内皮素1对人血管内皮细胞基因表达谱的影响

目的探讨内皮素1对人血管内皮细胞基因表达谱的影响，进一步阐明内皮素1导致内皮细胞功能异常的分子机制。方法培养人血管内皮细胞，提取总RNA，采用人内皮细胞生物学功能基因芯片（含96个基因），检测内皮素1作用12h后人血管内皮细胞主要功能基因表达谱的变化。结果与未用内皮素处理的对照组相比，人血管内皮细胞在内皮素1作用12h后，共有53个基因出现差异表达，其中抗凝血和抗氧化基因等22个基因表达下调，促凝和炎性因子基因等31个基因表达上调。结论内皮素通过诱导人血管内皮细胞凝血和纤溶系统基因表达失衡、下调抗氧化酶基因表达和上调促炎因子基因表达，损伤人血管内皮细胞，造成其生物学功能异常。     

内皮素对大鼠培养心肌细胞肥大及肌球蛋白基因表达影响的研究

为探讨内皮素（ET）在大鼠培养心肌细胞肥大及肌球蛋白（MHC）基因表达中的作用，采用心肌细胞培养及斑点杂交的方法，同时测定心肌细胞直径、数目及3H亮氨酸（3H－Leu）掺入率，观察ET耐心肌细胞肥大及肌球蛋白基因表达的影响。结果显示：ET（10-7mol／L）作用培养心肌细胞24h后，细胞直径明显增大（P＜0．01），细胞数目无明显增加（P＞0．05）；不同浓度ET（10－10～10－7mol／L）可刺激心肌细胞3H－Leu掺入率呈明显剂量依赖性增加；随ET浓度（10－9～10－7mol／L）增高，β-肌球蛋白重链（β-MHC）mRNA表达呈剂量依赖性增加，α－MHCmRNA表达相应减少。提示：①ET可促进心肌细胞肥大，而不诱导心肌细胞增殖;②ET促使心肌细胞由α-MHC向β-MHC转化，说明ET促心肌细胞肥大是病理性的，此作用发生在翻译前水平。     

苦参碱对人肝癌细胞株HepG2基因表达谱的影响

目的利用基因表达谱芯片研究苦参碱对体外培养的人肝癌细胞株HepG2基因表达谱的影响。方法苦参碱处理人肝癌细胞株HepG272h后，提取研究组和对照组细胞的总RNA，将两组RNA纯化为mRNA，逆转录成cDNA，用Cy3和cy5两种不同的荧光染料进行线性扩增标记，与人全基因组基因表达谱芯片杂交，采用生物信息学方法分析两组细胞基因表达谱的改变。结果用Panther生物学软件分析，总共发现差异基因385个，其中上调基因133个，下调基因252个，并对其进行生物学功能分类。结论应用全基因组表达谱芯片检测差异表达基因，苦参碱可改变人肝癌细胞株HepG2细胞基因谱，可以通过调控凋亡基因的表达，诱导HepG2细胞发生凋亡。     

热处理对人肝癌细胞HepG2基因表达谱的影响

肿瘤的热疗已成为近年来肿瘤治疗学的一个热点[1] 。为了从基因水平上深入研究热杀灭细胞机制 ,本文应用基因点数为 12 5 5 0的人类基因表达谱芯片 ,筛查经热处理的人肝癌细胞ＨｅｐＧ2 出现表达变化的基因 ,探索这些基因的变化与热杀伤肿瘤细胞的内在联系与规律 ,为肿瘤的热疗提供分子生物学依据。一、材料与方法1.主要试剂及设备 :Ｔｒｉｚｏｌ试剂盒、Ｔ7 (Ｔ) 2 4引物、ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔⅡＲｅｖｅｒｓｅＴｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ、ＤＮＡｌｉｇａｓｅ、ＤＮＡ多聚酶Ⅰ、ＲＮＡ酶Ｈ(Ｇｉｂｃｏ) ;ＭＥＧＡｓｃｒｉｐｔＴ7ＩｎＶ…     

卡托普利预处理对急性心肌损伤大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

目的 探讨卡托普利预处理对急性心肌损伤大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响.方法 将Wistar雄性大白鼠随机分为3组:对照组、异丙基肾上腺素损伤组(Iso损伤组)、卡托普利预处理组(Cap预处理组).用TUNEL方法检测心肌细胞凋亡,用免疫组化方法检测Fas、FasL、Bcl-2和Bax蛋白表达.结果 Cap预处理组与Iso损伤组比较,心肌细胞凋亡指数减少,Fas、FasL和Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达增高(P＜0.01或P＜0.05).结论 卡托普利可通过减少心肌细胞凋亡及降低凋亡相关基因的表达发挥心肌保护作用.     

人心力衰竭心肌细胞基因表达谱分析方法初探

目的通过对多中心人类心力衰竭心肌细胞基因表达谱数据整理、分析,探索识别不同表达谱中相同结构蛋白基因的方法。方法选取14个已发表的原发病为扩张型心肌病和（或）缺血性心肌病的心力衰竭基因表达谱,筛选出各表达谱中差异表达≥1.4倍的心肌结构蛋白基因及功能蛋白基因。编写程序自动下载相关基因片段的序列,并建立数据库。根据表达谱中提供的识别号及相关注释信息,用BatchGenAna网站在染色体基因组上进行序列定位,通过定位图显示同一基因不同片段的定位信息。结果通过GenBank序号及芯片中克隆序号得到不同表达谱中相同序号的基因仅有23组,检出率低,漏检了相同基因的不同片段。通过染色体基因组比对、定位,检出不同表达谱中定位在同一染色体区域的相同基因的不同片段共51组,且集中定位在1、2、9、11、12、16号染色体上。通过定位明确显示此基因的编码区及调控区序列。结论基因组定位方法可识别不同表达谱中相同基因的不同片段,明确定位基因编码区及调控区,为后续的功能基因组研究提供可靠信息。     

阿妥伐他汀对人结肠癌细胞基因表达谱的影响

目的 研究阿妥伐他汀对人结肠腺癌colo-320细胞的反式调节基因,并对结果进行验证.方法 以阿妥伐他汀作用于人结肠腺癌细胞株colo-320为实验组,对照组加入PBS,提取总mRNA,逆转录为cDNA,进行基因芯片技术分析;采用Western Blot方法检测阿妥伐他汀对细胞中热休克蛋白70(HSPTO)表达的影响.结果 实验组细胞19种基因的表达水平上调,24种基因的表达水平下调;实验组HSP70表达水平高于对照组.结论 阿妥伐他汀可使人结肠癌细胞的基因表达谱发生改变,可能是他汀类药物防治结肠癌的重要分子机制之一.     

心肌淀粉样变的诊疗进展

心肌淀粉样变（CA）是淀粉样蛋白沉积并引起器官结构和功能障碍的一组疾病,其自然病程、累积器官和治疗随淀粉样蛋白来源的不同而有较大变化,主要有轻链型心肌淀粉样变（AL-CA）和转甲状腺素蛋白型心肌淀粉样变（ATTR-CA）2类。前者源于异常免疫球蛋白轻链,常累及心脏和肾脏;后者源自肝脏合成的转甲状腺素蛋白,又分为基因突变型（ATTRm-CA）和野生型（ATTRwt-CA）,除心脏外,也累及软组织及周围神经。CA的临床主要表现为左心室不大、射血分数保留的心力衰竭,且心脏受累及程度与患者预后具有显著相关性。组织活检是诊断CA,尤其是AL-CA的金标准。无创影像学技术是早期发现和诊断CA的重要手段,尤其心脏核素显像已被用于诊断ATTR-CA。CA的治疗包括心力衰竭的对症处理,以及靶向治疗淀粉样蛋白的产生过程。     

下肢缺血预处理对大鼠心肌基因表达的影响

目的 通过观察经下肢缺血预处理的心肌梗死大鼠心肌中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血红素加氧酶-1(HO-1)mRNA的表达,探讨其在缺血心肌中的作用.方法 将SD雄性大鼠随机分为心肌梗死组(40只)和下肢缺血预处理组(40只);每组按缺血时间又分为1、2、4、6、12 h组.显微镜下计数外周血白细胞;HE染色观察心肌组织中浸润白细胞的数值.应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)测定术后各时间点心肌组织中HIF-1α和HO-1mRNA表达.结果 下肢缺血预处理后12 h组外周血白细胞计数以及心肌组织中白细胞浸润数目较心梗组显著减少(P＜0.05);心肌中1、2、4 h HIF-1α mRNA表达与心梗组对应时间点比较有显著差异(P＜0.01).各时间点HO-1mRNA表达与心梗组对应时间点比较有显著差异(P＜0.01). 结论经下肢缺血预处理后,心肌损伤减轻,HIF-1α和HO-1可能与心肌保护作用有关.     

ZD7155对人胰腺癌细胞系PaTu8988s基因表达谱的影响

目的近40年来胰腺癌发病率呈稳步上升态势.该病具高度侵袭性,除根治性手术外缺乏有效的治疗手段,生存率低.     

复方黄精口服液对实验性大鼠心肌细胞自由基代谢及血清心肌酶的影响

目的：研究复方黄精口服液减轻阿霉素所致大鼠心脏毒性的作用及其机制。方法：通过腹可霉素复制大鼠实验性心力衰竭模型，测定心肌组织匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px)活性及血清心肌酶水平，并应用光镜电镜观察心肌组织的病理变化。结果：阿霉致鼠心力衰竭心肌组织SOD、GSH－Px活性降低，复方黄精口服液能逆转上述改变（P＜0．05）。复方黄精治疗组血清心肌酶肌酸激酶（CK）和乳酸脱氧酶（LDH）明显低于模型组（P＜0．05）。光镜、电镜结果显示：复方黄精治疗组心肌细胞损伤程度明显低于模型组（P＜0．05）。结论：复方黄精口服液具有抗自由基、降低心肌酶和保护心肌细胞超微结构的作用。     

红细胞生成素对大鼠心肌细胞凋亡相关基因表达的影响

目的探讨红细胞生成素(EPO)对大鼠心肌缺血-再灌注损伤(IRI)时心肌细胞凋亡及Bcl-2和Bax基因、蛋白表达的影响。方法以左冠状动脉前降支穿线结扎法制备心肌缺血再灌注模型,以TUNEL法检测凋亡细胞,S-P免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白表达,RT-PCR测定Bcl-2、BaxmRNA。结果EPO的干预使凋亡细胞指数明显下降,并上调Bcl-2基因及蛋白表达(P<0.05),而对Bax基因及蛋白表达无显著影响。结论EPO对大鼠心肌IRI具有显著的抑制细胞凋亡的作用。     

硒对培养心肌细胞存活的影响

低硒可导致大白鼠、猪的肝脏坏死,羊、牛的白肌病,我国大量工作证明低硒与克山病的区域分布密切相关,亚硒酸钠可有效地预防克山病。本实验拟用人工培养纯心室肌细胞的方法,控制培养基     

关注心肌淀粉样变的诊断线索

心肌淀粉样变是以心肌细胞间质前体蛋白沉积为特征的罕见疾病,表现为限制性心肌病,临床诊断困难。即使得到诊断,也往往忽视不同类型的心肌淀粉样变临床表现,且预后差异极大。本篇综述了AL型心肌淀粉样变的特点及临床表现,总结临床中易发现的线索,以提高该病的诊断率。     

原发型心肌淀粉样变的治疗进展

[提要]原发型即免疫球蛋白轻链型(AL型)淀粉样变是最常见的心肌淀粉样变类型,早期诊断技术及治疗方案的进展,极大改善了原发型心肌淀粉样变患者的预后。自体外周造血干细胞移植可显著延长患者的生存期限,但干细胞移植仅适用于一部分患者。目前马法兰联合地塞米松方案因其良好的耐受性,已成为不适合移植患者的一线方案。近来,蛋白酶体抑制剂及免疫调节剂为复发难治或无法移植的原发型心肌淀粉样变患者带来了新的希望。     

心肌细胞内钙释放对心肌细胞PTEN表达的影响

目的探讨雷尼丁（Ryanodine,RY）介导的心肌细胞内钙释放对PTEN mRNA和蛋白表达影响。方法新生Wistar乳鼠心肌细胞原代培养。用不同浓度的RY（0.0110μmol/L）促进心肌细胞内钙释放,特异的钙敏感指示剂Fura-2/AM测定心肌细胞内钙浓度（[Ca2+]i）。逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）、Western blot分别检测PTEN mRNA和蛋白表达。结果RY在0.011μmol/L浓度范围内,能浓度依赖性地促进心肌细胞内钙释放,RY在10μmol/L时,心肌细胞内钙浓度低于RY在1μmol/L时的效应,但仍高于对照组;RY在0.011μmol/L浓度范围内能浓度依赖性促进心肌细胞PTEN mRNA和蛋白表达,RY在10μmol/时,心肌细胞PTEN mRNA和蛋白表达低于1μmol/L的效应,但仍高于对照组。结论RY介导的心肌细胞内钙释放可影响心肌细胞PTEN基因表达,其表达在RY处于0.011μmol/L范围内具有浓度依赖性。     

cDNA微阵列技术检测胃肠安复方对人胃癌细胞基因表达谱的影响

目的:观察健脾类中药胃肠安复方对人胃癌细胞裸小鼠移植瘤的抑瘤作用,探讨基因表达谱芯片在中药复方对胃癌细胞多基因表达影响研究中的应用.方法:采用人胃癌细胞SGC-7901裸小鼠皮下移植瘤模型.造模1周后选瘤块直径1.5 mm以上者共16只,随机分为胃肠安复方组及0.85%氯化钠溶液对照组,每组8只.造模后41 d处死动物.通过RT-PCR反转录、同位素标记、全基因表达谱芯片方法研究胃肠安复方组与对照组人胃癌移植瘤细胞mRNA的表达差异.结果:胃肠安复方组瘤重低于对照组[(0.99±0.49)g:(1.93±0.52) g,P<0.05],胃肠安复方组抑瘤率为48.64%.全基因表达谱芯片检测比较分析示,胃肠安复方组与对照组样品间共有45个显著性差异表达基因,其中上调表达24个,下调表达21个,35个已克隆基因,10个表达序列标签.结论:健脾中药胃肠安复方抑制人胃癌细胞裸小鼠移植瘤生长,并可能对肿瘤细胞多基因表达有影响.