欧美杨(Populus nigra×P. deltoides)再生体系的建立

黑杨派（Aigeiros）的杂交后代欧美杨（Populus nigra × P. deltoides）在杨树叶锈病研究领域具有重要价值。本研究以叶柄、叶片和茎段作为外植体进行组织培养,构建欧美杨再生体系。分别优化了初代培养、继代培养、抽茎培养和生根培养的培养条件。正交试验结果表明最优初代培养培养基配方：MS 0.5 mg/L 6-BA 0.05 mg/L NAA。最优继代培养培养基配方：MS 0.5 mg/L 6-BA 0.1 mg/L NAA。最优抽茎培养培养基配方：MS 0.1 mg/L 6-BA 0.05 mg/L NAA。最优生根培养培养基配方：1/2MS 0.25 mg/L NAA 20 g/L蔗糖。以上培养基培养分别得到叶柄分化率为86.7%,不定芽诱导率为96.7%,抽茎率为91.7%,生根率为85%。再生苗移栽成活率为91.5%。所获得的欧美杨再生苗扩繁简便,可用于杨树抗叶锈病相关基因转化等研究。欧美杨再生体系为揭示欧美杨的感病机理提供物质基础。     

冰草属植物组织培养再生体系的建立

以适宜西北地区种植的优质牧草冰草属(AgropyronGaertn)中的三个不同种———蒙古冰草新品系(A.mongolicumKeng)、航道冰草(A.cristatumcv.Fairway)、诺丹冰草(A.desertorumcv.Nordan)和一个种间杂种冰草———蒙农杂种冰草(A.cristatum×A.desertorumcv.Mengnong)为材料,分别以幼穗为外植体建立了冰草组织培养再生体系。诱导愈伤组织的培养基为改良MS+2,4 D2.0mg/L,分化培养基为MS(无附加成分),在1/2MS培养基上生根后得到完整小植株。结果表明在本试验条件下,不同长度的幼穗在培养时,其愈伤组织发生的部位及其增殖速度不同;4种材料愈伤组织诱导率和分化率无明显差异,均可有效诱导愈伤组织并分化成再生植株,再生植株的产生主要通过直接器官发生途径。     

西瓜再生系统的建立

以京欣一号、查理斯顿、巨人、井神小西瓜、黑崩筋５个品种苗龄６ｄ的子叶为外植体,建立了西瓜无性繁殖系和高效的培养体系,在ＭＳ＋ＢＡ５ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ培养基上,芽诱导率为４６．６－９４％,转接到附加ＫＴ０．２ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上进行再生芽的伸长培养后,在ＭＳ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ的根诱导培养基上的诱导率达９６．２％     

裕民无刺红花的组织培养和植株再生

以裕民无刺红花成熟种子胚轴为外植体,在含BA(0.5mg/L)和NAA(1.5mg/L)的MS培养基上每个外植体均可诱导出若干个不定芽,平均每个外植体可产生4个不定芽,健壮的不定芽经过伸长、生根后可移栽成活.本试验利用裕民无刺红花品种获得了其再生植株,为其遗传转化和多倍体的诱导奠定了基础.     

木纳格葡萄组织培养和再生体系的建立

稳定、高效的再生体系是进行木纳格葡萄遗传转化的必要条件。本研究对影响不定芽诱导的外植体类型、基本培养基种类、激素组合和暗培养时间进行了测定。结果表明,叶片和叶柄是适合木纳格葡萄组培的外植体,NN69基本培养基适用于不定芽的诱导。叶片和叶柄不定芽诱导的最佳激素组合分别为TDZ(4 mg/L)+IBA (0.2 mg/L)和TDZ (1 mg/L)+IBA (0.2 mg/L),诱导率分别为4.81%和16.30%。在培养初期,3周暗培养明显促进不定芽的生长,且将不定芽转接到1/2MS+IBA (0.1 mg/L)的生根培养基上能够产生不定根,生根率为100%。本研究建立的木纳格葡萄再生体系,可为其后续遗传转化等研究提供技术参考。     

棉花组织培养高效植株再生体系的建立

通过对影响棉花体细胞胚胎发生和植株再生关键因素的研究,建立了适用于广泛基因型的棉花组织培养高效胚胎发生与植株再生体系。从中棉所12、中棉所19、泗棉3号等20余个主栽品种诱导获得了胚胎发生和植株再生,有效地突破了棉花组织培养植株再生的基因型控制,使占我国棉田面积50%以上的品种均能诱导获得胚胎发生和再生植株。首次诱导获得直接胚胎发生,使棉花组织培养的周期由180d缩短到120d左右,减少了培养过程中变异的发生。该结果的获得必将大大促进植物细胞工程和基因工程在棉花遗传改良上的应用。     

高羊茅高效组织培养再生体系的建立

植物分子育种与基因功能鉴定是建立在高效的组织培养再生体系基础上的。本研究以高羊茅(Festuca arundinacea Schreb)为材料,探讨了不同外植体状态、基本培养基类型、外源激素组合与固化剂种类与浓度对愈伤组织诱导的影响,并进行了愈伤组织分化长芽与生根研究。结果表明:愈伤组织诱导过程中,离体成熟胚比完整种子作外植体愈伤组织出现早、质量优、诱导率高;基本培养基的选择上以N6诱导率最高,MS最低;激素组合研究中高羊茅三个品种(SAFari, FirewarⅡ, Barleduc)在无6-BA培养基中,生长激素选择上都是2,4-D优于IAA,2~2.5 mg/L 2,4-D在三个品种中诱导率都在50%以上,而在添加0.5 mg/L 6-BA时诱导率都偏低;固化剂选择上则以Phytagel与Agarose二都最优,Phytagel固化剂最佳诱导浓度为2~4 g/L。分化长芽最佳培养基为MS+0.1 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+20 mg/L AgNO3+2%蔗糖+0.6%琼脂,生根壮苗最佳培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖+0.3%Phytagel。本研究为高羊茅的高效转基因体系建立与CRISPR基因功能研究提供准备。     

大蒜花梗组织培养再生植株

取生殖期大蒜花梗,在N_6+2,4-D 2mg/L+KT 1mg/L培养基上暗培养30天后,得到微黄色愈伤组织。将愈伤组织转到N_6+2,4-D 0.5mg/L+KT 0.5mg/L培养基上继代二次,然后于N_6+BA 5mg/L+KT 1mg/L+IAA 0.01mg/L,MS(1/2大量元素)+BA 5mg/L+KT 1mg/L+IAA 0.01mg/L和MS+BA 5mg/L+KT 1mg+IAA 0.01mg/L培养基上光照培养。3周后愈伤组织上出现绿色丛生芽,将小芽转到MS(1/2大量元素)+NAA 0.01mg/L培养基上,一周后发生白色根并形成完整植株。2,4-D和KT对大蒜花梗愈伤组织发生是必要的,高浓度的细胞分裂素和低浓度的生长素有利于芽分化,高浓度NH_4~+有利于根分化,低浓度NH_4~+有利于芽分化。愈伤组织低温处理对芽的分化是必要的。另外,对花梗愈伤组织发生进行了细胞学观察。     

大豆组织培养再生系统的研究进展

大豆因其愈伤组织难以分化、原生质体再生困难等因素,其再生体系一直不够完善。直到20世纪80年代初期,才成功建立了大豆的体细胞胚胎发生和器官发生再生系统。80年代末期原生质体培养获得突破。介绍了大豆器官发生再生系统、体细胞胚胎再生系统和原生质体再生系统的研究进展;对这3种再生系统进行遗传转化的优缺点作了比较;并提出了关于大豆遗传转化再生系统的几点展望。     

籼稻基因转化中的组织培养系统研究

以MS培养基为基础，通过改变植物激素配比和添加附加物，确定了适合籼稻愈伤组织的诱导、继代和再生的优化条件。用不同的抗生素与除草剂（Bar）处理愈伤组织，揭示了愈伤组织与抗生素和除草剂之间的关系，确定筛选具有卡那霉素（Kan）或Bar抗性标记的转化子筛选浓度。同时通过不同抗生素的组合，选择出抑制共培养后的籼稻愈伤组织表面残余农杆菌合适条件。并对植物激素和抗生素应用于愈伤组织的转基因系统中作用作了进一步的讨论。     

迎春花高效再生体系的建立

以迎春花作为材料,MS作为基础培养基,附加不同浓度的6-BA、IBA、NAA进行组合,研究不同处理对迎春花再生的影响.结果表明:迎春花最佳初代诱导培养基为M S+6-BA 07.5~10.0 mg/L+IBA 00.2~01.0 mg/L,诱导率为100%;最佳增殖培养基为MS+6-BA05.mg/L+IBA00.5mg/L,增殖系数为37.3;最佳不定根诱导培养基为1/2 MS+IBA 05.mg/L+NAA 02.mg/L,在此培养基中,诱导的不定根粗且长,多根毛,多侧根,容易移栽.     

紫花地丁的组织培养和植株再生

以未成熟种子萌发的子叶和下胚轴为外植体建立了紫花地丁的组织培养及植株再生体系，结果表明最适愈伤组织诱导培养基为MS＋2，4-D 0．5mg／L＋6．BA0．5mg／L或者MS＋2．4-D1mg／L＋6-BA 0．2mg／L，愈伤组织诱导率可达100％，将生长良好的愈伤组织转入分化培养基可诱导芽或根的分化，其中诱导芽的最适培养基为MS＋6-BA1mg／L＋2。4-D0．5mg／L，诱导根的最适培养基为MS＋2，4-D1mg／L＋6-BA 0．2mg／L，两种器官分化途径均能有效再生成苗。     

四川省猕猴桃生态气候适宜性分析及精细区划研究

利用四川省145个气象站点1981-2010年30a的气象数据,通过分析四川省主要猕猴桃产区县气候特点和影响猕猴桃生长的关键气象因子,选择了年均温、1月均温、7月均温、≥10℃积温、年降水、无霜期、相对湿度、日照作为四川猕猴桃生态气候适宜性区划指标,应用GIS空间插值技术推算出四川无测站区域500m*500m网格点上的气候要素值,采用模糊综合评判的方法确定区划指标权重,得到四川猕猴桃精细化气候适宜性区划图,再选择越冬冻害、芽膨大期冻害和日灼三种猕猴桃生长期内主要气象灾害,进行气象灾害风险区划,进一步对气候适宜区进行细分,以期为四川省猕猴桃产业合理规划布局和品质评价提供科学依据。结果表明,四川省猕猴桃种植的气候适宜区较广,高适宜区面积约3.39×104km2,适宜区面积约8.73×104km2,较适宜区面积约8.46×104km2。初步分析整个四川盆地区均属于高适宜区,但是在加入三种气象灾害风险分析后,高适宜区进一步缩小到龙门山脉沿线和成都平原区。     

椿叶花椒组织培养及植株再生

选用椿叶花椒带腋芽的茎段为外植体,进行组织培养与快速繁殖技术研究.结果表明椿叶花椒初代愈伤组织诱导以WPM 6-BA2.5mg·L-1 NAA2mg·L-1 IBA1mg·L-1效果最好;继代培养采用WPM 6-BA0.2mg·L-1 IBA0.1mg·L-1 NAA0.1mg·L-1,培养30d,增殖在5.6倍以上;生根培养1/4MS I-BA0.5mg·L-1,20d左右生根,平均根量4.6条,生根率95%.     

青葙高效再生体系的建立

以青葙茎段为外植体建立高频再生体系,探讨不同激素配比对青葙不定芽诱导、继代增殖和不定根诱导的影响。结果表明:青葙茎段外植体诱导培养基为MS+6-BA(2mg/L)+IBA(0.5mg/L),诱导率为100%;继代增殖培养基为MS+6-BA(2mg/L)+IBA(0.01~0.02mg/L),不定芽增加3~5个;不定根诱导培养基为1/2MS+NAA(0.5mg/L)+IBA(0.5~1.0mg/L),诱导率高达100%;组培苗移植到盛有细沙的花盆中,成活率为100%。     

新疆杨组培再生体系建立

以新疆杨叶片为外植体,研究新疆杨组织培养再生体系建立的主要影响因素。结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基组合为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D;愈伤组织分化的最佳培养基组合为MS+0.1 mg/L TDZ+0.3 mg/L IBA,不定芽增殖的最佳培养基组合为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IBA,诱导生根的最佳培养基组合为1/2MS+0.5 mg/L IBA,新疆杨组培苗在生根培养基上形成的根条数多,苗体健壮,生根率达到100%。本研究成功建立了新疆杨组织培养再生体系,为其转基因研究工作奠定了基础。     

贵州地方稻种香禾糯组织培养再生体系建立

本研究以贵州地方香禾糯从江黑禾和来拢为材料,研究了不同激素组合对丛生芽诱导和再生芽生根的影响。结果表明,在本研究条件下,MS培养基添加2.0mg/L 2,4-D和0.5mg/L 6-BA是从江黑禾最佳芽诱导培养基,在MS培养基添加4.0mg/L TDZ及0.5 mg/L IBA的培养基中培养10d后,转至添加4.0mg/L6-BA以及0.5mg/L NAA培养基继续培养,为从江黑禾茎尖诱导丛生芽最佳条件;以N6培养基添加1.0mg/L 2,4-D和0.1mg/L 6-BA是来拢最适芽诱导培养基,以MS培养基添加0.2mg/L NAA和2.0mg/L6-BA为来拢茎尖丛生芽诱导培养基。通过本研究建立的组织培养诱导再生技术,从江黑禾及来拢均获得移栽成活并能正常开花结籽的再生植株。     

耐寒美国红枫的组织培养体系的建立

本试验以美国红枫带芽茎段为外植体,通过筛选外植体消毒方式,筛选出适宜的初代诱导培养、继代增殖培养、壮苗培养、生根培养的培养基,建立美国红枫组织培养体系,从而为美国红枫工厂化育苗提供技术支持。研究结果表明：最佳的消毒处理方式是先后用75%酒精消毒30 s及10%次氯酸钠消毒10 min,平均存活率为64.15%;适宜的腋芽诱导培养基为改良MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA。在改良MS培养基中添加0.005 mg/L TDZ+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L GA₃+0.1 mg/L IBA适用于美国红枫继代增殖培养,增殖系数为6.91;筛选最佳的壮苗培养基为MS+1.0 mg/L ZT+0.3 mg/L IBA;生根培养基为1/2MS+1.0 mg/L GA₃+2 mg/L 2,4-D,平均生根数量为5条。     

地被菊花‘珍粉’组织培养与植株再生体系的建立

研究不同因子对地被菊‘珍粉’品种再生体系建立的影响,为地被菊的推广种植打下技术基础。以地被菊‘珍粉’二年生茎段为试材,研究不同消毒时间梯度下2%NaClO和0.1%Hg Cl2对茎段消毒效果、6-BA:NAA和6-BA:KT激素组合对不定芽诱导、不同浓度IBA和NAA对不定根发生,半开瓶和全开瓶两种炼苗方式对移栽成活率的影响。结果显示,2%NaClO消毒效果优于0.1%Hg Cl2,且在6 min时萌发率最高,达到90.00%;外植体腋芽诱导率在6-BA 0.1 mg/L+KT 0.1 mg/L组合最高,达到97.67%,出芽指数为6.33,优于6-BA:NAA组合;不同浓度IBA诱导不定根发生率均达100%,高于NAA,但在根系质量和后期成活率上,IBA浓度为0.5 mg/L时最优;试管苗在半开盖炼苗5 d后的移栽成活率达到了100%,且植株长势健壮。