山莨菪碱对脓毒症大鼠肺组织生物喋呤的影响

目的：探讨山莨菪碱对脓毒症大鼠肺组织生物喋呤产生的影响及其意义。方法：采用大鼠盲肠结扎穿孔（ＣＬＰ）致脓毒症模型,动物随机分为正常对照组、脓毒症组和山莨菪碱治疗组。分别于ＣＬＰ后２、８、１６小时处死动物,检测肺组织生物喋呤及其合成限速酶－－三磷酸鸟苷环水解酶Ⅰ（ＧＴＰ－ＣＨⅠ）ｍＲＮＡ表达和肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）ｍＲＮＡ表达的改变。结果：脓毒症动物肺组织生物喋呤含量显著升高,ＧＴＰ－ＣＨＩ     

窒息新生儿脐血中一氧化氮合酶、生物喋呤、新喋呤变化的临床意义

目的通过观察窒息新生儿血浆一氧化氮合酶（NOS）、生物喋呤（BP）、新喋呤（NP）的变化来了解新生儿窒息及其程度的轻重与这三项指标的相关性,以探讨NOS、BP、NP是否参与窒息的病理生理过程。方法轻度窒息15例,重度窒息15例为病例组,30例同期正常新生儿作为对照组,用固相夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）方法测定血浆中的NOS,高压液相色谱法（HPLC）测定血浆中的BP、NP,同时观察各临床指标的变化。结果重度窒息组血浆NOS、BP、NP均高于轻度窒息组和对照组,差异有高度显著性意义;轻度窒息组血浆NOS、BP、NP均与对照组差异无显著性意义。结论NOS、BP、NP参与了窒息的病理生理过程,可作为新生儿窒息后脑损伤判断的有效指标。     

生物喋呤/新喋呤在脓毒性休克中的意义

临床资料表明 ,脓毒性休克是内、外科危重患者死亡的重要原因之一。尽管早期液体复苏、新型抗生素治疗、代谢支持及重要器官支持性治疗已取得显著进展 ,但是脓毒性休克的病死率仍居高不下 ,成为进一步提高危重症救治成功率的一大障碍。因此 ,脓毒性休克发病机制及其防治是目前临床亟待解决的重要课题。研究表明 ,一氧化氮 ( NO)的过度产生可能是诱发脓毒性休克的最后共同通路 ,而生物喋呤 ( biopterin) ,主要为四氢生物喋呤 ( BH4 )为一氧化氮合酶 ( NOS)重要的辅因子 ,调控着细胞内 NO的产生。尽管生物喋呤的确切生物学效应尚未明了 ,…     

血清新喋呤、生物喋呤检测及其在尿毒症患者中的应用

目的探讨尿毒症患者血清中新喋呤（NP）和生物喋呤（BP）的浓度变化及其临床意义。方法采用反相高效液相色谱-荧光检测（RP-HPLC-FD）的方法,分别测定正常对照组、尿毒症组透析前后血清中的NP、BP浓度,并进行比较。结果尿毒症组血清中的NP、BP浓度和NP／BP比值均显著高于正常组（P〈0．01）,透析后血清中的NP、BP浓度显著低于透析前血清中NP、BP浓度（P〈0．01,P〈0．05）,而NP／BP比值差异无显著性（P〉0．05）。结论在尿毒症患者中,血清中的NP、BP浓度可作为炎性介质激活的灵敏指标,同时可作为判断肾功能好坏的标志物。     

血清新喋呤、生物喋呤检测及其在尿毒症患者中的应用

目的探讨尿毒症患者血清中新喋呤(NP)和生物喋呤(BP)的浓度变化及其临床意义。方法采用反相高效液相色谱-荧光检测(RP-HPLC-FD)的方法,分别测定正常对照组、尿毒症组透析前后血清中的NP、BP浓度,并进行比较。结果尿毒症组血清中的NP、BP浓度和NP/BP比值均显著高于正常组(P<0.01),透析后血清中的NP、BP浓度显著低于透析前血清中NP、BP浓度(P<0.01,P<0.05),而NP/BP比值差异无显著性(P>0.05)。结论在尿毒症患者中,血清中的NP、BP浓度可作为炎性介质激活的灵敏指标,同时可作为判断肾功能好坏的标志物。     

大黄对脓毒症患者血清新喋呤影响的研究

目的 观察大黄对脓毒症患者血清新喋呤的影响,进一步探讨其治疗脓毒症的作用机制.方法 40例脓毒症合并中毒性肠麻痹患者,随机分为两组,大黄治疗组和对照组各20例.对照组采用综合治疗,大黄治疗组在综合治疗的基础上加用大黄.观察两组患者治疗前后血清新喋呤水平的变化、中毒性肠麻痹的缓解率以及14 d生存率.结果 两组患者血清新喋呤在24 h后明显升高,大黄治疗组在24、48及72 h 血清新喋呤水平较对照组明显降低(P＜0.01).大黄治疗组在治疗后48 h及72 h中毒性肠麻痹的缓解率分别为50%和75%,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05和P＜0.01).14 d生存率明显高于对照组(P＜0.05).结论 大黄能有效缓解脓毒症患者中毒性肠麻痹,改善胃肠功能,降低血清中新喋呤水平,拮抗系统炎症反应,提高患者的生存率.     

反相高效液相色谱法同时测定血清中的新喋呤和生物喋呤

目的　建立同时测定血清中新喋呤 (NP)及生物喋呤 (BP)的反相高效液相色谱 (RP HPLC)方法。方法　血清标本经三氯乙酸去蛋白 ,低温、高速离心 ,用碱中和后直接进样 ,采用外标定量法 ,以甲醇 :水 =5∶95 (v/v)为流动相 ,经HypersilBDSC18反相色谱分离后用荧光检测 (Ex =36 0nm ,Em =4 4 0nm)。结果　线性范围 :BP为 0 .4 8～ 80 0 μg/L ,NP为 0 .12～ 80 0 μg/L。检测灵敏度 :BP为 0 .1μg/L ,NP为 0 .0 1μg/L。日内精密度 :BP为 3.96 % ,NP为 2 .87%。高、中、低浓度的平均回收率 :NP为 97.9%,BP为 94 .3%。NP和BP在血清中的线性回归方程分别为 :Y(NP) =1.0 2 5 5x - 0 .0 0 77(r2 =0 .9998) ;Y(BP) =0 .70 2 7x 0 .0 394 (r=0 .9995 )。正常人血清中的NP和BP的浓度分别为 :(5 .76± 2 .4 4 ) μg/L和 (1.81± 0 .5 7) μg/L ;急性心肌梗死患者血清中NP和BP的浓度分别为 :(12 .96± 6 .95 ) μg/L和 (3.36± 1.73) μg/L ,二者血清中的NP和BP浓度均有显著性差异 (P <0 .0 1)。 结论　该法简便、快速、精确 ,适于血清中生物喋呤及新喋呤的检测。     

脓毒症患者血清新喋呤改变及其意义

目的：研究脓毒症患者血清新喋呤的变化,并探讨其与感染严重程度及多脏器功能不全综合征（MODS）之间的关系。方法：测定60例收入ICU的危重患者（其中32例脓毒症）入住24h内、第3d、第4d及之后每周血清新喋呤水平,同时检测血常规、C反应蛋白（CRP）,评定MODS评分、SOFA评分（感染相关性器官功能衰竭评分）,并记录临床情况。结果60例危重患者中,脓毒症患者血清新喋呤水平显著高于非脓毒症者,且其水平与外周血中性粒细胞计数呈正相关。32例脓毒症中发生MODS者血清新喋呤水平高于未发生MODS者,且随病情加重更升高,与MODS评分呈正相关,以新喋呤大于40nmol/L诊断MODS有较高的敏感性和特异性。结论：脓毒症患者血清新喋呤水平升高,与感染严重度呈正相关;检测脓毒症患者血清新喋呤水平有助于协助诊断MODS,判断病情轻重及预后,对早期采取措施、改善预后有重要意义。     

内毒素休克大鼠组织生物喋呤与高迁移率族蛋白B1表达的关系

目的　探讨生物喋呤 (BH4)对内毒素休克大鼠肝、肺、肾等多器官高迁移率族蛋白B1(HMGB1 )基因表达的影响及其可能机制。方法　采用内毒素休克模型 ,1 0 4只大鼠随机分为正常对照组(n =8)、内毒素休克组 (n =4 8)和BH4合成抑制剂— 2 ,4 二胺 6 羟基嘧啶 (DAHP)拮抗组 (n =4 8)。分别测定血浆BH4含量和肝、肺、肾组织HMGB1mRNA的表达水平。结果　与正常对照组比较 ,内毒素攻击后 2～ 2 4h大鼠血浆BH4含量显著升高 (P <0 0 1 )。同时 ,内毒素攻击后 2～ 6h大鼠肝、肺、肾组织HMGB1mRNA表达显著增强 ,并于 1 2～ 2 4h达峰值 (P <0 0 1 ) ,4 8h仍持续于较高水平。给予DAHP处理后 ,血浆BH4含量在 2、 6、 1 2h显著低于内毒素休克组 (P <0 0 5 ) ;动物肝、肾组织中HMGB1mRNA表达亦明显下调 (P <0 0 5 ) ,各时间点其水平均接近正常对照范围 :与内毒素休克组相比 ,DAHP组肺组织HMGB1mRNA表达峰值显著下降 (P <0 0 5 )。结论　生物喋呤对机体HMGBl的基因表达具有显著影响 ,它参与了内毒素休克时多种组织“晚期”炎性介质———HMGB1的诱生过程     

Significance of biopterin induction in rats with postburn Staphylococcus aureus sepsis

It has been demonstrated that biopterin, an essential cofactor of nitric oxide synthase (NOS), plays an important role in the pathogenesis of endotoxin-induced shock, yet its biological significance in gram-positive sepsis remains unclear. In this study, we adopted a rat model of postburn Staphylococcus aureus sepsis to investigate the potential role of biopterin in the pathogenesis of gram-positive sepsis. Wistar rats were inflicted with a 20% total body surface area (TBSA) full-thickness scald injury followed by S. aureus challenge, and then guanosine triphosphate-cyclohydrolase I (GTP-CHI) mRNA expression and biopterin levels in liver, kidneys, lungs, and heart were determined. We found that after S. aureus challenge, GTP-CHI gene expressions and biopterin levels were markedly upregulated in various tissues. Meanwhile, multiple organ dysfunction was induced by S. aureus challenge. It was shown that cardiac GTP-CHI mRNA expression and renal BH(4) levels were positively correlated with MB isoenzyme of creatine kinase (CK-MB) and creatinine (r = 0.892, P = 0.0012 and r = 0.9423, P = 0.0015, respectively). These results suggested that thermal injury combined with S. aureus challenge could induce de novo biosynthesis of biopterin, which might play a role in the development of multiple organ dysfunction syndrome secondary to postburn sepsis.     

生物喋呤对内毒素休克大鼠肺组织核因子-κB活化的影响及意义

目的　探讨生物喋呤对内毒素休克大鼠肺组织核转录因子 κB (NF κB)通路活化的影响及其在急性肺损伤中的意义。方法　采用内毒素休克模型 ,10 4只大鼠分为正常对照组 (n =8)、内毒素休克组(n =4 8)、 2 ,4 二胺 6 羟基嘧啶 (2 ,4 diamino 6 hydroxy apyrimidine ,DAHP)拮抗组 (n =4 8)。采用逆转录多聚酶链式反应测定肺组织三磷酸鸟苷环水解酶I (GTP CHI)mRNA的表达水平 ,采用凝胶阻滞电泳分析技术测定NF κB的DNA结合活性 ,同时测定肺组织髓过氧化物酶 (MPO)活性。结果　与正常对照组相比 ,内毒素攻击可导致动物肺组织GTP CHImRNA表达明显上调 ,6h后一直维持在较高水平 ;同时 ,NF κB活性于 0 5h迅速增加 ;且持续至伤后 4 8h ,肺组织MPO活性各时间点均显著升高 (P <0 .0 1) ,6h达峰值。采用生物喋呤合成抑制剂DAHP处理后 ,肺组织GTP CHImRNA表达早期改变不明显 ,但 12h后明显受抑 ;MF κB活性 0 5、 2 4、 4 8h明显降低 ;肺组织MPO活性 0 5、 6、 2 4、 4 8h均显著低于内毒素休克组 (P <0 0 5 )。结论　生物喋呤参与了内毒素休克动物肺组织NF κB信号通路的活化过程 ,抑制生物喋呤能降低NF κB的DNA结合活性 ,并减轻急性肺损伤     

c-Jun氨基末端激酶通路在内毒素休克大鼠生物喋呤诱生中的信号机制

目的 观察c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路抑制剂——curcumin对内毒素休克大鼠生物喋呤(BH4)及一氧化氮(NO)表达的影响，并探讨JNK途径在生物喋呤诱生中的信号转导机制。方法建立内毒素休克模型，60只大鼠随机分为正常对照组(n=8)、内毒素休克组(n=32)和curcumin拮抗组(n=20)。采用逆转录多聚酶链式反应测定肝、肺、肾组织三磷酸鸟苷环水解酶Ⅰ(GTP-CHI)与诱生型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达水平，分别采用反相高效液相色谱法和Griess比色法测定血浆与组织中BH4、NO水平的变化。结果与正常对照组相比，内毒素使动物肝、肺、肾组织GTP-CHI基因表达和BH4水平明显升高，至伤后24h仍持续于较高水平；与之相应，组织iNOS基因表达和NO水平亦明显升高。curcumin处理可明显下调肝、肺、肾组织GTP-CHI mRNA表达水平，并且肝组织6～24h时、肺组织12h时BH4水平显著降低；各组织iNOS mRNA表达及NO水平亦显著降低。结论抑制JNK信号通路能明显抑制内毒素休克鼠多器官生物喋呤／NO系统的表达，JNK途径参与了生物喋呤诱生的信号转导过程。     

JAK/STAT通路对烫伤脓毒症大鼠Toll样受体基因表达的调节作用

目的：探讨Janus激酶／信号转导和转录激活子（JAK／STAT）通路在烫伤脓毒症大鼠Toll样受体2（TLR2）基因表达调控中的意义。方法：Wistar大鼠38只随机分为正常对照组（n=6)、烫伤后金黄色葡萄球菌（金葡菌）感染组（n=12)、AG490拮抗组（n=20)和雷帕霉素（Rapamycin,RPM)拮抗组（n=10), 检测动物肝、肾、肺组织中TLR2和肿瘤坏死因子－α（TNF－α）基因表达的改变。结果：烫伤合并金葡菌攻击后0．5h和2h，动物肝、肾、肺组织中TLR2 mRNA表达显著增高（P＜0．05或P＜0．01）。RPM干预可有效抑制动脉肝、肾组织TLR2 mRNA表达，但对肺脏TLR2 mRNA表达无明显影响；而AG490拮抗组动物各组织中TLR2 mRNA表达与未干预组相比均无明显差异。烫伤合并金葡菌感染后2h大鼠肝、肺、肾组织TNF－α基因表达均显著升高（P均＜0．01）。给予RPM可明显抑制各组织中TNF－α mRNA表达（P＜0．05或P＜0．01），AG490拮抗组大鼠肝、肾组织中TNF－α表达亦均显著低于未拮抗组（P均＜0．01）。结论：烫伤后金葡菌感染可促进体内TLR2基因表达，STAT可能直接或通过其诱生的炎症介质参与了对TLR2 mRNA表达的调控。     

Modulation of hypoxic pulmonary vasoconstriction is time and nitric oxide dependent in a peritonitis model of sepsis

Objective This study assessed modulation of hypoxic pulmonary vasoconstriction (HPV) in isolated perfused rat lungs during sepsis induced by cecal ligation and perforation (CLP) at different times and its relationship to nitric oxide synthases (NOS).Design and setting Prospective controlled trial in a university research laboratory.Subjects 102 male Sprague-Dawley rats.Interventions Groups 1–3 received sham laparotomy 6 h before lung isolation: group 1, only laparotomy; group 2, concurrently l-N ⁶-(1-iminoethyl)-lysine (L-NIL, 3 mg/kg); group 3, concurrently N -nitro-l-arginine methylester (L-NAME, 5 mg/kg). Groups 4–6 received CLP 6 h before lung isolation: group 4, only CLP; group 5, concurrently L-NIL; group 6, concurrently L-NAME. The same experiments were carried out with sham and CLP treatment for 24 h (groups 7–12). Exhaled NO from rats lungs was measured after anesthesia and tracheostomy. After the pulmonary circuit was isolated and perfused, angiotensin II (0.1 µg) was injected into the inflow tract. The lungs were ventilated with the hypoxic mixture (HPV, 3% O₂) for 10 min and then again with the normoxic mixture (21% O₂) for an equal period. Changes in perfusion pressure were measured. Endothelial (eNOS) and inducible NOS (iNOS) expression of the lungs was determined.Measurements and results Treatment with L-NAME but not L-NIL increased HPV in sham lungs. HPV was unaltered after CLP 6 h and decreased after CLP 24 h compared to sham. In CLP animals eNOS protein expression was reduced whereas iNOS expression was increased compared to sham animals. Exhaled NO, reflecting NOS activity was twice as high in the CLP 24 h group than in the CLP 6 h group.Conclusions In the CLP sepsis model modulation of HPV was time-dependent. In addition, vasoconstriction to hypoxic stimuli was dependent on NOS activity.L.G. F. is supported by Innovative Medizinische Forschung Münster, Germany (Fi-1-2000-4)     

烫伤后金黄色葡萄球菌感染致严重脓毒症大鼠模型的建立

目的初步建立烫伤后金黄色葡萄球菌(金葡菌)感染所致严重脓毒症的动物模型。方法雄性Wistar大鼠行20%总体表面积Ⅲ度烫伤,于伤后24小时经腹腔注射对数生长期的金葡菌菌液4ml/kg(浓度为8×10     

抗菌肽对金黄色葡萄球菌抑制作用的研究

目的探讨抗菌肽S-Thanatin对金黄色葡萄球菌的抑制效果。方法采用肉汤微量稀释法研究抗菌肽S-Thanatin对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果抗菌肽S-Thanatin对金黄色葡萄球菌MIC是50 mg/L。结论抗菌肽S-Thanatin对临床常见的金黄色葡萄球菌需要较高浓度才有抑制作用,因此为进一步提高其抗金黄色葡萄球菌活性,需要对抗菌肽S-Thanatin的化学结构进行改进。     

一氧化氮吸入对脓毒症幼猪血流动力学和氧合功能的影响

目的：研究脓毒症幼猪吸入一氧化氮（N0）后心脏指数（CI）与氧合指数的变化。方法：静脉注入革兰氏阴性杆菌内毒素（LPS）诱导脓毒症幼猪模型。随机分为两组：NO组（n＝8）为脓毒症模型建立后,在容量控制通气基础上持续吸入80 ppmNO 30 min;对照组（n＝4）为脓毒症模型建立后单纯容量控制通气,观察30 min以确定模型的稳定性并与NO组比较。利用脉波指示剂连续心排血量监测（PICC0）技术和动脉血气分析,测定各组血流动力学参数和肺气体交换。结果：静脉注射内毒素能够诱导稳定的脓毒症幼猪模型。该模型血气分析指标pH、HCO3－、股动脉血氧分压（PaO2）、平均动脉压（MAP）及心脏指数（CI）均较基础值明显降低（P＜0．01）。NO组PaO2及CI均较吸入前和同时点对照组明显升高（P＜0．01）。NO组及对照组心率（HR）、中心静脉压（CVP）、全心舒张末容积指数（GEDI）及胸腔内血容积指数（ITBI）均无明显变化。结论：吸入NO气体可以改善脓毒症幼猪的心功能及氧合功能。     

Comparison of the haemodynamic effects of nitric oxide synthase inhibition and nitric oxide scavenging in endotoxaemic sheep

Objective: The present study compared the effects of nitric oxide (NO) synthase inhibition and NO scavenging with haemoglobin in endotoxaemic sheep. Design: 12 sheep were instrumented for chronic study. Six sheep received l ^G-nitro-arginine-methylester (l-NAME, 2.5 mg/kg bolus followed by a continuous infusion of 0.5 mg/kg per h), the other 6 sheep received pyridoxalated haemoglobin polyoxyethylene conjugate (PHP, 100 mg/kg bolus followed by a continuous infusion of 20 mg/kg per h). Measurements and results: Haemodynamic and oxygenation parameters were measured in healthy sheep, after infusion of Salmonella typhosa endotoxin (10 ng/kg per min) for 24 h and after infusion of l-NAME or PHP. The infusion of endotoxin resulted in a hypotensive, hyperdynamic circulation. Infusion of l-NAME increased mean arterial pressure (MAP) from 76.1 ± 4.2 mmHg to normal values of 95.8 ± 5.7 mmHg (p < 0.05). PHP increased MAP from 73.0 ± 3.0 to 88.6 ± 4.7 mmHg (p < 0.05). This increase in MAP was associated in the l-NAME group with a more prominent drop in cardiac index (from 10.2 ± 0.4 to 7.0 ± 0.5 l · min^–1· m^–2; p < 0.05) than in the PHP group (from 10.7 ± 0.2 to 9.3 ± 0.6 l · min^–1· m^–2). During the first 90 min of infusion, cardiac index remained lower in the l-NAME group than in the PHP group. The increase in pulmonary vascular resistance was also higher in the l-NAME group. Conclusion: These results suggest, that at the doses used in the experiment, NO scavenging with PHP has smaller effects on cardiac index and pulmonary vascular resistance than NO synthase inhibition with l-NAME. Therefore, the concept of NO scavenging in hyperdynamic sepsis should be further evaluated. Received: 29 January 1997 Accepted: 23 October 1997     

PCR检测腹膜透出液中的金黄色葡萄球菌

检测腹膜透出液中的金黄色葡萄球菌。方法应用ＰＣＲ检测未感染的及已感染的腹膜透出液,并与传统培养方法进行对比。结果培养出金黄色葡萄球菌的腹透液,ＰＣＲ均出现了２７９ｂｐ的特异性扩增带,且ＰＣＲ检出率高于培养法。结论ＰＣＲ与培养方法相比具有快速、特异,敏感的优点,而且不受抗菌素使用的限制。