,观察冷应激处理对其后卵母细胞成熟率和体外受精胚胎发育率的影响和微丝、微管等亚细胞结构的变化,Real-time PCR检测猪卵母细胞CIRP mRNA的表达。结果表明:短时间(2 h)冷应激处理后各组成熟率和体外受精卵裂率均与对照组无异(P0.05);微丝、微管及染色体等亚细胞结构均无明显改变(P0.05),但2 h组的囊胚发育率较对照组有明显下降(9.7%对12.3%,P0.05)。冷应激处理超过2 h后,各组成熟率和囊胚发育率与对照组相比均显著降低(P0.05),微丝、微管正常率均较对照组显著下降(分别为76.8%和53.6%对90.2%和77.2%;P0.05)。在冷应激条件下,猪卵母细胞CIRP mRNA表达水平升高,并在一定范围内随冷应激处理时间的延长而增加,至冷应激处理4 h时达最高。猪卵母细胞在短时间冷应激条件下,其发育能力和亚细胞结构并未受到显著影响;适当的冷应激条件可有效激发猪卵母细胞CIRP mRNA的表达。     

冷诱导下Y-box结合蛋白基因的表达变化

为了研究冷诱导下Y-box结合蛋白基因的表达,试验采用Real-time PCR的方法,将所得民猪的Y-box结合蛋白表达结果与长白猪的Y-box结合蛋白表达结果进行对比研究.结果表明:在-20℃条件下处理13 d后,民猪的Y-box结合蛋白基因的表达水平与常温组相比显著下降,而长白猪的Y-box结合蛋白表达无显著变化...     

牦牛RBM3的基因克隆及其在不同繁殖时期卵巢、输卵管、子宫中的表达定位

旨在研究RBM3在牦牛(Bos grunniens)生殖相关调控中的作用。本研究以卵泡期、黄体期和妊娠期4~6岁健康雌性牦牛各3头为采集对象,采集其卵巢、子宫和输卵管共9组试验样品,每组设置3个生物学重复。利用基因克隆技术克隆牦牛RBM3基因并进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot,WB)分别在基因层面和蛋白层面检测RBM3在牦牛子宫、卵巢和输卵管中的相对表达量;利用免疫组织化学(immunocytochemistry,IHC)方法检测RBM3蛋白在试验样品中的分布定位。牦牛RBM3基因(GenBank No.:MF142258.1)被成功克隆并预测出二、三级结构,发现其与野牦牛亲缘性最近,基因编码区第51位、98位核苷酸不同于常见哺乳动物,生物信息学分析预测其编码的蛋白质为稳定的非跨膜蛋白。RBM3蛋白在本试验9组样品的表达量有如下差异：在卵巢中,黄体期显著高于卵泡期和妊娠期(P＜0.05);输卵管中,卵泡期显著低于黄体期和妊娠期(P＜0.05);子宫上,卵泡期显著高于黄体期和妊娠期(P＜0.05)。免疫组织化学结果显示,RBM3在卵巢中的主要表达位置是卵泡膜、颗粒层和黄体细胞;在输卵管的表达位置是黏膜上皮;子宫上的表达主要以子宫内膜和子宫腺为主。本研究结果提示,RBM3可能参与牦牛个体发情周期和妊娠过程的调控以及妊娠识别等过程,为RBM3这一冷应激调节因子参与牦牛对高原环境的适应性生理机制方面的研究提供参考。     

动物冷应激相关蛋白和分子的最新研究进展

恒定的体温是维持生命活动的重要基础,恒温动物需要内源性产热源。寒冷条件下动物体温降低的直接后果是细胞内整体水平上蛋白质的合成被抑制,但冷诱导RNA结合蛋白（cold-inducible RNA binding protein,CIRP）、RNA结合基序蛋白3 (RNA-binding motif protein 3,RBM3)、解偶联蛋白（uncoupling protein,UCP）、热休克蛋白（heat shock proteins,HSPs）以及少数细胞因子的表达却增加,从而确保细胞在寒冷环境中的内稳态和生存。对冷应激条件下动物体内被激发的蛋白及相关分子的最新研究进展进行综述,以期为冷应激蛋白分子领域的深入研究提供借鉴。     

促肾上腺皮质激素释放激素结合蛋白功能与调控研究进展

促肾上腺皮质激素释放激素结合蛋白(CRH-BP)是37 ku的分泌糖蛋白,其结构与促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)受体不同,但与CRH和尿皮素(UCN)具有很高的亲和力.CRH-BP具有重要的生物调控作用,对CRH诱导的脑垂体促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)的释放具有抑制作用.应激和代谢因素能改变体内CRH-BP的表达与调控,CRH-BP在生产分娩、炎性疾病、阿尔海默症(Alzheiner′s disease)和其他机能障碍等过程中也具有广泛的作用,这说明CRH-BP在大脑和脑垂体中可能还有其他潜在功能,研究CRH-BP在中枢和外周的作用及机理,有利于阐明其在病因学方面的潜在地位,有助于治疗CRH失调引起的机能紊乱.     

脂肪酸结合蛋白的研究进展

脂肪酸结合蛋白最早是1972年Ockner等从肠细胞液组分中分离出来的,当前成为了动物营养领域的研究热点。笔者主要介绍了FABP的类型、特点和生物学功能,并对FABP在脂肪酸代谢的影响及其调节脂肪酸代谢机制等方面的研究进展进行了综述。     

冷休克蛋白表达的分子机制

生物对环境应激 (如温度波动 )的适应 ,对于其生存是至关重要的。原核生物和真核生物对高温细胞水平的反应主要是合成一系列保守的热休克蛋白。和热休克反应相比 ,有关生物体对低温适应的研究 ,虽还不是特别深入 ,但现在已经发现了原核生物的冷诱导蛋白家族 ,以及生物体对低温的适应机制 ,包括改变膜的流动性和蛋白质翻译等方面。本文主要对冷休克与冷适应诱导不同生物体冷休克蛋白表达的分子机制进行综述。1　冷休克反应的生理特征　　不同动物的最适生长温度不同 ,对寒冷的应激范围和程度也不完全一样。原核生物的最适生长温度范围非常大 …     

金属硫蛋白及其诱导、分离纯化研究进展

<正>金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是一种广泛存在于生物界的低分子量、高金属含量,且能被金属或其它因素诱导生成的金属结合蛋白的一种天然生物活     

胰岛素样生长因子结合蛋白的研究进展

胰岛素样生长因子（IGFs）在动物机体中有着明显重要的生理功能，这些功能是由IGFs受体以及一部分胰岛素受体介导的。血浆和其它生物液中只有极少一部分IGFs以游离态形式存在，绝大部分IGFs与一类具有高亲合力的特异性蛋白（IGFBPs）结合。这些IGFBPs将游离态的IGFs稳定在一个平衡水平，并且由于IGFBPs对IGFs的亲合力大于IGFs受体对IGFs的亲合力，IGFBPs可作为一种运输载体将IGFs定位于靶组织细胞并通过对IGFs与其受体的相互作用进行调控而改变IGFs的生物学活性。本文就IGFBPs结构、功能以及IGFBPs基因表达调控等方面对IGFBPs近年来的研究进展进行了综述，并展望了IGFBPs研究的前景以及对未来工作的建议。     

胰岛素样生长因子结合蛋白的研究进展

胰岛素样生长因子 (IGFs)在动物机体中有着明显重要的生理功能 ,这些功能是由IGFs受体以及一部分胰岛素受体介导的。血浆和其它生物液中只有极少一部分IGFs以游离态形式存在 ,绝大部分IGFs与一类具有高亲合力的特异性蛋白 (IGFBPs)结合。这些IGFBPs将游离态的IGFs稳定在一个平衡水平 ;并且由于IGFBPs对IGFs的亲合力大于IGFs受体对IGFs的亲合力 ,IGFBPs可作为一种运输载体将IGFs定位于靶组织细胞并通过对IGFs与其受体的相互作用进行调控而改变IGFs的生物学活性。本文就IGFBPs结构、功能以及IGFBPs基因表达调控等方面对IGFBPs近年来的研究进展进行了综述 ,并展望了IGFBPs研究的前景以及对未来工作的建议     

环状RNA及其在生殖发育中的研究进展

环状RNA(circular RNA, circ-RNA)是一类由初始转录RNA反向剪接,形成的闭合环状RNA分子,广泛存在于真核细胞中。因不受RNA外切酶切割,所以稳定存在时间长。主要通过海绵吸附作用竞争性结合miRNA调节基因表达。circ-RNA分子鉴定及其生理调控作用成为近几年生命科学领域的研究热点,本文从circ-RNA的生成过程、在早期胚胎发育调控以及配子发育过程中的数量和作用等方面进行了综述。     

调控动物生殖功能的lncRNAs研究进展

长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)是一类转录本长度大于200个核苷酸(nt)的非编码RNA,其可被转录但通常没有编码潜能,不能翻译成为蛋白质,故早期被认为是基因组转录过程中形成的副产物.近年在生殖领域随着二代测序技术的发展,已发现lncRNA可在转录、转录后修饰、翻译、翻译后修饰及表...     

蜱组胺结合蛋白研究进展

蜱体内含有多种生物学功能分子物质,组胺结合蛋白(HBP)是其中之一。对自HBP发现以来,关于其生物学特性及其在蜱体内分布等方面的相关研究进展进行了总结,以期为全面深入地认识HBP提供参考。     

热休克蛋白在冷应激引起的炎症反应和氧化应激中的调节作用

冬季持续低温引起的冷应激是降低北方畜牧业经济效益和动物福利的重要因素,可诱导动物产生炎症反应和氧化应激危害机体健康。热休克蛋白作为体内重要的分子伴侣蛋白,在维持机体内环境稳态、帮助动物抵抗应激方面有重要作用,低温环境可激活热休克蛋白快速产生,以此在细胞内外对免疫和抗氧化系统发挥重要调节作用：在胞外,具有保护细胞、参与调节免疫细胞功能、激发免疫反应和提高抗氧化酶活性等作用;在胞内,可抑制NF-κB信号通路保护机体免受炎症损伤,上调Nrf2信号通路提高机体抗氧化功能,缓解冷应激对机体造成的负面影响。本文总结了国内外关于在冷应激状态下热休克蛋白对机体免疫和抗氧化功能的调节作用及其机制,并给出部分提高热休克蛋白表达水平的方法,以期为后续畜禽的冷应激理论研究提供参考。     

胰岛素样生长因子结合蛋白的研究进展

胰岛素样生长因子（ＩＧＦｓ）在动物机体中有着明显重要的生理功能,这些功能是由ＩＧＦｓ受体以及一部分胰岛素离态形式存在,绝大部分ＩＧＦｓ与一类具有高亲合力的特异性蛋白（ＩＧＦＢＰｓ）结合。这些ＩＧＦＢＰｓ将游离态的ＩＧＦｓ稳定在一个平衡水平,并且由于ＩＧＦＢＰｓ对ＩＧＦｓ的亲合力大于ＩＧＦｓ受体对ＩＧＦｓ的亲和力,ＩＧＦＢＰｓ可作为一种运输载体将ＩＧＦｓ定位于靶组织细胞并通过对ＩＧＦｓ与其受体的相互     

长链非编码RNA的生物学功能研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是转录本长度超过200个核苷酸(nt)的,可在表观遗传、转录以及转录后等多层面上调控基因表达的一类RNA。高通量转录组分析结合RNA-免疫共沉淀等研究揭示了lncRNA与DNA、mRNA、miRNA和蛋白的相互作用及其过程中的重要调控功能。论文从lncRNA的概念、分类、生物学功能及其在癌症等疾病发生、发展中的作用等方面系统介绍了该领域最新研究成果,为深入研究lncRNA在机体代谢和相关疾病中的调控功能提供参考。     

环状RNA及其与动物生殖关系的研究进展

环状RNA(circRNA)是一类单链共价闭合的环状非编码RNA,长度约为100个核苷酸,是由线性前体mRNA通过反向剪接产生的内源转录产物,可调节真核生物的基因表达.随着下一代测序(next-generation sequencing,NGS)技术、基因沉默(小干扰RNA)技术和CRISPR/CAS技术等分子生物学技...     

环状RNA及其与动物生殖关系的研究进展

环状RNA(circRNA)是一类单链共价闭合的环状非编码RNA,长度约为100个核苷酸,是由线性前体mRNA通过反向剪接产生的内源转录产物,可调节真核生物的基因表达。随着下一代测序(next-generation sequencing, NGS)技术、基因沉默(小干扰RNA)技术和CRISPR/CAS技术等分子生物学技术的发展和应用,极大地促进了环状RNA研究的进程。circRNAs具有多种生物学功能,对真核细胞的增殖、分化、自噬和凋亡等具有重要的调节功能。文章综述了circRNAs在调控卵泡发育、精子发生、胚胎发育与着床等生殖方面的研究概况,以期为circRNAs在动物生殖领域的深入研究提供参考。