中药白龙与HMBA对人癌周期细胞CKI-P16的调控

目的 :研究中药白龙与西药环六亚甲基二乙酰胺 (HMBA)对人癌细胞中周期蛋白抑制因子P16的表达与调节。方法 :采用Northernblot、Westernblot等方法检测人癌细胞在白龙或HMBA作用下P16的表达调节。结果 :在白龙或HMBA作用下癌细胞G1期P16的表达增加 ,这一作用与cAMP PKA和DAC PKC两套信号通路共调节作用密切相关。当以PKA抑制剂阻断PKA通路时 ,P16表达下降 ,相反当PKC通路被阻断时P16表达水平升高。结论 :(1)癌细胞G1期P16的低表达 (与其他时相比较 )可能是P16不能有效抑制癌细胞恶性变化的重要原因。 (2 )白龙和HMBA对肿瘤细胞的增殖抑制机理与G1期细胞P16表达升高相关。 (3)白龙和HMBA对人癌细胞内P16的表达调节表现了中西药对肿瘤细胞调节机理的共性。 (4 )首次阐明了P16上游调控与cAMP/PKC信号通路密切相关。     

中药白龙片与HMBA对人胃癌不同周期细胞癌基因与抑癌基因表达调控的共性研究

目的：探讨复方中药白龙片与环六亚甲基二乙酰胺（HMBA）对人胃癌（MGC80－3）细胞不同周期时相细胞癌基因c-H-ras、c-myc，抑癌基因Rb、p53和p21以及PKC－α基因表达的影响。方法：采用Northern印迹法检测基因表达情况。结果：MGC80－3细胞不同周期时相用中药白龙片或HMBA处理，癌基因c-H-ras和c-myc的表达下降，多数周期的抑制率达50．0％以上；促增殖的信使激酶亚类PKC－α基因的表达基本与癌基因表达抑制相似。两类药物对抑癌基因的影响则有显著差异。HMBA处理细胞后，Rb与p21在G1期的表达不是增加而是下降，抑制率分别为39．5％和33．3％，Rb在S期也抑制3．0％。而中药白龙片对Rb与p21在各个周期内均是促进表达的作用，有的周期升高1－2倍以上。但是中药白龙片对抑癌基因p53的表达作用和HMBA都很近似，各个周期都有显著增加，多数时相达125．0％－233．4％。结论：（1）中药白龙片对癌基因和抑癌基因的调节作用基本与诱导分化剂HMBA相似，但中药白龙片的作用优于HMBA。（2）中药白龙片或HMBA对MGC80－3细胞增殖抑制和促分化作用的分子机理和两类药物对细胞周期内癌基因与抑癌基因调节相关。     

中药白龙与环六亚甲基双已酰胺对人胃癌不同周期细胞生长与表型调节的共性研究

目的：对比研究中药复方白龙与西药诱导分化剂环六亚甲基双已酰胺（Hexamethylen bisace-lamide,HMBA）对人胃癌MGC80－3不同周期细胞的生长与表型调节的共性作用。方法：采用高压笑气加胸腺嘧啶脱氧（TdR）双阻断法将MGC80－3细胞分别同步于G1、S、G2、M4个时相，用中药复方白龙和HMBA分别处理各时相细胞。结果：实验结果表明中药白龙或HMBA对MGC80－3不同周期细胞具有显著的增殖抑制作用，抑制率达46.2%－75.3％。细胞在软琼脂上的生长势态和细胞周期中中的增殖抑制相似，但在S与G2期中中药白龙的作用优于HMBA。与此同时细胞质微丝组装，除M期外，均显著增加。结论：中药白龙与HMBA对人胃癌MGC80－3各时相细胞的生长与分化表型作用具有明显的共性特征，为促进中西医结合提供理论认识基础。     

复方中药白龙对人胃癌BGC82-3细胞恶性增殖表型的影响

目的：观察复方中药白龙（简称白龙）对人胃癌ＢＧＣ８２－３细胞恶性增殖表型的逆转作用方法：通过测定生长曲线、软玉脂集落及裸鼠致瘤实验，观察人胃癌ＢＧＣ８２－３细胞增殖的变化。结果：（１）生长曲线表明白龙明显３了ＢＧＣ８２－３细胞的增殖到第５天抑制率达８６％。（２）经白龙处理的ＢＧＣ８２－３细胞在软玉脂中形成的集落小且少，与对照组比交集落形成率仅为５２％。（３）白龙明显抑制接种ＢＧＣ８２－３细胞的裸鼠     

复方中药白龙对G1期人胃癌细胞中抑癌基因的影响及与PKA信号通路的相关性

目的：探讨复方中药白龙对人胃癌ＢＧＣ８２－３Ｇ１期细胞周期蛋白激酶抑制因子（ＣＫＩ）ｐ１６＾ＩＮＫ４ａ，ｐ２１以及Ｒｂ，ｃ－ｍｙｃ等基因转录的影响和ｃＡＭＰ－ＰＫＡ信号通路的调节关系。方法：通过实验室常规分子生物学手段（细胞同步化，分子杂交－Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交，Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交等）检测相关基因的表达变化。     

论补肾中药在妇科周期疗法中对生殖内分泌的调控作用

自1963年中医周期疗法创立以来,即被广泛应用于妇科临床,并取得了较好疗效。近年来中医周期疗法在临床指导选方用药上有了很大的发展和提高,补肾中药在该法中一直占有极其重要的地位。随着对生殖内分泌探索的深入,补肾中药的实验与临床研究取得进一步进展。故妇科周期疗法中使用补肾中药对神经内分泌的调控做一论述。     

甲基莲心碱对人脐静脉血管平滑肌细胞增殖及Cyclin D1，P^21Wafl/Cip1表达的影响

目的：观察甲基莲心碱对人脐静脉平滑肌细胞（HUVSMCs）增殖,Cyclin D1及P^21Wafl/Cip1表达的影响,旨在探讨甲基莲心碱作用的分子机制。方法：采用MTr法和流式细胞仪观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）及甲基莲心碱对HUVSMCs增殖的影响。用免疫印迹法检测CyclinD1及P21Wafl／Cipl蛋白表达,以半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测CyclinD1及P21Wafl／CiplrnRNA的表达。结果：AngII对HUVSMCs有明显促增殖作用,其促增殖效应在24h达到峰值,且在0．001-0．1μmol／L浓度范围内有剂量依赖关系。甲基莲心碱呈剂量依赖性地抑制AngⅡ诱导的HUVSMCs增殖,同时可抑制AngⅡ诱导的CyclinD1蛋白及mRNA的表达,促进P^21Wafl/Cip1蛋白及mRNA表达。结论：甲基莲心碱可通过下调CyclinD1及上调P^21Wafl/Cip1的表达阻滞细胞周期的进程,从而抑制血管平滑肌细胞的增殖,是一种有效的抑制血管平滑肌细胞增殖的药物。     

中药胃康宁对胃癌细胞生长与胃癌细胞周期调控因子的影响

目的 观察中药胃康宁含药血清对胃癌细胞生长与胃癌细胞周期调控因子CyclinD2、CyclinE、Cdk2（Cyclin dependant kinase2,CDK2）Cdk4、Cdk6和p16^INK4a、p27^KIP1mRNA及其蛋白表达的作用。 方法 分别将高、中、低不同剂量的中药胃康宁制剂对SD大鼠进行灌胃,制备含药血清,然后分别用不同剂量含药血清培养胃癌细胞,用流式细胞仪检测细胞周期的变化;采用免疫组织化学SABC法及RT-PCR法检测各组胃癌细胞中CyclinD2、CyclinE、Cdk2、Cdk4、Cdk6和p16^INK4a、p27^KIP1蛋白和mRNA的表达。 结果 中药胃康宁能将增殖过程中的MGC-803胃癌细胞阻滞于G0-G1期,使之不进入或延迟进入S期（即DNA合成期）,抑制胃癌细胞的生长;免疫组化法结果显示,与空白对照组比较,中药胃康宁高、中剂量组CyclinE和Cdk2,CyclinD2和Cdk4、Cdk6蛋白均有明显升高,而p27KIP1、p16INK4a蛋白则显著降低（P＜0.01）;RT-PCR结果显示,中药胃康宁高、中剂量组均能明显降低CyclinD2、CyclinE、Cdk2和Cdk4、Cdk6 OPTD值,同时升高p27KIP1、p16INK4a OPTDI值（P＜0.01）。 结论 中药胃康宁可抑制胃癌细胞促细胞周期相关因子CyclinD2、CyclinE、Cdk2、Cdk4和Cdk6的表达,同时增强胃癌细胞周期抑制因子p27^KIP1、p16^INK4a的表达,这可能是中药胃康宁抑制胃癌细胞生长的作用机制。     

甲基莲心碱对人脐静脉血管平滑肌细胞增殖及Cyclin D1,P21Waf1/Cip1表达的影响

目的:观察甲基莲心碱对人脐静脉平滑肌细胞(HUVSMCs)增殖,Cyclin D1及P21Waf1/Cip1表达的影响,旨在探讨甲基莲心碱作用的分子机制。方法:采用MTT法和流式细胞仪观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及甲基莲心碱对HUVSMCs增殖的影响。用免疫印迹法检测Cyclin D1及P21Waf1/Cip1蛋白表达,以半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Cyclin D1及P21Waf1/Cip1rnRNA的表达。结果:AngⅡ对HUVSMCs有明显促增殖作用,其促增殖效应在24 h达到峰值,且在0.001-0.1μmol/L浓度范围内有剂量依赖关系。甲基莲心碱呈剂量依赖性地抑制AngⅡ诱导的HUVSMCs增殖,同时可抑制AngⅡ诱导的Cyclin D1蛋白及mRNA的表达,促进P21Waf1/Cip1蛋白及mRNA表达。结论:甲基莲心碱可通过下调Cyclin D1及上调P21Waf1/Cip1的表达阻滞细胞周期的进程,从而抑制血管平滑肌细胞的增殖,是一种有效的抑制血管平滑肌细胞增殖的药物。     

鸡血藤黄酮类有效部位通过CKI途径对人肺腺癌细胞A549细胞周期的影响

目的:从细胞周期蛋白激酶抑制因子(CKI)途径入手探讨鸡血藤黄酮类有效部位(SSCE)对人肺癌A549细胞的周期阻滞作用的分子机制。方法:采用RT-PCR法检测人肺腺癌A549细胞中p21、p27 mRNA表达;应用Western Blotting法测定人肺腺癌A549细胞中p21、p27蛋白表达。结果:160mg/L SSCE作用于人肺腺癌A549细胞24h后,细胞内p21 mRNA表达较对照组增加(P0.01);p21蛋白含量较对照组高(P0.01),而细胞内p27 mRNA表达及蛋白含量与对照组比较差异无统计学意义;160mg/L SSCE作用人肺腺癌A549细胞48h后,细胞内p21、p27 mRNA表达与对照组比较差异无统计学意义;细胞内p21、p27蛋白含量与对照组比较差异无统计学意义。结论:SSCE上调p21 mRNA转录水平及蛋白表达量是引起人肺腺癌A549细胞G2/M期细胞周期阻滞的机制之一;p21、p27对SSCE引起的人肺腺癌A549细胞G0/G1期阻滞无直接作用。     

复方白龙片对人胃癌细胞两条信号通路的调控

目的：观察复方白龙片，对人胃癌细胞内两条信号通共调作用。方法：分别测定不同状况下人胃癌ＭＧｃ８０－３细胞内ｃＡＭＰ水平、二酰基甘油（ＤＡＧ）含量、蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ）和蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性。结果白龙处理ＭＧｃ８０－３细胞３ｈ后，ｃＡＭＰ水平和ＰＫＡ活性分别较对照组升高１１２．７％和１９．７％，而ＤＡＧ含量与ＰＫＣ活性分别下降４７．０％和６４．２％；如用ＧＦ－１０９２０３Ｘ阻断ＰＫＣ通路时发现ｃ     

中药治疗尖锐湿疣10例

中药治疗尖锐湿疣１０例钱黎华，王侠生，杨蜀嵋尖锐湿疣是一种由人类乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染而引起的性传播疾病，现收集１０例单独用中药治疗的患者，并报告如下。临床资料（１）诊断标准：病史：患者有婚外性交史，或嫖娼史，或配偶感染史；体征：生殖器或肛门部位出...     

浸泡再生法治疗手指末端缺损伤1520例

浸泡再生法治疗手指末端缺损伤１５２０例山东省青岛市立医院（山东２６６０１１）王明明，丁华丽，祝迎宪，刘远征，李淑惠我们自１９８０年６月～１９９４年１１月临床应用浸泡再生法治疗手指末端缺损伤１５２０例，疗效满意，现报告如下。临床资料１５２０例患者，男１...     

青藤碱对肺癌模型大鼠抑癌基因P16 和P53 的影响

目的：本研究旨在探讨青藤碱对肺癌模型大鼠抑癌基因P16和P53的影响机制。方法：雄性SD大鼠40只,均采用左肺注射WALKER-256癌细胞悬液方法建立大鼠肺癌移植性模型,3周后筛选成瘤的大鼠30只,随机分为模型组、环磷酰胺组和青藤碱治疗组,另取健康SD大鼠10只设为正常对照组。青藤碱治疗组背皮下注射10%青藤碱治疗10周,环磷酰胺组注射环磷酰胺作为阳性对照,同时正常对照组和模型组注射生理盐水。治疗10周后取各组肺肿瘤测量瘤体积、瘤质量并计算抑瘤率;取肿瘤组织匀浆,流式细胞仪检测瘤体组织WALKER-256癌细胞在G1、G2、M和S四周期细胞比例;采用免疫组化法检测P16和P53蛋白阳性表达率,逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）测定P16mRNA和P53mRNA表达。结果：与模型组比较,青藤碱组抑瘤率达30.15%,P16和P53蛋白阳性表达率明显降低,P16mRNA和P53mRNA低表达,S期细胞比值、瘤体积和瘤质量明显降低、G1和G2期细胞比值提高（P＜0.05）。结论：青藤碱可能通过影响抑癌基因P16和P53表达,调节G1和G2和S期细胞比值而起到抑制大鼠WALKER-256移植性肺癌肿瘤细胞的分化和增殖。     

姜黄素抑制HepG2细胞HDAC1活性及促进P21WAF1/CIP1表达的研究

目的：研究姜黄素(curcumin,Cur)对HepG2细胞组蛋白去乙酰化酶HDAC1的作用及细胞周期依赖激酶抑制剂P21^WAF1/CIP1表达的影响,探讨Cur抗肿瘤的作用机制。方法：培养人肝癌细胞株HepG2,用Cur在不同浓度(6.25,12.5,25,50,100 μmol·L^-1)和不同时间(4,8,16,24,48 h)点处理细胞,提取细胞总蛋白和mRNA,Western blot蛋白质印迹技术检测HDAC1和P21^WAF1/CIP1蛋白表达,RT-PCR技术检测P21WAF1/CIP1 mRNA的表达水平。结果：Cur对HepG2细胞的半数抑制率(IC50)为25 μmol·L^-1。IC50浓度作用4 h,HDAC1表达开始降低,降低作用呈时间依赖性；12.5 μmol·L^-1,24 h可引起HDAC1水平降低,但在50～100 μmol·L^-1时HDAC1的降低未见明显差别。Cur作用8 h时可见到P21WAF1/CIP1蛋白和mRNA均增加；作用效应呈明显时间和剂量依赖性。结论：Cur明显抑制HDAC1活性和表达,促进P21^WAF1/CIP1蛋白和mRNA水平升高。抑制HDAC1活性和促进P21^WAF1/CIP1增加可能是Cur抗肿瘤的机制之一。     

白龙灵沙汤对非小细胞肺癌免疫功能的影响

目的:探讨中药白龙灵沙汤对非小细胞肺癌免疫功能的影响。方法:观察非小细胞肺癌60例,治疗组30例,对照组30例,治疗2个周期后进行比较。结果:与对照组比较,治疗组能够提高CD3+T细胞,CD4+T细胞百分比及CD4+/CD8+,降低CD8+T细胞百分比,提高NK细胞百分比,降低CD19+B淋巴细胞百分比。两组比较差异有显著性意义(P<0.05)。临床症状改善率治疗组为86.70%,而对照组为56.70%。两组比较差异有显著性意义(P<0.05)。治疗组与对照组相比能够显著提高行为状况评分,两组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论:中药白龙灵沙汤配合化疗能改善临床症状、提高生活质量,提高机体免疫功能。