Ki-67和BRAF基因突变与甲状腺乳头状癌侵袭性关系的研究进展

甲状腺乳头状癌（PTC）是最常见的甲状腺恶性肿瘤,近年来发病率呈明显上升趋势。Ki-67是与细胞增殖相关的核抗原,鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1（BRAF）基因所表达的蛋白参与细胞的增殖分化和凋亡,Ki-67及BRAF基因突变均可影响细胞周期的调控及肿瘤的发生发展。本文就Ki-67和BRAF基因突变在PTC发生发展中的作用及其对肿瘤侵袭性、临床诊断及预后方面的影响进行综述。     

BRAFV600E基因突变和TERT启动子突变与甲状腺微小乳头状癌中央区淋巴结转移的关系

目的:探讨鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)V600E基因突变及端粒酶逆转录酶(TERT)启动子突变在甲状腺微小乳头状癌(PTMC)中的发生率及其与中央区淋巴结转移的关系.方法:选取2015年6月～2018年6月皖南医学院第二附属医院普外科76例经临床病理诊断为PTMC的患者,采用聚合酶链式反应(PCR)直接...     

BRAF基因在甲状腺癌中表达的研究

近年来,甲状腺癌患病率逐年增加,国内外对于甲状腺癌发生发展可能的基因展开了大量研究,发现甲状腺癌的发生发展与鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)基因的突变、重排有关。BRAF基因是甲状腺癌研究相对热门基因之一,在甲状腺癌特别是乳头状癌中检出率极高。BRAF基因突变与甲状腺癌的发生发展密切相关,测定BRAF基因不仅可以指导甲状腺癌的早期诊断,同时在疾病治疗方案制订、预后评估等应用中也具有较高的价值,是目前临床较认可的甲状腺癌高效风险预测分子标志物。     

甲状腺乳头状癌BRAF基因突变及表达的临床意义分析

目的：研究探讨甲状腺乳头状癌BRAF基因突变及表达的临床意义.方法：随机抽取2008年6月-2013年9月本院接诊的106例甲状腺肿瘤以及结节性甲状腺肿患者作为研究对象,将其中58例甲状腺乳头状癌患者设为观察组,其余设为对照组,采用DNA直接测序法和聚合酶链反应对所有患者的甲状腺组织进行BRAF基因检测,采用免疫组织化学法检测患者B-rM蛋白表达情况,观察两组患者BRAF基因突变情况、B-rM蛋白表达情况,分析其与甲状腺乳头状癌的相关性.结果：观察组患者基因突变率48.3％显著高于对照组0％,组间比较差异显著（P＜0.05）;观察组患者B-rM蛋白阳性率63.8％,显著高于对照组6.3％,二者比较差异显著（P＜0.05）,具有统计学意义.结论：甲状腺乳头状癌患者的BRAF基因突变率 与B-rd蛋白表达水平均显著升高,BRAF基因突变在临床检测乳头状癌具有重要意义,对甲状腺肿瘤的性质判断具有一定的作用.     

BRAF基因突变与甲状腺乳头状癌的相关性

目的: 探讨BRAF基因突变与甲状腺乳头状癌的相关性。方法: 采用PCR和测序技术,对73例散发的甲状腺乳头状癌患者和16例甲状腺瘤患者组织BRAF基因突变进行筛查。结果: 甲状腺乳头状癌组中42例存在突变;而在甲状腺瘤组中未发现突变。BRAF突变与甲状腺乳头状癌的淋巴转移以及临床分期间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论: BRAF基因突变与甲状腺乳头状癌发生及其淋巴结转移、临床分期相关。     

sARMS-PCR 检测非小细胞肺癌肿瘤组织中KRAS、BRAF 基因突变研究

目的：针对非小细胞肺癌（NSCLC）患者组织标本鼠类肉瘤病毒癌基因同源基因（KRAS）和鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体 B1（BRAF）驱动基因突变使用特异引物双扩增实时蝎形探针扩增阻滞突变系统（sARMS-PCR）检测的可行性;了解 KRAS 和 BRAF 基因突变患者临床病理特征,为NSCLC 患者个体化治疗提供理论依据。方法收集89例NSCLC 患者肿瘤组织甲醛固定石蜡包埋标本（FFPE）,采用FFPE 样品 DNA 分离试剂盒（离心柱型）提取 DNA,使用sARMS-PCR 同时进行 KRAS 及 BRAF 基因突变检测。结果① KRAS 基因突变21例（21／89）;其中KRAS 基因7种热点突变中,检出6种热点突变,均位于第12、13位密码子,1例同时检出存在G12D 及G12V 位点突变,1例同时检出存在G12C 及G12V 位点突变;未发现G12S 突变型;② BRAF 基因突变1例（1／89）,突变位点为V600E,为女性,黏液腺癌;③未见KRAS 和BRAF 基因同时突变现象。结论临床使用sARMS-PCR 技术检测NSCLC 患者KRAS 和BRAF 基因突变有较强敏感性,且石蜡组织标本取材方便,可以作为两种基因的临床检测方法;KRAS 和BRAF 基因突变与年龄、吸烟史、病理分型等均无明显相关性,KRAS 基因突变与性别相关,男性高于女性;KRAS 与BRAF 基因是独立存在的。     

肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1 V600E基因及生长分化因子15表达变化与甲状腺乳头状癌患者淋巴结转移及预后关系研究

目的:探究肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)V600F基因及生长分化因子15(GDF-15)表达变化与甲状腺乳头状癌(PTC)患者淋巴结转移及预后的关系。方法:收集出现淋巴结转移的PTC患者60例作为研究组,收集同期无淋巴结转移的PTC患者53例作为对照组,均测定BRAF V600E基因及GDF-15表达。比较两组患者BRAF V600E基因及GDF-15表达差异。分析两指标与研究组患者临床特征间的关系。分析两指标对PTC患者淋巴结转移的预测价值及与患者预后间的关系。结果:研究组患者BRAF V600E基因突变率及GDF-15阳性表达率高于对照组(均P<0.05)。BRAF V600E基因突变及GDF-15阳性表达与淋巴结转移PTC患者肿瘤直径和是否包膜侵犯有关(均P<0.05)。BRAF V600E基因突变及GDF-15阳性表达对PTC患者淋巴结转移均具有一定的预测价值,两项联合的预测价值更高(均P<0.05)。BRAF V600E基因突变患者累积无进展生存率低于BRAF V600E基因未突变患者,GDF-15阳性表达患者累积无进展生存率低于GDF-15阴性表...     

甲状腺乳头状癌患者BRAF基因突变及相关生物特征分析

目的 利用生物信息学方法分析甲状腺乳头状癌(papilary throid carcinoma,PTC)患者中的BRAF基因及相关生物特征.方法 利用可视化在线数据库Cbioportal(http://www.cBioPortal.org/index.do)获取"Thyroid Carcinoma(TCGA,PanCa...     

超声引导下细针穿刺和BRAFV600E分子检测在甲状腺癌诊断中的价值

目的 探讨超声引导下细针穿刺细胞学检查(FNAB)和鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)^V600E(BRAF^V600E)分子检测在甲状腺癌诊断中的价值。 方法 回顾性分析2019年1月至2021年12月304例甲状腺结节的患者,并行FNAB细胞病理和BRAF^V600E分子检测。以术后病理诊断为金标准,分为FNAB组(n=138)和FNAB联合BRAF^V600E组(n=166),采用受试者工作特征曲线(ROC)和曲线下面积(AUC)评估两组的诊断效能,同时分析细胞病理分类Bethseda Ⅰ、Ⅲ~Ⅴ类结节的超声特点。 结果 304例患者中诊断为甲状腺癌的患者为278例,其中277例甲状腺乳头状癌,1例甲状腺髓样癌,诊断为良性病变的26例。两组中Bethseda Ⅰ、Ⅲ~Ⅴ类的结节有53个,超声特点以钙化(28.3%)和结节大小<1 cm(45.3%)为主。依据术后病理结果,FNAB细胞病理诊断组的效能评估:敏感性为93.9%,特异性为57.1%,AUC为0.824。FNAB细胞病理联合BRAF^V600E组的效能评估:敏感性为98.0%,特异性为84.2%, AUC为0.911,且AUC联合分析>AUC_FNAB。 结论 FNAB细胞病理联合BRAF^V600E基因检测对甲状腺癌的诊断效能优于单独应用FNAB。     

BRAF基因突变及Ki67蛋白表达与甲状腺乳头状癌的关系

目的 探讨BRAF基因突变及Ki67表达与甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)及其临床病理特征之间的关系。方法 收集46例PTC组织标本(PTC组)及16例良性甲状腺肿瘤组织标本(对照组)。采用基因测序法检测BRAF基因突变情况,采用免疫组织化学法检测Ki67蛋白表达情况。结果 1)PTC组BRAF基因突变率为32.6%(15/46),其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳa期突变率分别为14.3%、22.2%、60.0%、75.0%,Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳa期BRAF基因突变率比较差异有统计学意义(P=0.040);淋巴结阳性者BRAF基因突变率为69.2%,阴性者为18.2%,二者比较差异有统计学意义(P=0.026);肿瘤直径≥2cm BRAF基因突变率为40.6%,<2cm者为14.3%,二者比较差异无统计学意义(P=0.18)。对照组未发现BRAF基因突变。BRAF基因突变诊断甲状腺恶性肿瘤的灵敏度为32.6%(15/46),但特异性为100.0%(16/16)。2)PTC组Ki67蛋白阳性表达率为69.6%(32/46),其表达与PTC病理分期、淋巴结转移、肿瘤大小均无明显关系,但其表达率随病情恶化程度呈逐步上升趋势;对照组Ki67蛋白阳性表达率为18.6%(3/16),且均为低表达;Ki67蛋白阳性表达诊断甲状腺恶性肿瘤灵敏度为69.6%(32/46),特异性为81.4%(13/16)。3)在PTC中,15例BRAF基因突变Ki67蛋白阳性表达率为80.0%(12/15),31例无BRAF基因突变Ki67蛋白阳性表达率为64.5%(20/31),二者比较差异无统计学意义(P>0.05)。二者联合检测诊断甲状腺恶性肿瘤灵敏度为80.0%(12/15),特异性为35.5%(11/31)。结论BRAF基因突变在甲状腺乳头状癌中随临床分期增加和淋巴结转移其突变率增加;Ki67蛋白在甲状腺乳头状癌中阳性表达率高,但与病情进展无明显关系。     

内蒙古地区甲状腺乳头状癌中BRAF V600E基因的表达及意义

目的：测定内蒙古地区蒙古族与汉族甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)患者BRAF V600E突变率及分布情况,进而评估基因突变与临床病理特征的关系。方法：从内蒙古医科大学附属医院甲乳外科及病理科收集2017-1~2019-12行手术治疗的20例汉族与40例蒙古族甲状腺乳头状癌患者的临床资料及存档石蜡组织进行基因检测及分析。结果：蒙古族PTC患者BRAF V600E突变率显著高于汉族患者(P<0.05)。蒙古族BRAF V600E突变与PTC患者是否合并桥本、淋巴结转移及被膜侵犯有关,而与年龄、性别、肿瘤直径、病灶数目、有无钙化无关。结论：内蒙古地区蒙古族与汉族BRAF V600E突变率不同,蒙古族患者BRAF V600E突变与PTC患者是否合并桥本、淋巴结转移及被膜侵犯有关,这些发现可为PTC患者手术方案的制订及预后评估提供参考。     

基于ARMS技术检测不同标本类型BRAF基因状态与甲状腺乳头状癌的相关性探讨*

目的：探讨扩增阻滞突变系统(amplification refractory mutation system, ARMS)技术检测同一患者不同标本类型BRAFV600E的突变状态并研究其突变差异性。方法：采用ARMS技术对132例甲状腺细针穿刺细胞学(fine-needle aspiration cytology, FNAC)标本和手术组织学标本进行BRAFV600E基因突变检测,分析不同标本类型及不同程度病变组织中BRAFV600E的突变差异性;同时探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)临床病理参数和BRAFV600E突变的相关性。结果：在细胞学方面,BRAFV600E基因突变率在FNAC明确诊断PTC中为95.56%,FNAC不能明确PTC中为17.24%;在组织学方面,68例PTC中BRAFV600E的突变率为85.29%,64例良性组织BRAFV600E未发现突变。另外,BRAFV600E突变与PTC临床病理参数,如性别、年龄、肿瘤大小、病灶数目、双侧病灶、是否有腺外侵犯及淋巴结转移等因素均无关(均P>0.05)。结论：基于ARMS法检测BRAFV600E基因状态是PTC非常重要的鉴别诊断指标,BRAFV600E与FNAC标本联合运用有效提高了PTC的术前诊断率,具有较高的灵敏度和特异性,但与PTC临床病理参数无关。     

甲状腺乳头状癌患者BRAF基因V600E检测的意义

目的 评估免疫组化法检测BRAF基因V600E突变对甲状腺乳突状癌的诊断价值,进一步明确BRAF基因V600E突变与甲状腺乳头状癌外扩散的相关性。方法 2011年3月至2014年3月37例经病理确诊甲状腺乳突状癌患者,对于免疫组化染色阳性肿瘤进行染色强度分类。评估年龄、甲状腺外扩散、侵袭淋巴管血管、区域淋巴结转移病理变化。结果 直接测序法显示28例（75.7%）PTC BRAF基因V600E阳性;免疫组化染色显示25（67.6%）BRAF基因V600E阳性。以直接测序法为标准,免疫组化法对BRAF基因V600E特异抗体检测突变的敏感性为89.3%、特异性为100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为75.0%。 结论 免疫组化染色是检测甲状腺乳突状癌中BRAF基因V600E突变准确的方法,能够量化BRAF基因V600E表达,预测肿瘤侵袭性。     

Bmi-1基因在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的分析Bmi-1基因在甲状腺疾病组织中的表达,探讨Bmi—1与甲状腺乳头状癌转移的相关关系及临床意义。方法采用RT—PCR法检测8例正常甲状腺、18例结节性甲状腺肿、24例甲状腺乳头状癌组织中Bmi-1基因的表达,运用Fisher确切概率法分别对正常组、结甲组和甲癌组检验,判断Bmi-1在各组中的表达。结果①Bmi-1基因阳性表达在正常甲状腺中仅1例（12．5％）,在结节性甲状腺肿中有3例（16．7％）,而在甲状腺癌中有19例（79．2％）,3组阳性率比较差异有统计学意义（P〈0．05）;②在24例甲状腺癌中,有淋巴结转移的16例（66．67％）,无淋巴结转移的8例（33．33％）,2组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）;③以年龄为界,在19例阳性表达的甲状腺癌中,年龄≥45岁的12例（63．16％）,〈45岁的7例（36．8％）,2组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论①研究证实Bmi-1基因在甲状腺癌中的阳性率明显高于良性甲状腺疾病和正常甲状腺组织;②Bmi-1的表达与淋巴结的转移及年龄有显著相关性,提示它对判断甲状腺乳头状癌的转移机制及预后有一定的临床价值。     

抗鼠科肉瘤病毒癌基因同源物B1抗体的检测及其在类风湿关节炎诊断中的意义

目的:了解抗鼠科肉瘤病毒癌基因同源物B1(v-raf murine sarcoma viral oncogene homologue B1,BRAF)抗体在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)诊断中的临床意义。方法:纳入RA患者112例、健康对照73例、其他风湿病患者112例,以重组人BRAF蛋白为抗原,采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assays,ELISA)检测患者血清中的抗BRAF抗体水平,并收集RA患者的临床资料,采用SPSS 13.0软件行统计学分析。结果:(1)抗BRAF抗体的阳性率在RA患者组为53.6%,明显高于正常对照组(4.1%,P<0.01)和除骨关节炎(34.2%)组以外的其他风湿病组(强直性脊柱炎11.8%,系统性红斑狼疮20.1%,原发性干燥综合征17.9%,P均<0.01);RA患者血清中抗BRAF抗体滴度也明显高于正常对照组和其他风湿病组(P均<0.01)。(2)抗BRAF抗体对RA诊断的敏感度和特异度分别为53.6%和84.3%。(3)类风湿因子、抗环瓜氨酸抗体、抗角蛋白抗体和抗核周因子抗体阴性RA患者的抗BRAF抗体阳性率分别为52.6%、38.2%、30.3%和31.0%。(4)RA患者的抗BRAF抗体水平与患者的年龄、病程、C反应蛋白水平呈负相关。结论:抗BRAF抗体有助于RA的诊断,并可作为其他自身抗体的补充。     

hMSH2基因多态与乳头状甲状腺癌的遗传易感性

目的 探讨中国汉族人群中错配修复基因hMSH2多态与乳头状甲状腺癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）易感性的关系.方法 采用以医院为基础的1∶1配对病例对照研究设计;应用PIRA-PCR-RFLP和PCR-RFLP方法检测204对病例和对照的hMSH2基因多态.结果 以TT基因型为参照,拥有gIVS12-6 TC和CC基因型者,其PTC发病风险增加,OR值分别为1.48（95%CI：0.99-2.23）和2.23（95%CI：1.06-4.73）,呈现基因剂量-效应关系（χ^2趋势=6.27,P=0.012）;拥有突变基因型TC＋CC者,其PTC发病风险亦增加,OR值为1.58（95%CI：1.09-2.33）.未发现hMSH2基因-118 T＞C多态与PTC的关联,但叉生分析显示,当同时拥有gIVS12-6 T＞C和-118 T＞C位点突变基因型时,其PTC发病风险增加,OR值为1.80（95%CI：1.02-3.17）.由gIVS12-6 T＞C和-118 T＞C多态位点组成的单倍型频率在病例组和对照组具有统计学差异（P=0.046）,CgIVS12-6T-118单倍型在病例组的频率高于对照组,差异有统计学意义（P=0.036）;以TgIVS12-6T-118单倍型为参照,CgIVS12-6T-118单倍型可以使PTC的发病风险增加,OR值为1.43（95%CI：1.02-2.00）.gIVS12-6 T＞C多态与吸烟之间存在相乘交互作用,既吸烟又拥有突变纯合CC基因型者,其PTC发病风险明显增加,OR值为19.79（95%CI：1.57-24.82）.结论 hMSH2 gIVS12-6 T＞C多态能增加PTC的发病风险,同时拥有gIVS12-6 T＞C和-118 T＞C突变基因型者,PTC发病风险进一步增加,CgIVS12-6T-118单倍型可以使PTC发病风险升高,gIVS12-6T＞C多态与吸烟间可能存在相乘交互作用.     

血清鼠科肉瘤病毒癌基因同源物B1蛋白的检测与类风湿关节炎

目的：检测类风湿关节炎（rheumatoid arthritis, RA）患者血清中鼠科肉瘤病毒癌基因同源物B1（v-raf murine sarcoma viral oncogene homologue B1, BRAF）蛋白水平,探讨该蛋白在RA诊断中的意义。方法： 纳入RA患者78例、其他风湿病患者96例、健康对照30例,应用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）检测所有患者血清中BRAF蛋白水平,分析BRAF蛋白与RA患者临床与实验室指标的关系。 结果： RA患者血清中BRAF蛋白水平明显高于其他风湿病组(P<0.01)及健康对照组（P<0.01）,BRAF蛋白与类风湿因子（rheumatoid factor,RF）及免疫球蛋白A（immunoglobulin A, IgA）水平呈正相关（P<0.01）,与其他临床、实验室指标及细胞因子无相关性。将RA患者分为BRAF蛋白升高组及正常组,比较两组之间的差异,结果显示两组在临床及实验室指标分布上差异均无统计学意义。结论： RA患者血清中BRAF蛋白水平显著高于其他疾病组及健康对照组,提示BRAF蛋白可能参与RA的发病过程。     

乳头状甲状腺癌TSHR基因转录表达和启动子区甲基化研究

目的观察抑癌基因促甲状腺激素受体(TSHR)在乳头状甲状腺癌(PTC组)中的表达,分析其启动子甲基化与肿瘤发生的关系。方法选择50例PTC和32例良性甲状腺肿瘤(对照组,包括20例结节性甲状腺肿,12例甲状腺腺瘤)患者,对两组患者手术获取的标本提取RNA后,反转录为cDNA,进行PCR检测TSHR基因的表达情况;运用甲基化特异性PCR(MSP)检测上述组织中TSHR基因启动子区甲基化的情况。结果PTC组患者中有34例(68%)TSHR基因启动子发生甲基化,16例(32%)TSHR基因mRNA表达缺失;对照组患者中有7例(21.9%)TSHR基因启动子发生甲基化,4例(12.5%)TSHR基因mRNA表达缺失。PTC组织TSHR基因启动子甲基化率及TSHR基因mRNA表达缺失率均显著高于对照组(χ2值分别为16.61和4.02,P<0.05)。34例发生了TSHR基因启动子甲基化的PTC患者中,有14例(41.2%)TSHR mRNA表达缺失;16例未发生甲基化的PTC患者中,2例(12.5%)发生了mRNA表达缺失,二者mRNA表达缺失率差异有统计学意义(χ2=4.11,P<0.05)。TSHR基因mRNA在...