子宫内膜异位症患者内膜组织中TLR4及MyD88的表达

目的:探讨Toll样受体4(TLR4)介导的髓样分化因子88(MyD88)通路在正常子宫内膜、子宫内膜异位症(EMs)患者在位内膜及异位内膜组织中的表达及其临床意义。方法:选取EMs患者(EMs组)45例(Ⅰ、Ⅱ期15例,Ⅲ、Ⅳ期30例),取其异位内膜组织45例(异位内膜组)、在位内膜组织30例(在位内膜组),另取同期因子宫纵隔行宫腔镜手术患者的正常内膜组织30例(对照组)。采用半定量RT-PCR及免疫组化SP法检测TLR4及MyD88 mRNA和蛋白在上述组织中的表达情况。结果:异位内膜组、在位内膜组及对照组TLR4与MyD88 mRNA和蛋白的表达水平比较,差异有统计学意义(FmRNA=37.541、38.669,F蛋白=46.707、31.046,P均<0.001),且异位内膜组和在位内膜组均高于对照组,异位内膜组高于在位内膜组(P均<0.01)。EMsⅠ、Ⅱ期和Ⅲ、Ⅳ期患者异位内膜组织中TLR4与MyD88 mRNA及蛋白的表达水平比较,差异均无统计学意义(tmRNA=1.373、1.574,t蛋白=0.299、0.066,P均>0.05)。在位内膜组中TLR4与MyD88 mRNA及蛋白的表达均呈正相关(r分别为0.594和0.560,P均<0.001),异位内膜组中TLR4与MyD88 mRNA及蛋白的表达均呈正相关(r分别为0.812和0.639,P均<0.001)。结论:TLR4及MyD88的高表达可能在EMs的发病机制中起着重要作用。     

电离辐射对小鼠腹腔巨噬细胞TLR4和转接蛋白MyD88表达的影响

目的：观察电离辐射对小鼠腹腔巨噬细胞TLRs介导的信号传导通路中TLR4和转接蛋白MyD88表达的影响,探讨低剂量辐射诱导机体免疫效应的机制。方法：昆明系雄性小鼠160只。时间-效应实验60只,随机分为假照组、照射后4、8、16、24和48 h实验组,每组10只;剂量-效应实验100只,随机分为假照组、0.050、0.075、0.100、0.200、0.500、1.000、2.000、4.000和6.000 Gy照射组,每组10只;X 线全身照射 (WBI) 后,采用流式细胞术检测小鼠腹腔巨噬细胞中TLR4和MyD88阳性细胞百分率。结果：时间-效应实验表明,与假照组比较,0.075 Gy 照射后TLR4和MyD88表达率在4 h后开始增高,分别在16 h和4 h达高峰（P<0.05或P<0.01,）;2.000 Gy 照射后,TLR4和MyD88表达率在4 h后开始增高, 16 h达高峰（P<0.01）。剂量-效应实验表明,与假照组比较,各剂量照射组 TLR4和MyD88表达率均随照射剂的增加递增,在0.075 Gy 开始明显增加（P<0.05）,在2.000 Gy 照射后达高峰（P<0.01）。结论：电离辐射使小鼠腹腔巨噬细胞TLR4和转接蛋白MyD88表达增高,促进小鼠的免疫反应,启动固有免疫及适应性免疫。     

扶正祛浊法对糖尿病肾病大鼠TLR4/MyD88通路的影响

目的观察研究扶正祛浊法治疗糖尿病肾病(DN)模型大鼠的疗效和作用机制。方法 SD大鼠60只,随机分为空白组、DN组、洛汀新组[2mg/(kg·d)]、扶正祛浊方低(1.32g/mL)、中(2.64g/mL)、高(5.28g/mL)剂量组,各10只,分别予生理盐水及相应药物灌胃,造模前后以及给药后4周、8周检测各组大鼠血糖、肾功能、尿蛋白等;8周后Western blot法检测大鼠肾组织中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)蛋白水平。结果与DN组比较,扶正祛浊方低、中、高剂量组及洛汀新组大鼠血肌酐水平、24h尿微量蛋白量及肾组织My D88蛋白表达水平明显下降[(32.50±2.95)umol/L、(29.17±3.87)umol/L、(29.00±4.65)umol/L、(35.50±5.47)umol/L比(53.67±3.88)umol/L,P0.05;(53.25±6.84)mg/d、(47.69±6.67)mg/d、(33.52±4.75)mg/d、(51.08±3.82)mg/d比(62.89±3.69)mg/d,P0.05;(0.1703±0.0195)、(0.1592±0.0178)、(0.1349±0.0121)、(0.1221±0.0162)比(0.2055±0.0194),P0.05];扶正祛浊方高剂量组、洛汀新组大鼠尿素氮水平均有明显下降[(7.43±1.09)mmol/L、(10.07±0.85)mmol/L比(11.02±0.87)mmol/L,P0.05];扶正祛浊方中、高剂量组,洛汀新组大鼠TLR4蛋白表达水平有明显下降[(0.1613±0.0338)、(0.1336±0.0165)、(0.1156±0.0072)比(0.2227±0.0449),P0.05]。结论扶正祛浊法对糖尿病肾脏炎症反应有抑制作用,从而对DN大鼠肾脏产生保护作用。     

TLR4/MyD88/NF-κB通路基因及相关炎症因子在继发性脊髓损伤患者中的表达

目的: 探讨Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子（MyD88）/NF-κB通路基因及相关炎症因子TNF-α、IL-12、IL-6在继发性脊髓损伤（SSCI）患者中的表达及与预后的相关性。方法: 回顾性分析2017年7月至2018年6月浙江省台州医院收治的105例SSCI患者及40名健康体检者的临床资料。根据Frankel脊髓损伤分级评估结果将SSCI患者分为完全损伤组和不完全损伤组,根据日本矫形外科学会（JOA）患者神经功能改善率将SSCI患者分为预后优良组和预后不良组。对比SSCI患者与健康体检者、完全损伤组与不完全损伤组、预后优良组与预后不良组外周血单个核细胞（PBMC）中TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达及血清TNF-α、IL-12、IL-6水平;采用Logistic回归分析法分析导致SSCI患者预后不良的危险因素,并采用Pearson相关性分析法分析JOA改善率与上述指标的相关性。结果: SSCI患者PBMC中TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达量及血清TNF-α、IL-12、IL-6水平均高于健康体检者（均P < 0.01）,完全损伤组上述指标均高于不完全损伤组,且预后不良组高于预后优良组（均P < 0.01）。预后不良组Frankel分级A级、脊髓水肿或出血、脊髓损伤长度超过4 cm患者的比例均高于预后优良组（均P < 0.01）,且经Logistic回归分析证实Frankel分级、脊髓水肿或出血、脊髓损伤长度及PBMC中TLR4、MyD88、NF-κB mRNA相对表达量、血清TNF-α、IL-12、IL-6水平均是导致SSCI患者预后不良的危险因素（P < 0.05或P < 0.01）。Pearson相关性分析结果显示,JOA改善率与PBMC中TLR4、MyD88、NF-κB mRNA相对表达量以及血清TNF-α、IL-12、IL-6水平均呈负相关（P < 0.05或P < 0.01）。结论: TLR4/MyD88/NF-κB通路激活及其相关炎症因子TNF-α、IL-12、IL-6表达上调参与SSCI疾病进展且与神经炎症损伤关系密切,可作为评估SSCI患者预后的参考指标。     

瑞马唑仑对颅脑损伤大鼠脑组织损伤及TLR4/MyD88/NF-κB通路的影响

目的:探讨瑞马唑仑(Rem)对颅脑损伤(BI)大鼠脑组织损伤及Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子-κB(NF-κB)通路的影响。方法:构建BI大鼠模型;将所有大鼠分为对照组(Control组)、颅脑损伤组(BI组)、瑞马唑仑低、中、高剂量组(Rem-L、Rem-M、Rem-H组)、瑞马唑仑高剂量+TLR4激活剂LPS组(Rem-H+LPS组);检测大鼠脑组织含水量;ELISA检测大鼠脑组织中的炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平;HE染色观察大鼠脑组织的形态学变化;TUNEL法检测脑组织神经元凋亡情况;Western blot法检测大鼠脑组织TLR4、MyD88、NF-κB、p-NF-κB p65、Bax、Bcl-2蛋白表达情况。结果:与Control组相比,BI组大鼠脑组织神经元变性坏死,数量减少,体积缩小,损伤严重,神经功能评分、脑组织含水量、神经元凋亡率和TNF-α、IL-1β、IL-6水平及Bax、TLR4、MyD88、NF-κB、p-NF-κB p65表达升高,Bcl-2表达降低...     

TLR4-MyD88-NF-kB信号通路与肝炎-肝纤维化-肝癌轴相关性研究进展

Toll样受体4(TLR4)-髓样分化因子88(MyD88)-核转录因子κB(NF-κB)信号通路是疾病理变反应中的关键通路,广泛存在于各组织细胞中,是介导炎性因子在细胞内与细胞之间相互表达的重要信号通路之一.研究发现TLR4-MyD88-NF-κB信号通路在肝免疫异常、炎症反应触发的肝损伤、肝星状细胞的活化及肝纤维化恶化与肝癌的发展中均有重要调节作用.该信号通路在"肝炎-肝纤维化-肝癌轴"(IFC轴)的动态变化与肝癌的转移中可能是一个关键的调节点.本文就TLR4-MyD88-NF-κB信号通路参与IFC轴疾病病理机制的最新研究进展作一综述,为以后相关研究提供参考.     

木犀草素通过TLR4/MyD88信号通路对大鼠烟曲霉菌性角膜炎的调控作用

探讨木犀草素通过Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）信号通路对大鼠烟曲霉菌性角膜炎（AFK）的调控作用,阐明其抑制AFK炎症反应的机制。     

基于TLR4/MyD88/NF-κB通路异甘草素对大鼠颅脑外伤后炎症反应及Th1/Th2失衡的影响

【摘要】 目的 探讨异甘草素（ISL)通过介导Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）/核转录因子-κB (NF-κB)通路对大鼠颅脑外伤 （TBI)炎症反应及Th1/Th2细胞失衡的影响。方法将SPF级大鼠随机分为模型组、ISL低剂量组（20 mg·kg-1）、ISL高剂量组（40 mg·kg-1）、阳性药物组（甘油果糖氯化钠,40 mg·kg-1）,每组10只,另设对照组。HE染色观察大鼠脑组织病理学变化;比较血清白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-4（IL-4）、γ干扰素（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,脑组织TLR4、My D88、NF-κB p65 mRNA及TLR4、My D88、NF-κB p65、磷酸化核转录因子-κB p65（p-NF-κB p65）蛋白表达。结果与对照组比较,模型组血清IL-1β、IL-4、TNF-α水平,脑组织TLR4、My D88 mRNA及TLR4、My D88、p-NF-κB p65蛋白水平升高,血清IFN-γ水平降低（均P＜0.05）;与模型组比较,ISL低剂量组、ISL高剂量组、阳性药物组血清IFN-γ水平升高,IL-1β、IL-4、TNF-α水平降低,脑组织TLR4、My D88 mRNA及TLR4、My D88、p-NF-κB p65蛋白水平降低（均P＜0.05）;与ISL低剂量组比较,ISL高剂量组、阳性药物组血清IFN-γ水平升高,IL-1β、IL-4、TNF-α水平降低,脑组织TLR4、My D88 mRNA及TLR4、My D88、p-NF-κB p65蛋白水平降低（均P＜0.05）;与ISL高剂量组比较,阳性药物组血清IFN-γ水平升高,IL-1β、IL-4、TNF-α水平降低,脑组织TLR4、My D88 mRNA及TLR4、My D88、p-NF-κB p65蛋白水平降低（均P＜0.05）。HE结果显示,ISL低剂量组、ISL高剂量组、阳性药物组脑组织病变较模型组出现不同程度改善,ISL高剂量组和阳性药物组改善尤为明显。结论ISL能有效改善大鼠TBI炎性反应、调节Th1/Th2细胞平衡,可能基于调控TLR4/MyD88/NF-κB通路相关mRNA和蛋白表达发挥作用。     

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨雷帕霉素对狼疮小鼠肾脏的保护作用

目的 观察雷帕霉素(rapamycin, RAPA)对狼疮性肾炎(lupus nephritis, LN)模型小鼠Toll样受体4/髓系分化因子88/核转录因子κB(TLR4/MyD88/NF-κB)通路基因和蛋白表达水平的影响,探讨其治疗狼疮性肾炎的可能分子机制。方法 20周龄C57BL/6小鼠和MRL/lpr小鼠40只,分为正常对照组(n=10)、治疗组(n=10)、狼疮组(n=10)、狼疮治疗组(n=10)。正常对照组和狼疮组给予相同体积的生理盐水,治疗组和狼疮治疗组给予RAPA 2.0 mg/kg腹腔注射,连续28天;于第28天收集24小时尿液,第29天处死小鼠。检测24小时尿蛋白水平和血清anti-dsDNA、ANA、anti-Sm水平;HE、Masson、PAS、PASM染色方法观察肾组织病理变化;qRT-PCR、免疫荧光检测肾组织中TLR4、MyD88和NF-κB-p65基因和蛋白表达水平;TUNEL染色观察肾组织细胞凋亡水平。结果 (1)雷帕霉素治疗后,24小时尿蛋白和血清ANA、anti-dsDNA、anti-Sm明显改善(P<0.05),病理损伤明显改善。(2...     

结直肠癌组织Toll样受体4和髓系分化蛋白88mRNA检测

目的 通过检测结直肠癌组织Toll样受体4(TLR4)mRNA和髓系分化蛋白88(MyD88)mRNA,并分析其与分化、分期、转移的相关性,阐明TLR4和MyD88在结直肠癌发生发展中的作用.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测62例结直肠癌和25例癌旁正常组织TLR4mRNA和MyD88mRNA.结果 结肠...     

电针对急性痛风性关节炎大鼠踝关节滑膜组织TLR/MYD88信号通路的影响

目的 探讨电针对急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis,AGA）大鼠踝关节滑膜组织TOLL样受体（TLR）/髓样分化因子88 (MYD88)信号通路相关蛋白表达的影响。方法 将50只SD雄性大鼠随机分为正常组、硅晶体（SMD）组、AGA模型组、西药组、电针组,每组10只;正常组常规喂养,SMD组采用SMD溶液注入关节腔,作为关节炎症模型对照,其余各组采用尿酸钠溶液注射法建立急性痛风性关节炎模型。正常组、SMD组与AGA模型组大鼠造模前2 d开始按20 mL/kg 予以生理盐水灌胃,西药组按1 mg/kg予以秋水仙碱溶液灌胃,电针组选取大鼠受试侧三阴交、解溪、昆仑穴位施针,频率1.5～2 Hz,疏密波,电压9 V,电流强度1～3 mA,留针20 min,上述处理均为1次/d,连续9 d。定期观察各组大鼠受试关节肿胀指数,并采用免疫组化法检测受试关节滑膜组织中TLR2、MYD88蛋白的表达。结果 与正常组比较,SMD组大鼠受试关节肿胀指数增加(P<0.05)、而受试踝关节滑膜组织中TLR2、MYD88蛋白的表达差异无统计学意义（P>0.05）;模型组大鼠受试关节肿胀指数、滑膜组织TLR2、MYD88的表达则明显增加(P<0.05);与模型组比较,西药组和电针组大鼠受试踝关节肿胀指数减小(P<0.05),大鼠受试踝关节滑膜组织中TLR2、MYD88蛋白的表达降低(P<0.05);电针组与西药组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 电针能够减轻急性痛风性关节炎的症状,这可能与调节TLR/MYD88信号通路中TLR2、MYD88蛋白的表达有关。     

美沙拉嗪联合培菲康治疗溃疡性结肠炎患者的疗效及对 TLR4、MyD88的影响

目的：观察美沙拉嗪联合培菲康治疗溃疡性结肠炎（UC）的疗效及对患者血清Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子88（MyD88）的影响。方法将86例UC患者按随机数字表法分为观察组和对照组,每组43例;观察组给予美沙拉嗪联合培菲康治疗,对照组单纯给予美沙拉嗪治疗,8周为一疗程;观察两组患者的临床疗效,测定血清中TLR4、MyD88的含量变化,并记录治疗中的不良反应情况。结果观察组临床总有效率（95.35％）明显高于对照组（81.40％）,差异有统计学意义（ P ＜0.05）;两组患者血清TLR4、MyD88含量均较治疗前明显下降（ P ＜0.05或P ＜0.01）,且观察组TLR4的下降比对照组更为明显（ P ＜0.05）;两组不良反应发生率比较差异无统计学意义（ P ＞0.05）。结论美沙拉嗪联合培菲康治疗UC疗效确切、安全性好,其作用可能与调节外周血TLR4、MyD88的含量有关。     

木犀草素通过TLR/MyD88/NF-κB 通路参与急性痛风性关节炎大鼠的抗炎作用

目的：探讨木犀草素通过Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)/髓样分化因子(myeloid differentiation factor 88, MyD88)/核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)通路减轻急性痛风性关节大鼠炎症的作用及其机制。方法： 将60 只雄性Wistar 大鼠随机分为5 组：正常对照组、尿酸钠(monosodium urate,MSU)组、秋水仙碱组、木犀草素低剂量 组(50 mg/kg)、木犀草素高剂量组(150 mg/kg)。于大鼠踝关节局部注射尿酸钠晶体混悬液制备急性痛风性关节炎模 型,观察各组大鼠不同时间点的关节肿胀指数,并测定各组大鼠血清及滑膜中白细胞介素1β (interleukin-1β,IL-1β)、 白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平,采用实时PCR检测滑膜 组织中TLR2,TLR4,MyD88 mRNA 水平,蛋白质印迹测定滑膜组织中TLR2,TLR4,MyD88,磷酸化核因子 κBp65(phosphorylated-nuclear factor κB,p-NF-κB p65)蛋白表达,HE染色观察踝关节及其周围软组织炎症细胞情况, 免疫组织化学法测定NF-κB表达。结果： 与MSU组相比,木犀草素高、低剂量组及秋水仙碱组的关节肿胀指数均明 显降低(P<0.05),IL-1β,IL-6,TNF-α 的水平也显著降低(P<0.01),TLR2,TLR4,MyD88 mRNA和蛋白水平及NF- κB的蛋白水平均显著降低(P<0.01)。免疫组织化学结果显示：与正常对照组比较,木犀草素和秋水仙碱组大鼠踝关 节的炎症细胞明显减少,滑膜增生减少,软骨表面光滑,无明显软骨和骨侵蚀。结论： 木犀草素可通过下调TLR/ MyD88/NF-κB通路减轻急性痛风性关节炎的炎症反应,有望成为治疗急性痛风性关节炎的有效药物。     

结直肠癌中TLR4的表达及其与FasL、EGFR的关系

目的观察Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)在结直肠癌和正常大肠组织中的表达情况,并且分析其表达与Fas配体(fas ligand,FasL)和表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)表达的关系。方法采用免疫组化SP三步法检测58例结直肠癌和25例正常大肠组织TLR4、FasL和EGFR的表达。通过Spearman’s相关分析,探讨TLR4与FasL或EGFR表达的关系。结果 58例结直肠癌中TLR4、FasL和EGFR表达的阳性率分别为59%、71%和83%,均显著高于其在正常大肠组织中的表达阳性率20%、22%和31%(P<0.05)。TLR4的表达与结直肠癌的远处转移具有相关性(χ2=4.063,P<0.05)。TLR4和FasL表达具有正相关性(r=0.249,P<0.01),TLR4表达强的部位多伴有FasL的强表达,TLR4表达弱的部位也常伴随FasL的弱表达。TLR4与EGFR的表达不具有相关性(r=0.345,P>0.05)。结论 TLR4的表达与结直肠癌远处转移有关,TLR4可能通过调控FasL的表达而参与结直肠癌的免疫反击。     

肝细胞癌组织中TLR4、MyD88、NF-kB表达量及其与临床病理特征的相关性分析

目的  研究肝细胞癌组织中TLR4、MyD88、NF-κB表达量及其与临床病理特征的相关性。方法  选择肝细胞癌患者并采集血清、肝细胞癌组织、癌旁组织,选择健康志愿者并采集血清,检测肝脏组织中TLR4、MyD88、NF-κB的mRNA含量及血清中AFP、TK1、GP73、ASPH的含量。结果  肝细胞癌组织中TLR4、MyD88、NF-κB的mRNA含量均高于癌旁组织;TNM III-IV期、低未分化、淋巴结转移的肝细胞癌组织中,TLR4、MyD88、NF-κB的mRNA含量均高于TNM I～II期、高中分化、无淋巴结转移的肝细胞癌组织;肝细胞癌患者血清中AFP、TK1、GP73、ASPH的含量高于健康对照组,且与肝细胞癌组织中TLR4、MyD88、NF-κB的mRNA含量呈正相关。结论  肝细胞癌组织中TLR4通路功能增强且与肝细胞癌的临床病理分期、血清肿瘤标志物含量密切相关。

     

吡非尼酮对急性胰腺炎大鼠胰腺损伤及TLR4/MYD88信号通路的影响

目的 探讨吡非尼酮（PFD）对急性胰腺炎（AP）大鼠胰腺损伤的影响及其作用机制。方法 将32只SPF级SD雄性大鼠随机分为对照组、AP组及PFD低、高剂量组,每组8只。AP组及PFD低、高剂量组均成功复制AP模型,PFD低、高剂量组分别给予PFD 50和150 mg/（kg·d）灌胃治疗24 h,AP组、对照组大鼠则灌胃等量0.5%羧甲基纤维素钠。干预完成后,测定各组大鼠腹水量、血清淀粉酶（AMY）、血清炎症因子水平,观察各组大鼠胰腺组织病理变化并进行病理评分,比较各组大鼠胰腺组织Toll样受体4/髓样细胞分化蛋白88(TLR4/MYD88)通路蛋白的表达。结果 与对照组比较,AP组大鼠腹水量增加（P <0.05）,血清AMY、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平、病理评分、Toll样受体4(TLR4)和MYD88蛋白相对表达量表达升高（P <0.05）;与AP组比较,PFD低、高剂量组腹水量减少（P <0.05）,血清AMY、IL-6、TNF-α水平、病理评分、TLR4和MYD88蛋白相对表达量降低（P <0.05）;与PFD低剂量组...