TEL—AML1阳性及阴性儿童急性淋巴细胞白血病基因重排的特点分析

目的比较TEL—AML1融合基因阳性及阴性急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿的基因重排特点和其临床特点。方法儿童ALL患儿111例,应用多重PCR技术检测IgH、IgK、TCR1基因重排,双色间期FISH检测TEL—AML1／t（12;21）融合基因。分析不同TEL—AML1基因型与基因重排的相关性。结果在41例TEL—AML1阳性儿童ALL患儿中,多数年龄介于2～10岁,其中3～5岁比例最高;与儿童B系ALLTEL—AML1阴性组相比,TEL—AML1阳性患儿Ig κ和TCRγ的基因重排阳性率增高分别为54％（22／41）和71％（29／41）,两者差异有统计学意义（P分别为0．001、0．007）,但IgH重排和至少发生一个重排均无显著差异。结论t（12;21）是儿童ALL最常见的染色体易位,具有与TEL／AML1融合基因共存的亚克隆,该特点可作为微小残留病的辅助检测,值得在临床中推广使用。     

B系急性淋巴细胞白血病与基因重排

分子生物学是当今生命科学中最热门的前沿学科,尽管它在恶性血液病中的应用尚处于起始阶段,对细胞学诊断的影响也还有限。但是愕然回首,它已深深地影响到我们对细胞形态学和细胞遗传学,以及它们与临床之间诸多联系的理解,对肿瘤细胞生物行为和临床行为之间的了解,分子生物学检查能提供精确的证据、超前的信息和崭新的视角。本文就B系细胞白血病的相关基因重排与临床表型之间的关系作一综述。1　相关基因的结构与功能在B系急性淋巴细胞白血病(acutelymphoblasticleukaemia ,ALL)中,已检测到t(8;14 ) (q2 4 ;q32 )、t(2 ;8) (p11～12 ;q2 4 …     

多重PCR检测急性淋巴细胞白血病IgH及TCRγ链重排基因

多重ＰＣＲ检测急性淋巴细胞白血病ＩｇＨ及ＴＣＲγ链重排基因徐兵周淑芸孙竞免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）和Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）基因重排，可作为淋巴细胞白血病特异性基因标志。应用多聚酶链（ＰＣＲ）技术检测重排基因以其灵敏、快速等特点而优于其它传统方法。但目前Ｐ...     

急性淋巴细胞白血病TCR/IgH基因重排的联合检测及临床意义

目的探讨T细胞受体γ（T　cell　receptor．γ，TCRγ）、T细胞受体δ（T cell receptor δ，TCRδ）、免疫球蛋白重链（Immunoglobulin heavy chain H，IgH）基因重排的联合检测方法及其在监测急性淋巴细胞白血病（Acute Lymphoblastic Leukemia，ALL）微小残留病（Minimal Residual Disease，MRD）中的临床意义。方法应用PCR／SSP的方法对104例急性淋巴细胞白血病患者（83例儿童、21例成人）进行TCRγ、TCRδ、IgH三种基因重排的联合检测，并通过动态监测来了解它们与临床MPD的关系。结果三种基因重排联合检测在ALL患者的检出率较高（儿童前B-ALL为89．2％，T-ALL为94．4％；成人PreB-ALL为84．6％，T-ALL为87．5％），远高于单一基因重排的检出率；联合检测持续阳性患者的复发率远高与阴性患者（Χ^2=9．07，P〈0．01）。结论TCRγ、TCRγ、IgH基因重排的联合检测方法简便、敏感性高，对于急性淋巴细胞白血病的诊断以及MRD的监测具有非常重要的临床意义。     

MLL基因重排阳性的儿童急性淋巴细胞白血病的融合基因及免疫表型特点

为了探讨混合谱系白血病（mixed linage leukemia,MLL）基因重排阳性的儿童急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia,ALL）融合基因与免疫表型的特征,利用多重巢式聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）方法检测601例ALL患儿中MLL基因重排的发生率,通过对PCR产物的测序,分析融合基因的亚型及特点;比较分析重排阳性的22例患儿与同期未检出任何融合基因的随机抽取的30例ALL患儿及43例pro—B—ALL患儿初诊时免疫表型特点。结果表明：MLL基因重排阳性的ALL患儿检出率为3．66％,占pro—B—ALL的29．9％。20例MLL基因重排阳性的B—ALL患者全部为CD10^-,表达CD13、CD33和CD34的例数较pro—B—ALL对照组低,CD20、CD22、CD2、CD5、CD7的表达则无差异。共检出4种MLL基因的伙伴基因AF4、AF9、AF10和ENL。MLL基因融合位点主要位于第6、7、8外显子,同一患者可同时存在多种MLL基因融合位点;而其伙伴基因的融合位点相对单一。1例患儿MLL—AF10融合转录本存在随机插入序列。结论：MLL基因重排的发生率低,重排形式多样,阳性ALL患儿在免疫表型及融合转录本的表达方面具有独特的生物学特征。     

急性淋巴细胞白血病初发和难治复发时基因重排类型改变 …

目的：为进一步了解难治复发急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）基因类型的变化。方法：应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测５６例初治及其中２２例难治复发ＡＬＬ患者ＩｇＨ,ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ和ＴＣＲＶδ２－Ｄδ３基因重排。结果：７１．４％（４０／５６）,８０．４％（４５／５６）及５８．９％（３３／５６）,初始ＡＬＬ存在ＩｇＨ,ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ和ＴＣＲＶδ２－Ｄδ３基因重排,４０例ＩｇＨ基因重排阳性病人中,１７     

多重PCR法检测初诊成人急性淋巴细胞白血病患者克隆性免疫球蛋白和T细胞受体基因重排

目的 应用多莺PCR方法检测初诊成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的克隆性免疫球蛋白(Ig)和T细胞受体(TCR)基因重排,为实时定量RT-PCR(RQ-PCR)法监测ALL患者体内的微量残留病(MRD)奠定基础.方法 参照BIOMED-2协作组制定的Ig和(或)TCR检测方法,设计96条不同的PCR引物,分成14个混合管,通过多重PCR,分别检测患者骨髓单个核细胞的IgH、IgK、TCRB、TCRG、TCRD克隆性基因重排.结果 在22例成人B系ALL患者中,Ig克隆性重排检出率为96%,其中IgH为86%,IgK为14%.在18例成人T系ALL患者中,TCR克隆性重排检出率为100%,其中TCRB为83%,TCRG为78%,TCRD为39%.两个及两个以上克隆性标志物的检出率在B和T系ALL中分别为91%(22例中20例)和89%(18例中16例).结论 BIOMED-2协作组设计的14管多重PCR引物和方法,几乎可检测到淋巴细胞白血病患者体内所有占优势的克隆性T、B细胞增殖群体,方法简便、可靠、覆盖面广,适用于成人ALL患者基因重排检测和MRD监测.     

实时荧光定量PCR检测急性淋巴细胞白血病患者TCR VγI-Jγ基因重排

目的　探索提高急性淋巴细胞白血病 (ALL)微量残留病 (MRD)检测技术。方法　构建实时荧光定量聚合酶链反应 (PCR)检测TCRVγI Jγ基因重排技术并定量分析 36例ALL患者的检测结果。结果　建立的实时荧光定量PCR方法的灵敏度为 10 -4水平。 36例患者荧光定量PCR方法检测结果初治组为 (7.38± 6 .6 5 )× 10 -2 ,完全缓解 (CR)组为 (1.0 2± 1.0 8)× 10 -2 ,造血干细胞移植(HSCT)组为 (3.89± 5 .6 5 )× 10 -3 。CR组和HSCT组TCRVγI Jγ基因重排水平显著低于初治组 (P值均为 0 .0 0 1) ,HSCT组MRD水平显著低于CR组 (P <0 .0 5 )。 6例HSCT后检测阳性病例中 2例MRD水平 <1× 10 -3 ,获长期无病生存 ,另 4例MRD水平较高患者一年内均出现复发。结论　所建立的实时荧光定量PCR方法简便、快速、灵敏及特异 ;实时荧光定量检测缓解期ALL患者MRD水平对预测预后有一定的意义     

儿童急性淋巴细胞白血病IgH基因重排的定量检测研究

目的建立免疫球蛋白重链（IgH）的实时定量（RQ）-PCR检测体系，以用于儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）微小残留病（MRD）检测。方法采用定性PCR筛选109例儿童B细胞ALL（B-ALL）IgH基因单克隆重排，根据连接区序列设计等位基因特异性引物，应用RQ-PCR技术，采用胚系Taqman探针与引物，在41例患儿中建立RQ-PCR定量检测方法，并分析其敏感度、特异性等。结果109例儿童B-ALL初诊标本中IgH单克隆重排有48例，经测序分析发现，V、D、J片段频率最高的分别为V3家族、D3家族和J4家族。RQ-PCR方法扩增48例IgH单克隆重排的初诊DNA，其中41例可重复敏感度和最大敏感度均≤10^-4，非特异性扩增的循环阈值（Ct值）均〉40，与特异性扩增Ct值的差距均〉3。标准曲线斜率均值为-3．314±0．19，截距均值为37．664±1．23，相关系数均为0．97以上。结论以IgH基因重排为靶分子，采用RQ-PCR方法和胚系探针策略检测儿童B-ALL，敏感性≤10^-4，并具有较高的特异性，适于MRD的定量研究。     

PCR检测急性淋巴细胞白血病微小残留病38例临床分析

微小残留病(Minimal residual disease,MRD)是指白血病患者诱导化疗完全缓解后,体内残留微量白血病细胞的状态.MRD是白血病复发的根源,因此检测MRD对白血病判断预后、预防复发及个体化治疗都有重要意义.作者应用PCR检测了38例急性淋巴细胞白血病(ALL)的IgH和TCRγ基因重排,现报道如下.     

儿童急性淋巴细胞白血病的预后评估

目前危险指向性治疗使儿童急性淋巴细胞白血病的治愈率接近80％。白血病细胞的分子基因分析和宿主的遗传药理研究是进一步改善预后的基础。评估微小残留病的早期治疗效应以综合反映白血病细胞的药物反应和宿主的遗传药理学，是调整治疗强度最可靠的指标。基因组和蛋白质组学技术有望鉴定个体化治疗的分子靶向。本文综述目前用于儿童ALL预后评估的危险因素及评估系统。     

髓系抗原阳性儿童急性淋巴细胞白血病的临床及实验室分析

采用一系列相关单克隆抗体和流式细胞术间接免疫我法分析８５例初治儿童急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）患者的免疫表型,观察儿童ＡＬＬ髓系抗原表达及其与临床和生物学特性的关系。研究结果表明,儿童ＡＬＬ髓系抗是性率达２１．２％,以ＣＤ１３和ＣＤ３３阳性常见,Ｔ系ＡＬＬ系与Ｂ系ＡＬＬ髓系抗原表达无差异（Ｐ〉０．７５）。Ｔ／Ｂ混合ＡＬＬ中髓系抗原表达率较高（７例中３例阳性）。ＡＬＬ－Ｌ２与ＡＬＬ－Ｌ１髓系抗原表达无差异（Ｐ〉０．０５）,髓系抗原阳性ＡＬＬ与髓系抗是性ＡＬＬ临床生物学特征,染色体数量及其结构变化均无差异（Ｐ〉０．２５）,髓系统抗原性病例完全缓解（ＣＲ）率低于阴性病上内复发率高于阴性病例,但均无差异（Ｐ〉０．０５）,结论提示,儿童ＡＬＬ髓系统抗原表达与缓解率无关,Ｔ／Ｂ混合ＡＬＬ的髓系统抗原的表达较高,且预后不良。     

儿童急性淋巴细胞白血病的预后因素

目前在西方规模大的儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）治疗中心，其ALL的治愈率已达到80%，此成就归因了依据危险度所确定的多药联合化疗和中枢神经系统预防。患的分层是根据预后因素预测复发危险。研究预后因素间的相互关系是必要的，已被广泛熟知的宿主相关因素包括年龄，性别，种族和药物遗传学。疾病相关预后因素包括白细胞计数，免疫分型，细胞或分子遗传学特征。早期治疗反常是最有力的预后因素。大的，对照的和随机的临床方案的采用大大地改善了儿童急性淋巴细胞白血病的预后。     

P2RY8-CRLF2重排的急性淋巴细胞白血病儿童的临床特征及预后分析

目的:探讨P2RY8-CRLF2重排急性淋巴细胞白血病(ALL)儿童的临床特征及预后.方法:2016年1-12月确诊并按照中国儿童白血病协作组(CCLG)-ALL 2008(CCGL-ALL 2008)方案规范治疗的108例B细胞型ALL(B-ALL)患儿,根据有无P2RY8-CRLF2重排分为P2RY8-CRLF2重...     

982例儿童急性淋巴细胞白血病流行病学研究

目的:分析982例儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)临床病例,了解儿童ALL流行病学特征。方法:对本中心2008年4月至2015年5月收治的982例ALL患儿临床资料采用回顾性分析的方法,分析其性别、发病年龄、发病季节、发病相关危险因素及分子生物学特征等。结果:ALL患儿男女比例为1.5∶1,中位发病年龄5岁,发病年龄高峰为2-5岁。发病高峰季节为春季。出生和喂养史分析显示,足月产患儿占98.0%;55.9%患儿是顺产,44.1%患儿是剖腹产。母乳喂养者占79.8%,人工混合喂养儿占20.2%。中位出生体重3.5 kg,其中巨大儿占18.3%。有出生异常史者34例(3.5%),其中脐带绕颈者10例。发病近期有家庭装修史者占31.4%,中位装修环境暴露时间12个月。患儿一至三级亲属中,有血液系统疾病者44例(4.5%),有恶性肿瘤者53例(5.4%)。免疫表型分析结果显示,B-ALL占90.7%,T-ALL占9.3%。分子生物学检测中,TEL/AML1阳性者占21.0%,E2A/PBX1阳性者占5.2%,BCR-ABL阳性者占6.1%,MLL阳性者占2.5%。结论:本研究中儿童急性淋巴细胞白血病男性患儿较多,发病年龄高峰为2-5岁,发病季节高峰为春季,出生季节高峰为秋冬季,剖宫产术分娩、出生时为巨大儿及出生后非母乳喂养比例高于同期全国大部分地区婴儿的均值,有电离辐射及家居环境暴露史与亲属血液病、恶性肿瘤病史者比例较高。     

成人与儿童急性淋巴细胞白血病细胞遗传学大样本对比分析

本研究对566例成人急性淋巴细胞白血病（aALL）和586例儿童急性淋巴细胞白血病（cALL）的细胞遗传学进行对比分析。对所有患者均进行了细胞遗传学分析,部分患者进行了FISH检测。结果表明：aALL与cALL的染色体异常存在明显的差异。aALL中异常核型占62．0％,染色体异常较多见的为t（9;22）（q34;q11）、亚二倍体、超二倍体（47—50）、abn（6q）、abn（9p）、-7等,预后不良的占多数。cALL中异常核型占39．2％,染色体异常较多见的为高超二倍体、亚二倍体、TEL／AML1（＋）、＋8、超二倍体（47—50）、＋21等,预后良好的占多数。其中异常核型、总亚二倍体、总超二倍体（47—50）、t（9;22）（q34;q11）、-7、abn（7q）、abn（14q32）、＋Ph在aALL中的发生率明显高于eALL;cAu．正常核型（N）、高超二倍体、＋8、＋21＊2、TEL／AML1（＋）的发生率明显高于aALL。Ph（＋）在aALL中的检出率为20．5％,伴有附加异常的占63．8％。Ph（＋）aALL附加异常中＋Ph、-7、i（9q＋）、9p-、＋8、＋21、＋x、6q-、abn（14q32）、＋14出现的比例较高。Ph（＋）在cALL中的检出率为4．4％,明显低于aALL（P：0．000）,伴有附加异常的占42．3％,附加异常中abn（9p）、abn（7p）、-7、17p-、＋21出现的比例较高。结论：本组病例染色体数目异常及结构异常几乎涉及到每一条染色体,复杂核型多见。aALL与cALL的染色体异常存在明显的差异。     

Ph-like急性淋巴细胞白血病致病基因的研究进展

费城染色体样急性淋巴细胞白血病(Philadelphia chromosome-like acute lymphoblastic leukemia,Ph-like ALL或BCR-ABL1-like ALL)是指基因表达谱与Ph阳性ALL相似,但缺乏BCR-ABL1融合的一类急性白血病。Ph-like ALL涉及多种基因组,激活激酶和细胞因子受体信号的改变。本文将针对近几年Ph-like ALL在JAK-STAT通路异常激活,ABL激酶通路基因异常,TKI在Ph-like ALL中的抗性,SH2B3基因的失活性突变,IKZF1基因异常的研究进展作一总结。并就新型致病基因(ATF7IP外显子9和PDGFRB外显子11之间的融合,PDGFRB外显子11-23与AGGF1基因外显子1-6融合造成的PDGFRBC843G突变等)的前沿最新进展作一综述。