自动双向测序法检测基因的单核苷酸多态性

目的：通过检测21号染色体上的所有已知基因中存在的单核苷酸多态性(single nucleotide ploymorphism，SNP)，建立一种检测基因SNP的高通量的方法。方法：应用聚合酶链反应技术和荧光标记的自动双向测序法，对中国汉人、少数民族共96个人DNA标本，在21号染色体上所有已知基因的启动子区、全部编码区及其临近的内含子区进行自动测序，并通过Polyphred软件识别SNP。结果：应用聚合酶链反应技术和荧光标记的自动双向测序法在128个基因发现了许多SNP。汉族人与少数民族在一些基因有SNP的差异。结论：自动双向测序法检测基因的SNP是直接、可靠和高通量的一种方法。     

Preproghrelin基因rs696217位点单核苷酸多态性与广州番禺人群2型糖尿病的相关性研究

目的探讨广州市番禺区人群2型糖尿病(T2DM)与Preproghrelin基因rs696217位点单核苷酸多态性的相关性。方法提取来自番禺人群的非糖尿病人(对照组)和T2DM患者(T2DM组)的DNA,采用PCR-RFLP,检测其Preproghrelin基因rs696217位点的基因型,比较组间基因型、等位基因频率分布的差异。结果对照组116例样本中,CC 96例、AC 20例,AA 0例;基因型频率分别为:0.828、0.172、0。T2DM组118例样本中,CC 89例、AC 24例、AA 5例,基因型频率分别为:0.754、0.203、0.043。对照组和T2DM组的基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡。组间基因型和等位基因频率差异无统计学意义。结论未发现Preproghrelin基因rs696217位点单核苷酸多态性与广州市番禺区人群2型糖尿病直接相关。但在T2DM组中检测到AA基因型,预测等位基因A在T2DM发生中可能有某种作用,有待进一步研究。     

人类CPF基因转录启动区上游的基因多态性对基因转录的影响

目的：研究人类CPF基因启动子上游的SNP（-1907C→T）对CPF基因转录的影响。方法：PCR扩增人类CPF基因上游5′近端调控区（-2026-＋63bp）序列,构建荧光素酶报告基因表达体系,瞬间转染HepG2细胞,48h后收集细胞测定相对荧光素酶表达活性。结果：在人类CPF基因基本启动子区域,构建了三种荧光素酶报告基因表达载体pGL3-Basic-1120＋63bp,pGL3-2026＋63bp（-1907C）和pGL3-2026＋63bp（-1907T）。相对荧光素酶活性的比较显示pGL3-2026＋63bp（-1907T）的相对荧光素酶表达活性下降了约28％。结论：CPF基因上游5′近端调控区中SNP（-1907C→T）导致CPF基因启动子的转录活性下降。     

ABCA1基因R219K多态性与广西汉族心血管疾病的关系

目的:探讨ATP结合盒转运子A1(ATP-Binding Cassette Transporter 1,ABCA1)基因R219K多态性与广西汉族心血管疾病的关系。方法:采用PCR-RFLP技术,对无血缘关系的心血管疾病人群113例和非心血管疾病人群61例的ABCA1基因R219K位点G→A(Arg219Lys)进行检测,分析其基因多态性。结果:在心血管疾病组中,除HDL比非心血管疾病组低外,其余血脂指标均高,其中TC、LDL与ApoB在两组间的差异有统计学意义(P<0.05)。广西汉族心血管疾病人群的RK型频率最高,RR型次之,KK型频率最低;心血管疾病组的KK基因型频率(0.129)低于非心血管疾病组(0.148),但差异无统计学意义(P>0.05)。RR、RK和KK三种基因型的血脂水平差异没有统计学意义(P>0.05),女性心血管疾病人群KK型的HDL比RR型的高(P>0.05),而KK型的TG和VLDL比RR型低(P<0.05)。结论:ABCA1基因R219K变异对心血管疾病可能具有保护作用,但具体保护机制及ABCA1基因R219K在心血管疾病人群中基因型分布频率也有待于更大样本的观察和进一步深入研究。     

人类第6号染色体NOTCH_4基因位点多态性与精神分裂症的关系

目的 :探讨人类第 6号染色体上与精神分裂症有关的易感基因位点。方法 :应用 PCR-RFLP方法检测 88个精神分裂症患者及其健康父母组成的核心家系单核苷酸多态性 ( SNP)rs3870 71。结果 :精神分裂症患者健康父母 rs3870 71等位基因频率的分布符合 Hardy- Weinberg平衡 ;单倍型相对风险分析 ( HRR)表明 ,该基因位点与精神分裂症无关联 ( χ2 =0 .5 4 9,P>0 .0 5 ) ;传递不平衡检验 ( TDT)显示 ,父母和患者之间不存在传递不平衡 ,杂合父母传递给受累子女与非传递等位基因频率分布无差异 ;该基因位点与精神分裂症的关系妄想症状密切相关 ( χ2 =7.1 89,P=0 .0 2 8)。结论 :rs3870 71本身不是决定精神分裂症易感的 SNP位点 ,但是其位点多态性与精神分裂症的关系妄想症状密切相关     

布依族XRCC1基因单核苷酸多态性及其组合型分析

目的 分析布依族人群DNA修复基因XRCC1 C26304T、G27466A与G28152A单核苷酸多态性及其等位基因频率与组合分布特征。方法 获取自然人群个体布依族192例血白细胞基因组DNA，利用PCR扩增限制性酶切法（PCR—RFLP）检测XRCC1 C26304T、G27466A与G28152ASNPs。结果 XRCC1 C26304TSNPs基因型分布CC、CT、TT分别为64．6％、28．6％、6．8％，C、T等位基因频率分别为78．7％、21．3％。XRCC1G27466ASNPs基因型分布GG、GA、从分别为85．9％、12．5％、1．6％，G、A等位基因频率分别为91．7％、8．3％。XRCC1G28152ASNPs基因型分布GG、GA、从分别为55．2％、37．0％、7．8％，G、A等位基因频率分别为73．7％、26．3％。本研究发现XRCC1基因C26304T和G28152A两位点的SNPs组合基因型频率较高的为CC＋GG60例（31．2％）；C26304T和G27466A两位点的SNPs组合基因型频率较高的为CC＋GG98例（51．0％）；G28152A和G27466A两位点的SNPs组合基因型频率较高的为GG＋GG88例（45．8％）。结论 本研究揭示了布依族人群XRCC1基因3位点的单核苷酸多态性、基因型及其组合分布特征，为进一步研究该基因SNPs与其生理功能和疾病的关系提供基础资料。     

中国人群醛固酮合成酶基因T-344C位点单核苷酸多态性频率分析

目的研究醛固酮合成酶(CYP11B2)基因T-344C单核苷酸多态性(SNP)在中国人群中的分布。方法采用PCR-RFLP法对中国人群进行醛固酮合成酶(CYP11B2)基因T-344CSNP频率分析比较。结果中国人群的醛固酮合成酶(CYP11B2)基因T-344C基因型频率分布:TT型占64.5%,TC型占30.8%,CC型占4.7%;等位基因频率T占79.9%,C占20.1%。各基因型频率、等位基因频率与西班牙人、德国人、苏格兰人、日本人差异非常显著。结论醛固酮合成酶(CYP11B2)基因T-344CSNP频率的分布有明显的种族差异。     

单核苷酸多态性分析在近交系大鼠遗传检测中的应用

目的 研究SNP在近交系大鼠遗传检测中的应用.方法 选取大鼠20号染色体MHC所在P12区上的9个SNP位点,应用新建立的高保真酶特异性检测SNP基因分型技术对五种常用近交系大鼠(BN、F344、WKY、LEW 、SHR)和两种新培育近交系大鼠(MIJ和HFJ)进行SNP多态性分析.结果 五种常用近交系的SNP检测结果与Rat Genome Database网站提供的基因型数据一致,并检测确立了新品系的SNP基因型.同时绘制出七种近交系大鼠在该9个SNP位点的遗传扩增图谱.结论 运用所筛选的9个SNP位点进行大鼠多态性分析,能够快速、可靠地对BN、F344、WKY、LEW、SHR及MIJ、HFJ进行遗传监测.     

长爪沙鼠源肺孢子虫ITS1-5.8S rDNA-ITS2序列测定及分析

肺孢子虫属（Pneumocystis）内的虫种是引起人及哺乳动物肺孢子虫肺炎（Pneumocystis pneumonia,PCP）的机会性致病病原体。资料显示,不同宿主来源的肺孢子虫具有不同的遗传学特性。由于ITS序列较其两侧的rRNA基因功能区进化速度快、变异性大,故近年来多作为遗传学标志,用于肺孢子虫的基因分型和系统发育研究。本研究从经激素诱导感染的长爪沙鼠获肺组织获取虫体,对该虫的ITS序列进行了克隆和初步分析。现将结果报道如下。     

Bax基因P53结合位点多态性与食管鳞癌易感性的关联研究

目的探讨Bax基因P53结合位点多态性与我国西南地区食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carci-noma,ESCC)发病的关联性。方法利用SNaPshot技术检测201例食管鳞癌病例组及183例健康对照的Bax基因rs1009316位点多态性的分布情况,分析不同基因型与食管鳞癌易感性的关联。结果食管鳞癌病例组和对照组中rs1009316的CC和CT/TT基因型频率分别为59.2%、40.8%和73.2%、26.8%,CT/TT相比CC增加食管鳞癌的发病风险(OR值为1.884,95%CI为1.224～2.901),T等位基因增加食管鳞癌的发病风险(OR值1.620,95%CI为1.103～2.379)。分层分析发现,无吸烟史群体中,T等位基因(OR值为1.858,95%CI为1.050～3.288)及CT/TT基因型(OR值为2.178,95%CI为1.143～4.147)分别增加食管鳞癌的发病风险。结论在中国西南地区人群中,Bax基因P53结合区域的多态性位点rs1009316是食管鳞癌的危险因素之一。     

西洋参果中配糖体成分的研究

从西洋参果中分得６个配糖体。经理化常数和波谱分析分别鉴定为人参皂苷２０（Ｓ）－Ｒｇ３（Ⅰ），２０（Ｒ）－Ｒｇ３（Ⅱ），－Ｒｅ（Ⅲ），－Ｒｄ（Ⅳ），－Ｒｂ３（Ⅴ）和胡萝卜苷（Ⅵ）。化合物Ⅰ￣Ⅵ均为首次从该植物分得的已知化合物。     

有机氯农药残留量的气相色谱检测方法研究

建立了西洋参中有机氯农药残留量的气相色谱的分析方法。样品以丙酮提取，在NaCl存在下，以二氯甲烷进行液液分配，提取液以浓H2SO4净化，采用SE－54弹性石英毛细管柱，GCECD检测有机氯（六六六，DDT异构体及七氯，艾氏剂）农药的残留量，最低检测浓度为3．2×10－2ng／g～1．4ng／g，添加回收率在80％～133．18％，并对北京及东北产西洋参药材进行了实际残留量测定。     

将西洋参DNA导入大豆实现遗传转化的研究：Ⅰ.导入后代形态性变异的分析

用西洋参作ＤＮＡ的供体,用栽培大豆品种作为受体分子育种导入技术之一的“浸种法”进行外源ＤＮＡ导入,试衅在继续保持大豆营养价值和具有的医疗保健作用的前提下,提高其已用的药用成分的含是和导入新的药用成分。培育出具更高药用价值或保健作用的栽培大豆新材料和新品系。目前导入后代在形态、品质和药物成分含量等性状方面产生了广泛的变异。本文报道了导入后代形态上的差异。     

高效液相色谱蒸发激光散射检测器分析西洋参中的人参皂甙

目的：采用高效液相色谱蒸发激光散射检测器测定西洋参中人参皂甙的含量。方法：色谱柱为NH2柱,并以乙腈－水－异丙醇（80：20：15）和水作为梯度洗脱流动相,蒸发激光散射检测器。定量方法简单,准确。结果：回收率为95.97%-100.05%,相对标准偏差为0．87％－2．75％。结论：该法可作为西洋参质量控制方法。     

吉林人参芦头的研究——人参芦头皂甙元的分离与鉴定

<正> 人参是五加科(Araliaceae)人参属植物人参(Panax ginseng C.A.Meyer)的干燥根,是一味重要的传统中药。近代科学研究已经证明,人参具有广泛而重要的生物活性。同时阐明人参的主要有效成分为皂甙类成分,并确定了人参根中十五种人参甙的化学结构。此外,还证明人参含有肽类、多糖、氨基酸、维生素等多种生物活性物质。     

西洋参DNA导入大豆实现遗传转化的研究Ⅱ.导入后代异黄酮类成分的含？…

用高效液相色谱法测定了西洋参 DNA导入大豆后代的异黄酮类成分、大豆苷 (daidzin)、大豆黄素(daidzein)、染料木苷 (genistin)、染料木素 (genistein)的含量 ,采用 U nisil Q C1 8柱 ,4.6 mm× 2 5 0 m m,流动相乙腈 - 0 .0 0 3mol/L 磷酸氢二钠 (17∶ 83) ,流速 1.0 m L/min,检测波长 2 5 4nm,结果表明 ,4种成分分离效果好 ,成分含量发生了广泛变异 ,从中可筛选出有效成分含量较高的新材料     

液相色谱-离子阱质谱联用法建立留坝西洋参药材特征图谱研究

目的建立留坝西洋参药材皂苷成分的特征图谱。方法通过固相萃取小柱预处理样品,电喷雾质谱正离子模式全扫描法检测。结果从西洋参药材总提物的正离子全扫描总离子流图中选择了3个具有代表性的强峰,建立了西洋参药材皂苷成分的特征对应图谱。结论该方法有较好的重现性,能准确分析、鉴别西洋参药材。     

薄层扫描法比较人参和西洋参的研究

采用薄层扫描法对人参和西洋参进行了分析,找出了人参和西洋参各自的特征性成分,并且鉴定人参特征成分ＲＣ为人参皂甙Ｒｆ,西洋参特征成分ＲＡ为２４－（Ｒ）－假人参皂苷Ｆ１１。而且比较了它们的主要人参皂甙在量上的差异,为区别人参和西洋参提供了 方法和依据。     

人参愈伤组织的药理活性研究——与栽培人参的比较

人参愈伤组织水浸液给小鼠腹腔注射,从几方面观察其药理作用——镇静、抗疲劳、抗高温以及对心血管方面的影响,并同栽培人参作了活性比较。结果表明:1.人参愈伤组织对小鼠自发活动有非常明显的抑制作用,而且较栽培人参抑制作用强,两药均有相似的协同戊巴比妥钠的中枢抑制作用;2.两药均能显著地降低氧耗量,延长小鼠耐缺氧时间及具有相似的抗疲劳作用;3.两药均具有心脏抑制和血管收缩作用;4.人参愈伤组织抗高温作用较栽培人参弱。总之,人参愈伤组织与栽培人参药理活性基本相似,但在某些方面,作用略有强弱之别。