颜面播散性粟粒性狼疮误诊1例

病人，男，19岁。于2004年4月，在草地进行匍匐训练后，额及颜面部出现团块状红斑、丘疹，呈不规则形态，边界不清，局部融合成片状，触之质软，无压痛。全面部红肿明显，眼睑及颧骨部位肿胀尤甚。皮肤略干燥，无脱屑及瘙痒，躯干、四肢未见类似皮疹。未作任何检查，即诊断为“接触性皮炎”。给予抗过敏、消肿等对症治疗20余天后，颜面部水肿消退，皮疹颜色变淡，但消退较慢，压之质软。皮肤弹性尚可，无干燥。无新发皮疹。     

照射复合创伤愈合伤口成纤维细胞TGFβ1、TGFβR1蛋白及TGFβ1mRNA的表达与意义

目的：探讨局部照射对创伤愈合过程中伤口（Fb)TGFβ1及TGFβR1表达的影响及意义。方法：将132只Wistar大鼠分为单纯创伤组（对照组）和照射复合创伤组（照射组），用免疫组织化学，原位杂交和图像分析方法检测两组伤口愈合过程中伤后1－60d各时间点伤口成纤维细胞中TGFβ、TGFβR1蛋白及TGFβ1mRNA表达的变化规律，结果：单纯且口成纤维细胞TGFβ1、TGFβR1表达有明显的时相性，伤后2－21d可见表达，10d为表达高峰，照射复合创伤组其表达减弱，且表达时相延长，伤后28d仍有表达，结论：照射抑制伤口成纤维细胞内源性TGFβ1和TGFβR1的表达，表明照射使成纤维细胞自分泌TGFβ1功能减弱并对外源性TGFβ1的反应性减弱。     

TGFβ1正、反义基因转染60Co照射HELF对TGFβ1及I型前胶原mRNA表达调控影响

目的　观察TGFβ1正、反义基因转染6 0 Coγ射线照射的HELF后对其TGFβ1mRNA及Ⅰ型前胶原mRNA表达调控的影响。方法　采用脂质体介导法进行基因稳定转染 ,转染细胞经PCR ,DNAdotblot鉴定和RNAdotblot分析。结果　选择 5Gy照射细胞 ,采用LipofectAMINE将TGFβ1正、反义基因表达载体pMAMneo TGFβ1和pMAMneo AntiTGFβ1转入HELF ,转染细胞经G418抗性筛选出来 ,并且在糖皮质激素地塞米松诱导下培养。提取培养细胞的RNA和染色体DNA ,转染细胞DNA与地高辛标记的neo特异探针杂交阳性 ,且可用neo基因特异的PCR引物扩增出 2 76bp的阳性片段。对提取的RNA用地高辛标记的TGFβ1探针和α1(Ⅰ )寡核苷酸探针经RNAdotblot分析表明 ,转染pMAMneo AntiTGFβ1的细胞其TGFβ1mRNA水平下降 ,而转染pMAMneo TGFβ1的细胞其TGFβ1mRNA水平则升高。对于Ⅰ型前胶原mRNA ,前者表达水平比未转染细胞低 ,后者则略高。 结论　TGFβ1反义基因转染6 0 Coγ射线照射的人胚肺成纤维细胞后可以使细胞中TGFβ1mRNA含量水平减少 ,使Ⅰ型前胶原mRNA表达水平降低     

TGFβ1反义基因及表光荧光素酶的重组腺病毒对放射性肺纤维化体内基因治疗初探

目的：探索TGFβ1反义基因和脂质体混合物以及重组腺病毒转移载体进行放射性肺纤维化体内基因治疗的可行性。方法：通过支气管镜插管与滴注的方式进行。结果：检测分析表明,转基因后1.5d,肺组织DNA用meo基因特异引物PCR扩增阳性;第5．5天,PCR扩增67％（2／3）阳性。RNAdot blot分析表明,转染TGFβ1反义基因的肺组织TGFβ1mRNA含量降低,转染35d后聚动物肺组织测定其羟脯氨酸含量表明,尽管转染TGFβ1反义基因的动物其肺组织羟脯氨酸含量比正常对照高（P＜0．01）,但它比生理盐水治疗对照组动物和转染TGFβ1正义基因的动物其肺内羟脯氨酸含量低（均为P＜0．01）。用含有荧光素酶基因的复制缺陷型腺病毒感染大鼠,春肺脏均检测到了有荧光素酶活 蛋白的表达。结论：由聚阳离子脂质体介导的TGFβ1反义基因进行的肺纤维化体内基因治疗是一个简单易行的方法,它可以减缓肺纤维化的发生,用复制缺陷的重组腺病毒进行肺的基因治疗是一种较为理想的方法,有望成为治疗肺纤维化的有效的途径。     

TGFβ1反义基因及表达荧光素酶的重组腺病毒对放射性肺纤维化体内基因治疗初探

目的　探索TGFβ1反义基因和脂质体混合物以及重组腺病毒转移载体进行放射性肺纤维化体内基因治疗的可行性。方法　通过支气管插管与滴注的方式进行。结果　检测分析表明 ,转基因后 1 5d ,肺组织DNA用neo基因特异引物PCR扩增阳性 ;第 5 5天 ,PCR扩增 6 7% (2 3)阳性。RNAdotblot分析表明 ,转染TGFβ1反义基因的肺组织TGFβ1mRNA含量降低。转染 35d后取动物肺组织测定其羟脯氨酸含量表明 ,尽管转染TGFβ1反义基因的动物其肺组织羟脯氨酸含量比正常对照组高 (P <0 0 1) ,但它比生理盐水治疗对照组动物和转染TGFβ1正义基因的动物其肺内羟脯氨酸含量低 (均为P <0 .0 1)。用含有荧光素酶基因的复制缺陷型腺病毒感染大鼠 ,其肺脏均检测到了有荧光素酶活性蛋白的表达。结论　由聚阳离子脂质体介导的TGFβ1反义基因进行的肺纤维化体内基因治疗是一个简单易行的方法 ,它可以减缓肺纤维化的发生 ;用复制缺陷的重组腺病毒进行肺脏的基因治疗是一种较为理想的方法 ,有望成为治疗肺纤维化的有效的新途径。     

转化生长因子β1及其受体在正常及损伤性狭窄胆管壁中的表达

目的：探讨转化生长因子β1（TGF-β1)在损伤性胆管狭窄发生中的作用,方法：通过免疫组化检测TGF－β1及其I型受体（TGF－βR1)拓人正常胆管壁中及损伤性狭窄胆管壁中细胞及少量成纤维细胞高表达TGF－β1及TGF－βR1,在损伤性狭窄管壁中,大量炎细胞及少量成纤维细胞高表达TGF－β1,大量炎细胞及大量成纤维细胞高表达TGF－βR1,结果：胆管损伤后,其中的炎细胞及成纤维细胞产生了TGF－β1,TGF－β1可能由TGF－βR1介导通过自分泌及旁分泌机制,使TGF-β1秒断产生,并民纤维细胞表型改变,活化,胶原等基质不民合成堆积,TGF－β1可能在损伤性胆管狭窄发生中起了重要作用。     

TGFβ1正、反义基因转染60Co照射HELF对TGFβ1及I型前胶原mRNA表达调控影响

目的 观察TGFβ1正、反义基因转染^60Coγ射线照射的HELF后对其TGFβ1、mRNA及Ⅰ型前胶原mRNA表达调控的影响。方法 采用脂质体介导法进行基因稳定转染,转染细胞经PCR,DNA dot blot鉴定和RNA dot blot分析。结果 选择5Gy照射细胞,采用Lipofect AMINEuqf TGFβ1正、反义基因表达载体pMAM-TTGFβ1pMAMneo-AntiTGFβ1转入HELF,转染细胞经G418抗性筛选出来,在糖皮质激素地塞米松诱导下培养。提取培养细胞的RNA和染色体DNA,转染细胞DNA与地高辛标记的neo特异探针杂交阳性,且可用neo基因转导的PCR引物扩增出276bp的阳性片段。对提取的RNA地高辛标记的TGFβ1探针和α1（Ⅰ）寡核苷酸探针经RNA dot blot分析表明,转染pMAMneo-AntiTGFβ1的细胞其TGFβ1 mRNA水平下降,而转染pMAMneo-TGFβ1的细胞其TGFβ1 mRNA水平则升高。对于Ⅰ型前胶原mRNA,前者表达水平比未转染细胞低,后者则略高。结论 TGFβ1反义基因转染^60Co γ射线照射的人胚肺成纤维细胞后可以使细胞中TGFβ1 mRNA含量水平减少,使Ⅰ型前胶原mRNA表达水平降低。     

适于磁共振检测播散性皮层抑制的猫脑解剖研究

目的 寻找适于研究播散性皮层抑制的猫脑表面脑回及磁共振功能成像(fMRI)平面.材料与方法 成年雌性家猫6只,行垂直相交的高分辨力横断面、矢状面、水平面T1WI及T2WI,研究各方位图像显示脑回的解剖特点.灌注固定后取猫脑标本进行大体表面解剖观察,分析各脑回的位置及形态特点.结果 猫脑具有多脑回结构.边缘回内侧紧邻上矢状窦;上侧裂回位置相对表浅,与相邻脑回以脑沟相隔,周围无大血管相邻;外侧裂回位置偏外,长度短,形态复杂.在MRI上每个横断面仅能显示嘴尾侧走行脑回的一个断面,矢状面不能显示相邻脑回间的关系,包括双侧上侧裂回和边缘回的水平面图像既能显示脑回的长轴,又能显示相邻脑回的关系且能提供对侧大脑半球作为对照.结论 上侧裂回是研究播散性皮层抑制最合适的皮层结构;包括双侧上侧裂回和边缘回的水平面是fMRI研究播散性皮层抑制的理想成像层面.     

北京生物工程研究所(张兆山);北京基础医学研究所(龙建银、王会信)TGF β1反义基因及表达荧光素酶的重组腺病毒对放射性肺纤维化体内基因治疗初探

目的探索TGFβ1反义基因和脂质体混合物以及重组腺病毒转移载体进行放射性肺纤维化体内基因治疗的可行性.方法通过支气管插管与滴注的方式进行.结果检测分析表明,转基因后1.5 d,肺组织DNA用neo基因特异引物PCR扩增阳性;第5.5天,PCR扩增67%(2/3)阳性.RNA dot blot分析表明,转染TGFβ1反义基因的肺组织TGFβ1 mRNA含量降低.转染35 d后取动物肺组织测定其羟脯氨酸含量表明,尽管转染TGFβ1反义基因的动物其肺组织羟脯氨酸含量比正常对照组高(P＜0.01),但它比生理盐水治疗对照组动物和转染TGFβ1正义基因的动物其肺内羟脯氨酸含量低(均为P＜0.01).用含有荧光素酶基因的复制缺陷型腺病毒感染大鼠,其肺脏均检测到了有荧光素酶活性蛋白的表达.结论由聚阳离子脂质体介导的TGFβ1反义基因进行的肺纤维化体内基因治疗是一个简单易行的方法,它可以减缓肺纤维化的发生;用复制缺陷的重组腺病毒进行肺脏的基因治疗是一种较为理想的方法,有望成为治疗肺纤维化的有效的新途径.     

局灶节段性肾小球硬化患儿尿TGF-β1检测的临床意义

目的：评估局灶节段性肾小球硬化（FSGS）患儿尿液中TGF-β1检测临床意义。方法：应用酶联免疫吸附法（ELISA）测定35例FSGS患儿，并对照观察30例系膜增生性肾小球肾炎（MsPGN）、30例轻微病变（ML）和30例对照组儿童尿液中的TGF-β1水平。结果：FSGS组尿液中TGF-β1水平与MsPGN、ML、对照组相比差异有非常显著性（P〈0．01）。FSGS中，间质炎症细胞浸润和（或）纤维化组与非炎症细胞浸润和（或）纤维化组相比，TGF-β1水平差异有非常显著性（P〈0．01）；大量蛋白尿组与非大量蛋白尿组TGF-β1差异亦有显著性（P〈0．05）。结论：FSGS患儿的尿液中TGF-β1水平升高，其与间质炎症细胞浸润及蛋白尿严重程度相关。检测尿液中TGF-β1可能是反映肾硬化及病情活动的指标之一。     

非小细胞肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞和TGF—β1的相关性分析e

目的：探讨非小细胞肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞和TGF—β1（血清转化生长因子β1）的相关性及意义。方法：分别采用流式细胞技术和ELISA法检测40例非小细胞肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞数量及TGF—β1的表达水平。结果：非小细胞肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞和TGF-β1的表达水平明显高于对照组（P〈0．05）。肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞与TGF—β1的表达成正相关。结论：非小细胞肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞数量的增多可能诱导TGF—β1表达水平的增高。     

博莱霉素损伤肺TGF β1与VEGF表达特征与血管新生的关系

目的　研究肺纤维化大鼠的血管内皮细胞生长因子 (VEGF)和转化生长因子 (TGF -β1)的合成和分布规律与血管新生的关系及其在肺纤维化发生、发展过程中的意义。方法　用免疫组织化学的原位杂交方法观察博莱霉素 (BLM )组和对照组在 3d、7d、14d、2 1d、2 8d时肺组织内VEGF和TGF -β1的合成和分布情况 ,并结合透射电镜及光学显微镜观察肺毛细血管的病理变化。 结果　博莱霉素大鼠VEGF与TGF -β1表达早期明显增强并且持续存在 ,两者呈平行增长 ,在肺内间质细胞的表达以 2 8d分布最广 ,其表达区域与血管新生及纤维组织增生区域相吻合。肺毛细血管内皮细胞早期见坏死、脱落、通透性增高 ,此后大量毛细血管新生 ,新生血管扭曲 ,通透性高 ,且可见血管内血栓形成。这种变化在 2 8d组仍然存在。结论　VEGF与TGF -β1的表达与血管新生密切相关 ,这两种因子的持续的高表达可能与新生血管损伤或功能障碍有关 ,进而在肺纤维化中起重要作用     

血清浓度对TGF—β1刺激成纤维细胞增殖的影响

目的比较低血清浓度（0．4％）和正常血清浓度（10％）培养条件对TGF-β1刺激成纤维细胞增殖的影响。方法原代大鼠皮肤成纤维细胞分别采用0．4％和10％血清浓度培养，加TGF-β1刺激细胞后，分别用BrdU ELISA法检测细胞增殖情况，噻唑蓝（MTT）比色法制作细胞生长曲线。结果0．4％和10％血清浓度下，250pg／ml TGF-β1均促进成纤维细胞增殖（P〈0．01），并促使生长曲线的峰值提前和增加。而25ng／ml TGF-β1均抑制成纤维细胞增殖（P〈0．05），并导致生长曲线峰值的滞后和降低。结论血清浓度对大小剂量TGF-β1刺激成纤维细胞增殖变化无明显影响。     

骨折愈合过程中BMP2和TGFβ1的基因表达及分析

目的：探讨骨形成蛋白（ＢＭＰ）和转化生长因子β（ＴＧＦβ）在骨生长愈合中的组织细胞来源、作用方式及二者的关系．方法：建立颌骨骨折模型，利用原位杂交方法检测与骨组织关系较为密切的ＢＭＰ２和ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ在骨折愈合不同时期的表达．结果：处于分化状态的未分化间充质细胞内ＢＭＰ２ｍＲＮＡ的水平较高，处于功能活跃期的成骨细胞和软骨细胞内ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ的水平较高．ＢＭＰ２的基因表达水平在骨折愈合的膜内成骨阶段较高；ＴＧＦβ１的基因表达水平在骨折愈合的软骨形成期和软骨骨化阶段较高．结论：未分化间充质细胞与ＢＭＰ的合成有关，成骨细胞和软骨细胞与ＴＧＦβ的合成有关．ＢＭＰ在骨折愈合早期的骨诱导中发挥重要作用，使未分化间充质细胞向骨细胞系分化，而ＴＧＦβ则主要在骨折愈合后期调节成骨细胞和软骨细胞的增殖，并增强其合成基质的能力．     

TGF-β1与AFP在原发性肝细胞癌组织中表达的相关性研究

目的：研究转化生长因子β1（TGF-β1）-7甲胎蛋白（AFP）在原发性肝细胞癌（HCC）组织中的表达和意义，以及两者之间的关系。方法：应用免疫组织化学S—P法同步检测我院2002～2004年外科住院患者经手术病理证实原发性HCC41例组织中的TGF-β1和AFP的表达，并按病理分级进行统计学分析。结果：（1）HCC组织TGF-β1表达增强，TGF-β1主要着色于细胞浆内，呈深棕色或黄褐色颗粒状，弥漫性或灶状分布，其阳性率为78．0％（32／41）；AFP阳性率为70．7％（29／41）（P〉0．05）。（2）癌组织AFP的阳性率显著高于癌旁组织（31．7％，13／41），而癌旁组织TGF-β1的阳性率（95．1％，39／41）显著高于癌组织。结论：（1）HCC组织TGF-β1表达显著增强，在肿瘤的发生、发展过程中具有重要作用。HCC组织中TGF-β1与AFP的表达均增高，二者的表达均是肝细胞癌的恶性表型，二者之间相关系数r为0．255（P〉0．05），无显著相关关系。（2）同时表达AFP与TGF-β1的癌旁肝细胞很可能是已经启动、尚未产生表型转化，但已具备肿瘤性增殖的癌前样细胞。TGF-β1作为人HCC的肿瘤特异标志物值得进一步研究。     

β受体阻滞剂普奈洛尔对大鼠脑创伤后脑组织中IL-1β和IL-1Ra的影响

目的探讨β受体阻滞剂（普奈洛尔）对大鼠脑创伤后脑组织中白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-1受体拮抗剂（IL-1Ra）的影响。方法选取SD大鼠72只,随机分为对照组（36只）、治疗组（36只）。采用改良的Feeney法致大鼠右顶叶脑创伤模型,分别给予生理盐水、普奈洛尔腹腔注射（40mg／kg）。每组于致伤后6、24、72小时3个时相点,取右顶叶损伤区脑组织,苏木精-伊红染色（HE染色）法观察其病理变化,免疫组织化学和免疫印迹（Western blotting）方法检测其中IL-1β和IL-1Ra的表达。结果对照组：伤后6小时即可见变性坏死神经元,且IL-1β有大量表达,24小时达高峰;IL-1Ra有极少表达并逐渐升高。治疗组：变性坏死神经元明显减少,IL-1β表达降低;而IL-1Ra6小时即有明显表达并持续至72小时;且IL-1β／IL-1Ra比值较对照组降低。两组比较,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论β受体阻滞剂能明显降低大鼠脑损伤区IL-1β表达、提高IL-1Ra表达,可能对减轻大鼠脑创伤后炎性损伤具有一定作用。