千金子制霜前后提取物对人胚肾细胞HEK293的体外毒性作用

目的：比较千金子制霜前后提取物对正常人胚肾细胞HEK293的影响,探究千金子制霜减毒的作用机制。方法：采用HEK293细胞为体外模型,随机分为对照组,千金子生品低、中、高质量浓度(100、200、400μg·mL^–1)组和千金子霜品低、中、高质量浓度(100、200、400μg·mL^–1)组。细胞体外培养后,分别给予等体积的无血清培养液和千金子生品、霜品提取物溶液,各组均设置3个复孔。采用CCK-8法评价细胞存活率,利用倒置显微镜观察细胞数量及形态变化;碘化丙啶(PI)染色法和AnnexinV-FITC/PI双重染色法检测细胞周期和凋亡情况;试剂盒法检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽(GSH)、肌酐(Cr)和细胞裂解液中尿素氮(BUN)水平。结果：与对照组比较,千金子生品各质量浓度组HEK293细胞存活率降低,细胞形态异常,细胞数量减少,G₀/G₁、G₁/G₂期细胞比例明显降低,S期细胞比例明显增加,细胞凋亡率升高(P<0.01),LDH...     

千金子制霜前后提取物对正常及癌性腹水模型小鼠泻下逐水效应与毒性研究

目的：筛选千金子泻下逐水药效部位,探究其制霜前后泻下逐水效应及结肠、肾脏毒性的变化。方法：采用H22癌性腹水模型小鼠,以腹水量、粪便含水量、尿量等生物效应指标筛选千金子药效部位;采用H22癌性腹水模型小鼠,灌胃千金子生品、霜品石油醚部位,结合生物效应指标、脏器指数、肾脏功能指标、氧化应激指标、炎症因子含量及水通道蛋白表达考察千金子的泻下逐水效应;采用正常小鼠,以脏器指数、肾脏功能指标、氧化应激指标、炎症因子含量考察千金子制霜前后的毒性差异。结果：千金子制霜前后石油醚部位能够提高癌性腹水模型小鼠粪便含水量、尿量,降低小鼠腹水量（P<0.05,P<0.01）,非石油醚部位无显著作用。药效实验结果显示,与模型组比较,各给药组小鼠组织损伤显著减轻,在灌胃石油醚部位后小鼠血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）含量降低,总超氧化物歧化酶（SOD）含量升高,丙二醛（MDA）含量下降,结肠、肾脏组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β (IL-1β)的含量显著降低,且能抑制结肠、肾脏组织中水通道蛋白1 (AQP1)和水通道蛋白3 (AQP3)蛋白表达水平。毒性结果显示,与对照组比...     

千金子制霜新工艺的研究

目的:优选千金子最佳制霜工艺。方法:利用新研制的制霜设备,采用正交试验法,选择种仁前处理方式、加热温度和加热时间为三个因素,以千金子霜含油量及主要泻下成分续随二萜酯和千金二萜醇二乙酸苯甲酸酯含量为指标,综合评价其制霜工艺。结果:千金子最佳制霜工艺为:种仁微炒后粉碎成泥状(粒度为40～60目),于55℃加热30min,出油率控制在51%～53%(g/g),出霜率控制在45%～47%。结论:加热温度对千金子霜含油量及主要泻下成分含量有显著影响,种仁前处理方式和加热时间对千金子霜含油量及主要泻下成分影响不明显。     

毒性中药千金子制霜前后脂肪酸成分GC-MS分析

目的：研究千金子制霜前后脂肪酸成分变化。方法：按文献方法,将千金子和千金子霜脂肪油皂化-甲酯化后,采用GC-MS法进行了测定,色谱柱为HP-INNOWAX（60m×250μm×0.25μm）毛细管柱。结果：千金子和千金子霜中均检测出9种脂肪酸成分,以油酸相对含量最高,分别占脂肪酸总量的76.724%和78.719%。其次为棕榈酸和亚油酸,棕榈酸分别占8.606%和8.430%,亚油酸分别占8.256%和7.10%。结论：千金子与千金子霜中脂肪酸成分组成基本一致,脂肪酸成分含量略有差别。     

千金子制霜前后提取物通过调控脂筏介导Caco-2细胞中TLR4信号通路的作用机制研究

目的 探究千金子Euphorbiae Semen制霜前后提取物通过调控脂筏介导Caco-2细胞中Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）信号通路的作用机制。方法 将Caco-2细胞分为千金子生品低、中、高剂量（50、200、800 μg/mL）组及千金子霜品低、中、高剂量（50、200、800 μg/mL）组和对照组,利用流式细胞术检测Caco-2细胞膜脂筏丰度;采用激光共聚焦实验检测Caco-2细胞中TLR4与脂筏的共定位;利用Western blotting检测Caco-2细胞中TLR4、核因子-κB p65（nuclear factor-κB p65,NF-κB p65）、p-NF-κB p65和NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NOD-like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3）的蛋白表达;ELISA检测Caco-2细胞上清液中白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的含量;Caco-2细胞转染TLR4后检测IL-1β和TNF-α的含量变化。结果 与对照组比较,千金子生品提取物可以显著增加Caco-2细胞膜脂筏的丰度（P<0.01）,促进TLR4向脂筏的募集（P<0.01）,提高TLR4、NF-κB p65、p-NF-κB p65和NLRP3的蛋白表达以及诱导IL-1β和TNF-α的释放（P<0.05、0.01、0.001）。相同剂量下,与千金子生品提取物相比,千金子霜品提取物对Caco-2细胞膜脂筏丰度、TLR4向脂筏募集、TLR4介导的信号通路传导和促炎因子分泌的影响均明显减弱（P<0.05、0.01、0.001）。体外siTLR4转染试验结果进一步证实,Caco-2细胞转染TLR4后TNF-α和IL-1β的含量显著降低（P<0.05、0.01、0.001）。结论 千金子制霜减毒的作用机制可能与通过调控脂筏丰度干扰TLR4向脂筏募集,最终影响脂筏中包含的TLR4信号蛋白的传导有关。     

黄连提取物与肠道菌群的相互作用研究

目的研究人体肠道菌群对黄连提取物主要活性成分的代谢及黄连提取物对人体肠道菌群生长的影响。方法采用UPLC-Q-TOF/MS技术分析肠道菌群对黄连提取物转化后的代谢物;并应用浊度法测定不同质量浓度黄连提取物对4类肠道细菌(乳酸菌、双歧杆菌、肠杆菌和肠球菌)生长的影响。结果肠道菌群对黄连提取物生物碱类成分主要进行氢化和去甲氧基作用,其中小檗碱和黄连碱被代谢为氢化产物,巴马汀被转化为去甲氧基产物;黄连提取物显著抑制病原菌(肠杆菌、肠球菌)的生长,显著促进益生菌(乳酸菌、双歧杆菌)的生长。结论肠道菌群对黄连提取物生物碱类成分具有多种代谢作用,且黄连提取物具有改善肠道微生态的功能。     

黄连对大鼠肠道菌群的影响

目的 通过观察黄连对大鼠肠道菌群的影响,为临床上合理使用黄连积累数据.方法 将黄连常规制备咸水提物,分别以高、中、低不同剂量灌胃大鼠,同时以等体积的蒸馏水和林可霉素分别灌胃大鼠作为对照.在连续给药1,2和3周等不同时间点,收集大鼠十二指肠、空肠、回肠和结肠等肠段(含肠内容物)样本,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT...     

怡生汤对小鼠肠道菌群功能影响的研究

目的：研究怡生汤对小鼠肠道菌群的影响方法：小鼠随机分为4组：正常组、怡生汤低、中、高剂量组,口服给予14d,观察怡生汤对小鼠肠道内双歧杆菌、乳杆菌、肠杆菌和肠球菌、产气荚膜梭菌、拟杆菌等6种菌群数目的变化结果：在连续给予怡生汤14d后,与给药前相比较,怡生汤中、高剂量组小鼠肠道内双歧杆菌、乳酸杆菌和拟杆菌的数目明显增多（p〈0．05或p〈0．01）,肠球菌、肠杆菌和气荚膜梭菌的的数目明显减少（p〈0．05）结论：怡生汤促进小鼠肠道中益生菌的生长增殖,同时抑制有害致病菌的生长,对肠道菌群有一定的调节作用。     

艾灸腹部募穴调整大鼠肠道菌群失调的实验研究

目的:观察艾灸关元、天枢对实验性大鼠肠道茵群失调的影响.方法:将50只清洁Wistar大鼠随机分为正常组(Normal group)、模型组(Model group)、药物组(Medical group)、关元组(CV 4 group)、天枢组(ST 25 group),每组10只.用大量盐酸林可霉素灌胃造模,造模成功后,分别进行药物治疗和艾灸治疗.1个疗程后,采取各组大鼠新鲜粪便0.1g,应用双歧杆菌(Bifidobacterium Species,BS)、乳酸杆菌(Lactobacillus.LBS)、肠杆菌(Enterobactefiaceae,EB)、肠球菌(Enterococcus,EC)选择性培养基进行细菌培养,生化鉴定管和比浊法检测不同菌落生长情况和各组菌落数量.结果:艾灸关元穴使BS、LBS数量有所增加;艾灸天枢穴使EB、EC数量有所增加.结论:艾灸不同部位的募穴可以选择性生调整肠道优势益生茵群,从而治疗肠道菌群失调症.

Abstract：

Objective:To study the moxibustion at Guanyuan(CV 4)and Tianshu(ST 25)on intestinal dvsbacteriosis in rats.Methods:Fifty Wistar rats,clearing grade,were randomly divided into 5 groups,a normal group,a model group,a medical group,and a Guanyuan(CV 4)group and a Tianshu(ST 25)group,with 10 rats in each group.The rats were treated with Lincomycin Hydrochloride via intragastric administration for developing models.The model rats were treated with medicine and moxibustion respectively.0.1 g fresh rat feces in each group were cultured on the selective culture medium of bifidobacterium species(BS),lactobacillus(LBS),enterobactefiaceae(EB)and enterococcus(EC).The growth and quantity of the bacterial colony were tested by biochemical identification tubes and turbidimetry.Results:Moxibustion at Guanyuan(CV 4)increased BS and LBS while moxibustion at Tianshu(ST 25)improved EB and EC.Conclusion:Moxibustion at Front-Mu points Of different body parts selectively regulated advantaged probiotics for treating intestinal dysbactenosis.     

养阴活血方对胃癌前病变肠道菌群变化及转归的影响

目的:观察养阴活血方对胃癌前病变肠道菌群变化及转归的影响。方法:将66例胃癌前病变患者分为2组各33例。对照组为口服四联给药方案,治疗组在对照组基础上加用养阴活血方,通过比较临床疗效,胃黏膜组织病理检测及肠道菌群(乳酸杆菌、大肠杆菌、双歧杆菌)数量进行疗效评定。结果:治疗组总有效率为87.88%,优于对照组总有效率66.67%,经秩和检验,差异有统计学意义(P 0.05)。经治疗,治疗组提高患者肠道菌群中乳酸杆菌、双歧杆菌,降低大肠杆菌,与治疗前比较,差异有统计学意义(P 0.05)。治疗组治疗后乳酸杆菌、大肠杆菌、双歧杆菌与对照组比较,差异有统计学意义(P 0.05)。治疗后,治疗组胃镜下黏膜病变积分大体分级、部分分级均较治疗前改善(P 0.05),且治疗组治疗后2个分级积分与对照组比较,差异均有统计学意义(P 0.05)。结论:养阴活血方能调控胃癌前病变患者肠道菌群平衡,改善胃黏膜病理变化,有益于胃癌前病变的转归。     

铁皮石斛对抗生素诱导小鼠肠道菌群紊乱的改善作用

目的 探究铁皮石斛Dendrobium officinale对抗生素诱导小鼠肠道菌群紊乱的改善作用。方法 采用UPLC-QTOF-MS/MS对高压灭菌前后的铁皮石斛新鲜榨汁成分进行分析。C57小鼠随机分为对照组、模型组、铁皮石斛新鲜榨汁组和铁皮石斛高压灭菌榨汁组,抗生素干预7 d后给药14 d,收集粪便,另取铁皮石斛鲜品,用Illumina MiSeq高通量测序检测铁皮石斛内生细菌和各组小鼠肠道的菌群结构。结果 高压灭菌前后铁皮石斛新鲜榨汁的共有成分为14种,占总成分的95.84%。非度量多维标度分析发现铁皮石斛新鲜榨汁组小鼠肠道菌群结构与对照组小鼠肠道菌群更相似,但铁皮石斛高压灭菌榨汁对抗生素诱导小鼠肠道菌群紊乱无明显作用;与模型组比较,铁皮石斛新鲜榨汁组优势菌群乳酸杆菌属Lactobacillus、双歧杆菌属Bifidobacterium的丰度显著升高,有害菌群脱硫弧菌属Desulfovibrio的丰度显著降低。结论 铁皮石斛通过提高有益菌丰度和降低有害菌群丰度来改善抗生素诱导小鼠肠道菌群紊乱。     

甘草总皂苷及水提物对肝损伤大鼠肠道菌群的影响

目的探讨甘草总皂苷及水提物对肝损伤大鼠肠道菌群的影响。方法采用ip四氯化碳诱导大鼠慢性肝损伤模型,模型大鼠分为4组,分别ig给予甘草总皂苷和甘草水提物,并以联苯双酯作为阳性对照组,模型组ig生理盐水。同时设对照组,ig给予生理盐水。于给药结束后,测定各组大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平;收集大鼠粪便,通过16 S rRNA测序对各组大鼠肠道菌群的多样性进行分析。结果与对照组比较,模型组大鼠血清中ALT、AST水平显著升高(P<0.05、0.01);与模型组比较,各给药组大鼠血清中ALT、AST水平均显著降低(P<0.05、0.01);与模型组比较,联苯双酯组大鼠菌群结构未发生显著变化,而甘草总皂苷组及甘草水提物组均表现出不同的群落组成。并且相对于水提物组,总皂苷组显著提高了乳酸杆菌属和杆菌门S24-7科菌群的相对丰度。但甘草总皂苷组和甘草水提物组的大鼠肠道菌群与对照组大鼠肠道菌群之间仍存在差异,并没有完全恢复到正常状态。结论甘草总皂苷与甘草水提物均可以改善慢性肝损伤,并对肝损伤大鼠肠道菌群发挥不同的调控作用。     

大鼠肠道菌群对三七总皂苷体外降解的研究

目的探究雌、雄大鼠肠道菌群对三七总皂苷中3种皂苷(三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1)的体外降解作用。方法将三七总皂苷分别与雌、雄大鼠肠道菌群孵育液在厌氧条件下共同培养24 h,测定不同时间点孵育液中3种皂苷的量。结果雌、雄大鼠肠道菌群对人参皂苷Rb1均有降解作用,雄鼠的降解较雌鼠稍快。雌、雄鼠肠道菌群对三七皂苷R1和人参皂苷Rg1均无明显降解作用。结论在离体条件下,三七总皂苷中人参皂苷Rb1会被肠道菌群降解,而三七皂苷R1和人参皂苷Rg1则较为稳定。     

毛冬青三萜皂苷对动脉粥样硬化大鼠肠道菌群的影响

目的探讨毛冬青三萜皂苷对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)大鼠肠道菌群的影响。方法采用高脂饮食联合ip维生素D3诱导AS大鼠模型,给予辛伐他汀和毛冬青三萜皂苷进行干预,检测各组大鼠血清中总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglycerides,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、一氧化氮(nitric oxide,NO)、内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、血管紧张素-Ⅱ(angiotensin-Ⅱ,Ang-Ⅱ)水平;采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠胸主动脉病理变化;通过高通量测序检测各组大鼠肠道菌群变化。结果与模型组比较,毛冬青三萜皂苷组AS斑块减少,血管内皮功能改善,血清中TC、ET-1和Ang-Ⅱ水平显著降低(P0.05、0.01),HDL-C、NO水平明显升高(P0.05、0.01),NO/ET-1显著升高(P0.05、0.01)。16S rRNA测序结果显示,模型组大鼠肠道菌群紊乱,经毛冬青三萜皂苷干预后大鼠肠道菌群结构改善,拟杆菌等益生菌相对丰度增加,大肠杆菌等致病菌相对丰度降低。结论毛冬青三萜皂苷可以调节AS大鼠肠道菌群结构,对AS大鼠具有较好的治疗作用。     

淡豆豉炮制中黄曲霉毒素产毒株的筛选鉴定和产毒能力测定

目的 对淡豆豉炮制过程中产黄曲霉毒素(aflatoxins,AFTs)的微生物(简称产毒菌)进行筛选鉴定、定量分析和产毒能力测定.方法 运用紫外荧光法初筛淡豆豉炮制中各样本的产毒菌并菌落计数;对初筛菌株的18S rDNA序列进行PCR扩增、测序,测序结果经NCBI同源性比对、MEGA7.0软件构建系统发育树进行分子生物...     

白芍总苷对自身免疫性甲状腺炎大鼠肠黏膜屏障及肠道菌群的影响

目的 探讨白芍总苷对自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis,AIT)大鼠肠道菌群及肠黏膜屏障的影响.方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、硒酵母(36 μg/kg)组及白芍总苷低、中、高剂量(160、320、640 mg/kg)组,每组8只.采用高碘水喂养联合Sc猪甲状腺球蛋白与弗氏佐剂诱导A...     

茜草炭不同提取物对急性血瘀模型大鼠的影响比较研究

目的观察茜草炭不同提取物对急性血瘀模型大鼠的影响,筛选茜草炭化瘀止血作用最佳的提取方式。方法连续给药8 d,于第7天给药后,除对照组大鼠外,其余各组大鼠均sc盐酸肾上腺素加冰浴复制急性血瘀模型,以云南白药为阳性药,观察茜草炭醇提物、醇提加水提物、醇提后水提物、水提物对急性血瘀模型大鼠血液流变学、体外血栓形成、血小板系统及纤溶系统的影响。结果与对照组比较,模型组大鼠各切变率下的全血黏度升高(P0.01),体外血栓湿、干质量增加(P0.05),凝血时间延长(P0.05、0.01),血浆纤维蛋白原(FIB)的量与ADP诱导的血小板聚集率升高(P0.01),纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)和血栓素B2(TXB2)的量增加,6-酮-前列腺素1α(6-keto-PGF1α)的量下降(P0.05、0.01)。与模型组比较,茜草炭醇提物与醇提加水提物显著改善模型大鼠全血黏度、减轻血栓湿质量与干质量、缩短凝血时间、升高PAI-1与6-keto-PGF1α的量、降低TXB2的量(P0.05、0.01),两者均能升高模型大鼠血小板聚集率,醇提物显著降低纤溶酶原激活物(t-PA)的量(P0.05),但对FIB量影响不大;而醇提加水提物显著升高t-PA的量(P0.01),其中醇提加水提物对全血黏度、血栓湿质量与干质量影响优于醇提物,而醇提物对凝血时间的作用效果强于醇提加水提物;醇提后水提物与水提物对急性血瘀模型大鼠的影响弱于醇提物与醇提加水提提取物,两者均具有改善模型大鼠全血黏度、减轻血栓干质量、缩短凝血酶时间(TT)与凝血酶原时间(PT)、升高PAI-1与TXB2的量、降低t-PA量的趋势,显著缩短活化部分凝血活酶时间(APTT)、升高FIB与6-keto-PGF1α的量、减轻血栓湿质量(P0.05、0.01)的作用。结论茜草炭醇提加水提物化瘀止血作用强于茜草炭其他提取物,即醇提加水提法为茜草炭化瘀止血作用的最佳提取方式。     

基于生理及寒热模型大鼠肠道菌群多样性变化的淫羊藿药性归属研究

目的 基于高通量测序技术探讨淫羊藿Epimedii Folium对生理状态及寒热模型大鼠肠道菌群多样变化的影响以判断淫羊藿的药性归属.方法 取SD大鼠40只随机分为3部分,生理状态大鼠、热证模型大鼠及寒证模型大鼠.生理状态大鼠共10只,随机分为2组:空白组与淫羊藿组(SmQ);热证模型大鼠共15只,随机分为3组:空白组...     

中药藜芦与蒙药阿格希日嘎的指纹图谱评价及其急性毒性比较

目的研究蒙药阿格希日嘎与中药藜芦在化学成分和毒性方面的差异,为蒙药阿格希日嘎质量标准的制定奠定基础。方法建立藜芦甾体生物碱类和茋类成分的HPLC指纹图谱,测定不同来源的8批蒙药阿格希日嘎和6批中药藜芦,所得色谱图导入"中药指纹图谱相似度评价系统",建立蒙药阿格希日嘎和中药藜芦指纹图谱共有模式并进行相似度评价。选取藜芦特征色谱峰,包括甾体生物碱类32个和茋类16个,以各峰面积占总峰面积的百分比为变量,运用SPSS 20.0软件进行聚类分析。采用小鼠急性毒性实验法评价蒙药阿格希日嘎和中药藜芦的毒性。结果建立了藜芦甾体生物碱类和茋类成分的HPLC指纹图谱测定方法,得到了蒙药阿格希日嘎和中药藜芦指纹图谱共有模式,各样品与其共有模式之间相似度良好。以甾体生物碱类和茋类成分为指标的聚类分析,均将14批药材聚成蒙药阿格希日嘎与中药藜芦2大类。蒙药阿格希日嘎比中药藜芦的急性毒性大,LD_(50)分别为0.503 0和17.934 3 g/kg。结论蒙药阿格希日嘎与中药藜芦在功效主治、产地、化学成分和毒性方面具有很大差异,应区分入药并制定蒙药阿格希日嘎质量标准。