神经生长因子在不同条件下的活性研究

目的研究各种因素对神经生长因子(NGF)生物活性及免疫原性的影响。方法把天然NGF在不同浓度的变性剂、去污剂、氧化还原剂及其配伍中或在不同pH值、不同温度下进行孵育处理,测定其生物活性和免疫原性的变化。结果NGF在8mol/L尿素中孵育过夜后生物活性下降10倍,在浓度低于5mol/L的尿素中孵育过夜后生物活性基本不变;十二烷基硫酸钠和巯基乙醇对NGF生物活性破坏较大,且尿素可增加巯基乙醇的破坏作用;还原型谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽配合使用对NGF生物活性的影响较小;NGF对温度敏感,在60℃孵育1h后活性降低约30倍,在37℃孵育48h生物活性开始下降;NGF在酸、碱中稳定。生物活性降低的NGF免疫原性未见明显改变。结论NGF的生物活性易受多种因素影响,但其免疫原性较稳定。     

异丙酚在不同pH值环境下对苯甲酰苯甲酸ATP诱发的巨噬细胞嘌呤2X7受体电流的影响

目的:观察在不同pH值条件下巨噬细胞膜嘌呤2X7(P2X7)受体电流对其特异性激动剂苯甲酰苯甲酸ATP(BZATP)的敏感性及异丙酚对P2X7受体电流的影响。方法:应用培养的RAW264.7巨噬细胞,采用全细胞膜片钳技术,向细胞施加BZATP(10～10000μmol/L)5s,记录电流,计算细胞外液pH值为7.4或6.0时BZATP的半效浓度(EC50)。观察异丙酚对P2X7受体电流的影响时,在细胞外液pH值为6.5或7.4时,向细胞预先施加异丙酚(1、3、10、30、100μmol/L)1min,再施加2倍EC50水平的BZATP持续5s,计算异丙酚影响P2X7受体电流的半效抑制浓度(IC50)。观察异丙酚在不同pH值环境下对BZATP的浓度效应曲线的影响时,先施加IC50水平的异丙酚1min,再施加不同浓度的BZATP并持续5s,计算BZATP的EC50。结果:BZATP在细胞外液pH值为7.4或6.0时诱发P2X7受体电流的EC50分别为(112±26)μmol/L或(643±87)μmol/L。细胞外液pH值为7.4时,异丙酚可浓度依赖性地抑制P2X7受体电流,其IC50为(31±6)μmol/L,且此水平异丙酚可使BZATP的浓度效应曲线右移。细胞外液pH值为6.0时,异丙酚可浓度依赖性地增强P2X7受体电流,其EC50为(38±6)μmol/L,此浓度异丙酚使BZATP的浓度效应曲线发生左移。结论:细胞外液pH值降低使P2X7受体对BZATP的敏感性下降,临床相关浓度的异丙酚在细胞外液pH值为7.4时对P2X7受体电流表现为剂量依赖性的抑制作用,但pH值为6.0时则呈现增强作用。     

pH值、温度、底物浓度对L1型金属β-内酰胺酶活性的影响

目的 研究pH值、温度、底物浓度对L1型金属β-内酰胺酶活性的影响.方法 将表达后的L1酶纯化,以亚胺培南为底物,分光光度法测定不同pH值和温度的酶活性及不同底物浓度下的酶反应初速度,观察不同pH值,温度及底物浓度对酶活性的影响.结果 L1酶的最适pH为8.2,L1酶在40℃时活性最高.在亚胺培南浓度不超过30μmol/L时,反应初速度随底物浓度增加而呈线性增加,当底物浓度超过100μmol/L时,酶活性反而受抑,初速度明显下降.结论 该结果对进一步研究该酶的结构及酶学特性有重要意义,并可为开发有效的L1金属β-内酰胺酶抑制剂提供理论指导.     

重组猪羧肽酶原B在大肠杆菌中的表达与复性研究

利用大肠杆菌表达系统,表达猪源羧肽酶原B蛋白包涵体,并对包涵体的体外复性条件进行优化。对猪源羧肽酶原B基因进行设计,优化稀有密码子,并将基因片段插入到pET28a载体中,构建表达质粒pET28a-proCPB,并转化入BL21(DE3)中。通过乳糖诱导表达得到包涵体。通过检测酶的比活力来考查复性液的pH、蛋白终浓度、氧化还原对比例、复性时间、复性温度对复性程度的影响。最终确定的体外稀释复性条件为:复性液成份为100mmol/L Gly-NaOH、pH=9.5、GSH与GSSG的比例为1∶0.8(GSH为1mmol/L)、蛋白终浓度为200μg/ml、复性温度为25℃、复性时间24h。通过检测,复性液中酶的比活力为11.7u/mg,经过DEAE纯化后酶的比活力可达到73u/mg。     

酸碱度和血红蛋白浓度对胶体金法检测潜血的影响因素分析

目的观察酸碱度、血红蛋白浓度对胶体金法检测潜血结果影响程度。方法用氯化钠溶液稀释血液至浓度为0.05～102.4mg/L,用氢氧化钠溶液和盐酸调整pH值,使用胶体金法对监测物进行潜血检测,观察pH值和Hb浓度对胶体金法检测潜血的影响。结果 Hb浓度在0.2～0.8mg/L或〉12.8mg/L时,结果受pH值影响较大;pH〈4时可出现假阴性结果。结论对胶体金法检测潜血阴性的可疑标本应进行连续稀释,并调整pH值至5～7之间,从而提高潜血诊断的准确性。     

牛肝β-D-葡萄糖醛酸苷酶的分离纯化和性质研究

采用自溶、35 %硫酸铵分部沉淀、CM 纤维素柱层析、羟基磷灰石柱层析由动物肝脏中分离纯化β D 葡 萄糖醛酸苷酶 ,获得比活 2 6 70 0U/mg的纯酶 ,活力回收率为 4 2 .8% ,纯化的酶经SDS PAGE呈单一条带。该酶以 β D 酚酞葡萄糖醛酸苷为底物的Km值为 2 .0× 10 -4mol/L ,以对硝基苯酚葡萄糖醛酸苷为底物的Km值为 2 .5× 10 -4mol/L。在 pH值 5～ 6的范围内 ,该酶的活力较高 ,最适 pH值为 5 .5 ,在pH值 5 .5时稳定性最好。在 30～ 5 0℃范围内酶活力均较稳定     

利用反向胶束技术从微紫青霉菌中提取木聚糖酶的初步研究

目的利用反向胶束技术从微紫青霉菌中提取木聚糖酶。方法采用双-2-乙基己基硫代琥珀酸钠(AOT)异辛烷反胶束溶液萃取和反萃取由微紫青霉菌产生的木聚糖酶,探讨水相pH值、离子强度、AOT浓度等因素对分离效率的影响。结果当AOT浓度为0.6 mol/L,萃取pH 6.0,NaCl浓度为0.1 mol/L,反萃取pH 8.0,NaCl浓度为0.5 mol/L,15%乙醇时,该体系从微紫青霉菌澄清发酵液中提取木聚糖酶,萃取率接近100%,反萃取率也在80%以上。木聚糖酶酶比活从27 U/mg提高到208 U/mg,提高了6.7倍,且粗酶纯化后的比活在200 U/mg以上。结论采用此体系提取木聚糖酶具有较好的工业前景。     

非甾体类抗炎药对胃癌细胞增殖抑制研究

目的观察NSAIDs对人胃癌细胞株SGC7901生长的抑制作用,并初步探讨其作用的机制。方法采用MTT法及流式细胞技术检测不同浓度阿司匹林和NS-398对胃癌细胞增殖及细胞周期的影响。结果MTT检测表明,阿司匹林和NS-398呈时间和浓度依赖性对SGC7901细胞活性产生抑制(P<0.05);阿匹匹林浓度为0.1mol/L时,24,48和72h抑制率分别为7.1%,10.4%和24.5%;浓度为1.0mmol/L时抑制率分别为7.9%,15.5%和50.5%;浓度为8.0mmol/L时抑制率分别为10.2%,23.6%和81.3%;NS-398浓度为10μmol/L时,NS-398作用24,48和72h,SGC7901细胞的抑制率分别为3.8%,12.0%和19.8%;浓度为50μmol/L时抑制率分别为5.1%,17.4%和35.8%;浓度为100μmol/L时抑制率分别为12.4%,28.1%和51.1%;阿司匹林和NS-398呈剂量依赖性影响细胞周期,显著增加G0/G1期细胞比例。结论阿司匹林和NS-398在一定浓度内呈时间和剂量依赖性抑制SGC7901细胞的增殖,其作用机制可能与改变细胞周期的分布有关。     

重组人血管抑素(rhAGN)包涵体变性与复性初探

在优化的培养条件下，进行rhAGN 5L罐发酵-菌体干重由原摇瓶发酵的3．02g／L增加到8.06g／L，表达量依然稳定在35％；对所产生的包涵体进行溶解变性研究，确定较佳变性缓冲液组成为8mol／L，尿素50mmol／L Tris-HCl，20mmol／LDTT，pH值8．0；凝胶过滤色谱复性效果相对较好，蛋白浓度4．28μg/ml(IC50)时对HEMC细胞的抑制活性达50．1％。     

不同因素对酶联免疫法测定破伤风免疫球蛋白活性的影响

目的考察不同因素对酶联免疫法(ELISA)测定破伤风免疫球蛋白生物活性的影响。方法将破伤风免疫球蛋白加入不同pH的缓冲液、不同浓度的氯化钠、硫酸铵以及聚乙二醇(PEG,相对分子质量为1 000,6 000和10 000)溶液,采用ELISA法测定其活性。结果pH 5~9的缓冲溶液对活性测定的影响不大,而pH≤4和≥10的缓冲溶液都会使测定值显著降低,当pH<2或pH>12时,活性下降到正常值的10%以下。随氯化钠浓度的增加测定值先下降到正常值的37.3%,后回升到41.2%,再下降;随硫酸铵浓度的增加测定值先下降到正常值的67%,后回升到99.4%,再下降。PEG对活性测定有较大影响,随PEG浓度的增加活性测定值降低。结论缓冲液pH、盐以及PEG对破伤风免疫球蛋白活性测定有影响。     

子宫中隔切除术后预防粘连方法探讨

目的 探讨子宫中隔并不孕患者宫腔镜术后不同处理方法预防宫腔粘连的效果.方法 55例子宫中隔并不孕患者行腹腔镜监护下宫腔镜子宫中隔切除术(TCRS),术后针对不同患者采用不同术后处理措施,包括宫腔放置与不放IUD,是否进行人工周期治疗,部分患者术后使用GnRH-a类药物治疗术后第1、3个月行宫腔镜检查随访,宫内放置IUD的患者;于术后第3个月取环.结果 54例患者术后进行宫腔镜检查随访,其中40例分别于术后第1、3个月完成了术后2次宫腔镜检查,另14例只完成一次检查.宫腔术后放环与否对术后宫腔形态影响无差异(P>0.05),术后使用人工周期治疗患者较未使用者子宫内膜厚,此两者术后第3个月宫腔镜检查发现宫底创面均已有内膜覆盖.使用GnRH-a类药物患者术后官腔形态满意.结论 TCRS术后宫腔放置IUD无助于预防术后粘连的发生;术后人工周期治疗应更个体化并有针对性的使用GnRH-a类药物治疗.术后及时进行宫腔镜检查随访可防止术后宫底新粘连的形成.     

10例狂犬病误诊原因分析

狂犬病近年来发病率有逐年增加的趋势,近十二年来,我们共遇见狂大病２３例,其中１０例被误诊为其它疾病,现就其误诊原因进行分析如下。１临床资料１．１ 一般资料：男８例,女２例;年龄最大７８岁,最小４岁。发病季节为３月～１１月。首诊科室,儿科３例、内科３例、转院３例、急诊科１例。１．２ 临床表现：发热７例,恐风５例,恐水６例,怕光３例,流涎１０例,胸闷、气促、呼吸困难４例,烦躁不安１０例,多汗７例,恐惧６例,肢体麻木４例,抽搐４例,恶心、呕吐２例,昏厥１例。所有病例发病至死亡时间为２天～６天,死亡原因为…     

住院患者精神用药情况调查分析

目的：了解目前住院精神患者的药物使用情况。方法：采用一日法调查西安市精神卫生中心403例住院精神患者诊断和治疗情况，并与上海市精神卫生中心2004年调查结果相比较。结果：①传统精神药物使用显著减少，新型精神药物使用占据首位；②抗精神病药物使用趋向小剂量化；③本组联用丙戊酸盐类药物显著增多；④我院精神药物使用情况与上海精神卫生中心比较有显著差异。结论：近年来精神药物使用情况已发生了显著变化，与新型精神药物疗效好，副作用少，患者依从性高有关。     

不同方法治疗慢性宫颈炎的疗效分析

目的慢性宫颈炎是妇科最常见的疾病之一,可引起盆腔脏器炎症,并且与宫颈癌的发生关系密切。本文诣在探讨不同方法在慢性宫颈炎中的疗效。方法回顾性分析新乡市中心医院收治的210例宫颈炎患者,采用药物保妇康栓、聚焦超声治疗及宫腔镜下宫颈电切术的临床效果进行统计分析。结果宫颈电切术治疗有效率为97.9%,明显高于另外两组,差异有统计学意义。结论宫腔镜下宫颈电切术治愈慢性宫颈炎,并且切除宫颈移行带,减少宫颈癌发生。     

The effect of temperature and of cetrimide on the rate of loss of refractility of spores of Bacillus megaterium

The rate of germination of spores of Bacillus megaterium at 30° is not significantly different from the rate at 37° but the onset of germination is delayed; outgrowth is normal. At 45° germination of some spores occurs but the rate is much slower than at 37°, and there is no lag; emergence occurs from only a proportion of the germinated spores and after 3 or 4 vegetative cells have been produced, replication ceases. A single regression equation can represent the germination rate of the spores at 37° in the presence of from 0.0005 to 0.02% w/v of cetrimide and in its absence. In 0.0005% w/v of cetrimide, germ cells emerge from some of the germinated spores but many of them become swollen and disintegrate. Concentrations of 0.00125% w/v or more progressively inhibit swelling and completely inhibit emergence.     

欧洲药典适用性认证介绍

目的介绍欧洲药典适用性认证程序,为国内药品监管机构和原料药生产企业提供信息,促进我国原料药生产企业的国际化。方法通过查阅调研欧盟相关药品法规和与EDQM同行面对面的交流,详细了解欧洲药典适用性认证的组织机构和具体程序。结果与结论欧洲药典适用性认证程序在对原料药的质量控制有重要作用,加强了药典的监管力度,进一步保证了原料药的质量、安全性和有效性。     

经尿道前列腺汽化电切术与经尿道前列腺电切术治疗前列腺增生症的效果对比

目的 对比分析经尿道前列腺汽化电切术与经尿道前列腺电切术治疗前列腺增生症的效果.方法 将本院2011年3月～2013年2月收治的90例前列腺增生症患者随机分为观察组（n=45）和对照组（n=45）,观察组患者采用经尿道前列腺汽化电切术治疗,对照组患者采用尿道前列腺电切术治疗,比较两组患者的疗效.结果 观察组的手术时间、术中出血量、术后冲洗时间、术后留置导尿管时间、住院时间少于对照组（P＜0.05）,残余尿量、国际前列腺症状评分和生活质量评分优于对照组（P＜0.05）,但是两组患者的并发症发生率差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 经尿道前列腺汽化电切术治疗前列腺增生症具有疗效更确切、出血少、恢复快等优势,可以作为治疗前列腺增生症的首选方法.     

甲巯咪唑治疗甲状腺功能亢进症致白细胞减少12例临床分析

目的探讨甲巯咪唑治疗甲状腺功能亢进症引起白细胞减少的规律及治疗对策。方法回顾分析本院2007年2月至2012年2月使用甲巯咪唑治疗甲状腺功能亢进症致白细胞减少12例的临床资料。结果 75%（9/12）的病例白细胞减少发生在治疗开始的第2～3个月;全部病例白细胞减少均发生在甲巯咪唑15～45mg/d治疗阶段;口服抗白细胞减少药物及皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子治疗的有效率为83.3%（10/12）。结论甲巯咪唑药物可导致白细胞减少、粒细胞减少;用药前后应密切监测血常规,掌握白细胞减少的情况,如明显减少应及时停药,予以升白细胞药物对症治疗,必要时给予重组人粒细胞集落刺激因子皮下注射治疗。