乳腺癌中RUNX3基因启动子区甲基化及基因表达研究

目的 通过检测乳腺癌中RUNX3基因启动子甲基化状态及其对mRNA表达的影响,探讨RUNX3在乳腺癌发生、发展中的意义.方法 运用甲基化特异性PCR(MSP)检测40例乳腺浸润性导管癌和20例乳腺良性病变标本中RUNX3基因启动子甲基化状态,同时采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测该基因的表达情况.结果 乳腺癌组织中RUNX3基因的甲基化率为47.5%,明显高于乳腺良性病变组织的甲基化率,其差异具有显著性(P<0.05);同时乳腺癌组织中RUNX3基因表达缺失率为40%,明显高于乳腺良性病变,其差异也具有显著性(P<0.05).乳腺癌中RUNX3基因启动子甲基化水平与患者的病理组织学分级有相关性,差异有统计学意义(P<0.05),与患者的年龄、淋巴结转移无相关性.RUNX3基因表达与患者的临床病理特征均无相关性.结论 RUNX3基因启动子的高甲基化可能是乳腺癌中一类重要的分子改变,也是导致RUNX3基因表达下降的原因之一,并参与了肿瘤的演进.     

RUNX3启动子甲基化与胃癌发生发展的关系

目的检测胃癌RUNX3基因启动子区域甲基化情况,探讨RUNX3基因在胃癌发生和发展过程中的意义。方法采用DNA甲基化特异性聚合酶链反应[methylation-specific polymerase chain reaction,PCR（MSP）]技术对30例胃癌患者手术切除肿瘤组织及其癌旁组织RUNX3基因启动子区域甲基化进行检测。结果 RUNX3基因甲基化率在胃癌中为70.0%（21/30）,其癌旁组织中为16.7%（5/30）,有统计学差异（P〈0.05）。结论 RUNX3的甲基化可能是癌症特异性的,其启动子区甲基化与胃癌的发生、发展密切相关。     

RUNX3基因甲基化与鼻咽癌的临床生物学行为关系

目的探讨RUNX3基因甲基化与鼻咽癌临床生物学行为关系。方法运用甲基化特异性PCR对54例鼻咽癌组织、18例慢性鼻咽炎症组织和20例正常鼻咽上皮组织的RUNX3基因启动子区甲基化状态进行检测。结果 RUNX3基因在鼻咽癌组织中启动子甲基化频率为59%(32/54);而在慢性鼻咽炎症组织和正常鼻咽上皮组织中均未检测到RUNX3基因启动子甲基化。RUNX3基因启动子区甲基化与患者临床生物学行为无明显相关关系。结论 RUNX3基因甲基化具有肿瘤特异性,RUNX3基因甲基化参与鼻咽癌发生发展,但目前尚不能作为判断鼻咽癌临床预后预测指标。     

RUNX3基因启动子甲基化与早期非小细胞肺癌的预后

目的:探讨RUNX3基因启动子甲基化与非小细胞肺癌(NSCLC)预后的关系.方法:酚/氯仿法提取80例术后接受顺铂辅助化疗NSCLC患者的肺癌组织标本DNA,巢氏甲基化特异性PCR(nMSP)检测RUNX3启动子甲基化状态,并回顾性分析甲基化状态与临床病理特征、术后无病生存、总生存的关系.结果:80例NSCLC肿瘤样本...     

结肠癌中RUNX3基因表达和启动子甲基化及其临床意义

目的 探讨RUNX3基因表达和启动子甲基化在结肠癌发生发展过程中的作用及其临床意义.方法 采用RT-PCR方法检测RUNX3基因表达,用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测RUNX3基因启动子甲基化.结果 47例结肠癌中,癌旁肠粘膜、原发灶、肝转移灶中RUNX3表达阳性率分别为100%(47/47)、38.3%(18/47)、14.3%(1/7).原发灶和肝转移灶中RUNX3表达明显降低(P<0.01).癌旁肠粘膜组织、癌原发灶、肝转移灶组织中RUNX3基因启动子甲基化阳性率分别为10.6%(5/47),44.7%(21/47),57.1%(4/7),3种组织RUNX3基因启动子甲基化率的差别有显著性意义(P<0.01).在7例出现肝转移者中发生RUNX3失活者6例,其中4例(66.7%)存在RUNX3基因启动子甲基化.结论 RUNX3基因启动子甲基化和RUNX3蛋白表达在结肠癌的癌旁组织和原发癌灶间存在显著的差异,可能与结肠癌的发生发展有关.     

宫颈鳞癌RUNX3基因启动子区甲基化及其临床意义

目的 研究宫颈鳞状细胞癌(鳞癌)组织中RUNX3基因启动子甲基化状态及临床意义.方法 采用甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)测定50例宫颈鳞癌(CSCC组)、50例宫颈上皮内瘤变(CIN组)手术标本及10例正常宫颈组织(对照组)中RUNX3基因的甲基化状态,分析RUNX3基因甲基化与宫颈鳞癌临床病理学特征的关系.结果 CSCC组和CIN组中分别有27例(54％)和17例(34％)存在RUNX3基因启动子甲基化,而对照组未检出;三组间RUNX3基因启动子甲基化的发生率比较差异有统计学意义(x2=11.500,P＜0.005),CIN不同级别组(CIN Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级)的RUNX3基因启动子甲基化发生率比较差异有统计学意义(x2=9.655,P＜0.05).RUNX3基因启动子甲基化与宫颈鳞癌的分化程度及是否发生淋巴结转移有关(r=-0.367,P=0.017;r =0.288,P=0.042).结论 RUNX3作为抑癌基因参与宫颈鳞癌的发生和发展,可作为对宫颈鳞癌患者进行预后评估的生物学指标.     

肝细胞癌RUNX3基因高频率的甲基化和等位缺失

最近 ,位于 1p36 1的RUNX3基因被认为是一种新发现的抑癌基因 ,对胃癌细胞的生长有明显的抑制作用 ,并能阻止其在裸鼠体内的致瘤性。相反 ,敲除掉RUNX3基因 ,可使鼠胃黏膜发生异常增生。在人类胃癌 ,RUNX3基因失活的主要机制是高甲基化和缺失[1] 。然而 ,先前的实验曾发现 ,1p36 1也是肝细胞癌发生高频率等位缺失的位点 ,甚至发生在肝癌前病变[2 ] 。RUNX3基因是否在肝细胞癌的发病中起重要作用 ,目前尚不清楚。本研究对肝细胞癌RUNX3基因的遗传学和表遗传学改变进行初步研究 ,以期发现RUNX3基因在肝细胞癌的发生、发展过程中的…     

膀胱癌尿沉渣RUNX3基因启动子区域CpG岛甲基化状况及意义

目的探讨膀胱癌患者尿沉渣细胞中RUNX3基因启动子CpG岛的甲基化状况及其临床意义。方法收集临床病理确诊39例膀胱癌,采用甲基化特异PCR(MSP)的方法,检测膀胱癌肿瘤组织和配对的尿沉渣RUNX3基因启动子CpG岛的甲基化异常频率,同时以45例非肿瘤性泌尿系疾病患者及14例健康志愿者作为对照。结果膀胱癌肿瘤组织和配对的尿沉渣RUNX3基因启动子甲基化阳性率分别为64.1%(25/39)和56.4%(22/39),二者密切相关(r=0.420,P=0.008)。膀胱癌组尿沉渣RUNX3基因启动子甲基化阳性率(64.1%,25/39)显著高于非肿瘤组(6.7%,3/45)(χ2=31.015,P=0.000),非肿瘤组与志愿组间(阳性率为0)并无明显差异(P>0.05);尿沉渣RUNX3基因甲基化对膀胱癌诊断的敏感性为64.1%(25/39),特异性为94.9%(56/59)。浸润性(≥pT2)和表浅性(≤pT1)膀胱癌RUNX3基因甲基化阳性率之间的差异有统计学意义(χ2=10.363,P=0.001)。性别、年龄、病理分级与RUNX3基因甲基化均无明显相关性(均P>0.05)。结论 RUNX3基因启动子异因异常甲基化可能是膀胱癌的早期事件,尿沉渣RUNX3基因启动子异常甲基化可作为非侵入性诊断膀胱癌并且判断其预后的分子标志物。     

5-氮-2＇脱氧胞苷对Reh细胞增殖及RUNX3基因启动子区甲基化状态的影响

目的：探讨5-氮-2＇脱氧胞苷对Reh细胞增殖及其抑癌基因RUNX3启动子区甲基化状态的影响。方法：应用MTT法观察5-氮-2＇脱氧胞苷对Reh细胞增殖的抑制能力;采用甲基化特异性PCR（MSP）检测5-氮-2＇脱氧胞苷干预前后RUNX3基因启动子区的甲基化状况;应用RT-PCR检测干预前后RUNX3基因的mRNA表达水平的变化。结果：经5-氮-2＇脱氧胞苷处理后,RUNX3基因启动子高甲基化的区域发生部分去甲基化,5-氮-2＇脱氧胞苷处理前启动子高甲基化的RUNX3 mRNA未见表达,而在其处理后该基因可见重新表达,经5-氮-2＇脱氧胞苷处理后,Reh细胞生长缓慢。结论：5-氮-2＇脱氧胞苷能使Reh细胞RUNX3基因启动子区发生部分去甲基化,从而调控RUNX3基因表达并能抑制其细胞生长。启动子区异常甲基化是白血病Reh细胞RUNX3基因失活的主要原因之一。     

RUNX3蛋白在原发性肝细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨RUNX3蛋白在原发性肝细胞癌中的表达状况及其与临床病理学特征的关系.方法 应用免疫组化方法检测50例原发性肝细胞癌患者癌组织、癌旁组织中RUNX3的表达.结果 RUNX3在原发性肝细胞癌组织中的表达率显著低于癌旁组织(P＜0.05), RUNX3的表达与肝内或淋巴结转移及肿瘤分化程度有关(P＜0.05), 而与患者性别、年龄、HbsAg、AFP无明显关系 (P＞0.05).结论 RUNX3蛋白在原发性肝细胞癌组织中呈低表达,可能与肝癌的发生有关,并对肝癌恶性程度及预后判断可能有意义.     

乳腺浸润性导管癌中Ezrin、CD44v6 的表达及其临床意义

目的:探讨埃兹蛋白(Ezrin)与细胞粘附分子(CD44v6)在乳腺浸润性导管癌中的表达及其意义。方法:用免疫组化PV9000通用型两步法检测90例乳腺浸润性导管癌组织中Ezrin和CD44v6的表达。结果:有淋巴结转移患者Ezrin和CD44v6阳性表达率明显高于无淋巴结转移者(P<0.05);随着临床分期、组织学分级的增加,Ezrin和CD44v6阳性表达率有增加的趋势;不同年龄、肿瘤大小、淋巴结转移数目的患者Ezrin和CD44v6阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05),Ezrin和CD44v6的表达具有关联性(χ2=9.188,P=0.002,Pearson列联系数=0.304),且2者在乳腺浸润性导管癌中共表达阳性者腋窝淋巴结转移阳性率高于阴性者(P<0.05)。结论:Ezrin和CD44v6与乳腺浸润性导管癌的浸润和转移有关,2者相互作用促进乳腺浸润性导管癌的淋巴结转移,可以作为预测乳腺浸润性导管癌淋巴结转移的肿瘤标志物。     

RUNX3、DAPK基因甲基化及其蛋白表达与胃癌病情的研究

目的 观察胃癌组织中RUNX3、DAPK基因启动子区甲基化状态及其对蛋白表达的影响,并分析其甲基化改变与临床病理特征的关系.方法 采用甲基化特异性聚合酶链反应检测胃癌组织及相应癌旁正常组织中RUNX3、DAPK的甲基化状态.应用免疫组化SP法检测RUNX3、DAPK蛋白表达情况.结果 胃癌组织中Run3、DAPK基因的甲基化阳性率分别为77.8%(42/54)、90.7%(49/54)明显高于癌旁组织的38.9%(21/54)、40.7%(22/54)(P<0.01).胃癌组织中RUNX3、DAPK蛋白免疫组化阳性率分别为42.6%(23/54)、31.5%(17/54)比癌旁组织96.3%(52/54)、98.1%(53/54)表达明显降低或缺失(P<0.01).RUNX3基因甲基化阳性率与胃癌的临床分期、组织分化程度、肿瘤直径、淋巴结转移具有相关性(P<0.05).DAPK基因甲基化阳性率和胃癌的临床分期、浸润深度、组织分化程度具有相关性(P<0.05).结论 RUNX3、DAPK甲基化与胃癌的发生发展关系密切,甲基化影响其蛋白表达.     

胰腺癌中人RUNT相关转录因子3基因启动子区甲基化及其临床意义

目的检测胰腺癌人RUNT相关转录因子3(RUNX3)基因启动子的甲基化情况并探讨其临床意义。方法采用甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)检测56例胰腺癌组织及癌旁组织、14例正常胰腺组织、3株人胰腺癌细胞株(PANC1、CFPAC-1、SW1990)、1株正常肝细胞株(HL-7702)中RUNX3基因启动子区CpG岛甲基化状态。检测用甲基化抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-cdR)处理前后胰腺癌细胞株RUNX3 mRNA的表达。分析RUNX3异常甲基化与胰腺癌临床特征的关系。结果56例胰腺癌组织中,51.79%(29/56)存在RUNX3基因启动子区CpG岛的异常甲基化,癌旁胰腺组织有10.7%(6/56)存在异常甲基化,而正常胰腺组织中未检测到RUNX3基因异常甲基化。RUNX3基因异常甲基化与患者病理分化程度(r=0.314,P=0.018)、淋巴结转移(r=0.370,P=0.005)显著相关。在5-Aza-cdR处理前,胰腺癌细胞株PANC1、CFPAC-1、SW1990的RUNX3 mRNA无表达或低表达,经5-Aza-cdR处理后各胰腺癌细胞株RUNX3 mRNA恢复表达。结论胰腺癌组织及胰腺癌细胞株均存在RUNX3基因CpG岛异常甲基化;RUNX3启动子的高甲基化与其基因表达降低有关,与胰腺癌组织分化程度、淋巴结转移相关。     

RUNX3基因对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响

目的 研究RUNX3基因对乳腺癌细胞迁移及侵袭的影响,并探讨其分子作用机制.方法 分别用RUNX3的真核表达载体pFlag-RUNX3和对照载体pFlag-control转染乳腺癌MDA-MB-231、BT-549细胞,CCK-8细胞增殖实验检测RUNX3基因高表达后对2种乳腺癌细胞增殖的影响;细胞迁移和侵袭实验检测RUNX3基因高表达对2种乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响;人类肿瘤转移PCR芯片研究RUNX3基因高表达后乳腺癌细胞中转移相关基因的表达水平; RT-PCR和Western blot方法检测RUNX3基因表达后对2种乳腺癌细胞中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）mRNA和蛋白表达的影响;明胶酶谱实验检测RUNX3基因表达后对2种乳腺癌细胞分泌活性MMP-2的影响.结果 在2种乳腺癌细胞中过表达RUNX3能够抑制细胞的迁移和侵袭能力.在84个肿瘤转移相关基因中MMP-2受RUNX3的影响最显著.结论 RUNX3通过MMP-2通路调节乳腺癌细胞的迁移与侵袭.     

RUNX3基因在宫颈癌中的表达及临床意义

目的:探讨RUNX3在宫颈癌发生、发展中的意义.方法:采用免疫组织化学方法检测25例正常宫颈、34例宫颈上皮内瘤变(intraepithelia neoplasia,CIN)、48例宫颈癌组织中RUNX3蛋白的表达,应用SYBR Green Ⅰ嵌合荧光real-time PCR技术检测10例正常宫颈、24例CIN和30...     

RUNX3蛋白在脑胶质瘤中的表达特点及临床意义

目的探求脑胶质瘤RUNX3的表达及生物学意义。方法手术切除脑胶质瘤标本55例相对制成石蜡组织微阵列,运用免疫组织化学方法检测RUNX3在上述55例癌灶和其中19例癌旁相对正常脑组织中的表达情况和分布特点,并分析其表达与患者临床病理特征之间的关系。结果胶质瘤中RUNX3蛋白表达率为38.2%(21/55)较相对正常脑组织中表达率94.7%(18/19)明显下降,差异有显著性意义(P<0.05)。RUNX3蛋白表达无性别、年龄及病理分级间差异,但在病灶直径≥3 cm及生存期<3年的胶质瘤患者中,RUNX3蛋白表达显著低于病灶直径<3 cm及生存期>3年的患者(P<0.05)。RUNX3在不同类型脑胶质瘤中呈现差异表达。结论RUNX3蛋白表达下调可能与胶质瘤进展及患者的预后有关。