茶槲寄生“螃蟹脚”正丁醇萃取相对金黄色葡萄球菌抑菌机理的研究

本文研究了茶槲寄生"螃蟹脚"醇提各萃取相的抑菌作用及正丁醇萃取相(NVBEs)对金黄色葡萄球菌的抑菌机理。采用滤纸片扩散法测定抑菌圈直径(DIZ)的大小,对倍稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),来评价"螃蟹脚"醇提各萃取相对金黄色葡萄球菌(S.aureus)、大肠杆菌(E.coli)、鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)、单核细胞增生李斯特菌(L.monocytogenes)4种食源性腐败菌的抑制性;通过光学显微镜和扫描电镜观察、胞膜通透性、胞壁完整性和酶活性等实验,研究了NVBEs抑菌机理。结果表明,"螃蟹脚"醇提各萃取相对S.aureus、E.coli、S.typhimurium和L.monocytogenes均有明显抑制效果,其中NVBEs抑菌活性较好,对S.aureus抑制效果最好,DIZ为9.84±0.57 mm,MIC为3.52 mg/m L,MBC为7.04 mg/m L。抑菌机理结果表明:NVBEs可增加S.aureus细胞壁及细胞膜的通透性,破坏菌体细胞结构,引起细胞内含物如核酸和蛋白质等外泄;引起遗传物质DNA的改变,使菌体细胞形态结构出现异常;影响菌体酶的代谢活动,从而抑制细菌的生长。     

普洱茶醇提不同萃取物的体外抑菌活性研究

采用滤纸片扩散法研究了普洱茶95%醇提萃取物石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和萃取后剩余物对金黄色葡萄球菌(S.aureus)和大肠杆菌(E.coli)的体外抑菌效果及普洱茶醇提乙酸乙酯萃取物抑菌活性的稳定性.结果表明:上述4种普洱茶醇提萃取物对S.aureus和E.coli均有一定的抑制作用,其中,乙酸乙酯萃取物的抑菌效果最好,对两种受试菌抑菌圈直径分别为(31.88±0.24)mm和(22.81±0.31)mm,最小抑菌浓度MIC分别为0.47 mg/m L和0.35 mg/m L.乙酸乙酯萃取物稳定性实验结果表明:普洱茶醇提乙酸乙酯萃取物在不同温度和紫外光照条件下均具有良好的抑菌稳定性,但酸碱性对其抑菌活性影响明显,抑菌效果随p H值的增大而逐渐变差.     

普洱茶不同提取物体外抑菌活性研究

研究了不同溶剂普洱茶提取物及萃取物的体外抑菌活性。论文采用滤纸片扩散法和最低抑菌浓度检测了水提、75%和95%乙醇普洱茶提取物对S.aureus、E.coli、P.aeruginosa及B.subtilis体外抑菌效果。同时分析了95%醇提物的不同溶剂萃取物对供试菌的影响。结果表明:95%乙醇浸提物抑菌效果最好,尤其对S.aureus、E.coli最为明显,抑菌圈分别为19.58±0.24 mm、14.58±0.24 mm,MIC分别为0.63 mg/mL,0.39 mg/mL,但对B.subtilis抑菌效果差。在95%醇提物的不同溶剂萃取物中,萃取物抑菌活性为:乙酸乙酯>正丁醇>石油醚>氯仿。乙酸乙酯萃取物对S.aureus抑制效果最好,其抑菌圈直径为31.88±0.24 mm,MIC为0.47 mg/mL。普洱茶提取物的醇提乙酸乙酯萃取提物能显著抑制革兰氏阴性菌和阳性菌的生长,研究结果为普洱茶抗菌活性成分的开发利用提供一定的实践和数据参考。     

三甲胺柱[5]芳烃的合成及其抑菌性能

本研究合成基于三甲胺的柱[5]芳烃,并以金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus ATCC 6538）和大肠杆菌（Escherichia coli DH5α）为供试菌对三甲胺柱[5]芳烃的抑菌性能和抑菌机制进行分析。通过抑菌实验确定三甲胺柱[5]芳烃最小抑菌浓度（minimal inhibit concentration,MIC）和最小杀菌浓度（minimal bactericidal concentration,MBC）,并探讨其对细菌生物被膜形成的影响;利用透射电子显微镜（transmission electron microscopy,TEM）观察三甲胺柱[5]芳烃对细菌细胞膜的损伤情况,并通过噻唑蓝（3-(4,5-dimethyl-2-thiazyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide,MTT）法测定其细胞毒性。结果显示,三甲胺柱[5]芳烃对S. aureus ATCC 6538的MIC和MBC分别为0.125 mg/mL和1.000 mg/mL,对E. coli DH5α的MIC和MBC分别为0.250 mg/mL和＞1.000 mg/mL;三甲胺柱[5]芳烃对S. aureus ATCC 6538生物被膜形成的抑制效果优于对E. coli DH5α。TEM观察结果表明三甲胺柱[5]芳烃对不同菌株细胞膜的损伤不同;MTT实验结果表明MIC范围内三甲胺柱[5]芳烃无毒。本研究结果明确了三甲胺柱[5]芳烃的具体抑菌性能,可为其在食品领域的进一步开发利用提供一定的理论依据。     

青钱柳多糖抑菌活性及及作用机理

为研究青钱柳多糖的抑菌活性和作用机制，用不同质量浓度的青钱柳多糖处理细菌，通过最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration, MIC）、抑菌生长曲线分析青钱柳多糖对细菌的抑菌效果，并从抑制效果最佳的受试菌菌体电导率、细胞蛋白和核酸含量、还原糖的释放、呼吸链脱氢酶活性、脂质过氧化程度、细胞内ATP含量、细胞外碱性磷酸酶活力的角度来揭示其抑菌机理。结果表明，青钱柳多糖对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大肠杆菌（Escherichia coil）、单增李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）和鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium）有明显的抑制作用，MIC分别为2、4、6、6 mg/mL，对枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）的抑菌性不明显；对指示菌的电导率、蛋白质和核酸渗漏、还原糖释放、呼吸链脱氢酶活性、细菌脂质过氧化程度、菌体胞内ATP和胞外碱性磷酸酶（AKP）含量均有影响。以上现象表明，青钱柳多糖的抑菌性主要是破坏菌体细胞壁和细胞膜完整性，改变其通透性，使得胞内大小分子物质外泄，抑制了细胞的呼吸代谢和引起氧化损失，进而影响细胞的生长代谢或造成细胞死亡，达到抑菌效果。     

普洱茶与绿茶提取物体外抑菌效应的研究

采用滤纸片扩散法分别研究不同浓度的普洱茶和绿茶提取物对李斯特氏菌(L. monocytogenes)、猪粪链球菌(S. faecalis)、大肠杆菌(E. coli)、鼠伤寒沙门氏菌(S. typhimurium)、金黄色葡萄球菌(S. aureus)和炭疽杆菌(B. anthracis)6 株食源性微生物和致病菌的抑制效果及其最小抑菌浓度(MIC)。结果表明：普洱茶提取物在1%～7%(m/V)范围内对李斯特氏菌(L. monocytogenes)有较强的抑制作用,其MIC 为0.07mg/ml,在5%～7% 范围内对所有供试菌种均有抑制作用,对炭疽杆菌的抑制效果最好。绿茶提取物在1%～2%(m/V)范围内仅对李斯特氏菌(L. monocytogenes)有抑制作用,其MIC 为0.09mg/ml,在3% 时仅对炭疽杆菌(B. anthracis)无抑制作用,在4%～7% 范围内对所有供试菌种都有抑制作用,对猪粪链球菌抑制效果最好。     

花生壳乙酸乙酯萃取物对金黄色葡萄球菌抗菌作用及机理

以金黄色葡萄球菌 ATCC 6538（Staphylococcus aureus ATCC 6538）为指示菌，通过滤纸片法、稀释涂布平板法和电子显微镜扫描法等研究花生壳乙酸乙酯萃取物的抗菌效果和机理。结果表明：花生壳乙酸乙酯萃取物对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为（9.54 ± 0.78） mm，最低抑菌浓度（MIC）为0.80 mg/mL，最低杀菌浓度（MBC）为6.40 mg/ mL；能够导致指示菌生长曲线的延滞期变长、最大比生长速率和最大生长量降低；进一步研究表明乙酸乙酯萃取物能导致指示菌细胞壁破裂和细胞膜通透性增加，从而影响细胞生理功能，达到抗菌目的。     

丁香酚对金黄色葡萄球菌抗菌作用的探究

为了寻找代替化学防腐剂的绿色安全天然添加剂,研究了丁香酚对金黄色葡萄球菌的抑菌作用。以丁香酚为原材料,采用96孔板微量稀释法和琼脂平板稀释法确定最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）,通过菌落数直观地确定丁香酚对金黄色葡萄球菌的MIC值和MBC值;并以分光光度计法探究不同质量浓度丁香酚对金黄色葡萄球菌中苹果酸脱氢酶（MDH）和琥珀酸脱氢酶（SDH）酶活性的影响。结果表明,丁香酚对金黄色葡萄球菌的最低抑制浓度（MIC）为600 μg/mL,最低杀菌浓度（MBC）为700 μg/mL,其可将金黄色葡萄球菌菌体蛋白质质量浓度、苹果酸脱氢酶（MDH）酶活、琥珀酸脱氢酶（SDH）酶活分别降至0.033 mg/mL、8.28 U/mg、2.40 U/mL,原因可能是抑制了菌体三羧酸循环和电子链传递中相关关键酶的活性。     

葡萄籽和苹果原花青素对变形链球菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用

研究苹果原花青素和葡萄籽原花青素对变形链球菌(Streptococcus mutans)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抑制作用,采用试管液体稀释法和琼脂稀释法抑菌实验测定其最低抑菌质量浓度(MIC)和质量最低杀菌质量浓度(MBC),并通过测定培养基pH值的变化,研究葡萄籽原花青素对变形链球菌产酸能力的影响。结果表明：苹果原花青素、葡萄籽原花青素对变形链球菌和金黄色葡萄球菌生长都有抑制作用;苹果原花青素对变形链球菌的MIC和MBC分别为1.25、4.00mg/mL,葡萄籽原花青素对变形链球菌的MIC和MBC分别为1.75、2.00mg/mL;苹果原花青素对金黄色葡萄球菌的MIC和MBC分别为4.00、9.00mg/mL,葡萄籽原花青素对金黄色葡萄球菌的MIC和MBC分别为2.00、6.50mg/mL。葡萄籽原花青素质量浓度大于1.00mg/mL对变形链球菌的产酸能力有显著抑制效果。     

臭茉莉正丁醇提取物抑菌活性研究

目的:研究臭茉莉正丁醇提取物(ECP)的抑菌效果及机理。方法:采用纸片扩散法、微量肉汤稀释法测定表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球、伤寒杆菌及绿脓杆菌对ECP的敏感性。并通过考察金黄色葡萄球菌(S.aureus)细胞膜、细胞壁及形态结构等的变化,研究ECP的抑菌活性及机理。结果:ECP对4种供试细菌均具有抑菌活性,其中对S.aureus的抑菌活性最强,其最低抑菌浓度(MIC)及最低杀菌浓度(MBC)均为0.5 mg/mL。ECP处理后S.aureus细胞内容物外泄、氧化损伤和细胞凋亡均明显增加,脱氢酶活性及蛋白含量均明显下降,扫描电镜(SEM)观察到菌体形态结构受损严重。结论:ECP对S.aureus的抑菌靶点可能为细胞膜、细胞壁、三羧酸(TCA)循环关键酶、蛋白质和遗传物质等,臭茉莉具有成为天然食品添加剂的潜力。     

扁枝槲寄生提取物对金黄色葡萄球菌抑菌机理的研究

本论文主要研究了95%乙醇扁枝槲寄生提取物的抑菌效应,并研究了抑菌机理。研究发现,95%乙醇扁枝槲寄生提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、李斯特杆菌、铜绿假单胞菌、鼠伤寒沙门氏菌及变异微球菌均有明显抑菌效果,对枯草芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌无明显作用,对金黄色葡萄球菌抑菌效果最好(最低抑菌量为0.1 mg/m L)。进一步研究发现,提取物可增加金黄色葡萄球菌的细胞壁及细胞膜的通透性,引起细胞内含物如可溶性糖类、蛋白质等外泄,导致电导率上升。光学显微镜、扫描电镜以及透射电镜观察证实了提取物不仅能作用于菌体的壁膜系统,破坏菌体细胞的正常结构,还能通过抑制细胞分裂等方式来杀灭菌体。本文研究结果表明扁枝槲寄生具有开发成天然食品添加剂的良好前景。     

桉叶精油对水产品中4种微生物的抑菌效果及抑菌机理

本文研究了桉叶精油对水产品中4种微生物的体外抑菌活性及其抑菌机理。通过滤纸片法和倍比稀释法分别测定抑菌圈直径(DIZ)和最低抑菌浓度(MIC),分析植物精油(桉叶精油、薄荷精油、茶树精油、丁香精油)对水产品中4种常见微生物(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、腐败希瓦氏菌和副溶血性弧菌)的抑菌效果;进一步以腐败希瓦氏菌和金黄色葡萄球菌为研究对象,通过扫描电镜、透射电镜、电导率、核酸含量、细胞内ATP含量分析植物精油的抑菌机理。结果表明,桉叶精油对大肠杆菌、腐败希瓦氏菌、副溶血性弧菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径分别为33.33、27.87、38.88、39.61 mm,对大肠杆菌、腐败希瓦氏菌、副溶血性弧菌和金黄色葡萄球菌的MIC值分别为1.00、1.25、0.75、0.63 μL/mL,在4种植物精油中显示出最强的抗菌活性。桉叶精油改变了腐败希瓦氏菌和金黄色葡萄球菌的细胞形态和超微结构,加了细胞膜的通透性,破坏了细胞膜的完整性,造成细胞内容物的泄露及细胞生理功能紊乱,从而导致细菌的死亡。本实验将为桉叶精油作为一种天然抑菌物质应用于水产品行业提供理论依据。     

香辛料提取物对肉制品中常见致病菌的抑菌作用

研究27 种植物香辛料的抑菌作用,并比较其醇提取液的抑菌效果。得到抑菌作用较强的乌梅、丁香、甘草3 种原料。再进行复配抑菌实验,经大量实验确定,乌梅、丁香、甘草3 种提取液复配抑菌效果最好的配比。通过测定抑菌圈和最小抑菌浓度(MIC),比较乌梅和复配液的抑菌效果。结果表明,丁香、乌梅、甘草提取液1:8:1(V/V)复配液的抑菌作用优于乌梅的抑菌作用。同时,研究表明,复配提取液的抑菌作用受温度的影响较不明显。     

山楂果胶寡糖的抑菌性能及机理

采用抑菌圈法对不同聚合度的山楂果胶寡糖进行选择,测定了实验样品对5 种供试菌的最小抑菌浓度 （minimal inhibitory concentration,MIC）和最小杀菌浓度,绘制了供试菌的生长曲线来评定样品的抑菌效果;并 从菌体形态、胞膜通透性、胞膜完整性等方面阐述果胶寡糖抑菌的机理。结果表明：平均聚合度为3的果胶寡糖对 供试菌种的抑菌效果最为显著,尤其是对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌3 种供试菌的抑菌效果最为明 显,其MIC值分别为1.250、0.625、0.625 g/L。随着加入果胶寡糖质量浓度的增大,菌悬液的相对电导率也随之升 高,同时菌悬液中核酸和蛋白质含量增大,由此表明果胶寡糖的抑菌性能是由于其破坏了细菌胞膜的通透性和完整 性,致使内容物外漏进而影响其代谢活性,抑制细菌生长。因此山楂果胶寡糖可以作为天然防腐剂,抑制食品中腐 败菌和致病菌的生长,延长食品货架期。     

复合生物保鲜剂对金黄色葡萄球菌的抑菌作用研究

研究了壳聚糖、溶菌酶与茶多酚配制而成的复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的抑菌作用。采用琼脂平板打孔法确定复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC),结合抑菌率、抑菌活力、细菌生长曲线、膜完整性、AKP活性与细菌超微结构,综合评价复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的影响。结果得出,复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的MIC与MBC分别为0.8 mg/mL与1.6 mg/mL,随着作用时间的延长,复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的生长抑制明显,菌体的细胞壁与细胞膜完整性受到破坏,菌体细胞中的AKP量增多,影响菌体细胞的代谢循环,菌体内部的核酸与蛋白质外泄,抑制其正常生长。由细菌超微结构观察发现,菌体细胞经复合保鲜剂处理后,造成菌体扭曲变形,细胞壁破裂,细胞质外渗。表明复合保鲜剂可破坏菌体的细胞壁,影响胞膜稳定性与胞内环境,最终导致菌体死亡。     

南五味子乙醇提取物对食品腐败细菌的抑菌活性研究

目的:研究南五味子乙醇提取物的体外抑菌活性,以期为寻求新的天然食品防腐剂提供实验依据。方法:以抑菌圈直径、最低有效抑菌浓度等为指标,以金黄色葡萄球菌、乙型副伤寒沙门氏菌等7种食品腐败细菌作为供试菌,研究南五味子乙醇提取物的体外抗菌活性。结果:南五味子乙醇提取物对供试菌的抑菌圈直径均>20mm,且对革兰氏阳性细菌的抑制效果强于革兰氏阴性细菌。乙醇提取物对供试菌的MIC值和MBC值分别为金黄色葡萄球菌3.125,6.25mg/mL,蜡样芽孢杆菌1.562,3.125mg/mL,大肠杆菌25,25mg/mL,变形杆菌12.5,25mg/mL,枯草芽孢杆菌、乙型副伤寒沙门氏菌、宋内氏志贺氏菌、铜绿假单胞菌的MIC值和MBC值均为12.5mg/mL。提取物对供试菌的抑菌率随抑菌作用时间的延长,提取物浓度的增加而升高。提取物对蜡样芽孢杆菌抑菌能力大于苯甲酸钠和山梨酸钾;对金黄色葡萄球菌的抑菌能力与苯甲酸钠相同,稍差于山梨酸钾。结论:南五味子乙醇提取物对食品腐败细菌具有显著的抑菌活性,有望开发成天然食品防腐剂。     

三种茶叶中多酚提取物的抑菌活性及其对致病菌膜渗透性的比较分析

目的:研究3种茶叶中茶多酚的抑菌活性及对菌株细胞膜渗透性的影响。方法:以西湖龙井、铁观音和普洱茶为材料提取茶多酚,以滤纸片法测定茶多酚的抑菌圈直径,二倍肉汤稀释法测定其最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),比较其抑菌效果。通过DNA渗透性实验、DNA损伤实验评价茶多酚对细胞膜完整性及对DNA损伤的影响。结果:相同条件下,绿茶(西湖龙井)中茶多酚含量最高为(48.12±3.22) mg/g,青茶(铁观音)次之为(37.36±2.64) mg/g,黑茶(普洱茶)最低为(31.61±1.92) mg/g。绿茶对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强,抑菌圈直径为(1.80±0.06) cm,MIC值为0.125 mg/mL、MBC值为0.25 mg/mL。随着茶多酚提取物浓度的增加,260 nm下的细菌渗透性物质逐渐增多,并且基因组DNA的损伤程度逐渐增大。结论:3种茶叶中绿茶具有更好的抑菌效果,并通过增强细菌细胞膜渗透性,进而对DNA产生一定的损伤。     

Antibacterial activity of xanthorrhizol isolated from Curcuma xanthorrhiza Roxb. against foodborne pathogens

Xanthorrhizol, isolated from the ethanol extract of Curcuma xanthorrhiza Roxb., is a sesquiterpene compound with a molecular weight of 218. The aim of this study was to investigate the antibacterial activity of xanthorrhizol against foodborne pathogens. The antibacterial activity of xanthorrhizol was measured in terms of the MIC and the MBC. MICs and MBCs of xanthorrhizol against Bacillus cereus, Clostridium perfringens, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, Salmonella Typhimurium, and Vibrio parahaemolyticus were 8, 16, 8, 8, 16, 8 microg/ml and 16, 32, 16, 16, 16, 16 microg/ml, respectively. The bactericidal study, as determined by the viable cell count method, revealed that xanthorrhizol treatment at 4 x MIC reduced viable cells by at least 6 to 8 log for all six foodborne pathogens in 4 h. Xanthorrhizol maintained its antibacterial activity after thermal treatments (121 degrees C, 15 min) under various pH ranges (pH 3.0, 7.0, and 11.0). These results strongly suggest that xanthorrhizol, conferring strong antibacterial activity with thermal and pH stability, can be effectively used as a natural preservative to prevent the growth of foodborne pathogens.     

ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF EXTRACTS FROM FAMILY ZINGIBERACEAE AGAINST FOODBORNE PATHOGENS

Chloroformic extracts of selected Thai medicinal plants commonly employed to treat infections were investigated for their antibacterial activity against important foodborne pathogenic bacteria. These included Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, methicillin‐resistant S. aureus (MRSA), Escherichia coli O157:H7, Salmonella Typhi and Shigella sp. Among 33 extracts tested, only chloroformic extracts of five plant species exhibited antibacterial properties. Alpinia galanga, Boesenbergia rotunda, Zingiber zerumbet and Piper betel were active against S. aureus. Barleria lupulina was active against B. cereus. Only the extract from P. betel leaves possessed activity against gram‐negative bacteria. As extracts from the three plant species belonging to family Zingiberaceae displayed strong activity against S. aureus, they were further tested against 17 clinical isolates. Minimum inhibitory concentration (MIC) values of B. rotunda, A. galanga and Z. zerumbet extracts against most clinical S. aureus isolates were 0.01, 0.19 and 0.79 mg/mL and the minimum bactericidal concentration (MBC) values were 0.19, 1.57 and >12.5 mg/mL, respectively. Significant growth inhibition of MRSA was observed in the cultures incubated in the presence of the B. rotunda extract, A. galanga and Z. zerumbet. B. rotunda exhibited the greatest activity among the three plant species against S. aureus at MIC, 2MIC and MBC within 2 h.