MTT法、CPE观察法用于药物细胞毒性实验的比较与分析

目的比较和分析应用于检测药物细胞毒性的MTT法和CPE观察法。方法用MTT法和目测法分别检测麻黄、黄芩、病毒唑对Hela细胞的毒性,通过SPSS软件计算药物的TC50,用统计方法分析两种方法的差异。结果MTT法和CPE观察法得到的结果差异无统计学意义。结论药物毒性实验中MTT法较目测法更为简单直观。     

MTT法观察微囊藻毒素-LR对原代大鼠肝细胞的双向毒性作用

[目的]系统性探讨微囊藻毒素-LR(MC-LR)引起肝细胞毒性效应的量效和时效关系特点. [方法]采用胶原酶灌注法建立原代大鼠肝细胞模型,并通过抗大鼠细胞角蛋白 (CK18)的特异性抗体来进行免疫荧光染色观察细胞纯度.对分离培养得到的原代肝细胞分别给予10-5～10-12mol/l的MC-LR,在给药后的24、48、72和96h后分别采用MTT法观察细胞存货率的改变情况. [结果]分离培养所得细胞均为肝实质细胞,细胞纯度为100%;高剂量MC-LR(μM水平)能引起细胞死亡或凋亡,而低剂量MC-LR(nM～pM水平)则具有促进细胞增殖的效应,双效性作用的分界浓度10-7mol/L左右. [结论]MC-LR对原代培养肝细胞的毒性效应上表现为双向性.     

谷红注射液对三硝基丙酸致小鼠脑缺氧模型的保护作用观察

目的观察谷红注射液对三硝基丙酸（3-NP）致小鼠脑缺氧模型是否具保护作用。方法建立ICR小鼠3-NP致慢性轻度缺氧模型和急性严重缺氧模型,观察谷红、红花、乙酰谷酰胺药物组的治疗和预防作用;采用水迷宫评价小鼠空间记忆功能,转杆、斜板评价小鼠运动功能。结果谷红注射液低、高剂量组治疗下的慢性轻度缺氧模型小鼠运动功能有明显改善;谷红和乙酰谷酰胺未见对3-NP致急性严重缺氧模型小鼠的运动功能具有保护作用。结论谷红注射液能够对抗3-NP导致的小鼠慢性轻度化学性脑缺氧,对3-NP致小鼠急性严重脑缺氧不具保护作用。     

2,4-二羟基二苯甲酮对DMN致小鼠急性肝毒性保护作用

目的探索2,4-二羟基二苯甲酮（BP-1）对二甲基亚硝胺（DMN）所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法将体重18~22 g的ICR小鼠随机分为对照组、模型组、BP-1低、中、高组（200、400、800 mg/kg）灌胃给药4 d,末次给药30 min后腹腔注射给予DMN 22 mg/kg,24 h处死,测定谷丙转氨酶（ALT）,谷草转氨酶（AST）,乳酸脱氢酶（LDH）活性;测定肝脏还原性谷胱甘肽（GSH）,氧化型谷胱甘肽（GSSG）和丙二醛（MDA）含量;观察肝脏病理组织学变化。结果与对照组比较,模型组小鼠血清ALT、AST、LDH活性均明显升高（P<0.01）,MDA含量[(0.256±0.059) μmol/g]升高（P<0.01）,肝小叶出现大量坏死细胞;与模型组比较,BP-1各剂量组小鼠血清ALT、AST、LDH水平均明显下降（P<0.05）,肝组织中GSH/GSSG比值升高（P<0.01）,高剂量BP-1组小鼠肝脏MDA含量[(0.062±0.034) μmol/g]明显下降（P<0.01）,肝小叶坏死区域减少。结论2,4-二羟基二苯甲酮对DMN所致小鼠急性肝损伤有保护作用。     

HBV生物标志物阳性涂阳肺结核病人DOTS中肝损害的观察

目的观察板式组合药2H3R3Z3E3／4H3R3方案直接面视下短程化学疗法（DOTS）对HBV生物标志物阳性的涂阳肺结核病人肝损害发生情况。方法比较HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性的初治涂阳肺结核病人与HBV生物标志物阴性的初治涂阳肺结核病人DOTS前后肝功能损害情况。结果 HBV生物标志物阳性初治涂阳肺结核病人肝损害总发生率59．2％，HBV生物标志物阴性者肝损害发生率8．2％，两者相比，差异有统计学意义（P〈0．01）。6．1％病人因肝损害需更改治疗方案。结论DOTS中合并HBV生物标志物阳性的初治涂阳肺结核病人采用板式组合药用2H3R3Z3E3／4H3R3方案易发生肝损害，对这类病人应慎用常规方案，并要密切全程观察肝功能，尽可能应用肝损害较小的抗结核药，或在早期应用保肝药加以预防。     

几种植物化学物体外抑制结肠癌细胞增殖活性研究

结肠癌是危害人类健康的恶性肿瘤之一,大量的流行病学研究表明,多食水果、蔬菜有利于结肠癌的预防,降低其发病率。现在越来越多的研究显示,植物化学物可能是水果、蔬菜具有这种作用的物质基础[1]。源于植物迷迭香的鼠尾草酸(carnosic acid,CarH)、鼠尾草酚(carnosol,Car)、迷迭香酚(rosmanol,Ros)、迷迭香酸(rosmarinic acid,RosH)、熊果酸(ursolic acidUrH)和十字花科植物西兰花的萝卜硫烷(sulforaphane,Sul)等均有一定的抗癌活性,但抗结肠癌的研究报道则少见[2-4]。本研究选择结肠癌细胞系Caco-2和HCT-15为实验细胞株,考察上述植物…     

裸鼠肾包膜下移植法与四唑盐比色法检测直肠癌对抗癌药物的敏感性

目的 评价SRCA法与MTT比色法测定肿瘤对药物的敏感性试验中的差异，探讨引起这种差异的可能原因，为临床应用提供理论依据。方法 取新鲜直肠癌标本进行SRCA法及MTT法，分为5—FU、MMC、MTX组。SRCA法术后第1、3、5d裸鼠各组分别皮下注射5—FU、MMC、MTX，术后第6d测定移植肿瘤消退率；MTT法各组以相应的药物的血浆峰浓度的1／10作为试验浓度，第4d测定肿瘤细胞的抑制率。结果 60组肿瘤对化疗药物敏感性结果中，符合20对，不符合40对，两方法间药物敏感性阳性和阴性结果符合率为33．3％，差异有统计学意义。结论 MTT法与SRCA法肿瘤药物敏感试验结果之间存在差异。     

MTT法检测医用高分子材料浸出细胞毒性的实验研究

介绍了在微量细胞培养板中，用四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）比色法检测医用高分子材料浸出细胞毒性的方法。研究了不同细胞接种浓度下，ＭＴＴ比色法的重现性，并且在同一细胞浓度下，将此方法和细胞计数法进行了比较。结果表明，此方法操作简便，结果稳定，重复性好．     

红毛五加多糖对体外胃癌细胞抑制作用

目的　本文对红毛五加多糖对胃癌的抑制作用进行研究。方法　采用体外细胞培养计数法 ,结果表明 ,该多糖对胃癌有显著性抑制作用。结论　该多糖对胃癌可能有一定防治作用。     

MTT法检测通心络对血管内皮细胞增殖的影响

目的　研究通心络 (TXL)对体外培养的人脐静脉内皮细胞 (ECV -3 0 4)增殖的影响。方法　制备通心络含药血清 ,用5 % ,10 % ,15 %TXL含药血清分别作用培养的ECV -3 0 4细胞 4h ,8h。通过细胞形态学、MTT法检测TXL含药血清对ECV -3 0 4细胞增殖的影响。结果　通心络组光密度 (OD)值明显高于对照组 (P <0 0 1) ,含药血清培养 8h的OD值明显高于 4h的 (P <0 0 5 )。结论　TXL促进ECV -3 0 4细胞增殖。     

低分子肝素对大鼠肾小球系膜细胞增生及MCP-1表达的影响

目的　观察低分子肝素 (LMWH)对大鼠肾小球系膜细胞 (GMCs)增生及单核细胞趋化蛋白 - 1(MCP- 1)表达的作用。方法　在体外培养的大鼠GMCs株中加入脂多糖 (LPS)后 ,再分别加入不同浓度的LMWH ,设实验组 1组 :GMCs +LPS +LMWH ,设对照组 2组 :GMCs +LPS组及GMCs组 ,分别将上述 3组命名为 :LMWH组 ,LPS组及GMCs组。采用MTT掺入方法 ,于 2 4h、4 8h ,观察 3组中GMCs增生水平 ,并采用ELISA方法观察其培养的上清液中单核细胞趋化蛋白 - 1(MCP - 1)的浓度。结果　LMWH组于 4 8hGMCs增生的抑制最为显著 ,其中 :LMWH组GMCs增生水平低于LPS组 (P <0 0 5 ) ,与GMCs组无统计学差别 (P >0 0 5 ) ;LMWH组GMCs培养上清中MCP - 1浓度明显低于LPS组 (P <0 0 1) ,与GMCs组无统计学差别 (P >0 0 5 )。结论　LMWH能抑制大鼠GMCs增生 ,下调GMCs中MCP - 1的异常表达及分泌。     

氟对体外培养的血管内皮细胞增殖的影响

目的 观察不同浓度的氟对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞增殖的影响.方法 利用二甲基噻唑二苯基四唑溴(MTT)比色法、流式细胞仪及免疫组织化学法观察不同浓度的(120、240、360、480、600、720、840、960 μmol/L)氟化钠染毒24 h对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞增殖活性的影响.结果 氟化钠的浓度在120～240 μmol/L时,增殖细胞核抗原表达阳性率高于正常对照组(P＜0.01),240 μmol/L时的阳性率最高约为80%;吸光度(A)值和细胞分裂增殖指数(PI)值也高于正常对照组(P＜0.05,P＜0.01);360～480 μmol/L氟化钠染毒组上述指标与正常对照组差异无统计学意义(P＞0.05);当氟化钠的浓度增加到600 μmol/L以上时,增殖细胞核抗原的表达、A值及PI值均低于正常对照组(P＜0.05,P＜0.01),以960μmol/L时增殖抗原表达阳性率最低(约为20%),并且随着浓度增高上述指标呈下降趋势.结论 低浓度的氟化钠能促进脐静脉血管内皮细胞增殖活性,高浓度时抑制脐静脉血管内皮细胞的增殖活性,且随着氟浓度的增加,抑制作用逐渐增强.     

芬太尼对MCF-7细胞增殖和细胞周期影响研究

目的　探讨芬太尼对MCF -7细胞增殖和细胞周期的影响及其机制。方法　MCF -7细胞在不同浓度芬太尼、纳洛酮和两药联合干预后 ,采用MTT法检测细胞增殖活性 ;流式细胞术检测细胞周期 ;免疫细胞化学染色SP法检测p5 3、p2 1/WAF1的表达。结果　芬太尼浓度≥ 0 1μmol/L时 ,细胞增殖活性较对照组显著下降 (P <0 0 5 ) ,其效应与时间和浓度均呈正相关 (P <0 0 1) ,72h半数抑制浓度 (IC50 )为 0 81± 0 0 2 μmol/L。随着芬太尼浓度增加 ,G0 /G1期比例逐渐增加 ,(S +G2 /M )期比例逐渐减少。芬太尼组浓度≥ 0 1μmol/L时 ,细胞增殖活性较对照组显著下降 (P <0 0 5 ) ,较纳洛酮和芬太尼联合给药组差异无显著性。给予芬太尼 10 μmol/L后胞核内p5 3、p2 1/WAF1AOD显著增加 (P <0 0 5 )。结论　芬太尼浓度和时间依赖性抑制MCF -7细胞增殖 ,主要是将细胞阻滞在G1期 ;其机制可能是上调野生型p5 3和p2 1/WAF1的表达。     

彗星试验检测甲氨喋呤诱发人淋巴细胞DNA的损伤

目的用彗星试验评价人外周血淋巴细胞暴露于不同剂量甲氨喋呤（MTX）后的DNA损伤。方法外周血来自男女两名助血员,淋巴细胞分离后用终浓度为0（溶剂对照）、0、5、10、25、50、100ug ml^-1的MTX分别染毒6h和24h,而后用彗星试验检测各组淋巴细胞的DNA损伤,以尾长（TL）和尾相（TM）作为DNA损伤的指标,并分析剂量-效应关系。结果染毒组DNA损伤明显高于对照组,并有剂量-效应关系。结论彗星试验是一种快速、简便测定DNA损伤的方法。MTX对体外培养的人淋巴细胞具有DNA损伤效应。