CD20分子在移植肾切除标本中的表达

背景：肾移植是治疗肾功能衰竭最有效的手段，如何提高移植物及受者的长期生存率和生存质量仍然是肾移植的重要课题。B细胞群的浸润与移植肾失功间的关系尚处于争论阶段。 目的：分析CD20+ B细胞浸润与移植肾存活时间的相关性，探讨浸润B细胞在移植肾排斥反应病变中的作用。 设计、时间及地点：回顾性病例分析，于1989-01/2006-12在解放军总医院第二附属医院器官移植研究室完成。 对象：纳入40例难治性排斥反应导致移植肾失功并行移植肾切除的患者。 方法：切除的移植肾组织经石蜡包埋、切片后行免疫组化染色，检测肾组织中CD20的表达情况，CD20+ B细胞群在肾间质呈弥漫性浸润者视为阳性。计算移植肾的存活时间。 主要观察指标：统计分析CD20表达对移植肾存活时间的影响及其与移植肾排斥反应导致失功的相关性。同时统计分析性别、年龄、冷缺血时间、热缺血时间、免疫抑制方案、术后高血压以及是否为二次移植对CD20表达的影响。 结果：①40例切除的移植肾组织免疫组化染色结果中，CD20+ 19例(48%)。②失功的移植肾中CD20的表达与其性别、年龄、冷缺血时间、热缺血时间、免疫抑制方案、术后高血压以及是否为二次移植不相关。③40例移植肾的存活时间最长为110个月，最短为2周，平均为35个月。CD20+组移植肾存活时间明显短于CD20-组[（34.9±5.4），（45.8±5.9）个月（P﹤0.05）]。 结论：CD20+的B细胞群浸润可使移植肾的存活时间减少，导致移植肾预后较差。     

移植肾切除标本中C4d的表达及其体视学测定

背景：2003年Banff移植病理会议正式将C4d在肾小管周围毛细血管中的特异性沉积列入体液性排斥反应的Banff诊断标准,体视学测定是一种重要的分析手段。 目的：检测C4d在难治性排斥反应移植肾组织中的表达情况,对C4d阳性细胞进行体视学定量测定,分析其体视学指标与移植肾存活时间的关系。 设计、时间及地点：回顾性病例分析,2006-12/2007-06在解放军总医院第二附属医院器官移植完成。 对象：选择难治性排斥反应导致移植肾切除患者40例,所有移植肾标本石蜡切片均由解放军总医院第二附属医院病理科提供,移植肾存活时间大于5年者17例,小于5年者23例。 方法：应用C4d多克隆抗体对移植肾组织石蜡切片行免疫组织化学染色,检测C4d在切除移植肾中的表达情况,运用图像分析系统在显微镜下测量C4d阳性细胞的体视学参数。 主要观察指标：患者性别、年龄、冷缺血时间、热缺血时间、免疫抑制方案、移植后高血压以及是否为2次移植,C4d细胞群在移植肾标本中的分布情况,体视学分析结果。 结果：40例切除移植肾中C4d阳性17例（42.5％）,移植肾存活时间小于5年者的C4d细胞阳性率明显大于存活时间大于5年者（70.6％,29.4％）。移植肾组织中C4d阳性沉积与移植供受者的年龄、性别、免疫抑制方案、冷、热缺血时间以及是否为2次移植无关。存活时间大于5年的移植肾组织中C4d阳性细胞体视学参数核体密度、核表面积密度均小于存活时间小于5年者（F=12.741 5,9.733 7,P < 0.01）。 结论：C4d阳性沉积预示着移植肾功能预后较差,移植肾组织中C4d阳性细胞的核体密度、核表面积密度是影响其存活时间的重要指标。     

应用供体抗原特异性CD4+CD25+ Treg细胞延长大鼠移植肾的存活

背景：随着磁分选技术的完善,体外分选、扩增足量的对移植抗原具有特异性的细胞已成为可能,但就其在体内应用剂量及免疫耐受的效能问题目前鲜有报道。 目的：探索供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞在体内应用诱导移植免疫耐受的量效关系。 方法：以SD大鼠为供体、Wistar大鼠为受体,建立同种异体肾移植动物模型;体外分选、富集Wistar大鼠脾脏CD4+CD25+Treg细胞,并诱导其对SD大鼠供体抗原的特异性表型;根据不同数量(2×105、5×105、1×106、2×106)供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞在肾移植中单剂量尾静脉注射,并以未注射组为对照。术后15 d分析移植肾脏存活状况。术后4,9,15 d采血检测各组肌酐水平,同时进行移植肾脏病理检查,按照Banff Schema标准进行诊断,并根据Watanabe的方法进行半定量评分。 结果与结论：术后15 d内对照组死亡率最高83.3%,2×105组次之66.7%,2×106组为58.3%,5×105组为33.3%,1×106组则全部存活;各实验组术后4,9,15 d血肌酐水平均明显低于对照组(P < 0.05,P < 0.01);术后第9,15天,2×105组、5×105组血肌酐水平均明显高于1×106组、2×106组(P < 0.05);术后第4,9,15天移植肾脏病理检查的半定量评分结果显示,各时间段5×105组、2×105组与对照组间差异无显著性意义,各时间段1×106组与2×106组优于对照组 (P < 0.05)。结果初步证实供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞受体内应用能够改善大鼠移植肾功能,延长移植肾存活时间,1×106为相对理想的单次应用剂量。     

CD40-CD40 L在颈动脉粥样硬化斑块稳定性中的作用及与基质金属蛋白酶的相关性

目的 观察CD40、CD40L和基质金属蛋白酶9(MMP9)在人类颈动脉粥样硬化斑块中的表达情况,探讨CD40、CD40L在斑块稳定性中的作用及与MMP9表达的关系.方法 将因颈动脉粥样硬化狭窄(>70%)行颈动脉内膜切除术的37例手术标本分为有临床脑卒中事件组(A组,n=20)和无临床脑卒中事件组(B组,n=17),另设尸检正常颈动脉(C组,n=11)作为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组斑块中CD40、CD40L和MMP9 mRNA水平,Western blot检测各组CD40、CD40L和MMP9蛋白表达水平,免疫组织化学检测各组CD40、CD40L和MMP9表达及分布,并对CD40、CD40L与MMP9的转录及表达水平作相关性分析.结果 A、B、C 3组的CD40mRNA的相对表达量分别为:2.41±0.43、1.03±0.38和0.31±0.12;MMP9 mRNA的相对表达量分别为:6.88±1.57、1.90±0.44和0.39±0.12.A组CD40、MMP9的mRNA水平高于B组(FCD40=105.183,FMMP9=160.395,P=0.000),B组高于C组(FCD40=37.307,FMMP9=124.093,P=0.000);CD40与MMP9的mRNA水平有正的直线相关关系(r=0.929,P=0.000),但各组CD40L的mRNA水平差异无统计学意义(FA-B=0.033,P=0.857;FB-C=1.564,P=0.767;FA-C=0.219,P=0.644).A组CD40、CD40L和MMP9的蛋白表达高于B组(FCD40=104.100,P=0.000;FCD40L=129.932,P=0.000;FMMP9=13.565,P=0.021),B组高于C组(FCD40=115.848,P=0.000;FCD40L=30.482,P=0.005;FMMP9=35.557,P=0.004).免疫组织化学示CD40、CD40L和MMP9的阳性表达面积A组大于B组(FCD40=39.451,FCD40L=57.606,FMMP9=30.711,P=0.000),B组大于C组(FCD40=95.066,FCD40L=59.081,FMMP9=145.758,P=0.000);CD40、CD40L与MMP9的阳性表达面积有正相关关系(rCD40L-CD40L=0.963,rCD40-MMP9=0.959,rCD40L-MMP9=0.929,P=0.000),并且CD40、CD40L和MMP9均在斑块肩部表达明显增多.结论 CD40-CD40L在动脉粥样硬化的形成和斑块稳定性中起重要作用;其可能通过上调MMP9导致斑块不稳定;CD40L可能是通过转录后修饰影响CD40L的表达,从而产生生物学效应.     

未成熟树突状细胞表面CD1d分子在体外移植免疫中的作用☆

背景：树突状细胞具有双向免疫调节作用,成熟树突状细胞激活免疫应答,而未成熟树突状细胞则倾向诱导免疫耐受。 目的：探讨鼠CD1d分子在未成熟树突状细胞诱导移植免疫耐受中的作用,以及在此过程中细胞因子的参与机制。 方法：利用vIL-10转染的BALB/c小鼠未成熟树突状细胞在体外用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因、脂多糖刺激成熟,经抗CD1d(anti-CD1d)干预。观察培养后的细胞表型、细胞因子表达。为探明CD1d分子在异体T细胞存在下的免疫作用,进行不同实验条件的初次、再次混合淋巴细胞培养(1stMLC、2ndMLC),观察T细胞增殖、细胞因子表达。 结果与结论：Anti-CD1d的干预降低了未成熟树突状细胞增殖异体T细胞的能力,anti-CD1d干预的未成熟树突状细胞致敏异体T细胞后其免疫功能低下;anti-CD1d干预在异体T细胞存在时影响未成熟树突状细胞在功能上的成熟,主要表现在抑制白细胞介素12的分泌,加强白细胞介素10的分泌。     

红细胞CD58在健康施灸人群中的表达：40例变化分析*

背景：CD58是一种糖蛋白,属于免疫蛋白超家族成员,广泛表达于人体各种免疫细胞和红细胞,是红细胞调控T细胞免疫功能的重要天然免疫物质基础。 目的：通过在神阙、关元等传统保健穴上施灸,观察对健康人群红细胞CD58表达的影响。 设计、时间及地点：前后对照、调查分析。于2008-03/12在山西中医学院实验中心完成。 对象：选择山西中医学院在校健康大学生40例,男女各20例,平均年龄21.08岁。受试者均知情同意。 方法：将以熟地、山药、山茱萸等为主方的药物制成药饼置于受试者神阙、关元、足三里、脾俞、肾俞等穴施灸,隔日1次,共灸10次,进行施灸前后的对比。 主要观察指标：在施灸前、后分别进行血细胞的常规检查,流式细胞仪测定红细胞表面CD58分子的阳性百分率和平均荧光强度。 结果：施灸后红细胞、白细胞数量较施灸前显著升高(均为P < 0.01);与施灸前相比,红细胞CD58分子的阳性百分率和平均荧光强度均明显高于施灸前(均为P < 0.01)。其中,红细胞CD58荧光强度的变化尤为突出。 结论：红细胞CD58分子数量表达与艾灸密切相关,隔药饼灸增强了机体的免疫调节功能。     

大部分肝切除模型大鼠肝再生组织中CD34蛋白及Delta-like-1蛋白的表达**☆

背景：当肝脏受到严重损伤或肝脏大部分缺失时,肝干细胞迅速分裂增殖向成熟肝细胞分化修复肝组织,但肝再生是一个复杂的多信号分子调控的过程,参与调控的相关基因及蛋白质目前尚不十分清楚。目的：观察大部分肝切除后大鼠肝再生组织中CD34蛋白、Delta-like-1蛋白的表达变化。方法：切除2/3肝脏建立大鼠肝再生动物模型,应用苏木精-伊红染色、酶组织化学染色、免疫组织化学染色方法在不同时间点检测肝再生组织中ATP酶、增殖细胞核抗原、CD34、Delta-like-1蛋白的表达情况。结果与结论：在肝再生的启动阶段ATP酶表达下调,CD34、Delta-like-1表达上调;在肝再生的持续增殖阶段,ATP酶表达上调到正常水平,CD34、Delta-like-1表达下调;增殖细胞核抗原表达为持续上调。说明ATP酶、CD34、Delta-like-1在不同阶段表达不同,提示在肝再生过程中各信号分子的协同作用及Notch- Delta信号通路参与其作用机制。     

髓鞘抗原特异性CD8+T细胞在MS/EAE脑组织免疫豁免中作用的研究进展

对多发性硬化(MS)及其动物模型实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)中T细胞迁移的研究长期关注于CD4~+T细胞。活细胞成像研究提供CD4~+T细胞进入CNS的3种可能途径,而且发现必须连续破坏两种不同的组织屏障。但近年来发现CD8~+T细胞在MS/EAE发病中的重要地位,同时它们的迁移,并显示其机制与CD4~+T细胞的机制不同。因此,我们综述了MS/EAE中髓鞘抗原特异性CD8~+T细胞的体内迁移和免疫豁免的国内外最新研究进展,以期了解它们与MS/EAE发病的精确机制。     

CD4O及基质金属蛋白酶在颈动脉内膜剥脱术斑块中的表达及影响斑块稳定性的研究

目的 研究CD40及基质金属蛋白酶(MMPs)在颈动脉易损斑块及稳定斑块中的表达,探讨CD40与MMPs表达的相关性及影响斑块稳定性的可能机制.方法 收集颈动脉内膜剥脱术(CEA)后的粥样硬化斑块标本32例次,根据术前颈动脉超声、经颅多普勒(TCD)及是否发生急性缺血性脑卒中事件分为易损斑块组及稳定斑块组,采用PCR和Western blot法检测两组标本中CD40及MMPs的mRNA和蛋白表达水平.结果 易损斑块组CD40和MMP-9 mRNA及蛋白表达水平均较稳定斑块组显著增高(P＜0.01);MMP-2蛋白表达水平亦较稳定斑块组明显增高(P ＜0.01);CD40mRNA与MMP-2 mRNA(r=0.43)、CD40 mRNA与MMP-9 mRNA(r=0.90)之间呈正相关(P＜0.05).结论 CD40不但参与动脉粥样硬化斑块的形成,而且可能通过调控MMP-2、MMP-9的表达影响动脉粥样硬化斑块的稳定性.     

CD40配体在血清AChRab阳性和阴性重症肌无力发病机制中作用的探讨

目的 :研究CD40配体在血清阳性重症肌无力 (SPMG)和血清阴性重症肌无力 (SNMG)主要致病因素产生中的作用。结果 :无论SPMG或SNMG ,外周血单个核细胞体外培养后上清液中γ干扰素 (IFN γ)、白细胞介素 4(IL 4)、抗乙酰胆碱受体抗体 (AChRab)和抗突触前膜受体抗体 (Prsmab)均比健康对照组非常显著增高 (P =0 0 0 0 )。抗CD40L单克隆抗体 (anti CD40Lmonoclonalantibody ,CD40LMcAb)干预后 ,SPMG组与健康对照组的差异无统计学意义 (P >0 0 5 ) ,SNMG组只有PsmRab与健康对照组的差异无统计学意义 (P >0 0 5 ) ,而IFN γ、IL 4和AChRab的水平虽有所下降 ,但仍显著高于健康对照组 (P <0 0 5 )。结论 :SNMG的AChRab、IFN γ和IL 4可能还通过其他途径产生 ,存在其他发病机制。     

Differences of soluble CD40L in sera and plasma: implications on CD40L assay as a marker of thrombotic risk

INTRODUCTION: Soluble CD40L (sCD40L) ELISA has emerged as a promising predictor of poor outcomes in acute coronary syndrome. Yet many blood processing techniques have been used with little consideration of their effect on the results. METHODS: We measured sCD40L by ELISA in 10 patients with thrombocytopenia and 12 with normal or high platelet counts and 8 healthy controls using three sampling techniques: serum clotted on ice (serum-I) or at room temperature (serum-RT) and platelet poor plasma (PPP). RESULTS: Serum-RT samples, compared to serum-I, gave significantly higher CD40L values (p=0.003), demonstrating that ex vivo sCD40L release by activated platelets is inhibited by cold temperature. Although serum-I and PPP were comparable in patients with normal platelet counts, serum-I gave significantly higher values than PPP in the thrombocytosis group (p=0.01), suggesting that cold inhibition is insufficient in the latter group. To estimate the fraction of sCD40L that was microparticle-bound CD40L (mp-CD40L), 16 samples underwent 0.1-microm filtration. 50.6% of sCD40L was mp-CD40L in serum-RT, whereas 21.3% and 29.9% were observed in serum-I and PPP, respectively. Lastly, plasma sCD40L was assayed in 46 patients with and 35 without thrombosis. Plasma sCD40L did not correlate with platelet count in non-thrombotic, non-inflammatory patients but did (p<0.01) in those with thrombosis. CONCLUSIONS: Sample processing and temperature profoundly affect sCD40L assay. Serum-I and PPP minimize the release of sCD40L ex vivo and better represent sCD40L in vivo. However, PPP may be preferable particularly in patients with thrombocytosis. The existence of mp-CD40L highlights the importance of centrifuge conditions.     

肾移植术后超延迟肾功能恢复15例治疗体会

背景：肾脏移植患者急性排斥反应已不再成为术后的主要并发症,延迟肾功能恢复和慢性移植肾肾病仍然是移植患者术后需要面对的问题。目的：总结分析15例术后发生超延迟肾功能恢复的肾移植患者资料,探讨临床经验及治疗对策。 方法：对肾移植后发生超延迟肾功能恢复患者15例进行回顾性分析。15例患者移植后均采用常规剂量的半量(环孢素A 3.0~4.0 mg/kg,他克莫司0.5~1 mg/kg),并定期监测血药浓度,随时调整免疫用药剂量,采用血液透析/连续性肾脏替代治疗。分析超延迟肾功能恢复诱因,患者观察患者肾功能恢复情况。 结果与结论：术中低血压、供肾热缺血时间过长、早期急性排斥反应、环孢素中毒、外科并发症、动脉粥样硬化致移植肾血液灌流不足可能为患者超延迟肾功能恢复的诱因。患者术后由少尿期开始进入多尿期时间最长者为108 d,平均32~108 d。肾功能正常8例(血清肌酐78~135 μmol/L),肾功能轻度异常5例(血清肌酐135~300 μmol/L),血清肌酐> 300 μmol/L者2例。随访时间最长1例11年,至今移植肾功能正常。结果提示,肾移植后尽早行移植肾穿刺活检及移植肾彩超,根据结果采取综合治疗并制订个体化治疗方案可以使大多数的患者移植肾功能恢复正常。     

Expression of CD40 in the brain of Alzheimer's disease and other neurological diseases

We have investigated immunohistochemically the expression of CD40 in post-mortem human brain tissues. In control brain, the blood vessels were stained weakly for CD40. Vascular expression of CD40 was enhanced in the lesions of Alzheimer's disease and some other neurological diseases. In such diseases, reactive microglia were also positive for CD40. The results of this study suggest that CD40 expression by microglia is up-regulated upon a variety of brain insults and is not limited to lesions with amyloid beta-protein deposits.     

肾移植受者血清sFas和sFasL变化及在早期急性排异反应预测中的应用

背景：细胞凋亡在移植免疫和移植物功能丧失发生过程中起十分重要的作用,其中Fas/FasL系统被认为是细胞凋亡参与肾移植的急性排异反应过程的主要途径之一。 目的：分析肾移植受者术后血清sFas和sFasL水平变化及其在预测早期急性排异反应中的应用价值。 方法：肾移植受者80例分为肾功能稳定组(49例)、急性排斥反应组(23例)和环孢素A中毒组(8例)。另选择性别、年龄与肾移植受者相匹配的健康体检者50例为对照组。肾移植受者术后均常规使用环孢素A+硫唑嘌呤+泼尼松三联免疫抑制治疗。发生急性排斥反应时给予每日甲基强的松龙6~8 mg/kg冲击治疗,3 d为1个疗程。采用ELISA法检测患者手术前后的血清sFas和sFasL水平。 结果与结论：肾移植组患者手术前的血清sFas和sFasL水平均明显高于对照组(P < 0.05)。急性排斥反应组血清sFas、sFasL水平高于相同时间段肾功能稳定组(P < 0.05)。环孢素A中毒的肾移植患者术后各时间点血清sFas、sFasL水平变化与肾功能稳定组基本相同,差异无显著性意义。提示动态监测血清sFas、sFasL水平可能对早期诊断及鉴别诊断肾移植急性排斥反应具有重要参考价值。     

肾移植患者围术期麻醉管理：40例资料回顾

背景：从肾移植患者围术期血生化检测结果可以看到,一些酸碱指标及生化指标的变化可能与血液稀释有关。 目的：通过监测肾移植患者围术期血流动力学的变化以及电解质、血生化的改变,麻醉药物使用情况,探讨肾移植患者理想的麻醉管理方法。 方法：分析40例肾移植患者麻醉前、肾动脉血流开放前、血流开放后10 min、手术结束时(T4)各时点平均动脉压、中心静脉压、心率、电解质、血糖和血气参数的变化。 结果与结论：与肾移植患者麻醉前比较,血流开放后10 min平均动脉压、中心静脉压、pH、HCO3-、BE显著降低(P < 0.01),K+和葡萄糖明显增加(P < 0.01)。与肾动脉血流开放前比较,血流开放后10 min平均动脉压、葡萄糖、pH、HCO3-、BE明显降低而心率明显增高(P < 0.05)。说明充分的移植前准备,合理的麻醉药物选择,以及围术期的循环、呼吸及水电解质酸碱平衡的维持是肾移植术全身麻醉成功的关键。     

Role of renal nerve activity, plasma catecholamines and plasma vasopressin in cardiovascular responses to intracisternal neurotoxins in the rabbit

We have examined the acute (0-3 h) effect of intracisternally administered 5,7-dihydroxytryptamine (DHT) and 6-hydroxydopamine (6-OHDA) on blood pressure, heart rate, renal nerve activity, plasma adrenaline, plasma noradrenaline and plasma vasopressin in conscious rabbits. The increase in blood pressure seen following 5,7-DHT treatment was associated with increases in adrenaline and vasopressin levels and renal nerve activity throughout the response. The increase in blood pressure which followed 6-OHDA administration was associated with an increase in renal nerve activity alone. These findings indicate that the rise in blood pressure elicited by these drugs involves an increase in sympathetic nerve activity. The absence of a rise in vasopressin levels during the response to 6-OHDA suggests that the rise in blood pressure seen in these animals is due entirely to a bulbospinal sympathoexcitatory pathway.     

Chiari malformation in adults: a review of 40 cases

Forty adult patients (average age 40 years), with the clinical and radiological features of the Chiari malformations, were seen at the Toronto Western Hospital between 1967 and 1984. Surgical confirmation of the diagnosis was obtained in 32 cases; of these, 23 were classified as Chiari I malformation while 9 fulfilled the anatomic criteria of Chiari II. The patient population consisted of 22 males and 18 females. Common presenting symptoms included head and neck pain (60%), sensory complaints (60%), upper extremity weakness (42%), and gait disturbance (40%). Neurological findings included signs of central cord dysfunction (73%), long-tract motor and/or sensory findings (58%), brainstem signs (38%), cerebellar dysfunction (18%), and increased intracranial pressure (15%). The majority of patients underwent myelography with or without computed tomography of the cervical-medullary junction. Two recent patients had 0.15T MRI scans which helped demonstrate an intramedullary syrinx. Thirty-three patients underwent 47 operative procedures (discounting spinal fusion and CSF shunt revisions). Open surgical management was performed in 32 patients, with CSF shunting along in one patient. Five patients (15%) incurred surgical complications within a six week postoperative period. Follow-up to date, ranges from one month to 11 years. In the 33 surgically treated patients, 18 are improved (55%), 10 are neurologically stable (30%), and five have worsened clinically (15%), including one death. Based on this study it appears that the Chiari II malformation may be more common in adults than previously recognized. Surgical intervention has a favourable outcome in the majority of patients but a significant proportion continue to deteriorate.