不同浓度幽门螺杆菌对胃癌上皮细胞SGC-7901生长的影响

[目的]探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)对体外培养胃上皮细胞的增殖与凋亡作用.[方法]6种浓度Hp标准株NCTC11637分别感染SGC-7901细胞,观察细胞形态,测定增殖细胞核抗原(PCNA)表达、细胞增殖指数(PI)和凋亡率.[结果](1)Hp感染细胞形态均出现早期细胞凋亡的特征性改变; (2)Hp≥9.6×105 cfu/ml时,细胞凋亡率显著升高(P＜0.01); (3)细胞PCNA表达率和PI在Hp≤1.9×105 cfu/ml时明显增高(P＜0.05);而Hp≥4.8×106 cfu/ml时显著降低(P＜0.05).[结论]Hp感染可直接诱发胃上皮细胞的增殖与凋亡,增殖与凋亡的菌量依赖性不同.     

幽门螺杆菌感染对胃癌细胞株增殖及凋亡影响的研究

目的探讨幽门螺杆菌感染对胃癌细胞株SGC7901增殖和凋亡的影响和机制。方法体外培养的SGC7901细胞与1×10^8、5×10^7、1×10^7、5×10^6cfu／ml浓度梯度的HPNCTC11637标准菌株共孵育,分别在24、48、72h时观察细胞形态学变化,MTT检测细胞增殖抑制率,流式细胞和TUNEL分析细胞凋亡,RT-PCR检测survivin在mRNA的表达情况,Western blot检测细胞survivin在蛋白水平的表达。结果1×10^8、5×10^7、1×10^7、5×10^6cfu／ml浓度梯度的HP菌对SGC7901细胞作用72h的细胞增殖抑制率分别为54．5％、58．9％、67．6％、72．9％。流式细胞仪和TUNEL法检测不同浓度梯度的HP菌处理72h后细胞凋亡率分别为42．51％、45．67％、48．57％、54．61％与49．51％、51．26％、59．41％、62．46。幽门螺杆菌可以明显降低survivin的mRNA和蛋白水平的表达。这些作用均随幽门螺杆菌浓度和作用时间的延长而增强。结论幽门螺杆菌感染可能通过降低survivin的表达,在体外抑制SGC7901细胞增殖,并促进其凋亡。并且,这种作用呈时间剂量效应。     

幽门螺杆菌vacA基因分型和cagA基因检测

〔目的〕建立检测幽门螺杆菌（Ｈｐ）的ｃａｇＡ、ｖａｃＡ基因及其基因型的方法,观察ｖａｃＡ基因型与ｃａｇＡ状态的相关性。〔方法〕应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对１７２份Ｈｐ阳性标本进行Ｈｐ ａｃｇＡ和ｖａｃＡ基因检测及其基因型分析。〔结果〕１７２份Ｈｐ阳性标本中,ｖａｃＡ阳性数１７２（１００％）,ｃａｇＡ阳性数９３（５４．０７％）;４９例萎缩性胃炎患者中,ｃａｇＡ阳性菌株感染４７例（９５．９２％）,６４例浅表性胃炎患者中,ｖａｃＡ阳性菌株感染２８例（４３．７５％）,两者有显著差异（ｐ〈０．０５）;ｖａｃＡ中间区域型ｍ１和ｍ２分别为８０和９２例,两者无明显差异（ｐ〉０．０５）,信号序列型ｓｌａ、ｓｌｂ、ｓ２分别为８２、６８、２２例,ｓｌａ与ｓｌｂ无明显差异（Ｐ〉０．０５）,ｓｌａ、ｓｌｂ、ｓｌ（ｓｌａ＋ｓｌｂ）均显著多     

幽门螺杆菌感染者胃上皮细胞凋亡与一氧化氮之间的关系

目的 研究HP感染者胃黏膜上皮细胞凋亡与一氧化氮（NO）之间的关系。方法 分别用切口末端标记法和硝酸还原酶法对HP阳性的十二指肠球部溃疡（DU）、胃溃疡（GU）、癌前病变、胃癌以及组织学上正常的HP阴性者各10例的胃黏膜活检组织进行细胞凋亡和一氧化氮检测。结果 从HP阳性的十二指肠溃疡→胃溃疡→癌前病变→胃癌→HP阴性的正常组织，细胞凋亡逐渐减少，凋亡指数除在胃溃疡与球部溃疡之间无统计意义外（P＞0．05），其它各组间相互比较差别均有统计学意义（P＜0．01）。HP根除以后细胞凋亡显著减少。NO含量在HP阳性的各实验组比HP阴性的正常对照组显著增高（P＜0．01），但各实验组之间差别均无显著性（P＞0．05）。在HP阳性的十二指肠溃疡、胃溃疡细胞凋亡与NO呈显著正相关（P＜0．05）。而在癌前病变组和胃癌组细胞凋亡与NO无显著相关性（P＞0．05）。结论 （1）HP感染能诱导胃上皮细胞凋亡，这可能是HP致胃癌的机制之一；（2）HP感染可能引起胃黏膜NO的升高；（3）在HP感染早期，大量产生的NO可能有助于胃上皮细胞凋亡。根除HP，以减少细胞凋亡可能有助于预防胃癌的发生。     

幽门螺杆菌cagA基因影响胃粘膜上皮细胞肿瘤相关蛋白表达

目的筛选和鉴定与幽门螺杆菌(Hp)细胞毒素相关基因A(cagA)有关的宿主细胞肿瘤相关蛋白。方法用幽门螺杆菌野生株和cagA基因敲除株分别与胃粘膜上皮细胞Ges-1共培养10h(细菌与细胞的比例为100:1),提取2组细胞总蛋白,进行等电聚焦和十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳,比较2组细胞蛋白质表达谱差异,选取差异蛋白点进行质谱分析鉴定。结果经肽质量指纹图(PMFs)检索分析鉴定,与cagA基因敲除株比对,幽门螺杆菌野生株攻击后的胃粘膜上皮细胞Ges-1总蛋白中的磷酸丙糖异构酶、膜联蛋白A1和α-烯醇酶(2个相邻位点)4个差异蛋白点均呈高表达,质谱评分依次为:325,254,395,347;肽段匹配率分别为:95%,79%,77%,76%。结论3种差异表达的蛋白均与幽门螺杆菌cagA基因有关,属于胃粘膜上皮细胞肿瘤相关蛋白。     

幽门螺杆菌感染对胃癌组织中Fas基因蛋白表达的影响

目的研究幽门螺杆菌(Hp)感染对胃癌组织细胞凋亡的影响,探讨Hp在胃癌发生、发展中的作用.方法用Warrthin-Starry染色法检测胃癌组织中Hp,以流式细胞学方法测定胃癌组织Fas基因蛋白的表达.结果正常胃组织中Fas表达阳性率为12.05%±3.59%,胃癌组织中Fas表达明显低于正常胃粘膜,Hp阳性癌组织低于阴性癌组织;Fas基因表达不与肿瘤的分化程度有关.结论Hp在胃癌的发生发展过程中对细胞的增殖影响较小,主要通过减弱细胞凋亡而起作用.     

淮南地区学生幽门螺杆菌vacA和cagA基因分布特征

目的研究淮南地区学生幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)cagA和vacA基因分布特征,为防治工作提供理论依据。方法对74例有消化道症状,年龄在7~24岁的在校学生进行胃镜检查,并在胃窦部取活检粘膜作H.pylori的分离培养,利用聚合酶链反应技术(PCR)测定分离培养出的H.pylori菌株的cagA和vacA基因并进行分型。结果74例学生中,分离培养出H.pylori菌株24例,基因测定结果显示,24株H.pylori临床分离株中,94.7%(23/24)含vacA基因,70.8%(17/24)含cagA基因;其中慢性胃炎vacA和cagA基因检出率分别为94.7%(18/19),70.6%(12/17);2例胃溃疡及3例十二指肠球部溃疡均全部为vacA和cagA阳性;进一步分型发现89.5%(17/19)的慢性胃炎为vacA 和cagA ,而5例溃疡患者均为vacA 和cagA 。结论淮南地区学生H.pylori感染多为vacA 和cagA 菌株,应充分重视H.pylori毒力因子的监测。     

幽门螺杆菌感染与胃疾病相关毒性基因的研究进展

幽门螺杆菌是一种与胃疾病密切相关的致病菌,具有较高的危害性.本文主要对幽门螺杆菌的毒性基因进行综述,并且对目前治疗幽门螺杆菌方案进行了总结和展望.     

淮南地区矿工幽门螺杆菌vacA、cagA基因分布特征

[目的]研究淮南地区煤矿工人幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H.pylori)vacA、cagA基因分布特征。[方法]选择经胃镜及病理组织检查诊断证实有相关胃、十二指肠疾病的349名矿工为研究对象,取其胃窦部活检黏膜作H.pylori的分离培养,利用聚合酶链反应技术(PCR)测定分离培养出H.pylori菌株的vacA、cagA基因,并进行分型。[结果]349份样本中共分离培养出244株H.pylori菌株,其中慢性胃炎、萎缩性胃炎、胃溃疡及十二指肠溃疡幽门螺杆菌培养阳性率分别为61.61%(69/112)、61.54%(48/78)、75%(72/96)及87.30%(55/63);基因测定结果显示,244株H.pylori菌株临床分离株中,84.84%(207/244)含vacA基因,73.36%(179/244)含cagA基因;其中慢性胃炎、萎缩性胃炎、胃溃疡及十二指肠溃疡cagA、vacA基因检出率分别为66.67%(46/69)、50.72%(35/69)、85.42%(41/48)和70.83%(34/48)与93.06%(67/72)、84.72%(61/72)、96.36%(53/55)和89.09%(49/55),4种疾病间差异均具显著性(P<0.01)。进一步分型发现,慢性胃炎、萎缩性胃炎,胃溃疡及十二指肠溃疡患者中vacA 、cagA 分别为44.93%(31/69)、66.67%(32/48)、79.17%(57/72)、87.27%(48/55),差异具显著性(χ2=30.80,P<0.01)。vacA 、cagA 菌株主要多见于损害较严重的胃黏膜表面,如萎缩性炎症、炎性坏死等,23例腺体不典型增生的胃黏膜表面均为vacA 、cagA 菌株。[结论]淮南地区矿工H.pylori感染多为vacA 、cagA 菌株,vacA 、cagA H.pylori菌株为高毒力菌株,且与较严重的胃黏膜病理改变有关,可能是导致矿工慢性胃炎、消化性溃疡的重要因素,临床应充分重视H.pylori菌株毒力因子的监测。     

幽门螺杆菌中国菌株致病相关基因cagA、iceA、vacA及HP0519分布分析

目的分析中国不同人群及不同胃部疾病病例来源的幽门螺杆菌致病相关基因cagA、iceA、vacA及HP0519的分布.方法采用特异引物聚合酶链式反应（PCR）方法分析150株幽门螺杆菌上述基因的多态性分布特点,并对其分布作初步统计分析.结果93%（139/150）中国菌株cagA基因3′端重复序列的PCR产物具有东方菌株特征.75%（113/150）菌株iceA基因为iceA1,19%（29/150）为iceA2,不同地区间iceA基因的分布差异无统计学意义.云南菌株iceA1、iceA2的分布与菌株分离个体的种族特点及临床疾病类型无显著关系.96%中国菌株（144/150）vacA基因s区的等位基因为s1;m区等位基因m2、m1b和m1b-m2的比例分别为57%（85/150）、27%（41/150）和11%（16/150）,仅2株福建菌株为m1a.不同地区间vacA s1、m2、m1b分布的差异无统计学意义.云南菌株m1b-m2的分布高于福建和北京菌株.云南菌株vacA s区等位基因的多样性与分离个体的种族及临床疾病类型无显著关系.vacA m区等位基因的多样性与分离个体的临床疾病类型无显著关系,但不同民族间m2的分布有显著差异,白族人群m2的分布显著少于汉族和纳西族.93%（140/150）的中国菌株HP0519基因具有24 bp和15 bp DNA插入和缺失的多态性特点.不同地区间HP0519基因的多态性无显著不同.云南菌株HP0519的多态性与菌株分离个体的临床疾病类型无显著关系,但来源不同民族菌株的HP0519基因存在差异.结论幽门螺杆菌中国菌株cagA 3′端JF/TR特异引物的扩增结果具有东亚菌株特点.中国菌株vacA基因多为s1,其分布与菌株分离个体的临床疾病类型无关.中国菌株vacA基因m区的分布具有多样性.中国菌株HP0519基因具有24 bp和15 bp插入和缺失的多态性特点.     

1426例幽门螺杆菌抗体检测的临床价值探讨

目的:探讨I型和II型幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori,简称 HP)与小儿腹痛的关系.方法:对1426例腹痛患儿,用免疫印迹法进行分型检测.结果:检出HP阳性590例,占41.37%;其中I型HP感染342例,占57.97%;II型248例,占42.03%.结论:免疫印迹法分型检测HP对临床诊治具有重要的指导意义.     

4984名职工幽门螺杆菌感染情况分析

幽门螺杆菌(HP)与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌等上消化道疾病关系密切,HP感染是胃癌发病的因素之一,1994年国际癌症研究中心将HP定为人类胃癌第一致癌物[1].湖北省航天医院为了解该院职工HP感染状况,以便做好防治工作,对该院4984名参加健康体检的职工进行了碳14呼气试验,现将检测对象、方法及结果分析如下.     

口腔幽门螺杆菌感染的研究

幽门螺杆菌(ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ简称Ｈｐ)是一种营养要求高,微需氧的革兰氏阴性细菌。研究表明Ｈｐ是慢性活动性胃炎和胃十二指肠溃疡的主要病因,是人类胃癌的第一类致癌因子。Ｈｐ的致病因素包括鞭毛、尿素酶、粘附蛋白和毒素等。近来,口腔中Ｈｐ的存在逐渐引起人们的重视。一、胃及口腔内Ｈｐ的分离和证实1983年Ｗａｒｒｅｎ和Ｍａｒｓｈａｌｌ从慢性活动性胃炎患者的胃粘膜活检组织中分离出Ｈｐ,大量实验研究证实Ｈｐ与慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌的发生关系密切。1989年,Ｋｒａｊｄｅｎ等[1]首次从Ｈｐ胃炎患者的牙菌…     

幽门螺杆菌体内试验的研究现状

幽门螺杆菌（Hp）体内试验是研究Hp致病机制与免疫机制,验证致病因子的依据,并用于临床药品、疫苗与治疗方案的探索,它包括动物体内和人体内试验,常用于该试验的动物有猪、小鼠、蒙古沙鼠、大鼠、狗、猴等.本文就幽门螺杆菌体内试验的类型、方法、特点等方面对该领域现状作了综述.     

幽门螺杆菌感染的细菌学和流行病学研究进展

幽门螺杆菌是感染率很高的细菌之一,也是慢性活动性胃炎的直接病因、胃、十二指肠疾病发病与复发的重要因素,与胃癌和胃NALT淋巴瘤密切相关。它可以通过多种机制致病,包括细菌的粘附、各种毒力因子对胃粘膜的直接损伤等。本文就幽门螺杆菌的微生物学、流行病学特征、感染的传播机制及其影响因素作了简要综述。     

幽门螺杆菌体内试验的研究现状

幽门螺杆菌(Hp)体内试验是研究Hp致病机制与免疫机制,验证致病因子的依据,并用于临床药品、疫苗与治疗方案的探索,它包括动物体内和人体内试验,常用于该试验的动物有猪、小鼠、蒙古沙鼠、大鼠、狗、猴等。本文就幽门螺杆菌体内试验的类型、方法、特点等方面对该领域现状作了综述。     

球形幽门螺杆菌vacA基因表达质粒构建及表达

目的构建球形幽门螺杆菌vacA基因的重组表达质粒,初步观察其在E.coli中的表达。方法采用亚克隆技术,用BamHⅠ和SacⅠ从重组质粒pMD-18T-vacA上切下vacA基因,插入表达载体pET32a（＋）质粒,转化大肠埃希菌BL21,在氨苄青霉素阳性的LB平板上筛选阳性重组子,并经双酶切及PCR扩增鉴定。重组质粒pET32a（＋）-vacA转化大肠埃希菌,（IPTG）诱导表达后进行（SDS-PAGE）电泳和凝胶扫描定量分析。结果重组质粒酶切和PCR鉴定与预期结果相符,成功构建携带vacA基因的重组原核表达质粒pET32a（＋）-vacA。核酸序列测定及同源性分析证实,表达质粒pET32a（＋）-cagA中所含vacA基因与GenBank中的vacA序列同源性达到99.2%。vacA基因在大肠埃希菌中诱导表达后获得约156 kD蛋白,蛋白含量占全菌体蛋白含量15.5%。结论成功构建球形H.pylori vacA基因重组表达质粒,并获得高效表达,为研究该基因蛋白的生物学特性及DNA疫苗研制奠定了基础。     

儿童幽门螺杆菌感染检测方法

儿童是幽门螺杆菌感染的易感人群 ,绝大多数儿童均有短暂或持续存在的幽门螺杆菌感染。小儿消化系统疾病 ,如消化性溃疡、慢性胃炎、慢性腹泻以及反复发作的腹痛等均与幽门螺杆菌感染有关 ,甚至许多胃、十二指肠外疾病 ,如缺铁性贫血、荨麻疹等也可能与幽门螺杆菌感染有关。因此 ,寻找适合儿童的、快速准确检测幽门螺杆菌的诊断方法 ,对诊断幽门螺杆菌感染的检测方法、影响因素及对儿童的适用性作以评价具有实用意义。     

幽门螺杆菌耐药性与细胞毒相关基因A分型关系

目的 探讨对克拉霉素耐药的幽门螺杆菌(Hp)携带细胞毒相关基因A(CagA)状况及其与基因分型的关系.方法收集右江民族医学院附属医院确诊Hp感染患者的胃窦部黏膜标本482份,进行Hp分离培养和鉴定;采用PCR方法扩增CagA,采用E实验(E-test)进行克拉霉素耐药试验,采用细菌基因组重复性元件序列PCR技术(REP-PCR)方法对携带CagA+的克拉霉素耐药株进行基因分型,运用NTsys_2软件进行聚类分析.结果分离培养出374株Hp,其中CagA阳性87株,阳性率23.3％;随即选取携带Cagk基因的克拉霉素耐药的26株Hp,根据78％的相似性分析结果显示,可分成6类基因型,分别是Group I、GroupⅡ、GroupⅢ、GroupⅢ、GroupⅣ、Group V,GroupⅥ,每类分别有3、3、8、4、6、2株Hp.结论携带CagA基因的克拉霉素耐药的Hp可分成6类基因型,Hp的克拉霉素耐药性基因分型与CagA基因无密切关联.