墨旱莲对胸腺细胞凋亡影响的研究

目的:研究墨旱莲水煎剂对不同药物诱导的小鼠胸腺细胞凋亡模型细胞凋亡的影响。方法:制作以环磷酰氨诱导的小鼠胸腺细胞凋亡模型和以氢化可的松诱导的小鼠胸腺细胞凋亡模型;用不同浓度的墨旱莲水煎剂对其治疗,用电镜或荧光显微镜观察其形态变化;用流式细胞仪等检测胸腺细胞凋亡情况。结果:以环磷酰胺诱导的小鼠胸腺细胞凋亡模型组小鼠和以氢化可的松诱导的小鼠胸腺细胞凋亡模型组小鼠,胸腺均出现典型细胞凋亡表现;用不同浓度的墨旱莲水煎剂对其治疗,均使细胞凋亡情况得到一定抑制,且有计量依赖性。环磷酰胺诱导的小鼠胸腺细胞凋亡模型流式细胞仪检测结果:正常对照组胸腺细胞凋亡率2.15%;环磷酰氨组胸腺细胞亡凋率30.25%;各治疗组(3～7组)依次分别是28.76%、26.14%、12.06%、3.24%、3.6%。氢化可的松诱导的小鼠胸腺细胞凋亡模型组,流式细胞仪检测结果:正常对照组胸腺细胞凋亡率2.33%;氢化可的松组胸腺细胞亡凋率22.78%;墨旱莲各组(2～4组)依次分别是2.33%、2.31%、2.31%;治疗各组(6～8组)分别是16.52%、9.74%、4.26%。结论:环磷酰胺诱导的小鼠胸腺细胞凋亡模型制作成功;氢化可的松诱导的小鼠胸腺细胞凋亡模型制作成功。墨旱莲水煎剂可以抑制以环磷酰胺诱导的小鼠胸腺细胞凋亡,也可以抑制氢化可的松诱导的小鼠胸腺细胞凋亡,而对正常细胞几乎没有影响。故墨旱莲水煎剂对小鼠免疫功能有调节作用。     

地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡中线粒体质量的变化

目的研究地塞米松(DEX)诱导的小鼠胸腺细胞凋亡中线粒体质量变化。方法分别设对照组(Control)和DEX组;在6 h,分别以NAO和M itotracker G reen(MG)单染流式细胞术检测线粒体质量变化,以D iOC6(3)染色流式细胞术检测线粒体膜电势变化,以Annexin V-PE/MG双染流式细胞术检测细胞凋亡中线粒体质量改变特点。结果NAO染色检测结果显示终浓度1μmol.L-1DEX可以诱导小鼠胸腺细胞线粒体心磷脂含量降低,与对照组比较P<0.01;MG染色流式细胞术结果表明DEX(P<0.01)诱导了胸腺细胞线粒体质量的降低;DEX(P<0.01)诱导线粒体膜电势依赖性D iOC6(3)在胸腺细胞中可染性下降;Annexin V-PE/MG双染流式细胞术显示,凋亡细胞中存在一定比例的低线粒体质量细胞,DEX组该群细胞多于对照组(P<0.01)。结论DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡中线粒体质量降低;线粒体质量评价在细胞凋亡相关药理学研究领域有应用前景。     

聚酯型儿茶素对小鼠淋巴细胞增殖和凋亡的影响

目的 :研究聚酯型儿茶素 (theasinesin ,TS)对小鼠淋巴细胞增殖和凋亡的影响。方法 :采用MTT法研究TS对小鼠脾细胞增殖的影响 ,采用形态学检测、DNA琼脂糖凝胶电泳及FACS分析方法研究TS对小鼠胸腺细胞自发凋亡及地塞米松诱导脾细胞凋亡的影响。结果 :5 0、15 0、5 0 0mg·L- 1TS对小鼠脾淋巴细胞增殖有明显促进作用。小鼠胸腺细胞体外培养 2 0后 ,琼脂糖凝胶电泳出现典型的DNAlad der,FACS图上出现典型的亚二倍体凋亡峰。 5 0、15 0、5 0 0mg·L- 1TS作用后 ,随药物剂量增加DNAladder减弱 ,凋亡峰减小 ,细胞凋亡率从 19.87%分别减为 12 .14%、9.4 9%、6 .71%。但不同浓度TS对地塞米松诱导的小鼠脾细胞凋亡无明显影响。结论 :聚酯型儿茶素可明显促进小鼠脾淋巴细胞增殖 ,同时可抑制小鼠胸腺细胞自发凋亡 ,两者总的效应是一致的。     

tuftsin衍生物T肽对小鼠T细胞存活和分化的影响

目的探讨tuftsin衍生物T肽(TP)对T细胞存活、分化的影响。方法无菌分离正常小鼠和荷瘤(B16-F10)小鼠胸腺细胞,分为正常T细胞组、正常T细胞+TP组、荷瘤T细胞组和荷瘤T细胞+TP组,TP终浓度为4.18μmol·L~(-1),处理72 h后收集培养的胸腺细胞,Guava ViaCount流式细胞术检测细胞存活率,Annexin V-FITC和PI检测细胞凋亡,CD4-FITC和CD8a-Per CP双标记检测细胞的分化成熟。结果正常T细胞组细胞存活率为(26.70±2.40)%,而加入TP后细胞存活率为(36.50±2.00)%,两组比较有显著差异(P<0.05);荷瘤T细胞+TP组细胞存活率为(20.70±2.20)%,与荷瘤T细胞组细胞存活率(17.80±1.30)%相比无显著差异(P>0.05)。正常T细胞组早期凋亡和晚期凋亡细胞百分比分别是(28.07±1.43)%和(8.45±0.48)%,加入TP后,早期凋亡和晚期凋亡细胞百分比分别是(15.90±0.45)%和(5.10±0.21)%,加药前后比较均有显著差异(P<0.01)。正常T细胞组CD4~+和CD8~+双阳细胞的比例为(70.50±1.91)%,经TP处理后CD4~+和CD8~+双阳细胞的比例降低为(55.30±3.81)%,比较有显著差异(P<0.01)。正常T细胞组CD4~+或CD8~+单阳细胞的比例分别为(22.13±1.12)%和(6.74±0.36)%,而经TP处理后CD4~+或CD8~+单阳细胞的比例分别为(34.87±2.77)%和(9.65±0.61)%,均显著增加(均P<0.01)。结论 TP能促进正常胸腺T细胞存活,抑制凋亡,并诱导其分化成熟。     

头孢地秦和阿米卡星治疗肺炎克雷伯氏菌感染对小鼠胸腺细胞凋亡的影响

目的研究肺炎克雷伯氏菌感染及应用头孢地秦、阿米卡星治疗后对NIH小鼠胸腺细胞凋亡的影响。方法给NIH小鼠腹腔注射肺炎克雷伯氏菌悬液,建立肺炎克雷伯氏菌感染模型。TUNEL法染色后用流式细胞仪观察24h内胸腺细胞的凋亡量。腹腔注射不同剂量的头孢地秦和阿米卡星,观察注射后9h胸腺细胞的凋亡量。结果胸腺细胞凋亡在感染后逐渐增高,至24h达高峰(P<0.01)。与感染组相比,头孢地秦5、15mg组的凋亡率分别下降56%、81%,两组比较有显著性差异(P<0.05)。阿米卡星5、15mg组的凋亡率分别下降41%、76%,两组比较也有显著性差异(P<0.05)。结论肺炎克雷伯氏菌感染能引起胸腺细胞发生凋亡,应用头孢地秦和阿米卡星能明显抑制胸腺细胞的凋亡。     

沙棘油抑制小鼠胸腺细胞凋亡机制的初步探讨

目的初步探讨沙棘油对脂多糖(LPS)诱导的小鼠胸腺细胞凋亡的抑制作用及其机制。方法取小鼠胸腺细胞进行分离培养,分为空白对照组;LPS组;沙棘油与LPS合用组。然后进行相关基因、蛋白的检测。结果基因表达结果,与对照组相比:LPS组caspase-3NF-κB LC3-Ⅱ表达量均增加差异有统计学意义(P<0.05);LPS+沙棘油组caspase-3 NF-κB表达量均增加差异有统计学意义(P<0.05);与LPS组相比LPS+沙棘油组caspase-3表达量下降差异有统计学意义(P<0.05)与对照组相比:LPS刺激组Caspase3、8、9蛋白表达量均增加差异有统计学意义(P<0.05);LPS+沙棘油组Caspase3、8、9蛋白表达量均增加差异有统计学意义(P<0.05);与LPS刺激组相比LPS+沙棘油组Caspase3、9表达量下降差异有统计学意义(P<0.05)。结论沙棘油对LPS诱导的小鼠胸腺细胞的凋亡有一定抑制作用且其抑制casepase通路中的线粒体途径是其可能的机制。     

环磷酰胺致神经管畸形与细胞凋亡的关系

有研究证明环磷酰胺 (ＣＰ)有强烈地致神经管畸形(ＮＴＤ)和骨骼发育异常等作用 ;亦有学者对其ＮＴＤ的发生率和致畸原因作了初步探讨[1～ 3] 。但尚未见有关ＮＴＤ与细胞凋亡相关的研究报道。本研究利用光镜和透射电镜观察了ＣＰ致ＮＴＤ与神经上皮细胞凋亡的关系 ,从形态学方面阐明ＣＰ致ＮＴＤ的原因。1　材料与方法1 1　动物分组及处理　选用未孕ＳＤ大鼠 ,雌性 30只 ,雄性15只 (山东医科大学实验动物中心提供 ) ,体重 180～ 2 5 0 ｇ ,颗粒饲料喂养 ,普通饮水。雌、雄按 2∶1比例合笼过夜 ,次日晨作阴道涂片 ,查出精子者为受精第 0天。…     

三丁基氯化锡对小鼠胸腺细胞凋亡及其Fas蛋白表达的影响

目的研究三丁基氯化锡(TBTCL)对小鼠胸腺细胞凋亡及Fas蛋白表达的影响,探讨TBTCL的免疫毒性机制。方法ICR种小鼠体重20~25 g,雄、雌各半,共40只,随机分为4组,每组10只,即1个对照组和低、中和高3个组,经口灌胃21 d,流式细胞仪检测胸腺细胞凋亡状况,免疫组化染色,观察Fas蛋白在胸腺的表达。结果低、中和高剂量组,胸腺细胞的早期凋亡率高于对照组P<0.05,且有随剂量增加而升高的趋势,Fas蛋白阳性表达率在染毒组亦强于对照组P<0.05。结论TBTCL可诱导胸腺细胞凋亡,且可导致Fas蛋白表达增强,这可能是其免疫毒性作用机制之一。     

大鼠胸腺细胞糖皮质激素受体核转位能力的放射分析法

大鼠胸腺细胞糖皮质激素受体核转位能力的放射分析法詹秀琴，金国琴，赵伟康（上海中医学院生化教研室．上海２０００３２）国内外研究胸腺细胞糖皮质激素受体（ＧＣＲ）通常测定胞浆的受体数目［１，２］或细胞内全部受体数目，而对核转位率的测定方法研究较少。本文根据...     

低剂量γ射线诱导丝裂霉素C损伤小鼠胸腺细胞的适应性反应

目的 :探讨低剂量辐射诱导小鼠拮抗丝裂霉素C(MitomycinC,MMC)损伤作用的机制。方法 :小鼠接受低剂量γ射线作用后6h ,再给予损伤剂量的MMC ,然后通过流式细胞术和 3H_TdR掺入法观察小鼠胸腺细胞周期和DNA含量的变化。结果 :50mGy和100mGy照射加MMC组小鼠胸腺细胞 3H_TdR自发掺入率、S期细胞百分率明显高于单纯MMC对照组 (P<0.01,P<0.05)。胸腺细胞G0/G1 期细胞百分率明显低于单纯MMC对照组 ,100mGy照射加MMC组小鼠胸腺细胞G2/M期细胞百分率明显低于单纯MMC对照组。结论 :低剂量γ射线对MMC损伤小鼠胸腺细胞自发掺入能力和细胞周期进程具有刺激作用。     

玉屏风散对小鼠胸腺上皮细胞介导的皮肤淋巴细胞功能的影响

目的研究玉屏风散对BALB/c小鼠胸腺上皮细胞(TEC)及TEC介导的小鼠淋巴细胞功能的影响。方法分离BALB/c小鼠皮肤组织,给予不同浓度玉屏风散、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、及给予不同浓度玉屏风散的TEC培养皮肤组织3 d,实验分为对照组、玉屏风散低剂量组(YPF-L)、玉屏风散中剂量组(YPF-M)、玉屏风散高剂量组(YPF-H)、TSLP低剂量组(TSLP-L)、TSLP中剂量组(TSLP-M)、TSLP高剂量组(TSLP-H)、与TEC共培养组(TEC)、TEC共培养低剂量组(TEC-L)、与TEC共培养中剂量组(TEC-M)、与TEC共培养高剂量组(TEC-H),免疫组化法检测皮肤组织中CD3,CD4,CD8和TSLP的表达;分离小鼠脾淋巴细胞和胸腺细胞,MTT法检测玉屏风散对脾淋巴细胞、胸腺细胞和TEC增殖的影响(24,48,72 h);q PCR检测玉屏风散对TEC中TSLP、信号传导及转录激活因子3(STAT3)、白细胞介素6(IL-6)、IL-7、IL~(-1)0、IL~(-1)2、IL~(-1)7和肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA水平变化;ELISA检测玉屏风散对TEC中IL-7水平的影响;流式细胞术检测玉屏风散对TEC与脾淋巴细胞和胸腺上皮细胞共培养2 d后两细胞中CD3,CD4,CD8和CD45阳性细胞的变化。结果免疫组化结果显示,与对照组相比,YPF-L,YPF-M和YPF-H组皮肤组织内CD3,CD4,CD8阳性细胞数量无明显变化,TSLP未见表达。TEC,TEC-L,TEC-M和TEC-H组皮肤组织内CD3,CD4,CD8阳性细胞数量增加,且给药组较明显,TSLP未见表达。TSLP-L,TSLP-M和TSLP-H组皮肤组织内CD3,CD4,CD8阳性细胞数量无明显变化,TSLP表达增强。说明玉屏风散可通过调节TEC提高皮肤免疫功能,且与TSLP无明显关系;与对照组相比,玉屏风散对TEC的增殖无明显影响,48 h时玉屏风散12.5,25,50,100,200 mg·L~(-1)对脾淋巴细胞和胸腺细胞具有一定的增殖作用(P<0.05);与对照组相比,不同浓度玉屏风散均能够显著下调TEC中TSLP,STAT3,IL-6,IL~(-1)0,IL~(-1)2,IL~(-1)7和TNF-αmRNA水平(P<0.01),显著上调IL-7 mRNA水平(P<0.01);ELISA结果显示,玉屏散低、中、高剂量组TEC中IL-7水平分别为(0.18±0.04,0.21±0.03,0.23±0.07)mg·L~(-1),与对照组(0.15±0.02)mg·L~(-1)相比,低剂量组上调了TEC中IL-7的水平(P<0.05),中高剂量组显著上调了TEC中IL-7的水平(P<0.01);与脾淋巴细胞及胸腺细胞单独培养组、TEC和脾淋巴细胞及胸腺细胞共培养组相比,玉屏风散提高了两细胞中CD3,CD4,CD8阳性细胞数量(P<0.05),对CD45阳性细胞无明显影响。结论玉屏风散可通过上调胸腺上皮细胞IL-7的水平,从而提高BALB/c小鼠皮肤淋巴细胞的数量及功能。     

NF-κB在细胞凋亡中调节作用的研究进展

细胞凋亡是由基因控制的细胞自主有序的主动死亡过程,主要有3条通路参与引起细胞凋亡,即细胞内的线粒体通路、内质网通路和细胞外的死亡受体通路。近年研究表明,NF-κB与细胞凋亡关系密切,具有抑制凋亡和促进凋亡的双向调节作用,其在细胞凋亡中调节作用与凋亡抑制蛋白家族、B细胞淋巴瘤/白血病-2家族、肿瘤坏死因子受体相关因子家族、c-Jun氨基端激酶、肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体和Fas相关死亡域蛋白样白细胞介素1β转化酶抑制蛋白等有关。探索NF-κB在细胞凋亡中的调控机制,对凋亡相关疾病的药物开发具有重要意义。本文就NF-κB在细胞凋亡中的调节作用进行综述。     

甲氨蝶呤联合环磷酰胺对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡作用的研究

目的通过对类风湿关节炎(RA)动物模型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的实验研究,从滑膜细胞凋亡的角度,探讨甲氨蝶呤(MTX)联合环磷酰胺(CTX)的协同作用和机制。方法建立Ⅱ型胶原诱导性雌性Wistar大鼠CIA模型,将造模成功的60只大鼠随机分成4组:CIA模型对照组、小剂量MTX治疗组(MTX0.9mg/kg,每周1次)、小剂量CTX治疗组(24mg/kg,每3周1次)及小剂量MTX联合小剂量CTX治疗组(0.9mg/kg,每周1次,CTX24mg/kg,每3周1次);再选8只为正常对照组。治疗24周后全部动物处死取材,再经固定、脱钙、包埋,通过TUNEL法检测滑膜细胞凋亡。结果各治疗组滑膜细胞凋亡均较CIA模型组增加,联合治疗组凋亡程度最高,各组间平均灰度值差异有统计学意义(P<0.05)。结论提示MTX和CTX联合治疗RA为协同作用。     

大鼠胸腺细胞三碘甲腺原氨酸受体的放射分析法

大鼠胸腺细胞三碘甲腺原氨酸受体的放射分析法＊王润平金国琴赵伟康（上海中医药大学生化教研室，上海２０００３２）１９９６－０８－１３收稿，１９９７－０４－０９修回＊国家自然科学基金资助项目，Ｎｏ３９３７０８６６作者简介：王润平，男，２８岁，博士；赵伟康，...     

金黄扶正散对免疫抑制小鼠脾细胞凋亡的影响

目的研究金黄扶正散对免疫抑制小鼠脾细胞凋亡的影响。方法建立免疫抑制小鼠模型,金黄扶正散低、中、高剂量组分别连续给小鼠灌胃10d,小鼠处死后,取脾,比色法测定乳酸脱氢酶和酸性磷酸酶活性;采用TUNEL染色法观察脾细胞凋亡情况。结果与环磷酰胺组比较,金黄扶正散低、中、高剂量组可明显提高免疫抑制小鼠的乳酸脱氢酶和酸性磷酸酶活性(P<0.01,P<0.05);与正常对照组比较,环磷酰胺组凋亡指数显著性提高(P<0.05);金黄扶正散中、高剂量组凋亡指数与环磷酰胺组比较显著性下降(P<0.01,P<0.05)。结论金黄扶正散可抑制免疫抑制小鼠脾细胞凋亡,降低凋亡指数。     

内毒素诱发小鼠肾细胞凋亡的动态观察

细胞凋亡(apopt哭15)作为不同于坏死的一种细胞生理性死亡形式,在维持机体稳态方面起重要作用。但在许多病理条件下,如缺氧、缺血、炎症、创伤、毒物或药物(抗肿瘤药物、激素等)的作用也可诱发细胞凋亡并对机体造成损害[‘〕。为探讨由内毒素所致肾功能衰竭过程中是否有细胞凋亡参与,其出现的时间及与TNFa的相关性,本文进行了如下实验。衰1各时间组小皿血清中TNFh含t变化(ng几,厉士、)oh 05h lh 1.5h Zh4h sh、。士0.4粼 t肠.0餐“ 113931四151加.4 17.4 1.09士2以.6士134.4士5.8土1.0士0.1213.6书份23.5苦赞52.6苦釜42.4替苦21.8片资1材…     

阿霉素对人胚胸腺细胞IL-2产生及LAK活性的影响

某些抗癌药物的免疫调节效应在其抗肿瘤机制中可能起着重要作用.本研究表明,低浓度(0.04mg·L~-1)阿霉素对人胚胸腺细胞IL-2产生和LAK活性的诱导具有促进作用;高浓度(4mg·L~-1)阿霉素虽对LAK活性没有影响,但却明显抑制IL-2的产生.提示低浓度阿霉素对人胚胸腺细胞具有一定的免疫增强效应.