介绍一种大鼠脑中γ—氨基丁酸受体的检测方法

目的：介绍一种大鼠脑中γ＝氨基丁酸本的快速简便的检测方法。方法：用＾３Ｈ－ＧＡＢＡ为配体来检测大鼠脑神经末梢微囊中的ＧＡＢＡ受体。检测ＧＡＢＡ受体的合适条件是１．０×１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ的脑膜蛋白在３７℃下反应３０ｍｉｎ。结果：大鼠脑中存在ＧＡＢＡ受体,Ｋｄ＝（９７．３±５．８）×１０＾－９ｍｏｌ／ｇ蛋白±０．０１０３×１０＾－９ｍｏｌ／ｇ蛋白,属低亲和力受体。结论：用＾３Ｈ－ＧＡＢＡ可以检测大鼠     

牛小脑γ-氨基丁酸受体的溶液化及其纯化

牛小脑突触膜GABA受体经非离子型去垢剂(Nonidet P40)溶液化和超滤分离后于4℃冰箱或0℃放置5天左右,其[~3H]-GABA特异结合活性(cpm/mg蛋白)较膜结合GABA受体提高115倍,该结合活性至少可维持20天。根据该蛋白与[~3H]-GABA特异结合的可饱和性、可逆性、高亲和部位的存在及其配基专一性等,表明它仍具备膜结合GABA受体的特征。该受体蛋白不具有[~3H]-氟硝基安定的结合活性,在7.5%聚丙烯酰胺凝胶电泳为单一染色区带,等电点5.2左右,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳显示两种亚基,主要亚基为4.4万道尔顿。对该受体蛋白的理化性质及分子量大小进行了初步观察。     

梭曼中毒影响γ-氨基丁酸系统吗?

用体外放射性配体结合实验方法检测了梭曼对牛小脑γ-氨基丁酸(GABA)受体和GABA摄取的影响.10~(-3)～10~(-6)M未影响GABA受体结合;对GABA摄取有轻微抑制IC_(50)为1.4×10~(-3)M.这一结果未能支持加拿大学者Lundy关于梭曼中毒有可能影响GABA受体结合的假设.对梭曼中毒与GABA系统的关系进行了讨论.     

γ射线诱发小鼠γ-氨基丁酸受体结合活性改变和神经行为变化的观察

目的观察电离辐射对γ-氨基丁酸(GABA)受体功能的影响以及动物受照射后神经行为的变化。方法采用^60Coγ射线照射小鼠头部，观察不同剂量辐射对小鼠脑内神经细胞中GABA受体活性及其功能结合位点的影响，并对小鼠行为活动改变进行测定。结果辐射可显著降低神经细胞中GABA受体生物结合活性，表现为GABA受体蛋白平衡解离常数(Kd)升高，结合活性降低。受照射后GABA受体的异常变化与其受照射剂量有关。受照射小鼠行为测试结果显示：照射48h后，动物表现出燥动、焦虑等行为活动异常表现，与注射GABA受体阻断剂动物的行为活动变化相一致。结论电离辐射可引起GABA受体活性改变。根据GABA受体阻断剂动物的行为变化实验结果，推测受照射后GABA受体功能和结合活性变化是引发神经行为变化的直接因素。     

神经毒剂急性中毒时大鼠脑内GABA受体结合活性的变化

目的：通过探讨γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）受体在神经毒剂急性中毒时的活性状态,为临床治疗此类中毒引起的中枢惊厥症状提供新的思路。方法：提取含大鼠脑神经末梢微囊ＧＡＢＡ受体的匀浆液,通过大鼠体外实验、体内染毒实验（动物抽搐发作和未发作）来观察ＧＡＢＡ受体变化。结果：在体外实验中,１０ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１的梭曼和丙氟磷均能显著降低大鼠ＧＡＢＡ配体与受体的结合率（Ｐ〈０．０１）,１ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１的梭曼仍能显著降低ＧＡＢＡ受体的结合率（Ｐ〈０．０５）。大鼠皮下注射梭曼９９μｇ．ｋｇ＾－１发现＾３Ｈ－ＧＡＢＡ的结合值在抽搐发作时显著降低;大鼠腹腔注射丙氟磷６ｍｇ．ｋｇ＾－１,＾３Ｈ－ＧＡＢＡ的结合值亦显著降低。结论：神经毒剂在一定浓度下能显著降低大鼠脑ＧＡＢＡ受体的结合率,提示ＧＡＢＡ受体参与了某些神经毒剂的急性中毒过程。     

μ型阿片肽受体对癫痫敏感大鼠海马γ-氨基丁酸神经元影响

目的探讨μ型阿片肽受体(MORs)介导大鼠癫痫敏感性形成过程中海马γ-氨基丁酸(GABA)神经元的变化。方法红藻氨酸(KA)皮下注射建立大鼠癫痫发作模型,采用脑立体定位及微渗透泵技术,海马内微量注射MORs激动剂吗啡感受素(PL017)或拮抗剂β-呋纳曲胺(β-FNA)。7 d后通过阈下剂量KA检测大鼠癫痫发作敏感性,应用免疫组织化学方法观察海马齿状回及门区GABA神经元数目和灰度变化。结果 KA诱导癫痫敏感性形成大鼠的海马齿状回及门区GABA神经元数目明显减少,染色强度减低。PL017可进一步减少海马齿状回及门区GABA神经元数目及其染色强度,而β-FNA能够明显改善KA及PL017对GABA神经元的损伤作用。结论 MORs介导癫痫发作敏感性形成机制与海马齿状回及门区GABA神经元损伤有关。     

脑内γ-氨基丁酸和谷氨酸的一种简便测定法

关于脑组织液中γ-氨基丁酸(GABA)及其前体谷氨酸(Glu)的测定最早采用双向纸层析分光光度法,操作费时且受多种因素影响,重复性较差。近年来,酶法、气相色谱-质谱法、柱层析荧光测定法等新技术很灵敏,但操作方法都较复杂并要求特定的试剂和昂贵的仪器设备。Enna等提出的放射性受体分析法标准曲线采用半对数作图,我们尚不能对其重复性下结论。我们根据一般实验室的设备条件建立了纸电泳比色法同时测定动物脑组织内GABA及Glu的含量。此法简便,特异性较高。经考核,结果符合要求,所测得的正常大鼠小脑中     

大鼠氧惊厥时脑内μ-阿片受体的变化

目的　探讨大鼠氧惊厥时脑内 μ-阿片受体的变化。方法　用 [3H]-羟甲芬太尼作为特异性标记配体 ,采用放射配体受体结合实验 (radioligand binding assay,RBA) ,测定在几种不同气体及压力的暴露条件下 ,大鼠脑内 μ-阿片受体的 k D值和 Bmax值的变化。结果　大鼠氧惊厥前 ,脑内 μ-阿片受体的 k D值即有增大趋势 (但 P>0 .0 5 ) ,Bmax值减小 (P<0 .0 1) ;氧惊厥时 k D值进一步升高 (P<0 .0 1) ,Bmax值反而增大 (P<0 .0 1)。结论　结果提示 :(1)氧惊厥发作中 ,μ-阿片受体的数量增多 ,而其结合活性降低。(2 )在高压氧 (HBO)暴露中 ,μ-阿片受体参与了氧惊厥的过程     

γ-氨基丁酸A型-苯二氮革受体显像剂在神经系统疾病中的应用

γ-氨基丁酸A型-苯二氮革(GABAA-BZ)受体广泛分布于中枢神经系统,是嵌于神经细胞膜上的异质性多肽五聚体,不同的亚单位组合发挥不同的神经抑制性药理作用,如镇静催眠、抗惊厥、抗焦虑等.PET可用于活体内受体结合的研究.GABAA-BZ受体PET显像剂分为拮抗剂、激动剂、反向激动剂3类,其中以拮抗剂显像剂11C-氟马西尼最为成熟,在癫癎、焦虑症、抑郁症、植物状态、成瘾等神经精神疾病中广泛应用.     

结核病4种实验室检测方法的评价

结核病４种实验室检测方法的评价１０００９１北京解放军第３０９医院李晓明王巍张敦熔李国利夏湘萱吴雪琼关键词结核，肺；聚合酶链反应；抗酸染色；酶联免疫吸附试验；细菌培养中国图书资料分类号Ｒ３７８．９１在结核病病原学诊断的方法中，抗酸染色和细菌培养是较传统...     

柱前衍生—电化学检测HPLC法测定大鼠脑内的谷氨酸和γ—氨基丁酸

目的：建立大鼠脑组织内谷氨酸和γ－氨基丁酸的ＨＰＬＣ测定方法。方法：大鼠脑组织匀浆液低温离心,上清液经甲醇沉淀蛋白并稀释至合适浓度后适浓度后与邻苯二醛在亚硫酸钠存在下发生衍生化反应,衍生物经ＨＰＬＣ分离,电化学检测。结果：谷氨酸在０．１～２．０μｇ．ｍｌ＾－１,γ－氨基丁酸在０．０５～１．０μｇ．ｍｌ＾－１浓度范围内,线性关系良好。谷氨酸测定的日内和日间变异系数（ＲＳＤ）分别小于３．４％和１０７．２％～１１０．０％,谷氨酸和γ－氨基丁酸的最小检出浓度均为（ＲＳＤ）分别小于４．２％和８．６％,两回收率分别为９５．９％～１０２．３％和１０７．２％～１１０．０％,谷氨酸和γ－氨基丁酸的最小检出浓度均为５ｎｇ．ｍｌ＾－１。ＳＤ大鼠小脑、皮层、丘脑、海马内谷氨酸的含量分别为９６０．２、１０６８．０、４６０．２和８４６．     

介绍一种颧骨的摄影方法

颧骨的骨质检查在临床工作中由外伤引起较常见，颧骨的摄片是诊断病情所必需的，而摄片质量的好坏常常是影响诊断的关键因素。以往传统的摄影方法常用顶颌位、颌顶位。病人不易配合，摄片成功率很低，很难取得满意效果，从而影响诊断结果。笔者在多年的工作实践中总结出一种摄影方法，现介绍如下。     

天狼星红偏振光法--胶原纤维染色的一种理想方法

胶原是细胞外基质的主要成分之一 ,不仅起支架作用 ,且具有特殊的生理功能。尤其在创伤修复中 ,机体通过胶原合成和降解 ,对组织创伤愈合后的改建 ,使组织修复得以完成和完善[1]。故研究胶原纤维的变化规律 ,对进一步揭示组织修复的机理很有益处。但目前用于研究胶原纤维的组织转染和免疫组化法尚有很多缺陷 ,而天狼星红偏振光法可克服它们的不足。1　材料与方法1 .1　材料 :①常规ＨＥ染色试剂 ;②天狼星红染料 (军事医学科学院放射病理研究所提供 )。1 .2　方法 :将切片常规脱蜡至水后 ,在玻片上加 80 0 μｌ天狼星红染料 ,3 7℃温育 1ｈ…     

磁共振波谱MEGA-PRESS序列检测帕金森病纹状体γ-氨基丁酸的研究

目的 探讨MEGA-PRESS波谱编辑序列结合LCModel软件检测帕金森病(PD)患者双侧纹状体γ-氨基丁酸(GABA)浓度的价值.方法 选取符合诊断标准的45例PD患者和47例正常对照组作为研究对象,均行MEGA-PRESS波谱编辑序列扫描,获取GABA/Cr值;再应用LCModel软件获取GABA浓度.结果 (1)与对照组相比,PD组双侧纹状体GABA平均浓度升高,差异有统计学意义(P=0.045);GABA/Cr值均值升高,但无统计学意义(P=0.183).(2)PD患者症状严重侧的同侧、对侧纹状体GABA/Cr值及GABA浓度比较,无显著性差异(P＞0.05).(3) PD组双侧纹状体GABA浓度均值与临床病程、统一帕金森病评定量表(UPDRS)评分无显著相关性(r=0.108,0.031;P-0.438,0.823).结论 MEGA-PRESS序列结合LCModel软件可以较准确、客观检测PD患者纹状体GABA浓度.     

运动对大鼠脑及前列腺组织雄激素受体结合容量的影响

对大鼠脑组织的雄激素受体（ａｎｄｒｏｇｅｎｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＡＲ）结合容量与典型雄激素靶器官前列腺组织的雄激素受体结合容量进行不同运动方式后的对比观察。结果表明，不同方式的运动对大鼠脑组织的ＡＲ结合容量的影响与典型雄激素敏感组织前列腺的ＡＲ结合容量的变化不一致；长期运动，无论运动强度如何，均可使脑组织的ＡＲ结合容量水平上升，但前列腺组织的ＡＲ水平均下降；一次力竭运动对脑组织的ＡＲ结合容量影响不大，但可降低前列腺组织的ＡＲ结合容量。     

介绍一种快捷组织脱水、透明方法

基层医院病理科外检标本少 ,常规组织脱水、透明需要时间长。脱水透明溶液易挥发 ,消耗量大 ,我们工作中摸索出缩短脱水时间的方法 ,经 10 0 0余例应用 ,效果满意。能够得到三个微米的切片。方法简介如下。取组织块厚 0 .2ｃｍ左右经乙醇 -甲醛液 (95 %乙醇 90ｍｌ,40 %甲醛 10ｍｌ)固定 30ｍｉｎ后 ,依次入 95 %、95 %、10 0 %、10 0 %酒精、丙酮、二甲苯缸 ,各浸泡 2 5ｍｉｎ。常规浸蜡 ,包埋。用本方法脱水、透明优点 :①耗时少 ,全过程只需 15 0ｍｉｎ ;②节省溶液量 ,成本低 ;③适合基层病理科使用 ;④能够得到和常规脱水、透明相媲美…     

磁共振波谱成像定量检测活体γ-氨基丁酸浓度的应用研究

γ-氨基丁酸（GABA）的减少与缺失导致脑内神经元过度兴奋,可引发癫痫、帕金森病、精神分裂症、焦虑、运动障碍等神经和精神性疾病。测定GABA含量对相关疾病的临床治疗和诊断有着十分重要的意义。磁共振波谱（MRS）技术可以直接定量检测活体脑组织内GABA浓度。本文旨在阐述MRS检测脑内GABA含量的技术原理,并对这项技术在几种相关病变中的应用进行综述。     

力竭运动前后活体大鼠纹状体谷氨酸和γ-氨基丁酸水平的动态变化

目的:观察一次性力竭运动过程中大鼠纹状体内神经递质谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)含量及其比值的动态变化,探讨运动疲劳后纹状体神经元电活动改变的可能机制.方法:8周龄雄性Wistar大鼠8只,通过手术预先将透析套管定植入左侧纹状体(P:0.2,L:3,H:3.2).采用活体微透析与高效液相色谱(HPLC)检测...     

模拟失重对大鼠脊髓小脑内γ-氨基丁酸免疫反应性的影响

目的 观察模拟失重对大鼠脊髓小脑中间区Ⅲ、Ⅳ小叶皮层和小脑间位核内γ-氨基丁酸(GABA)免疫反应性的影响.方法 将大鼠按随机配对原则分为2组:模拟失重14 d组及正常对照组,每组各10只.采用大鼠尾部悬吊法建立模拟失重模型,用免疫组织化学技术观察大鼠脊髓小脑中间区Ⅲ、Ⅳ小叶皮层和小脑间位核内GABA免疫阳性神经元数量.结果 正常大鼠脊髓小脑中间区Ⅲ、Ⅳ小叶皮层的3个细胞层内以及问位核均有GABA阳性神经元存在.模拟失重14 d后大鼠脊髓小脑中间区Ⅲ、Ⅳ小叶分子层内GABA阳性神经元数量明显减少(t=3.488,P<0.05),而浦肯野细胞层、颗粒层及间位核内GABA阳性神经元数量没有明显变化(P>0.05).结论 以上结果提示模拟失重后脊髓小脑中间区Ⅲ、Ⅳ小叶内神经环路的活动发生了改变,进一步证实了模拟失重可以导致肌肉本体感觉传人信息在高位中枢的分析整合过程中发生了变化.