高低不同分化特性人成骨肉瘤MG-63克隆细胞株的建立

目的：建立分化程度高低不同的骨肉瘤细胞株。方法：用有限稀释法将人成骨肉瘤MG-63细胞系单克隆化，并作如下鉴定：(1)细胞增殖；(2)细胞形态学；(3)软琼脂克隆形成率；(4)染色体分析；(5)细胞周期时相分析；(6)碱性磷酸酶的活性；(7)细胞运动能力；(8)裸鼠成瘤实验。结果：共得到23个克隆，命名为MG-63-1～MG-63-23。其中的5、18号细胞株具有明显差异，18号为大核长梭形细胞，无接触抑制，克隆形成率高，体内成瘤时间短，代表低分化的骨肉瘤细胞株。5号以短梭形为主，核质比例变小，有一定的接触抑制，致瘤能力较低，为高分化的骨肉瘤细胞株。结论：通过对骨肉瘤细胞系MG-63的单克隆化，建立了具有高、低不同分化程度的两个人骨肉瘤细胞株。     

多中心成骨肉瘤的治疗

目的探讨多中心成骨肉瘤的治疗方法。方法1998年1月至2005年6月治疗多中心成骨肉瘤患者9例，男7例，女2例。9例患者的临床特征、影像学表现、病理学检查均证实多中心成骨肉瘤的诊断。其中6例患者初诊时即存在多发骨肉瘤病灶；3例初诊时为单一骨肉瘤病灶，而后分别在确诊6、8、11个月出现第二处骨肉瘤病灶。1例患者因经济原因放弃治疗，其余8例患者接受阿霉素60mg／m^2,顺铂100mg／m^2,氨甲蝶呤8-12g／m^2长春新碱1．4mg／m^2、异环磷酰胺12．5g／m^2化疗1周期。化疗后根据病灶数目、部位以及对化疗的反应等决定包括手术、化疗在内的进一步治疗方案。对病灶数目较少、病灶可广泛切除的患者，如果化疗反应好，则在化疗的基础上广泛切除肿瘤，手术原则同单发性骨肉瘤；如果全身病灶数目多、部分病灶位于中轴骨等不易广泛切除的部位，则根据病情采取适当的姑息手术。对上述化疗反应差的患者，应用三氧化二砷、紫杉醇、VP-16化疗。结果放弃治疗的1例患者于确诊5个月后死于肿瘤引起的全身衰竭，5例初诊存在多发骨肉瘤病灶的患者平均生存时间9．8个月，其中2例对化疗反应好且完成4周期以上化疗的患者平均生存时间为15个月，对化疗反应差以及未能完成化疗的3例患者平均生存时间仅为7．1个月。3例病灶不同时出现的多中心成骨肉瘤患者平均随访2年，2例带瘤生存，无肺转移；1例无瘤生存。结论多中心成骨肉瘤预后较差，经积极的化疗，能够延长患者生命，改善预后。     

几丁糖对体外培养成骨肉瘤细胞生长的影响

几丁糖（Ｃｈｉｔｏｓａｎ）（又名壳聚糖、甲壳胺），是几丁质脱乙酰基衍生物，文献报道其医学用途广泛，具有促进伤口愈合、防止组织粘连、抗凝血、降脂、降胆固醇、抗溃疡作用；不仅对某些肿瘤细胞有抑制作用，而且也是多种抗肿瘤药物的良好载体，同时能活化机体免疫系...     

抗人成骨肉瘤单克隆抗体对人骨肿瘤定位显像的临床应用

作者使用１３１Ｉ标记抗人成骨肉瘤单克隆抗体（ＯＳＭｃＡｂ－Ｂ４）对１１例骨肿瘤及１例慢性骨髓炎患者进行肿瘤定位显像。６例成骨肉瘤和１例胚胎型横纹肌肉瘤呈阳性显像，骨软骨瘤、巨细胞瘤及骨髓炎等均呈阴性。结果证实ＯＳＭｃＡｂ－Ｂ４对成骨肉瘤组织有较好的特异性，使用核素标记该抗体对骨肿瘤进行放射免疫显像，是目前诊断成骨肉瘤较特异、有效的方法     

甲氨蝶呤-聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米囊对人成骨肉瘤细胞株的体外实验研究

[目的]研究甲氨喋呤-聚乳酸-羟基乙酸共聚物(MTX-PLGA)共聚物纳米囊的体外抑制效应。[方法]采用复乳法-溶剂挥发法制备MTX-PLGA共聚物纳米囊;用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度及不同时间MTX-PLGA共聚物纳米囊体外对人成骨肉瘤细胞株的抑制效应,以及与游离MTX对人骨肉瘤细胞株的抑制率相比较,并计算药物的半数抑制率IC50和对肿瘤细胞MG63的生长抑制率。[结果]不同浓度组在相同时间点的肿瘤细胞生长抑制率随药物浓度的增加而升高,不同浓度组间抑瘤率差异明显(P<0.05);在游离MTX组中,第3~6 d MTX-PL-GA组有显著的差异性(P<0.05)。[结论]MTX-PLGA共聚物纳米囊可以作为MTX的有效缓释载体,实现化疗药物控释释放,延长化疗药物对肿瘤的有效作用时间。     

^Ⅰ—抗人成骨肉瘤单克隆抗体在荷瘤裸鼠体内的放射免疫显像

利用杂交瘤技术制备了抗人成骨肉瘤单克隆抗体（ＯＳ－ＭｃＡｂ），获得了ＯＳ－ＭｃＡｂ２两株特异性抗体。经＾１２５Ⅰ标记及荷瘤裸鼠体内放射免疫显像证明，ＯＳ－ＭｃＡｂ２明显优于ＯＳ－ＭｃＡｂ１，实验进一步证明ＯＳ－ＭｃＡｂ２对人肝细胞癌无交叉反应性。本研究为ＯＳ－ＭｃＡｂ２今后于临床显像诊断及导向治疗提供了前提条件。     

直接原位RT-PCR检测人成骨肉瘤MG-63细胞株雌激素受体亚型表达

目的观察人成骨肉瘤MG63细胞株雌激素受体亚型mRNA表达特征。方法用直接原位RTPCR及激光共聚焦显微镜观察MG63细胞株在培养第6及第9天ERα、ERβmRNA表达。结果各检测点均见一定量的荧光弥散于细胞内。阳性对照点荧光较其他两点强,阴性对照点荧光明显减弱,仅见少量背景荧光。ERα的荧光强度强于ERβ。结论(1)MG63细胞株作为成骨细胞模型,存在ERα和ERβ基因的mRNA表达。(2)骨基质成熟早期阶段MG63细胞株的ERα表达比ERβ丰富,这表明两者在功能上存在差异。     

人成骨肉瘤细胞系SOSP-9607的建立及其生物学特性的观察

目的 建立人成骨肉瘤细胞系。方法 采用原代组织培养法对成骨肉瘤手术标本进行培养,对存活细胞进行形态学观察、组织化学染色、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）同工酶谱、细胞周期检查、核型分析、异种移植。结果 建立细胞系ＳＯＳＰ－９６０７,其形态学表现、组织化学染色、ＬＤＨ同工酶谱等均符合成骨肉瘤的特征。经１年体外培养,已连续传代１２０次,细胞倍增时间２９．８ｈ,细胞周期测定Ｇ１期为４８．２％、Ｇ２期为２０．９％、Ｓ     

三氧化二砷抗人骨肉瘤细胞株MG-63的实验分析

目的:探讨三氧化二砷(Arsenic Trioxide,As2O3)对人成骨肉瘤细胞株MG-63的抑制作用及机制.方法:将MG-63细胞于37℃,5％ CO2等实验条件下传代培养,等细胞进入对数生长期后再进行操作.采用以下实验方法:MTT检测:将MG-63细胞接种于96孔板,测定As2O3对MG-63细胞的半数抑制浓度(IC50),然后测定药物终浓度分别为0、As2O3的IC50、对MG-63细胞的抑制率.结果:MTT法测定As2O3对MG-63细胞的IC50为2.15μmol/ml,IC50浓度的As2O3MG-63细胞的抑制率分别为(52.20±0.19)％结论:低浓度的As2O3抑制骨肉瘤细胞增殖和诱导凋亡的能力均有明显增强.     

不同转移特性人成骨肉瘤MG-63细胞亚系的建立及特征

目的：建立高低不同转移特性人成骨肉瘤MG-63细胞亚系并研究其生物学特性。方法：通过体外克隆技术和体内移植，筛选并建立了6个细胞亚系，测量其细胞电泳率，细胞增殖率，利用琼脂克隆形成实验和裸鼠体内成瘤实验，比较各细胞亚系的转移特性。结果：A2、A3、A16亚系的细胞电泳率、细胞增殖率、琼脂克隆形成能力和肺转移灶形成率均明显高于A1、A6、A20亚系。结论：通过体外克隆技术和体内移植的方法可建立不同转移特性的MG-63细胞亚系，有助于骨瘤转移机理的进一步研究。     

顺铂诱导人成骨肉瘤耐药细胞系的建立及生物学特性研究

目的：建立顺铂诱导的人成骨肉瘤多药耐药细胞系MG63／R并观察其生物学特性。方法：以顺铂为诱导剂,采用大剂量冲击与逐步增加剂量相结合的方法诱导人成骨肉瘤MG63细胞,建立多药耐药系MG63／R。MTF法检测药物敏感性：光镜、透射电镜观察MG63、MG63／R细胞形态及超微结构变化;生长曲线、克隆形成试验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期、凋亡指数、P—pg、bcl-2、p53蛋白表达。结果：经顺铂186d的诱导建立了MG63／R,MG63／R对顺铂的耐药指数为83．557,对阿霉素、长春新碱、氨甲蝶呤、环磷酰氨亦产生不同程度的交叉耐药;光镜观察可见MG63／R细胞排列不规则,形态呈三角形、多角形及多核现象;透射电镜显示MG63／R细胞表面突起增加,粗面内质网丰富;细胞周期分析显示细胞增殖能力明显增加而细胞凋亡明显降低;MG63／R细胞P—pg、bcl-2阳性表达较MG63细胞明显增加,p53表达则明显降低。结论：本研究建立了稳定的人成骨肉瘤多药耐药细胞系（MG63／R）,为进一步研究顺铂的多药耐药机制和耐药治疗提供了一种新的实验模犁。     

三氧化二砷联合化疗治疗Ⅲ期成骨肉瘤、尤文肉瘤的初步报告

目的 探讨三氧化二砷（Arsenic trioxide,As2O3）联合化疗治疗转移性成骨肉瘤、尤文肉瘤的可行性。方法自2002年12月至2005年6月,32例转移性成骨肉瘤、尤文肉瘤患者接受了以三氧化二砷为主的二线化疗方案。其中男性19例,女性13例,年龄7～32岁。成骨肉瘤27例,尤文肉瘤5例;肿瘤转移部位包括肺转移25例,多发骨转移7例。所有病例均为手术后患者,术前及术后共接受过4～6周期的规范化疗。化疗方案：三氧化二砷、VP-16、紫杉醇。化疗2个周期28例,3个周期4例。结果所有患者均获得随访,随访时间6～36个月,平均20个月。经三氧化二砷联合化疗2个疗程后,5例完全缓解（15．6％）,转移病灶消失,无新发病灶出现;6例部分缓解（18．8％）;13例稳定（40．6％）,转移病灶无明显缩小,但出现明显钙化,其中完全钙化2例,部分钙化11例;8例进展（25％）,肿瘤体积增大或转移数目增多。21例治疗前碱性磷酸酶或乳酸脱氢酶增高的病例,9例（42．9％）明显下降。32例患者中病情持续稳定,肿瘤得到控制者24例,病情加重5例,死亡3例。结论三氧化二砷是一种低毒、有效的化疗药物,对于Ⅲ期成骨肉瘤、尤文肉瘤患者有较好的近期临床疗效。     

外源性一氧化氮对骨肉瘤细胞株表面超微结构的影响

目的：研究外源性一氧化氮（NO）作用于体外培养的骨肉瘤细胞株（HOS）后细胞表面形态的变化，推测其对HOS侵袭能力的影响。方法：在OS培养液中加入不同浓度的硝普钠（SNP）以产生外源性的NO，通过扫描电镜，观察骨肉瘤细胞株表面形态的超微结构变化。结果：不同浓度的SNP在体外均可改变细胞表面形态，浓度越高，细胞表面的绒毛或突起越少，伸展范围也越小，而对照组细胞表面的绒毛突起丰富且向周围伸展。结论：NO可以减少骨肉瘤细胞株表面的绒毛突起，使其侵袭和转移能力下降。     

巨噬细胞来源外泌体成骨作用研究进展

骨骼完整性受到多种因素影响,其修复和再生是一个复杂过程。现有研究发现,外泌体能够调控骨髓间充质干细胞等成骨过程相关细胞的生物学行为,影响其成骨作用。该文回顾近年来巨噬细胞来源外泌体成骨作用相关研究文献,通过讨论巨噬细胞极化亚型影响、外界因素影响、骨组织工程应用和微RNA调控机制等,分析巨噬细胞外泌体的成骨调控作用,为后续基础研究和临床应用提供参考依据。     

不同转移特性人成骨肉瘤MG-63细胞亚系的建立及特征

目的:建立高低不同转移特性人成骨肉瘤MG-63细胞亚系并研究其生物学特性.方法:通过体外克隆技术和体内移植,筛选并建立了6个细胞亚系,测量其细胞电泳率、细胞增殖率,利用琼脂克隆形成实验和裸鼠体内成瘤实验,比较各细胞亚系的转移特性.结果:A2、A3、A16亚系的细胞电泳率、细胞增殖率、琼脂克隆形成能力和肺转移灶形成率均明显高于A1、A6、A20亚系.结论:通过体外克隆技术和体内移植的方法可建立不同转移特性的MG-63细胞亚系,有助于骨肉瘤转移机理的进一步研究.     

成骨肉瘤相关抗原的纯化及其特异性分析

用抗正常组织抗体制成免疫亲和层析柱，把成骨肉瘤组织提取物反复过此免疫亲和层析柱，其中的正常组织成分被吸附在层析柱上，不被吸附的成分经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，显示单一条带，是一种分子量为３２ＫＤ的抗原成分。利用免疫电泳、ＥＬＩＳＡ和琼脂双向扩散试验进行了特异性分析，结果表明，此抗原只在肿瘤组织中存在，而在正常组织中没有。用此抗原免疫ＢＡＢＬ／Ｃ小鼠制备了一株抗成骨肉瘤的单克隆抗体２Ｇ１０。用此单抗进行免疫组织化学染色，与正常组织反应阳性率为０／９，与成骨肉瘤组织反应阳性率为２０／２１。     

外源性一氧化氮对骨肉瘤细胞株HOS生长能力的影响

目的：研究外源性一氧化氮对骨肉瘤细胞株（ＨＯＳ）体外生长能力的影响。方法：用不同浓度的ＳＮＰ（Ｓｏｄｉｕｍ Ｎｉｔｒｏｐｒｕｓｓｉｄｅ,硝普纳）作用于体外培养的ＨＯＳ细胞株,经细胞作用产生外源性一氧化氮,通过Ｇｒｉｅｓｓ比色法、ＭＴＴ比色法,观察ＨＯＳ细胞株一氧化氮的产生量及对细胞株生产情况的影响。结果：随着ＳＮＰ浓度的增加,ＨＯＳ细胞一氧化氮的产生量逐渐增加而细胞存活数量逐渐减少,以ＳＮＰ２００     

~(125)Ⅰ-抗人成骨肉瘤单克隆抗体在荷瘤裸鼠体内的放射免疫显像

利用杂交瘤技术制备了抗人成骨肉瘤单克隆抗体(OS-McAb),获得了OS-McAb_1及OS-McAb_2两株特异性抗体。经~(125)Ⅰ标记及荷瘤裸鼠体内放射免疫显像证明,OS-McAb_2明显优于OS-McAb_1,实验进一步证明OS-McAb_2对人肝细胞癌无交叉反应性。本研究为OS—McAb_2今后用于临床显像诊断及导向治疗提供了前提条件。