弹性蛋白酶水解丝素产物的理化分新

应用氨基酸分析、X射线衍射以及红外光谱对丝素溶液经弹性蛋白酶催化水解后的水溶部分和沉淀部分进行了研究，指出这两部分分子结构的区别以及具有不同水溶性的原因。     

Alcalase水解丝素蛋白的特性

研究了Alcalase水解丝素蛋白的特性。结果表明,Alcalase水解丝素蛋白的最佳条件是:丝素蛋白质量浓度50 mg/mL,pH值9.0,温度60℃;丝素肽中主要氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸和酪氨酸)的含量之和占其氨基酸总量的85%左右;水解度为17%的丝素蛋白水解产物中主要组分的相对分子质量分别为249 Da和762 Da,含量分别约占72.9%和15.5%,水解度为21%的丝素蛋白水解产物中主要组分的相对分子质量分别为209 Da和668 Da,含量分别约占84.4%和7.2%。     

丝蛋白的酶水解研究

Actinase是一种在食品加工中的水解蛋白酶,其蛋白水解产物的分子量可达到很低水平。并且,由于这种酶有自动分解的特性,就无需把该酶从产物中除去。所以可以用该酶来水解丝素蛋白。本篇文章就介绍了有关这方面的研究工作。 材料及实验方法 酶actinase由Kaken Chem.Co.公司购得。丝素溶液用CaCl_2溶解制成,并调整到2％     

Bacillus sp.L1胞外蛋白酶EL1基因克隆及酶学性质分析

目的:对菌株Bacillus sp. L1分泌的胞外蛋白酶EL1进行分离纯化、基因克隆及酶学性质研究。方法:利用硫酸铵沉淀、阴离子交换层析从菌株Bacillus sp. L1的发酵液中分离纯化出胞外酶EL1,对其进行了质谱分析、基因克隆及酶学性质研究。结果:质谱结果提示EL1属于丝氨酸蛋白酶,该酶基因开放阅读框为1326 bp,蛋白序列共441个氨基酸,氨基酸序列与菌株Bacillus stratosphericus分泌的丝氨酸蛋白酶(WP₀07499449)同源性最高(98%)。该酶最适温度60℃,具有较好的热稳定性;最适pH8.0,在pH8.0时稳定性较好;Mn²⁺对其有一定的激活作用,Cu²⁺对其有一定的抑制作用。结论:Bacillus sp. L1分泌的胞外蛋白酶EL1具有较好的热稳定性,在碱溶液中可以保持较高的活力,具有潜在的工业应用价值。     

弹性蛋白酶水解丝素产物的理化分析

应用氨基酸分析、X射线衍射以及红外光谱对丝素溶液经弹性蛋白酶催化水解后的水溶部分和沉淀部分进行了研究,指出这两部分分子结构的区别以及具有不同水溶性的原因。     

中性蛋白酶水解荞麦蛋白的研究

以水解度为主要指标,研究了中性蛋白酶对荞麦蛋白的水解作用.试验结果表明,最佳的酶解条件为:加酶量5000 U/g,底物质量浓度40 g/L,温度50℃,pH7.5,酶解时间2 h.在此酶解条件下,荞麦蛋白水解度达到42.31%.     

酶法水解丝素的研究

丝素经胰蛋白酶或胰酶水解后 ,产生较多的沉淀 ,而经木瓜蛋白酶、AS1 3 98中性蛋白酶、碱性蛋白酶 Alcalase、复合蛋白酶 Protamex水解后 ,则基本无沉淀生成。比较几种酶对丝素的水解能力 ,其中 Alcalase作用最强。Alcalase对丝素作用的最适 p H为 9左右 ,最适温度为 60℃左右。对丝素的酶解产物进行凝胶过滤色谱 (SEC)分析。     

风味蛋白酶水解菜籽蛋白条件研究

以菜籽蛋白为原料,利用风味蛋白酶对菜籽蛋白进行降解。通过正交试验,得出最优水解条件,即风味蛋白酶加量3000U／g,温度为55℃,pH6．5,时间为4h,底物质量分数2％。在其最优水解条件下水解度可以达到14．06％。     

碱性蛋白酶水解小麦面筋蛋白的研究

分别采用Alcalase、Neutrase、Protamex、Flavorzyme、胃酶、木瓜蛋白酶对小麦面筋蛋白进行水解研究,结果表明,Alcalase能够有效水解面筋蛋白,并对其最佳水解条件进行了确定,分别为pH9.0,温度60℃,底物浓度5%,酶浓度E/S为1%,即0.03AU/g蛋白,反应时间为4h左右。在此条件下,水解度可达20%左右。      

碱性蛋白酶水解小麦面筋蛋白的研究

分别采用Alcalase、Neutrase、Protamex、Flavorzyme、胃酶、木瓜蛋白酶对小麦面筋蛋白进行水解研究,结果表明,Alcalase能够有效水解面筋蛋白,并对其最佳水解条件进行了确定,分别为pH9.0,温度60℃,底物浓度5%,酶浓度E/S为1%,即0.03AU/g蛋白,反应时间为4h左右。在此条件下,水解度可达20%左右。     

可溶性丝素蛋白的功能性质

研究了可溶性丝素蛋白的功能性质。结果表明,丝素蛋白具有表面活性,能降低溶液的表面张力;经高速剪切作用后,丝素蛋白的表面疏水性显著增强;随着丝素蛋白质量浓度的增加,丝素蛋白溶液的乳化性、起泡性均增强,当丝素蛋白质量浓度大于5g/L时乳化能力增幅不明显,当丝素蛋白质量浓度为15g/L时,它的起泡能力最高,质量浓度继续增加至20g/L时其起泡能力下降,当丝素蛋白质量浓度高于15g/L时,泡沫稳定性的增幅变缓;丝素蛋白在pH3～10范围内具有较好的乳化性、起泡性,在pH4时最强。     

可溶性丝素蛋白的流变性质和胶凝性质

研究了可溶性丝素蛋白的流变性质和胶凝性质。丝素蛋白溶液的黏度随质量浓度的增加而增加;随着温度的升高,丝素蛋白溶液的黏度不断的降低;在剪切速率为0～30S-1的范围内,丝素蛋白溶液是剪切变稀的假塑性流体,剪切速率大于30S-1时,丝素蛋白溶液是牛顿流体;动态流变性质的研究表明,丝素蛋白溶液是典型的粘性流体;随着丝素蛋白质量浓度的增大,凝胶强度增大;丝素蛋白溶液的质量浓度大于100g/L时,丝素蛋白溶液在加热后的冷却过程中会形成凝胶,丝素蛋白溶液的质量浓度越高,则其胶凝点也越高。     

胞外弹性蛋白酶的理化特性及其影响因素

分离得到的假单胞菌(Pseudomonas sp) 菌株具有较强的分泌胞外弹性蛋白酶的能力。经微生物发酵方法生产的弹性蛋白酶,经过盐析、透析、DEAE SephadexA2 5离子交换层析、SephadexG75凝胶过滤层析等纯化步骤,从其发酵液中得到了均一的酶制品。研究结果表明,酶的最适作用温度为5 0℃;在硼砂-硼酸缓冲液中最适作用pH为8 0左右;酶在碱性环境下( pH7 0～12 0 )稳定性较好;在37℃以下,酶的稳定性较高。超过6 0℃,酶在短时间内即失活     

丝素的功能性质

丝素在pH3～10范围内具有较好的乳化能力和优良的乳化稳定性;氯化钠的添加使丝素的乳化能力和乳化稳定性略微下降;随着丝素质量浓度的增加,丝素的乳化能力和乳化稳定性均增强,当丝素质量浓度高于0.5g/dL时,乳化能力的增幅变缓。丝素的表面疏水性低于酪蛋白酸钠,经高速剪切作用后,表面疏水性显著增加。以丝素为壁材的微胶囊化薄荷油缓释性能良好。     

丝素的发泡性和胶凝性

丝素的起泡能力低于酪蛋白酸钠,但泡沫稳定性明显优于酪蛋白酸钠.丝素溶液直接或经剪切后放置均易形成凝胶,经高速剪切作用后形成凝胶的速度明显加快;随着丝素浓度增加,丝素凝胶的弹性增加;丝素经复合风味蛋白酶水解后形成凝胶,动态实验结果表明,其胶凝点在酶解进行至9min左右.用SEM和TEM观察丝素凝胶的超微结构发现,直接放置形成的丝素凝胶的网孔小于剪切作用后形成的凝胶.     

地衣芽孢杆菌弹性蛋白酶纯化和性质研究

用地衣芽孢杆菌发酵液制备弹性蛋白酶粗酶液,采用硫酸铵分级沉淀和Sephadex凝胶柱层析的方法分离纯化弹性蛋白酶,并对弹性蛋白酶的酶学性质进行研究。结果表明：弹性蛋白酶粗酶液经40%～70%饱和度的硫酸铵纯化后比活力提高到120U/mg,经凝胶柱层析纯化后比活力可达到292U/mg,纯化倍数为12.6,SDS-PAGE法证实弹性蛋白酶分子质量为29.5kD。对酶学性质的研究结果表明：弹性蛋白酶最适反应温度为55℃,最适反应pH值为7.4,以刚果红-弹性蛋白为底物,米氏常数Km为9.67mg/mL。低浓度金属离子Ca2+和K+对酶活力有促进作用,而Mg2+、Mn2+、Zn2+和Al3+对酶活力则有抑制作用。     

可溶性丝素粉末的制备

研究了较大规模制备丝素粉末的方法 .以废蚕丝为原料 ,经 0 .5g/dL的Na2 CO3溶液精炼后 ,用质量分数为 4 0 %的CaCl2 溶液溶解丝素 ,采用中空纤维超滤器脱盐 ,丝素溶液经冷冻干燥或喷雾干燥后即制成白色的丝素粉末 .从丝素的SephacrylS 2 0 0凝胶过滤图谱中可以看出 :用氯化钙溶液溶解丝素 ,煮沸时间延长 ,丝素相对分子质量呈下降趋势 ;在超滤浓缩过程中 ,丝素发生了部分缔合 .     

产弹性蛋白酶EL314CF10菌株种子培养基优化的研究初报

采用两水平部分因子实验设计 (FFD)研究了产弹性蛋白酶菌株的种子培养基各组分对菌体生长的影响 ,并找出主要影响因子为牛肉膏、酵母膏 ,二者都在 99%的概率水平上对菌体生长有正效应。而蛋白胨对菌体生长影响是负效应 ,但不显著。NaCl对菌体生长影响也极不显著。由方差分析结果可知 ,选取的水平接近最大响应区域。因此不再进行最陡爬坡实验。最后用中心复合设计及响应面分析确定主要影响因子的最佳浓度。由实验结果可知 ,菌株在优化后的种子培养基中生物量比未优化培养基高。     

产胞外多糖芽胞杆菌的发酵动力学研究

对芽胞杆菌胞外多糖发酵动力学进行了研究.基于Logistic和Luedeking-Piret方程,得到了描述芽胞杆菌发酵过程菌体生长、多糖形成、底物消耗的动力学数学模型和模型参数.模型反映了该菌株发酵过程的动力学特征,模型值与实验数据拟合良好,平均误差小于10%.     

可溶性丝素蛋白溶液脱盐技术

利用超滤和平衡渗析两种技术脱除溶丝液中的CaCl2,结果表明,溶丝液经中空纤维超滤脱盐,其脱盐率达86.57%,回收率达74.20%,氮溶解指数(NSI)达3.40%;而经平衡渗析脱盐,其脱盐率达98.5%,回收率达83.13%,氮溶解指数(NSI)达97.85%.因此,平衡渗析是适合制备可溶性丝素蛋白技术.