MiR-143在ob/ob小鼠肝脏、骨骼肌中的表达及意义

目的 观察miR-143在遗传性ob/ob肥胖小鼠与正常对照组C57/BL6J小鼠肝脏、骨骼肌中的差异表达,初步探讨miR-143在肥胖及相关脂代谢紊乱发生中的作用.方法 选择16周龄的ob/ob小鼠与C57/BL6J小鼠各12只,采用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测两组小鼠肝脏、骨骼肌中miR-143的表达水平.结果 miR - 143在ob/ob小鼠肝脏中的表达水平明显高于C57/BL6J小鼠(P＜0.05),但在骨骼肌中的表达水平两组无显著性差异(P＞0.05).结论 miR-143可能参与了ob/ob小鼠肝脏脂质代谢紊乱的发生.     

不同标准判定的肥胖患者脂肪细胞因子血清水平的临床意义比较

目的探讨3种代谢综合征(MS)诊断标准判定的肥胖患者脂联素(Adiponectin,APN)、抵抗素(Resistin,RST)、瘦素(Leptin,LPT)血浆水平临床意义的异同。方法采用2004中华医学会糖尿病学会(CDS)、2005国际糖尿病联盟(IDF)和2007中国成人血脂异常防治指南(CALIP)MS诊断标准中对肥胖的判定切点,将80名研究对象分为肥胖组和非肥胖组。测量体脂参数、血压,检测临床生化指标,测定空腹血浆胰岛素(FINS)、APN、RST、LPT、高敏C反应蛋白(hsCRP)、肿瘤坏死因子(TNF)α、白介素(IL)6、尿微量白蛋白(UAE)等。计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、分泌指数(HOMA-β)、敏感指数(ISI)。结果(1)3种不同标准的肥胖组血浆APN水平均显著低于非肥胖组(P均<0.01)。(2)血浆RST水平在2004CDS肥胖组显著高于非肥胖组(P<0.01),在2005IDF和2007CALIP肥胖组与非肥胖组间差异无统计学意义。(3)血浆LPT水平在2005IDF和2007CALIP肥胖组显著高于非肥胖组(P<0.01,P<0.05),在2004CDS肥胖组与非肥胖组间差异无统计学意义。(4)总体分析,血浆APN与性别呈显著正相关,与体重指数(BMI)、腰围(WC)、收缩压(SBP)、ln FINS、lnHOMA-IR、总胆固醇(TC)、ln三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、lnhsCRP呈显著负相关;血浆RST与lnhsCRP呈显著正相关,与腰臀比(WHR)呈显著负相关;血浆LPT与性别、年龄、BMI、ln空腹血浆血糖(FPG)、lnFINS、lnHOMA-IR、TC、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、LDL-C呈显著正相关,与WHR、ISI呈显著负相关;多元逐步回归分析,WC、lnhsCRP与血浆APN独立相关,WHR、lnhsCRP与血浆RST独立相关,性别、BMI、ISI、LDL-C与血浆LPT独立相关。(5)血浆APN在不同标准的各肥胖组均与性别呈显著正相关,在2005IDF和2007CALIP时与WC、lnTG呈显著负相关;在各非肥胖组均与WC呈显著负相关,在2004CDS和2007CALIP时还与BMI、TC呈显著负相关。血浆RST在各肥胖组均与lnhsCRP呈显著正相关,在非肥胖组2004CDS和2007CALIP时与lnFPG显著正相关。血浆LPT在各肥胖组与性别均呈显著正相关;各非肥胖组均与性别、lnFPG、lnHOMA-IR呈显著正相关,2004CDS和2007CALIP时还与BMI、lnFINS呈显著正相关,2005IDF和2007CALIP时还与TC呈显著正相关,均与WHR呈显著负相关。多元逐步回归分析,在不同标准各肥胖组性别、BMI均与血浆APN独立相关,lnhsCRP与血浆RST独立相关;在各非肥胖组WC均与血浆APN独立相关;性别在各标准的肥胖组和非肥胖组均与血浆LPT独立相关。结论3种不同标准的肥胖组血浆APN水平均显著低于非肥胖组,而血浆RST和LPT水平在不同标准下不一致;血浆APN在各肥胖组均与性别呈显著正相关,在各非肥胖组均与WC呈显著负相关;血浆RST在各肥胖组均与lnhsCRP呈显著正相关;血浆LPT在各肥胖组与性别均呈显著正相关,各非肥胖组均与性别、lnFPG、lnHOMA-IR呈显著正相关;在各肥胖组性别、BMI与血浆APN独立相关,lnhsCRP与血浆RST独立相关;WC在各非肥胖组均血浆APN独立相关;性别在各分组均与血浆LPT独立相关。     

胆管癌miR-551b表达变化的临床意义及其靶基因生物信息学分析

 目的 研究胆管癌miR-551b表达变化的临床意义,并采用生物信息学方法分析其靶基因。方法 选择2014-10至2018-10在武警安徽总队医院行胆管癌根治术的78例患者作为胆管癌组,并选择同期因胆管结石行Roux-en-Y胆肠吻合术的40例患者作为对照组,检测胆管癌组织和正常胆管组织中miR-551及细胞周期素D1(cyclinD1)的表达量,随访胆管癌患者的总生存期(OS)。结果 胆管癌组织中miR-551b的表达量低于正常胆管组织且术前血清CA19-9升高、术前血清CEA升高、TNM Ⅲ期、低未分化、微血管侵犯患者胆囊癌组织中miR-551b的表达量明显低于术前血清CA19-9正常、术前血清CEA正常,TNM Ⅰ-Ⅱ期、中高分化、无微血管侵犯的患者;与miR-551b高表达的胆管癌患者比较,miR-551b低表达的胆管癌患者的总生存期明显缩短;miR-551b靶向cyclinD1基因mRNA 3'UTR的第1456-1462碱基、1479-1486碱基,胆管癌组织中cyclinD1的表达水平明显高于正常胆管组织且与miR-551b 的表达具有负相关关系;术前CA19-9、TNM分期、微血管侵犯、miR-551b及cyclinD1表达是胆管癌患者总生存期的影响因素。结论 胆管癌中miR-551表达减少与病理特征恶化、总生存期缩短相关,靶向cyclinD1是miR-551参与胆管癌发生发展的可能机制。     

蛋白组学技术研究有氧运动影响C57BL/6小鼠骨骼肌代谢系列报道之四——有氧运动对胰岛素抵抗小鼠骨骼肌蛋白折叠/降解通路相关蛋白的影响

目的:运用蛋白组学技术研究有氧运动对胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)小鼠骨骼肌蛋白表达的影响,初步探究骨骼肌蛋白质折叠/降解通路相关蛋白在有氧运动改善IR过程中的作用机制。方法:选取80只4周龄C57BL/6雄性小鼠,随机分为正常饮食组(NC,n=20)和IR模型组(n=60)并分别饲以基础和高脂饲料10周。10周后通过检测空腹血清胰岛素水平(Fasting Insulin,FIN)及口服葡萄糖耐量试验(Oral Glucose Tolerance Test,OGTT)鉴定IR模型是否成功。选取40只成模小鼠,再次随机分为高脂饮食运动组(HE)和高脂饮食安静组(HC)。HE组小鼠采用6周75%VO2 max有氧跑台运动训练。运动结束后处死动物、提取各组小鼠股四头肌总蛋白,经Bradford法检测蛋白浓度后进行蛋白质双向电泳(2-DE),采用ImageMaster 2D Platinum V5.0软件分析2-DE电泳图谱,并对所选取的差异蛋白点用基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(Matrix-assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight MassSpectrometry,MALDI-TOF-MS)和高效液相色谱-串联谱法(Liquid-Chromatography–tandemMass Spectrometry,LC-MS/MS)进行分析,经Mascot检索软件结合NCBI nr数据库鉴定差异蛋白后使用相关软件对所得数据进行统计分析。结果:10周高脂饮食后,IR模型组小鼠FIN水平比NC组增加50%,OGTT曲线峰值时间点显著后移并出现平台期,提示10周高脂饮食可诱导小鼠产生IR。6周有氧跑台运动后,HE组小鼠FIN水平较HC组下降17.2%,OGTT曲线峰值下降且时间点前移,平台期消失,表明6周有氧运动可显著改善IR小鼠症状。经双向电泳显影,设定1.5倍为筛选差异表达蛋白的标准,比较HC组与HE组蛋白,共发现差异表达蛋白22个,其中运动后表达下调蛋白14个,表达上调蛋白8个。差异表达蛋白中有5个蛋白与细胞蛋白折叠/降解通路密切相关。其变化倍数分别为:纤维蛋白原β链前体(Fibrinogen Beta Chain Precursor)运动后下降38%,β型蛋白酶体7前体(Proteasome Subunit Beta Type-7 Precursor)运动后增加3.27倍,α型蛋白酶体1(Proteasome Subunit Alpha Type-1)运动后增加1.67倍,伴侣素β亚基(Chaperonin ContainingTcp-1 Beta Subunit,CCTβ)、Ester Hydrolase C11Orf54 Homolog为运动后新增蛋白。结论:6周有氧运动可通过调节IR小鼠骨骼肌蛋白折叠/降解通路相关蛋白的表达,改善高脂饮食诱导的IR。     

消化道恶性肿瘤患者空腹血糖、胰岛素、乳酸和服糖后血糖变化及临床意义

笔者以50例消化道恶性肿瘤患者为研究对象,测定空腹血糖、空腹胰岛素、空腹乳酸和服糖后2h血糖含量,以及稳态模式评估法胰岛素抵抗指数,探讨糖代谢紊乱的特点及其可能机制,为临床营养治疗提供实验依据。1对象和方法1.1对象选取2001年5月～2004年3月我院收治的住院消化道恶性肿瘤患者50例,男30例,女20例,平均年龄61岁,其中胃癌25例,肝癌15例,结肠癌10例。所有患者临床和病理诊断明确,无糖尿病史。正常对照组为门诊体检健康人50例,男32例,女18例,平均年龄50岁,无糖尿病史。两组在年龄、性别上无可比性。1.2测定方法血糖采用葡萄糖氧化酶动力法…     

蛋白组学技术研究有氧运动影响C57BL/6小鼠骨骼肌代谢系列报道之三——有氧运动对胰岛素抵抗小鼠骨骼肌抗氧化相关蛋白的影响

目的:采用蛋白组学技术研究有氧运动对胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)小鼠骨骼肌总蛋白表达的影响,通过分析差异表达蛋白,研究骨骼肌组织抗氧化相关蛋白在有氧运动后的表达变化,探讨其在有氧运动改善IR中的作用。方法:选取4周龄C57BL/6雄性小鼠80只,随机分为正常饮食组(NC,n=20)和IR模型组(n=60),分别饲以基础和高脂饲料10周。10周后经检测空腹血清胰岛素水平(fasting insulin,FIN)和口服葡萄糖耐量试验(oralglucose tolerance test,OGTT)鉴定模型是否成立。取40只成模小鼠再次随机分为高脂饮食安静组(HC)和高脂饮食运动组(HE)。HE组运动方案采用75%VO2max的有氧跑台训练,持续6周。6周后提取各组小鼠股四头肌总蛋白,经Bradford法检测蛋白浓度后进行蛋白质双向电泳(2-DE),采用ImageMaster 2D Platinum V5.0软件分析2-DE电泳图谱,并对所选取信号点用基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-fight massspectrometry,MALDI-TOF-MS)和高效液相色谱-串联谱法(liquid-chromatography-tandemmass spectrometry,LC-MS/MS)进行分析,经Mascot检索软件结合NCBI nr数据库鉴定差异表达蛋白后,使用相关统计软件对所得数据进行统计学分析。结果:10周高脂饮食后,高脂饮食组小鼠FIN水平比正常饮食组增加50%,OGTT曲线峰值时间点显著后移并出现平台期,证明10周高脂饮食可诱导小鼠产生IR。经过6周有氧跑台运动,HE组小鼠FIN水平较HC组下降17.2%,OGTT曲线峰值下降且时间点前移,平台期消失,表明6周有氧运动可显著改善IR小鼠症状。蛋白组学检测设定1.5倍为筛选差异表达蛋白的标准,据此比较HC组与HE组蛋白表达,共发现表达差异蛋白22个,运动后14个蛋白表达下调,8个蛋白表达上调。与抗氧化相关的蛋白为热休克蛋白27(heatshock protein27,HSP27),为运动后新增蛋白;超氧化物歧化酶(super oxide dismutase,SOD)运动后表达增加3.30倍。结论:6周有氧运动可显著增加小鼠骨骼肌抗氧化相关蛋白HSP27和SOD的表达,改善高脂饮食诱导的IR。     

高脂饲料诱导的肥胖倾向和肥胖抵抗倾向大鼠内脏脂肪visfatin和AMPK表达及其相互关系

目的:探讨大鼠内脏脂肪组织visfatin和AMPK的表达对肥胖倾向(OP)和肥胖抵抗倾向(ORP)形成的可能作用。方法:20只雄性Wistar大鼠,高脂饲料喂养10周,依据腹脂/体重比值选大鼠进入OP和ORP两组,每组各7只,测定大鼠血脂、血糖、血浆胰岛素和visfatin浓度,肾周脂肪组织中visfatin表达和AMPK活性。结果:与ORP组大鼠相比,OP组大鼠血浆visfatin浓度有升高趋势(P=0.16),肾周脂肪组织visfatin表达显著升高(P<0.05),而AMPK活性显著降低(P<0.05),内脏脂肪visfatin表达与AMPK活性之间存在负相关关系。结论:内脏脂肪组织中visfatin表达升高和AMPK活性降低可能与肥胖倾向有关。Visfatin可能通过负性调节AMPK活化程度影响肥胖倾向的发生。     

miR-122在非酒精性脂肪肝病患者血清中的表达及其临床意义

 目的 探讨microRNA-122(miR-122)在非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)患者血清中的表达及其临床意义。方法 采用荧光定量RT-PCR技术检测健康人、高脂血症患者、非酒精性单纯性脂肪肝(non-alcoholic simply fatty liver, NAFL)及非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis, NASH)患者血清中miR-122的表达。结果 各组miR-122的表达水平分别为5.94±1.21(2^-△△Ct), 5.99±1.03(2^-△△Ct), 8.67±0.72(2^-△△Ct), 10.55±0.83(2^-△△Ct)。高脂血症患者和健康人血清中miR-122的表达量差异无统计学意义(P＞0.05)。与前两组相比, NAFL和NASH患者血清中miR-122的表达明显逐渐升高, 差异有统计学意义(P<0.05)。结论 非酒精性脂肪肝病患者血清中miR-122的表达量明显升高, 提示miR-122参与了非酒精性脂肪肝的形成及进展过程, 可作为诊断和评估组织学病变严重性的一种新的生物学指标, 同时有望成为一个潜在的治疗靶点。     

蛋白组学技术研究有氧运动影响C57BL/6小鼠骨骼肌代谢系列报道之一——有氧运动对胰岛素抵抗小鼠骨骼肌脂代谢相关蛋白的影响

目的:采用蛋白组学技术研究6周有氧跑台运动对胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)小鼠骨骼肌总体蛋白表达的影响,对比筛选差异表达蛋白,分析有氧运动改善小鼠IR的分子机理。方法:选用C57BL/6雄性小鼠80只,将其随机分为正常饮食组(NC,n=20)和IR模型组(n=60),分别饲以基础和高脂饲料10周。鉴定高脂膳食组IR小鼠模型建立成功后,将40只成模的IR小鼠分为高脂饮食安静组(HC,n=20)和高脂饮食运动组(HE,n=20)。HE组进行6周、强度为75%VO2max的跑台运动。6周后检测各组小鼠空腹血清胰岛素水平(FIN)及口服葡萄糖耐量实验(OGTT);提取小鼠股四头肌总蛋白进行蛋白质双向电泳(2-DE),采用ImageMaster 2D Platinum V5.0软件分析2-DE电泳图谱,并采用基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和高效液相色谱-串联谱法(LC-MS/MS)分析统计蛋白表达差异。结果:6周有氧跑台运动后,HE组小鼠血清FIN水平显著降低,OGTT曲线峰值出现时间点前移,且峰值下降,平台期消失。比较HC组与HE组小鼠骨骼肌蛋白表达图谱,以蛋白表达量变化大于1.5倍为显著性判定标准,共筛选出43个差异表达蛋白。排除21个为高丰度蛋白后,表达上调蛋白8个、下调蛋白14个。其中与脂代谢相关的蛋白包括脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(Adipocyte Fatty Acid Binding Protein,AFABP)和载脂蛋白A-I(Apolipoprotein A-I,ApoA-I)。有氧运动引起IR小鼠骨骼肌AFABP表达下降50%、ApoA-I表达上调2.62倍。与HC组相比,与骨骼肌能量代谢相关的蛋白电压依赖性阴离子通道1和2(Voltage-dependent Anion Channel,VDAC)表达分别下降58%和42%。结论:6周有氧运动能够显著改善IR小鼠症状,同时HE组小鼠骨骼肌脂代谢相关蛋白AFABP、ApoA-I和电压依赖性阴离子通道蛋白VDAC1、VDAC2表达受到显著影响。     

耐力训练大鼠骨骼肌FAT/CD36表达及其与胰岛素敏感性的相关分析

目的:研究耐力训练对大鼠骨骼肌脂肪酸转位酶/CD36(FAT/CD36)表达的影响,并分析其与胰岛素敏感性指数(ISI)的相关关系。方法:将23只SD大鼠随机分成耐力训练组(T)(n=13)和安静对照组(C)(n=10)。T组大鼠每周进行6天、共7周的中等强度跑台耐力训练。7周后取肾周和睾丸周围脂肪组织称重,计算脂肪垫百分比;空腹取血测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、非酯化脂肪酸(NEFA)、胰岛素(FINS)含量;取股直肌测定匀浆液FAT/CD36蛋白表达,并与ISI进行相关分析。结果:7周耐力训练后,T组大鼠体重和脂肪垫百分比均低于C组(P<0.01,P<0.01);T组大鼠血清TC、NEFA、FINS低于C组(P<0.01,P<0.05,P<0.05);T组大鼠股直肌匀浆液FAT/CD36蛋白含量、胰岛素敏感性指数(ISI)显著高于C组(P<0.01,P<0.05),且二者呈高度正相关(r=0.823,P<0.01)。结论:7周耐力训练可提高大鼠胰岛素敏感性,上调FAT/CD36的表达,以适应其介导的耐力训练脂肪分解代谢增强后骨骼肌脂肪酸转运的需求。     

运动、EGCG和肉碱对肥胖大鼠体重、内脏脂肪及肝脏CPT1表达的影响

目的:探讨运动、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和肉碱(LC)对肥胖大鼠体重、内脏脂肪及肝脏肉毒碱棕榈酰转移酶1(CPT1)基因、蛋白表达的影响。方法:选取造模成功的肥胖大鼠50只,随机分为5组:肥胖对照组(F),运动组(S),运动+EGCG组(S+E),运动+肉碱组(S+L),运动+EGCG+肉碱组(S+E+L),每组10只。用蒸馏水将EGCG、LC溶解成无色透明的溶液,EGCG和LC的补充量均按80 mg/kg体重计算,灌胃容量为1 ml/100g体重(体重超过500g的大鼠,灌胃容量都按5ml配比),F组、S组大鼠则按照1 ml/100g体重灌胃蒸馏水。除F组外,其他四组大鼠进行低强度有氧跑台训练,负荷设定为16m/min,60min/day,大约相当于大鼠58%最大摄氧量。7周后比较各组大鼠体重、内脏脂肪系数、肝脏甘油三酯(TG)水平及肝脏CPT1基因及蛋白表达水平。结果:S组、S+E组、S+L组、S+E+L组大鼠体重显著低于F组(P<0.05),S+E+L组体重显著低于S组(P<0.05)。S+E+L组内脏脂肪系数显著低于F组(P<0.05)。S+L组和S+E+L组肝脏TG水平显著低于F组、S组和S+E组(P<0.05)。S组大鼠肝脏CPT1基因及蛋白水平与F组无显著差异(P>0.05),S+E组、S+L组、S+E+L组大鼠CPT1基因水平较F组和S组显著增高(P<0.05),S+L组和S+E+L组CPT1蛋白量较F组显著增加(P<0.05)。结论:运动、EGCG、LC联合使用可起到减重、减少内脏脂肪和改善肝脏甘油三酯水平的作用,改变肝脏CPT1表达可能是其机制之一。     

胃癌组织中miR-21、STAT3、FOXO3a表达及临床意义

目的探讨胃癌组织中微小RNA(miR-21)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、叉头框蛋白O3a(FOXO3a)的表达及临床意义。方法选取广东省人民医院珠海医院自2015年2月至2017年10月手术切除且经病理首次确诊为胃癌的组织标本87例为观察组,另选取体检经胃镜取组织活检病理证实的正常胃黏膜组织标本53例为对照组。采用实时RT-PCR技术检测两组胃黏膜中miR-21、STAT3、FOXO3a的表达情况。结果胃癌组miR-21、STAT3相对表达量显著高于正常对照组(P <0. 05),FOXO3a相对表达量显著低于正常对照组(P <0. 05)。miR-21、STAT3、FOXO3a表达与分化程度、浸润深度、淋巴转移具有相关性(P <0. 05),与年龄、性别、Laurén分型无相关性(P> 0. 05)。Pearson分析结果显示,胃癌组织miR-21表达水平与STAT3表达水平呈正相关(r=0. 591,P <0. 05),与FOXO3a表达水平呈负相关(r=-0. 705,P <0. 05); STAT3表达水平与FOXO3a表达水平呈负相关(r=-0. 618,P <0. 05)。结论 miR-21、STAT3在胃癌组织中表达异常增高、FOXO3a表达下调可作为胃癌患者诊断的潜在生物学标志物,判断胃癌的疾病进程以及恶性程度。     

miR-205在宫颈鳞癌中的表达及其对癌细胞迁移、侵袭能力的影响

目的 筛选宫颈癌中差异表达的微小RNA（miRNA,miR）,探讨关键miRNA对宫颈癌发生发展的作用及其机制。方法 采用生物信息学方法分析并以差异倍数>2.5及_P<0.01为条件筛选宫颈鳞癌中差异表达的miRNA;采用原位杂交和qRT-PCR分别检测miR-205及白细胞介素（IL）-32的表达;采用CCK-8法检测细胞增殖活力;应用Transwell模型评价细胞迁移及侵袭能力;利用Western blotting检测侵袭相关基质金属蛋白酶（MMP）-2及MMP-9蛋白的表达量。结果 生物信息学分析获得宫颈鳞癌中差异表达的miRNA 106个,其中70个上调,36个下调;其中miR-205的表达量变化最大。原位杂交及qRT-PCR结果表明,miR-205在宫颈鳞癌细胞中的表达量明显高于癌旁组织（_P<0.05）。miR-205可明显提升宫颈癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力（_P<0.05）。在宫颈癌细胞系HeLa及SiHa细胞中,过表达miR-205可增强IL-32的表达,降低_{miR-205表...}     

PI3KP85α在高脂高糖喂养妊娠期大鼠肝脏中的表达及其与胰岛素抵抗的关系

目的探讨高糖高脂喂养妊娠大鼠肝脏组织磷脂酰肌醇3激酶p85α（PI3KP85α）mRNA的表达及其对妊娠期胰岛素抵抗的影响。方法健康6周龄雌性SD大鼠40只,分为4组：高糖高脂饮食-孕鼠组（SFP）、高糖高脂饮食-未孕组（SFV）、普通饮食组-孕鼠组（NP）及普通饮食组-未孕鼠（NV）,每组各10只。SFP、NV组大鼠与雄性大鼠配对受孕,在妊娠第20天禁食水12小时后测空腹血糖和胰岛素水平,计算胰岛素抵抗指数;应用RT-PCR测定肝脏组织PI3KP85αmRNA的表达。结果 SFP组胰岛素抵抗指数（11.29±0.28）肝脏组织P13KP85αmRNA的表达量（1.04±0.16）明显高于其他组,差异有统计学意义（F=38.67,P〈0.01;F=36.70,P〈0.01）;SFV组P13KP85αmRNA的表达与胰岛素抵抗指数呈正相关（F=0.81,P〈0.01）。结论高糖高脂喂养妊娠大鼠,肝脏组织PI3KP85αmRNA明显升高,P13KP85α的高表达可能是导致妊娠期胰岛素抵抗进而发生妊娠期糖尿病的原因之一。     

束缚应激后大鼠肝脏PPARβ/δ mRNA和蛋白表达的变化

目的观察束缚应激后大鼠血甘油三脂（TG）、血糖和肝脏过氧化物酶体增殖物激活型受体（PPAR）β/δmRNA和蛋白的变化,初步探讨应激对糖脂代谢的影响及发生机制。方法健康雄性Wistar大鼠,随机分为正常对照组（C）、束缚1 w组（R1）、束缚2 w组（R2）和束缚4 w组（R4）,分别不给予应激及给予束缚应激1、2和4 w。实验结束后取大鼠血清及肝组织,全自动生化仪测定血TG和血糖水平,分别用RT-PCR和Western blot法检测肝脏PPARβ/δ的mRNA和蛋白表达水平。结果 R1、R2、R4组大鼠血清TG分别为（0.97±0.28）、（0.88±0.16）、（0.94±0.23）mmol/L,均明显高于C组的（0.59±0.09 mmol/L（P〈0.01）;血糖分别为（6.25±0.69）、（6.30±1.10）、（6.12±0.85）mmol/L,均明显高于C组的（5.18±0.54）mmol/L）（P〈0.01）。与C组相比,R1、R2、R4组肝脏PPARβ/δmRNA和蛋白表达均降低（P〈0.05或P〈0.01）。结论束缚应激后,大鼠血清TG、血糖水平升高,这种变化可能与肝脏PPARβ/δ表达降低有关。     

C57BL/6小鼠CIA模型的建立及其监测体系的初步筛选

目的 建立稳定的C57BL／6小鼠胶原诱导关节炎(CIA)模型,构建进一步进行类风湿关节炎(RA)发病机制及治疗研究的体系。方法 取40只雄性C57BL／6小鼠,随机分为模型组和对照组。模型组采用鸡Ⅱ型胶原与完全弗氏佐剂在尾部皮内注射,21天后同样方法加强免疫。定期观察两组小鼠的关节和关节外表现以及病理学改变;用三重免疫荧光标记、胞内细胞因子测定流式细胞术检测外周血T细胞亚群。结果 对照组小鼠均未发病。模型组小鼠在50天的发病率达70％,关节炎评分在3～8分,持续时间大约100天;病理切片显示典型的炎性细胞浸润,滑膜增生,软骨及软骨下骨破坏．外周血Th1／Th2比值升高。结论 应用Ⅱ型胶原能在C57BL／6小鼠上成功建立CIA模型,该模型是进行RA研究的良好动物模型。     

HtrA2/Omi与Livin在乳腺浸润性导管癌中表达及其临床意义

目的探讨HtrA2/Omi与Livin在乳腺浸润性导管癌(IDC)中的表达及临床意义。方法选取北部战区总医院和平分院普外科乳腺病区自2016年2月至2017年7月收治的63例行根治性手术治疗的IDC患者的病理组织与癌旁正常乳腺组织为研究对象。采用免疫组化法检测HtrA2/Omi与Livin在63例IDC组织及癌旁正常乳腺组织中的表达情况,分析二者的表达情况与临床病理特征间的关系。结果 HtrA2/Omi与Livin在IDC组织中的阳性表达率均明显高于癌旁正常乳腺组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。HtrA2/Omi的表达与肿瘤脉管侵犯有相关性(P<0.05),与患者年龄、是否绝经、肿瘤大小、淋巴结转移、原发肿瘤淋巴结转移分期(TNM)、组织学分级、神经侵犯、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体2(C-erbB-2)、细胞核增殖抗原(Ki-67)、分子分型均无相关性(P>0.05)。Livin蛋白的表达与肿瘤大小、TNM分期具有相关性(P<0.05),与患者年龄、是否绝经、淋巴结转移、组织学分级、神经侵犯、脉管侵犯、ER、PR、C-erbB-2、Ki-67、分子分型均无相关性(P>0.05)。Spearman等级相关分析显示,IDC组织中HtrA2/Omi与Livin表达水平无明显相关性(P>0.05)。结论在IDC患者中,HtrA2/Omi及Livin的高表达与肿瘤的发生、发展相关,Livin可能与IDC细胞增殖相关,高表达提示预后不良。     

2型糖尿病患者血清脂联素、肿瘤坏死因子-α水平变化及其临床意义

目的 探讨2型糖尿病患者体重指数（body mass index,BMI）、胰岛素敏感指数（insulin sensibitity,SI ）和血清脂联素、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）水平变化及其临床意义.方法 采用放射免疫分析法（RIA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）分别测定100例2型糖尿病组,101例正常对照组的空腹血清脂联素及TNF-α水平,同时测定BMI、空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）、空腹血胰岛素（fasting insulin FINS）、胰岛素抵抗指数（Homa-IR）等相关指标.结果 糖尿病组BMI、FBG、FINS、Homa-IR均明显高于正常对照组（均P〈0.05）,血清脂联素、SI均低于正常对照组（P〈0.05）.血清TNF-α两组间无统计学意义（P＞0.05）.单因素相关分析显示,血清脂联素与SI呈正相关（r=0.247,P〈0.05）,与BMI呈负相关（相关系数为：r=-0.313,P〈0.05）,与TNF-α无相关性.结论 血清脂联素与肥胖、SI相关,与TNF-α无相关性,脂联素的增高可能是有益的.     

VEGF/PTEN及下游信号通路在侵袭性垂体瘤中的表达及其临床意义

 目的 探讨侵袭性垂体瘤中血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)与人第10号染色体缺失的磷酸酶 (gene of phosphate and tension homology deleted on chromsome ten, PTEN)表达水平及其下游信号通路的变化的临床意义。方法 收集医院神经外科手术后垂体瘤标本62例(侵袭组32例,非侵袭组30例)和60例正常垂体组织标本(对照组)。通过实时定量PCR和蛋白质印迹法检测比较VEGF、PTEN、磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(phosphate-Serine/threonine Kinase, p-Akt)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(phosphate-mitogen-activated protein kinase, p-MAPK)在垂体瘤和正常垂体组织之间的表达差异。结果 垂体瘤标本中VEGF的表达水平显著高于对照组(P<0.05),在侵袭组(3.61±0.16)中的表达高于非侵袭组(2.06±0.13),差异有统计学意义(t=10.60, P<0.05),而PTEN在垂体瘤标本中的表达显著低于对照组(P<0.05),尤其在侵袭组(0.42±0.10)中的表达显著降低(t=6.31, P<0.05)。垂体瘤标本中p-Akt和p-MAPK水平显著高于对照组(P<0.05),且侵袭组(p-Akt 3.90±0.14; p-MAPK 2.52±0.11)明显高于非侵袭组(p-Akt 2.27±0.11; p-MAPK 1.89±0.05)(p-Akt,t=12.95, P<0.05; p-MAPK t=7.29, P<0.05)。结论 侵袭性垂体瘤中VEGF、p-Akt及p-MAPK水平明显增高,而PTEN表达水平显著降低,提示上述变化可能与垂体瘤的侵袭性相关,其可能为诊断并治疗侵袭性垂体瘤靶点的选择提供新方向。