萝卜硫素激活Nrf2/ARE通路对博来霉素致大鼠肺纤维化的作用

目的探讨萝卜硫素(SFN)对肺纤维化的干预作用及其机制。方法 SD雄性大鼠45只,随机分为空白对照组、模型组和萝卜硫素组,每组15只。模型组、萝卜硫素组气管内缓慢注射博来霉素生理盐水溶液0.2~0.3 m L(5 mg·kg~(-1)),空白对照组气管内注射等体积生理盐水。术后次日,萝卜硫素组腹腔注射萝卜硫素溶液5 mg·kg-1,空白对照组、模型组腹腔注射生理盐水,隔日1次。给药7、14、28 d,每组随机处死5只大鼠,取腹主动脉血及肺组织。肺组织切片行HE、Masson染色,对肺组织病理变化进行评估。测定血清丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力和肺组织羟脯氨酸(HYP)含量。Western blot、q RT-PCR法分析肺组织核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)蛋白及m RNA的表达水平。结果给药7、14、28 d,肺组织HE、Masson染色Szapiel评分及HYP含量、血清MDA水平测定均显示模型组高于空白对照组(P<0.01),萝卜硫素组低于模型组(P<0.01)。血清SOD活力测定显示模型组低于空白对照组(P<0.01),萝卜硫素组高于模型组(P<0.05或P<0.01)。Nrf2、HO-1蛋白及m RNA表达测定,各观察时点模型组均高于空白对照组(P<0.01),萝卜硫素组高于模型组(P<0.05或P<0.01)。结论萝卜硫素在延缓肺纤维化的形成及发展中起到重要的作用,可能与萝卜硫素激活Nrf2/ARE通路抑制氧化应激有关。     

基于Nrf2/HO-1信号通路探讨虾青素对创伤性脑损伤模型大鼠氧化应激和炎症反应的影响

目的 探讨虾青素对创伤性脑损伤（TBI）大鼠氧化应激和炎症反应的影响。方法 将雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、虾青素低剂量组（20 mg/kg）、虾青素高剂量组（40 mg/kg）、虾青素+ML385组[虾青素40 mg/kg+核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)抑制剂ML385 30 mg/kg],每组14只。除假手术组外,其余各组大鼠按改良的Feeney自由落体撞击法复制TBI大鼠模型。各药物组大鼠灌胃或腹腔注射相应药液,假手术组和模型组大鼠灌胃等体积生理盐水。分别于药物干预后第1、3、7天对各组大鼠的神经功能进行评分;于药物干预后第7天,观察各组大鼠脑组织形态学变化并进行炎症浸润评分,观察其脑组织神经细胞超微结构,检测脑组织中氧化应激指标[超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）]、炎症反应指标[肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、诱导型一氧化氮合酶]含量和Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)、NAD(P)H醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白及mRNA的表达情况。结果 与假手术组比较...     

木犀草素对脊髓损伤大鼠Nrf2/HO-1通路的影响

目的:观察木犀草素对脊髓损伤大鼠的影响,并初步探讨其作用机制.方法:将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、木犀草素低、中、高剂量组和阳性对照组,除假手术组外,其余各组均采用改良的Allen重物打击法制备大鼠脊髓损伤(SCI)模型,建模成功后,分别给予生理盐水、10 mg·kg-1木犀草素、20 mg·kg-1木犀草素、4...     

萝卜硫素基于Nrf2/ARE通路改善肾病综合征幼鼠的肾功能

目的 探讨萝卜硫素(SF)能否通过上调核因子NF-E2相关因子(Nrf2)发挥缓解炎症并改善肾病综合征的作用。方法 将3周龄雄性SD幼鼠随机均分为4组,Con组(对照组)、Model组(模型组)、SF组(萝卜硫素组)和SF溶剂组,SF组腹腔注射SF15 mg·kg^-1,SF溶剂组腹腔注射等体积的生理盐水作为溶媒对照,每天2次,间隔8 h,连续注射3 d;第4天Model组、SF组和SF溶剂组均给予多柔比星(Dox),尾静脉2次给药(4.0、2.5 mg·kg^-1),2次间隔1周,Con组在相同处理条件下注射等体积的生理盐水。收集尿液和血液,ELISA法检测尿蛋白、血清白蛋白、白细胞介素-18(IL-18)和白细胞介素-1β(IL-1β);分离肾脏组织用于HE染色,Western blot检测肾脏组织Nrf2核蛋白表达。结果 Model组与SF溶剂组肾损伤严重,损伤评分、尿蛋白、血清白蛋白、IL-18和IL-1β水平均明显高于Con组,并且Nrf2蛋白表达上调(P<0.05);与SF溶剂组比较,SF预处理后,幼鼠肾功能损伤改善,损伤评分、...     

Nrf2信号通路与胰腺β细胞功能障碍

核转录因子E2相关因子2（nuclear factor elytroid-derived factor 2-related factor,Nrf2）是维持细胞氧化还原稳态的中枢调节者,激活Nrf2在细胞水平和动物模型中均能拮抗氧化应激,表现出抗氧化、抗凋亡作用。近年来,大量的实验研究表明,氧化应激与2型糖尿病的形成和发展有着密切关系,而Nrf2信号通路在调节胰腺β细胞功能障碍和胰岛素分泌过程中具有重要作用。本文围绕Nrf2在胰腺β细胞功能障碍中的作用及其机制展开综述,以进一步了解Nrf2在2型糖尿病形成、发展及防治中的作用。     

山茶油调节Keap1/Nrf2/ARE信号通路对老年痴呆大鼠氧化应激损伤的影响

目的 探讨山茶油调节Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路对老年痴呆(AD)大鼠氧化应激损伤的影响。方法 将大鼠随机分为空白组、AD组、山茶油低、中、高剂量组和盐酸多奈哌齐组。空白组大鼠灌胃大豆油(1 ml/kg),模型组大鼠灌胃AlCl₃(110 mg/kg)+大豆油(1 ml/kg);山茶油低、中、高剂量组大鼠分别灌胃AlCl₃(110 mg/kg)+山茶油(1 ml/kg、2 ml/kg、4 ml/kg);盐酸多奈哌齐组大鼠灌胃AlCl₃(110 mg/kg)+盐酸多奈哌齐(1.75 mg/kg)。Morris水迷宫实验及跳台实验检测大鼠学习和记忆能力;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠脑组织病理学变化;试剂盒检测大鼠脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性;Western blot检测大鼠脑组织中Keap1、N...     

盐酸川芎嗪注射液通过Nrf2/HO-1通路对肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨盐酸川芎嗪注射液对大鼠肝脏缺血再灌注损伤及E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)通路的影响。方法 按随机数字表法将100只大鼠分为假手术组、模型组、丹参注射液(2mL/kg)组、盐酸川芎嗪注射液(30 mg/kg)组和盐酸川芎嗪注射液(30 mg/kg)+鸦胆子苦醇(Nrf2抑制剂,2 mg/kg)组。除假手术组外,各组大鼠采用阻断肝门静脉和肝动脉1h的方法制备肝脏缺血再灌注损伤大鼠模型,造模前30 min ip相应药物。造模6h后,采用生化分析法检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)水平;苏木精-伊红(HE)染色法检测肝组织病理学改变;比色法检测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量,ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6含量,Western blotting法检测核因子E2相关因子2/血红素加氧酶1(Nrf2/HO-1)通路相关蛋白表达水平。结果 与模型组比较,丹参注射液组和盐酸川芎嗪注射液组血清ALT、AST、TBIL水平显著降低(P<0.05),肝组织病理学改变明显改善,病理评分显著降低(P<0.05);肝组织SOD、GSH-Px活性显著升高,且MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6含量显著降低(P<0.05),Nrf2、HO-1表达量显著升高(P<0.05),胞核核因子-κB(NF-κB)p65表达量及胞核NF-κB p65/胞浆NF-κB p65比值降低(P<0.05)。Nrf2抑制剂鸦胆子苦醇能够明显逆转盐酸川芎嗪注射液对Nrf2/HO-1通路的激活作用以及对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。结论 盐酸川芎嗪注射液可能通过激活Nrf2/HO-1通路、抑制NF-κB核转位减轻肝脏缺血再灌注损伤大鼠氧化应激和炎症损伤,对肝脏缺血再灌注损伤起到保护作用。     

刺五加注射液调控Nrf2/HO-1通路减轻大鼠肾缺血再灌注损伤作用

目的 探讨刺五加注射液对大鼠肾缺血再灌注损伤(RIRI)的保护作用及其机制.方法 将48只健康SD大鼠随机分为假手术组、模型组、刺五加注射液(30 mg/kg)组和刺五加注射液(30 mg/kg)+Nrf2抑制剂(鸦胆子苦醇,2 mg/kg)组,每组12只.除假手术组外,其他组采用夹闭双侧肾动脉45 min的方法复制R...     

褪黑素激活Nrf2和HO-1对锰诱导纹状体氧化应激的影响

目的探讨Nrf2和HO-1在锰所致纹状体氧化应激中的作用及褪黑素(MT)对其的影响。方法小鼠82只,均分为6组,分别为对照组、低MnCl2组、中MnCl2组、高MnCl2组、MT对照组和MT+高MnCl2组。第5、6组提前皮下注射(sc)给予5 mg/kg MT,2 h后,第2、3、4和6组分别腹腔注射给予12.5、25、50和50 mg/kg MnCl2,连续2周。用流式细胞仪测定细胞内ROS,比色法检测GSH和MDA含量,免疫组化法检测Nrf2和HO-1表达,Western blotting检测Nrf2和HO-1的蛋白水平。结果与对照组相比,在各MnCl2组中ROS含量、MDA含量、Nrf2和HO-1的阳性表达及其蛋白水平均增加,GSH含量下降。而MT对照组中仅Nrf2和HO-1表达及蛋白水平均明显增加。与高MnCl2组相比,在MT+高MnCl2组ROS和MDA含量均明显下降,GSH含量、Nrf2和HO-1阳性表达及蛋白水平明显增加。结论褪黑素可拮抗锰所致的小鼠纹状体氧化应激,其机制可能与Nrf2和HO-1有关。     

DL-Selenomethionine Alleviates Oxidative Stress Induced by Zearalenone via Nrf2/Keap1 Signaling Pathway in IPEC-J2 Cells

Zearalenone (ZEN) is a kind of nonsteroidal mycotoxin that is considered a risk affecting the safety of human food and livestock feed that causes oxidative damages in mammalian cells. Selenomethionine (SeMet) was indicated to have antioxidant activity and received great interest in investigating the role of SeMet as a therapeutic agent in oxidation. Therefore, the aim of this study was to investigate the hormetic role of DL-SeMet in porcine intestinal epithelial J2 (IPEC-J2) cells against ZEN-induced oxidative stress injury. As a result of this experiment, 30 μg/mL of ZEN was observed with significantly statistical effects in cell viability. Following the dose-dependent manner, 20 μg/mL was chosen for the subsequent experiments. Then, further results in the current study showed that the ZENinduced oxidative stress with subsequent suppression of the expression of antioxidant stress pathway-related genes species. Moreover, SeMet reversed the oxidative damage and cell death of ZEN toxins to some extent, by a Nrf2/Keap1-ARE pathway. The finding of this experiment provided a foundation for further research on the ZEN-caused cell oxidative damage and the cure technology.     

Role of PI3K/Akt-Mediated Nrf2/HO-1 Signaling Pathway in Resveratrol Alleviation of Zearalenone-Induced Oxidative Stress and Apoptosis in TM4 Cells

Zearalenone (ZEA) is a common mycotoxin that induces oxidative stress (OS) and affects the male reproductive system in animals. Resveratrol (RSV) has good antioxidant activity and can activate nuclear factor erythroid 2-related factor (Nrf2) to protect cells through the phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/protein kinase B (Akt) signaling pathway. The objective of this study was to investigate the protective effect and the mechanism of RSV on OS and apoptosis in TM4 cells induced by ZEA. Prior to being exposed to ZEA, TM4 cells were pretreated with RSV or the PI3K/Akt inhibitor LY294002. Cell viability was measured by Cell Counting Kit-8 (CCK-8) assays. Flow cytometry was used to determine the level of apoptosis and intracellular reactive oxygen species (ROS). The expression of poly ADP-ribose polymerase (PARP), caspase-3, BCL2-associated X (Bax)/B-cell lymphoma-2 (Bcl-2), and PI3K/Akt-mediated Nrf2/heme oxygenase 1 (HO-1) signaling pathway-related proteins was evaluated by Western blotting. Nrf2 siRNA transfection and LY294002 treatment were used to investigate the role of the Nrf2/HO-1 and PI3K/Akt signaling pathways in RSV alleviation of ZEA-induced OS. The results showed that pretreatment with RSV significantly reduced the expression of apoptosis-related proteins and increased cell viability. Catalase (CAT) activity and glutathione (GSH) levels were also increased, whereas malondialdehyde (MDA) and ROS levels decreased (p < 0.05). RSV also upregulated Akt phosphorylation, Nrf2 nuclear translocation, and HO-1 expression under conditions of OS (p < 0.05). Transfection with Nrf2 siRNA abolished the protective effects of RSV against ZEA-induced cytotoxicity (p < 0.05), ROS accumulation (p < 0.05), and apoptosis (p < 0.05). LY294002 completely blocked the RSV-mediated increase in Nrf2 nuclear translocation (p < 0.05), HO-1 expression (p < 0.05), and cytoprotective activity (p < 0.05). Collectively, the above findings indicate that RSV can protect against ZEA-induced OS and apoptosis in TM4 cells by PI3K/Akt-mediated activation of the Nrf2/HO-1 signaling pathway.     

Curcumin Alleviates LPS-Induced Oxidative Stress,Inflammation and Apoptosis in Bovine Mammary Epithelial Cells via the NFE2L2 Signaling Pathway

Lipopolysaccharide (LPS) is an endotoxin, which may cause immune response and inflammation of bovine mammary glands. Mastitis impairs animal health and results in economic loss. Curcumin (CUR) is a naturally occurring diketone compound, which has attracted widespread attention as a potential anti-inflammatory antioxidant. The purpose of this study is to investigate whether CUR can reduce the damage of bovine mammary epithelial cells (MAC-T) induced by LPS and its underlying molecular mechanism. The MAC-T cell line was treated with different concentrations of LPS and CUR for 24 h. The results showed that CUR rescued the decrease of MAC-T cell viability and cell damage induced by LPS. At the same time, 10 µM CUR and 100 µg/mL LPS were used to treat the cells in the follow-up study. The results showed CUR treatment reduced the accumulation of reactive oxygen species (ROS), the expression of inflammatory cytokines (tumor necrosis factor-a (TNF-α), interleukin-8 (IL-8), IL-6 and IL-1β) and the rate of apoptosis induced by LPS. These effects were associated with the activation of the nuclear factor E2-related factor 2 (NFE2L2)-antioxidant response element (ARE) pathway coupled with inactivation of the nuclear factor-κB (NF-κB) inflammatory and caspase/Bcl2 apoptotic pathways.     

基于Keap1-Nrf2/ARE信号通路研究牛磺酸对胰岛素抵抗模型大鼠氧化应激的影响

目的 通过研究牛磺酸对胰岛素抵抗大鼠模型的血糖、血脂、氧化应激指标以及Keap1-Nrf2/ARE信号通路重要靶点的影响,并探讨其分子调控机制。方法 建立胰岛素抵抗SD大鼠模型,测定连续灌胃给药7周后正常组、模型组、二甲双胍组、牛磺酸高剂量组以及牛磺酸低剂量组的空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）、空腹胰岛素、甘油三酯（triglyceride,TG）、总胆固醇（total cholesterol,TC）、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白,计算胰岛素抵抗指数;采用酶联免疫吸附试验法测定肝组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）,运用RT-PCR技术检测肝组织中Nrf2、Keap1、HO-1、NQO1 mRNA的表达量。结果 给药7周后,与模型组比,牛磺酸高剂量组胰岛素抵抗大鼠FBG、空腹胰岛素降低（P<0.05）,血清TC、TG水平也降低（P<0.05）;大鼠肝组织的SOD升高、MDA降低（P<0.05）;肝组织中HO-1、NQO1、Nrf2的mRNA水平上调（P<0.05）, Keap1 mRNA水平下调（P<0.01）。结论 牛磺酸可调节糖尿病大鼠的血糖、血脂,改善模型大鼠氧化应激状态,减轻胰岛素抵抗,可能与其调控Keap1-Nrf2/ARE信号通路中关键基因表达从而改善氧化应激有关。     

细胞色素C对庆大霉素致大鼠肾小管上皮细胞毒性的影响研究

目的:探讨细胞色素C对庆大霉素致大鼠肾小管上皮细胞毒性的影响及其可能的作用机制。方法:取大鼠随机分为溶媒对照组、庆大霉素组、庆大霉素+细胞色素C组,每组10只,前2组分别腹腔注射生理盐水和庆大霉素(100mg·kg-1·d-1),第3组先静脉注射细胞色素C100mg·kg-1·d-1,30min后腹腔注射庆大霉素100mg·kg-1·d-1。单剂量给药后24h处死大鼠,以荧光偏振免疫发光技术测定后2组大鼠肾脏中庆大霉素的含量,用TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡情况,用MIAS医学图像分析系统计算凋亡阳性细胞数密度,以苏木精-伊红染色法观察肾脏组织病理学变化。结果:与溶媒对照组比较,庆大霉素组肾小管上皮细胞凋亡的阳性细胞数密度明显增加(P<0.01);与庆大霉素组比较,庆大霉素+细胞色素C组肾脏中庆大霉素的含量降低了33.86%((335.16±99.18)μg·g-1vs.(221.67±71.12)μg·g-1),肾小管上皮细胞凋亡的阳性细胞数密度明显下降((637.78±169.64)n·mm-2vs.(404.75±135.57)n·mm-2,P<0.05),肾小管上皮细胞水肿、空泡变性、肾间质内炎细胞浸润、肾小球充血肿胀等均有所好转。结论:细胞色素C可能通过抑制庆大霉素在肾脏中蓄积来减轻其肾毒性。     

基于Nrf2/HO-1信号通路的夜关门提取物对谷氨酸诱导小鼠海马细胞HT22损伤的保护作用及机制研究

目的:基于核因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路研究夜关门提取物对谷氨酸诱导小鼠海马细胞HT22损伤的保护作用及机制。方法:采用谷氨酸(5 mmol/L)建立HT22细胞损伤模型后,以水溶性维生素E为阳性对照(50μmol/L),采用MTT法检测0(空白对照)、25、50、100μg/mL夜关门的石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯提取物预处理12 h后对谷氨酸诱导损伤细胞增殖的影响。以水溶性维生素E为阳性对照(50μmol/L),采用2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐探针(DCFH-DA)法检测0(空白对照)、25、50、100μg/mL夜关门二氯甲烷提取物预处理12 h后对谷氨酸诱导损伤细胞中活性氧(ROS)水平的影响;以HO-1激动剂钴-原卟啉为阳性对照,采用Western blotting法检测0(空白对照)、25、50、100μg/mL夜关门二氯甲烷提取物处理24 h后对细胞中HO-1蛋白表达的影响;分别采用Western blotting法(药物分别处理0.5、1、1.5 h)和免疫荧光染色法(药物处理1 h)检测100μg/mL夜关门二氯甲烷提取物处理后对细胞核内外N...     

Nrf2信号通路及其在肝组织中的作用

肝脏是一个多方面高度调节的防御性器官,能够抵御多种化学/氧化应激,而在这个防御系统的最前线是一群被称作转录因子的特殊蛋白,这些蛋白能识别并结合于特异性基因启动子区域中特异的DNA元件,从而调节多种细胞保护性基因的基础型和诱导型表达,发挥细胞保护作用。而转录因子NF-E2相关因子2（Nrf2）是细胞防御化学/氧化应激的重要调节因子之一。综述Nrf2信号通路中主要调控因子的相互作用、Nrf2的激活与失活机制以及Nrf2信号通路在肝组织中的作用。